純化水微生物限度檢查法驗(yàn)證方案和驗(yàn)證報(bào)告

.*******驗(yàn)證文件頒發(fā)部門：質(zhì)量部頒發(fā)部門：質(zhì)量部生效日期：分發(fā)部門：工程設(shè)備部、質(zhì)量部編號：VDP-JY-010-01-1共頁第頁起草：日期：日期：日期：..純化水微生物限度檢查法驗(yàn)證方案起草、審核、起草人：審核人：批準(zhǔn)人：起草日期：審核日期：批準(zhǔn)日期：頒發(fā)部門：質(zhì)量部分發(fā)部門：質(zhì)量部驗(yàn)證小組名稱：純化水微生物限度檢查法驗(yàn)證方案驗(yàn)證小組驗(yàn)證組織：驗(yàn)證小組名稱：純化水微生物限度檢查法驗(yàn)證方案驗(yàn)證小組組長質(zhì)量部經(jīng)理負(fù)責(zé)組織、實(shí)施組員1QC負(fù)責(zé)出具檢驗(yàn)報(bào)告2QA負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案確實(shí)認(rèn)負(fù)責(zé)方法評價(jià)3微生物限度檢驗(yàn)員負(fù)責(zé)測試操作和操作原始記錄..名目驗(yàn)證目的驗(yàn)證人員職責(zé)參照標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證工程內(nèi)容評價(jià)合格標(biāo)準(zhǔn)驗(yàn)證試驗(yàn)材料驗(yàn)證明施打算菌液制備供試液制備計(jì)數(shù)方法驗(yàn)證掌握菌檢查方法驗(yàn)證驗(yàn)證結(jié)論和評價(jià)..純化水微生物限度檢查法驗(yàn)證方案驗(yàn)證目的：及酵母菌數(shù)測定，掌握菌的測定。驗(yàn)證人員職責(zé)驗(yàn)證領(lǐng)導(dǎo)小組：、1、1、1、2、1、3工程驗(yàn)證小組長負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案的起草負(fù)責(zé)驗(yàn)證的協(xié)調(diào)工作，以保證本驗(yàn)證方案的順當(dāng)實(shí)施。負(fù)責(zé)驗(yàn)證報(bào)告的起草。負(fù)責(zé)再驗(yàn)證周期確實(shí)認(rèn)。質(zhì)量部負(fù)責(zé)驗(yàn)證方案審核負(fù)責(zé)取樣及對樣品的檢驗(yàn)負(fù)責(zé)收集驗(yàn)證記錄，并加以分析后，幫助工程驗(yàn)證小組長起草驗(yàn)證報(bào)告。負(fù)責(zé)驗(yàn)證數(shù)據(jù)及結(jié)果的審核參照標(biāo)準(zhǔn)：2023XIII驗(yàn)證工程內(nèi)容：細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證，掌握菌檢查方法驗(yàn)證。評價(jià)合格標(biāo)準(zhǔn)：試驗(yàn)組的菌回收率和稀釋劑比照組的菌回收率均不得低于70%。驗(yàn)證試驗(yàn)材料：被驗(yàn)證產(chǎn)品：〔1〕4T/h;(2)4T/h水系統(tǒng)液體制劑二樓潔具間用水點(diǎn)；(3)4T/h..檢驗(yàn)量 5ml /次儀器設(shè)備：YX.400AYS－840101SPX-250BPYX-DUS-X303A-4天平PH7.0；0.9%的無菌氯化鈉溶液驗(yàn)證用培育基名稱改進(jìn)馬丁培育基改進(jìn)馬丁瓊脂培育基驗(yàn)證用菌株：

批號 生產(chǎn)廠家代號代號來源培育時(shí)間驗(yàn)證菌株 培育基 培育溫度〔代數(shù)〕 〔小時(shí)〕大腸埃希菌養(yǎng)分肉湯30—35℃金黃色葡萄養(yǎng)分肉湯30—35℃球菌養(yǎng)分肉湯30—35℃桿菌改進(jìn)馬丁培育基23—28℃改進(jìn)馬丁瓊脂黑曲霉菌23—28℃培育基..序號1序號1工程確認(rèn)名稱實(shí)施負(fù)責(zé)人起始和完成日期2驗(yàn)證結(jié)果評定、驗(yàn)證周期確認(rèn)、驗(yàn)證報(bào)告和發(fā)放驗(yàn)證證書菌液制備大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌菌懸液的制備110ml35℃18~241ml9ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，1010-6~10-7約為8.2110ml25℃培育24~481ml，參加9%9ml，混勻，1010-5~10-6細(xì)菌50~100cfu∕ml②接種黑曲霉的穎培育物于改進(jìn)馬丁瓊脂斜面培育基上，25℃5~71ml9ml0.9%1010-550~100cfu∕ml供試品制備供試品名稱及取樣點(diǎn)：純化水取樣點(diǎn)〔1〕4T/h；(3)4T/h三樓固體制劑純水箱總回水口。20230.45um50mm,規(guī)定每片濾膜上的菌1005ml。計(jì)數(shù)方法驗(yàn)證..試驗(yàn)組5mlPH7.0草芽孢桿菌、大腸埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉菌菌液〔50～100cfu/ml〕1ml，平行兩張濾膜，過濾后，取濾膜，將其菌面朝上貼于相應(yīng)培育基上培育。菌液組 大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌與枯草芽孢桿菌分別取1ml面液分別注入瓊脂培育基，每個(gè)面液分別制備二個(gè)平皿，置35～36℃培育24小時(shí)；白色念珠菌、黑曲霉分別取1ml面液分別注入平皿中，并馬上傾注玫瑰紅鈉瓊脂制備二個(gè)平皿，24～25℃培育48小時(shí)。菌落計(jì)數(shù)結(jié)果〔2個(gè)平皿計(jì)數(shù)取平均值〕見下表10-510-5稀釋10-6稀釋10-7稀釋試驗(yàn)次數(shù)12122大腸埃希菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉供試品比照組5ml0.9%無菌氯化鈉溶液3100ml，平行兩張濾膜，過濾后，取出濾膜，菌面朝上貼于瓊脂培育2稀釋劑試驗(yàn)組0.9%300ml，以無菌操作參加過濾器內(nèi)，每次在最終一次的沖洗液中分別參加上述的金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉菌菌液〔50～100cfu/ml〕1ml，平行兩張濾膜，過濾后，取濾膜，將其菌面朝上貼于相應(yīng)培育基上培育。稀釋劑比照組取0.9%無菌氯化鈉溶液300ml248～72h，觀看結(jié)果，測定菌數(shù)。結(jié)果見附表..11、掌握菌檢查方法驗(yàn)證〔常規(guī)法〕11.1試驗(yàn)組5mlPH7.0菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉菌菌液各平行兩張濾膜，過濾后，取濾膜，接入膽鹽乳糖培育基100ml中，按相應(yīng)掌握菌檢查法進(jìn)展檢查。故可按常規(guī)法進(jìn)展掌握菌檢查。122023XIII生物限度檢查法檢驗(yàn)，細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)可承受薄膜過濾法檢查。..附表1： 獨(dú)立試驗(yàn)一：各試驗(yàn)組菌落計(jì)數(shù)〔回收率%〕取樣點(diǎn)：試驗(yàn)時(shí)間 年 月 日 完成時(shí)間 年 月 日驗(yàn)證菌株 平皿號 (cfu)

數(shù)(cfu)

落數(shù)(cfu)

數(shù)(cfu)

率(%)

收率(%)大腸埃希小時(shí)計(jì)數(shù))金黃色葡萄球菌(培育計(jì)數(shù))枯草芽孢桿菌(培育48小時(shí)計(jì)數(shù))白色念珠小時(shí)計(jì)數(shù))黑曲霉(培育計(jì)數(shù))

12平均值12平均值12平均值12平均值12平均值結(jié)論：70%,按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,本次試驗(yàn)結(jié)果符合規(guī)定。復(fù)核人(簽名)： 試驗(yàn)人(簽名)：..附表2：獨(dú)立試驗(yàn)二：各試驗(yàn)組菌落計(jì)數(shù)〔回收率%〕試驗(yàn)時(shí)間年 月日 完成時(shí)間 年 月 日驗(yàn)證菌株 平皿號 (cfu)

數(shù)(cfu)

落數(shù)(cfu)

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率(%)

收率(%)大腸埃希小時(shí)計(jì)數(shù))金黃色葡萄球菌(培育計(jì)數(shù))枯草芽孢桿菌(培育48小時(shí)計(jì)數(shù))白色念珠小時(shí)計(jì)數(shù))黑曲霉(培育計(jì)數(shù))

12平均值12平均值12平均值12平均值12平均值結(jié)論：70%,按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,本次試驗(yàn)結(jié)果符合規(guī)定。復(fù)核人(簽名)： 試驗(yàn)人(簽名)：..附表3：獨(dú)立試驗(yàn)三：各試驗(yàn)組菌落計(jì)數(shù)〔回收率%〕試驗(yàn)時(shí)間 年 月 日 完成時(shí)間年 月 日驗(yàn)證菌株 平皿號 (cfu)

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落數(shù)(cfu)

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率(%)

收率(%)大腸埃希小時(shí)計(jì)數(shù))金黃色葡萄球菌(培育計(jì)數(shù))枯草芽孢桿菌(培育48小時(shí)計(jì)數(shù))白色念珠小時(shí)計(jì)數(shù))黑曲霉(培育計(jì)數(shù))

12平均值12平均值12平均值12平均值12平均值結(jié)論：霉菌及酵母菌數(shù)測定。復(fù)核人(簽名)： 試驗(yàn)人(簽名)：..******驗(yàn)證文件質(zhì)量部純化水微生物限度檢查法驗(yàn)證報(bào)告質(zhì)量部編號：VDP-JY-010-01-2共頁第頁起草：日期：日期：日期：頒發(fā)部門： 生效日期：分發(fā)部門：..目 錄1、驗(yàn)證目的2、參照標(biāo)準(zhǔn)3、驗(yàn)證工程內(nèi)容4、評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)5、驗(yàn)證明施時(shí)間6、驗(yàn)證方法7、驗(yàn)證結(jié)論和評價(jià)..一、驗(yàn)證目的確認(rèn)該方法適合于本公司純化水細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)計(jì)數(shù)測定，掌握菌的測定。特對此檢測方法進(jìn)展驗(yàn)證。二、參照標(biāo)準(zhǔn)三、驗(yàn)證工程內(nèi)容四、評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)70%。五、驗(yàn)證明施(微生物限度檢驗(yàn)室完成驗(yàn)證時(shí)間開頭)開頭，進(jìn)展各種菌液、供試液的制備，開頭驗(yàn)證工作。1、菌液制備大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌菌懸液的制備110ml35℃18~241ml9ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，1010-6~10-7約為白色念珠菌、黑曲霉菌懸液的制備110ml25℃培育24~481ml，參加9%9ml，混勻，1010-5~10-6細(xì)菌50~100cfu∕ml②接種黑曲霉的穎培育物于改進(jìn)馬丁瓊脂斜面培育基上，25℃5~71ml9ml0.9%1010-550~100cfu∕ml..2.供試品制備供試品名稱及取樣點(diǎn)：純化水。取樣點(diǎn)箱口;(2)4T/h(3)4T/h純水箱總回水口。5ml。六、驗(yàn)證方法〔一、細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)方法1、試驗(yàn)組5ml，以無菌操作參加過濾器內(nèi)，用0.9%無菌氯化鈉溶液沖洗濾膜3100ml，在最終一次的沖洗液中分別參加上述的金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉菌菌液各1ml，過濾后，取濾膜，將其菌面朝上貼于相應(yīng)培育基上培育。計(jì)數(shù)。2、菌液組 大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌與枯草芽孢桿菌分別取1ml面液分別注入平皿中，并馬上傾注養(yǎng)分瓊脂培育基，每個(gè)面液分別制備二個(gè)平皿，置35～36℃培育24小時(shí)；白色念珠菌、黑曲霉分別取1ml面液分別注入平皿中，并馬上傾注玫瑰紅鈉瓊脂制備二個(gè)平皿，24～25℃培育48小時(shí)。菌落計(jì)數(shù)結(jié)果〔2個(gè)平皿計(jì)數(shù)取平均值〕見下表菌落計(jì)數(shù)結(jié)果〔cfu∕ml〕試驗(yàn)次數(shù)大腸埃希菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉

10-5稀釋1 2

10-6稀釋1

10-7稀釋1 23供試品比照組5ml，0.9%無菌氯化鈉溶液沖洗3100ml，平行兩張濾膜，過濾后，取出濾膜，菌面朝上貼于瓊脂培育基平2稀釋劑試驗(yàn)組取0.9%無菌氯化鈉溶液300ml，以無菌操作參加過濾器內(nèi)，每次..在最終一次的沖洗液中分別參加上述的金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉菌菌液〔50～100cfu/ml〕1ml，平行兩張濾膜，過濾后，取濾膜，將其菌面朝上貼于相應(yīng)培育基上培育。稀釋劑比照組取0.9%無菌氯化鈉溶液300ml，以無菌操作參加過濾器內(nèi)，平行兩張248～72h，觀看結(jié)果，測定菌數(shù)。附表〔二〕掌握菌檢查方法驗(yàn)證〔常規(guī)法〕試驗(yàn)組5mlPH7.03枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、白色念珠菌、黑曲霉菌菌液〔50～100cfu/ml〕1ml，平行兩張濾膜，過濾后，取濾膜，接入膽鹽乳糖培育基100ml中，按相應(yīng)掌握菌檢查法進(jìn)展檢查。的該掌握菌檢查。故可按常規(guī)法進(jìn)展掌握菌檢查。七、驗(yàn)證結(jié)論和評價(jià)通過三次獨(dú)立試驗(yàn),證明所承受的供試液制備方法及薄膜過濾法適合于純化水細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)測定。掌握菌可按常規(guī)法進(jìn)展檢查。70%,按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,本次試驗(yàn)結(jié)果符合規(guī)定。2023XIII生物限度檢查法檢驗(yàn)，細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)承受平皿法檢查，符合規(guī)定。..附表1： 獨(dú)立試驗(yàn)一：各試驗(yàn)組菌落計(jì)數(shù)〔回收率%〕取樣點(diǎn)：試驗(yàn)時(shí)間 年 月 日 完成時(shí)間 年 月 日驗(yàn)證菌株 平皿號 (cfu)

數(shù)(cfu)

落數(shù)(cfu)

數(shù)(cfu)

率(%)

收率(%)大腸埃希小時(shí)計(jì)數(shù))金黃色葡萄球菌(培育計(jì)數(shù))枯草芽孢桿菌(培育48小時(shí)計(jì)數(shù))白色念珠小時(shí)計(jì)數(shù))黑曲霉(培育計(jì)數(shù))

12平均值12平均值12平均值12平均值12平均值結(jié)論：70%,按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,本次試驗(yàn)結(jié)果符合規(guī)定。復(fù)核人(簽名)： 試驗(yàn)人(簽名)：..附表2：獨(dú)立試驗(yàn)二：各試驗(yàn)組菌落計(jì)數(shù)〔回收率%〕試驗(yàn)時(shí)間年 月日 完成時(shí)間 年 月 日驗(yàn)證菌株 平皿號 (cfu)

數(shù)(cfu)

落數(shù)(cfu)

數(shù)(cfu)

率(%)

收率(%)大腸埃希小時(shí)計(jì)數(shù))金黃色葡萄球菌(培育計(jì)數(shù))枯草芽孢桿菌(培育48小時(shí)計(jì)數(shù))白色念珠小時(shí)計(jì)數(shù))黑曲霉(培育計(jì)數(shù))

12平均值12平均值12平均值12平均值12平均值結(jié)論：70%,按標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定,本次試驗(yàn)結(jié)果符合規(guī)定。復(fù)核人(簽名)： 試驗(yàn)人(簽名)：..附表3：獨(dú)立試驗(yàn)三：各試驗(yàn)組菌落計(jì)數(shù)〔回收率