大孔吸附樹脂法課件

FractionationMerhodsofNaturalDrugs天然藥物分離方法（2）大孔樹脂吸附法概述中藥有效成分的不斷闡明中藥現(xiàn)代化的要求當(dāng)前用于中藥純化的主要技術(shù)：

溶劑法：沉淀法：

色譜法：大孔吸附樹脂、離子交換樹脂、聚酰胺、葡聚糖凝膠等

超臨界流體萃取法：超濾法：結(jié)晶法：一、樹脂簡介1、常用樹脂的類型凝膠樹脂大孔樹脂離子交換樹脂離子交換樹脂的種類種類活性基團(tuán)1強(qiáng)酸性磺酸基(SO3H)2弱酸性磷酸基(PO3H2)、羧酸基(COOH)3強(qiáng)堿性Ⅰ型：三甲基胺(-N+(CH3)3)Ⅱ型：二甲基乙醇胺(N+(CH3)2C2H4OH4弱堿性伯氨基(-NH2)、仲氨基(-NHR)、叔氨基(-NR2)5兩性強(qiáng)堿＋弱酸弱堿＋弱酸3、大孔吸附樹脂目前國產(chǎn)樹脂的主要類型致孔劑：甲苯、石蠟、溶劑汽油、煤油、碳醇、聚乙烯醇等三菱化學(xué)的大孔吸附樹脂聚苯乙烯系列合成樹脂：Diaion:HP20,HP21Sepabeads:SP825,SP850Sepabeads:SP70,SP700修飾的聚苯乙烯系列合成樹脂:Sepabeads:SP207異丁烯系列合成樹脂:Diaion:HP2MG大孔吸附樹脂的主要理化性質(zhì)顏色：白色、乳白色至微黃物理化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，不溶于任何酸、堿及有機(jī)溶劑，加熱不溶，可在150℃以下使用含水量：60～80％堆積密度：0.6～0.9影響樹脂性能的主要因素及國產(chǎn)樹脂存在的主要問題交聯(lián)度比表面積吸附容量粒度分布強(qiáng)度1、樹脂預(yù)處理的方法回流提取法滲漉法水蒸氣蒸餾法2、樹脂預(yù)處理的溶劑乙醇丙酮異丙醇2～5％鹽酸2～5％氫氧化鈉3、滲漉法純化樹脂色譜柱：不銹鋼柱；徑高比為1:3～1:7裝柱：濕法裝柱洗脫溶劑：①乙醇→2～5％鹽酸→2～5％NaOH→水②甲醇→2～5％鹽酸→2～5％NaOH→水③混合溶劑→2～5％鹽酸→2～5％NaOH→水洗脫方法：①乙醇法：乙醇浸泡12h→2BV洗脫→浸泡3～5h→2BV洗脫→浸泡3～5h→3～5BV洗脫→浸泡3～5h→3～5BV洗脫→2～3BV鹽酸浸泡2～4h→洗脫→水洗脫→2～3BVNaOH浸泡2～4h→洗脫→水洗脫②混合溶劑法：混合溶劑浸泡12h→2BV洗脫→浸泡3～5h→2BV洗脫→浸泡3～5h→3～5BV洗脫→2～3BV鹽酸浸泡2～4h→洗脫→水洗脫→2～3BVNaOH浸泡2～4h→洗脫→水洗脫③新方法：乙醇浸泡3～5h→3～5BV乙醇洗脫→2～3BV鹽酸浸泡2～4h→洗脫→水洗脫→2～3BVNaOH浸泡2～4h→洗脫→水洗脫四、大孔吸附樹脂在新藥研究中的應(yīng)用1、適用的新藥類型中藥有效成分的粗分和精制單味中藥有效部位的制備中藥復(fù)方有效部位的制備注意：①性質(zhì)相似成分可混煎后一起制備②各味藥所含成分性質(zhì)差別較大的復(fù)方應(yīng)單獨(dú)提取后，再制備③單味藥有效成分性質(zhì)差別較大的應(yīng)分別制備2、成分的類型與樹脂的選擇脂溶性成分包括甾體類、二萜、三萜、黃酮、木脂素、香豆素、生物堿等：應(yīng)選擇非極性或弱極性的樹脂，如D101、AB-8、HPD100等皂苷和生物堿苷類成分：應(yīng)選擇弱極性或極性樹脂，如D201、D301、HPD300、HPD600、AB-8、NKA-9等黃酮苷、蒽醌苷、木脂素苷、香豆素苷等：應(yīng)選擇合成原料中加有甲基丙烯酸甲酯或丙烯氰的樹脂，如D201、D301、HPD600、NKA-9等環(huán)烯醚萜苷類成分：應(yīng)選擇極性樹脂，如D301、HPD600、NKA-9等4、樹脂分離條件的正交試驗(yàn)表頭的設(shè)計(jì)

因素藥材－樹脂色譜柱洗脫流速收集洗脫水平比例徑高比BV/h液量11:11:31321:21:52531:31:737實(shí)例一：某中藥中苯乙醇苷類成分的分離、精制該中藥所含的成分：苯乙醇苷類、環(huán)烯醚萜及其苷類、木脂素及其苷類、多元醇、水溶性生物堿、單糖、雙糖、氨基酸等1、樹脂型號(hào)的考察3、洗脫液乙醇濃度的考察

乙醇濃度20％40％60％80％洗脫量9倍5倍4倍3倍檢出雜質(zhì)脂溶性脂溶性成分成分4、收集洗脫液量的考察第一次洗脫第二次洗脫洗脫溶劑水洗脫40％乙醇洗脫收集量45TLC檢測未檢出糖難檢出苯乙醇苷洗脫溶劑水洗脫40％乙醇洗脫收集量34TLC檢測未檢出糖難檢出苯乙醇苷5、成品中有機(jī)殘留物的限量檢查檢查方法：氣相色譜法檢查成分：應(yīng)根據(jù)樹脂合成中所接觸的有機(jī)成分確定檢查成分測定方法：頂空進(jìn)樣或溶劑法含量限度：苯：2ppm；其它：20ppm方法學(xué)考察：①溶劑的氣相色譜檢測②基線噪音和最低檢測限的測定③對(duì)照品的測定④供試品的測定標(biāo)準(zhǔn)的書寫格式①色譜條件和系統(tǒng)適用性試驗(yàn)②對(duì)照品溶液的制備③供試品溶液的制備④測定法⑤起草說明五、大孔吸附樹脂在中藥及植物提取物生產(chǎn)中的應(yīng)用1、槐花米中黃酮苷類成分的分離、純化槐花花穗9.9kgMeOH提取36LHP20吸附MeOH溶解50％-10L+100%-10LLH-20吸附MeOH溶解CHP20P吸附50%EtOH流份ODS層析分離45%MeOH洗脫3`,4`,5`,7`-四羥基黃酮