生物分離工程總復(fù)習(xí)題

第一章緒論復(fù)習(xí)題1.生物分離工程在生物技術(shù)中的地位？在生物技術(shù)領(lǐng)域，一般將生物產(chǎn)品的生產(chǎn)過(guò)程稱(chēng)為生物加工過(guò)程，涉及優(yōu)良生物物種的選育、基因工程、細(xì)胞工程、生物反映過(guò)程（酶反映、微生物發(fā)酵、動(dòng)植物細(xì)胞培養(yǎng)等）及目的產(chǎn)物的分離純化過(guò)程，后者又稱(chēng)為下游加工過(guò)程。生物產(chǎn)物的特殊性、復(fù)雜性和對(duì)生物產(chǎn)品規(guī)定的嚴(yán)格性。因此導(dǎo)致下游加工過(guò)程的成本往往占整個(gè)生物加工過(guò)程成本的大部分。生物分離工程研究的主線任務(wù)：設(shè)計(jì)和優(yōu)化分離過(guò)程，提高分離效率，減少分離過(guò)程環(huán)節(jié)，縮短分離操作時(shí)間，達(dá)成提高?？谑章逝c活性、減少生產(chǎn)成本的目的。生物分離工程的特點(diǎn)是什么？1．產(chǎn)品豐富產(chǎn)品的多樣性導(dǎo)致分離方法的多樣性2．絕大多數(shù)生物分離方法來(lái)源于化學(xué)分離3．生物分離一般比化工分離難度大3.生物分離工程可分為幾大部分，分別涉及哪些單元操作？生物分離過(guò)程一般分四步：1.固-液分離（不溶物的去除）離心、過(guò)濾、細(xì)胞破碎目的是提高產(chǎn)物濃度和質(zhì)量2.濃縮（雜質(zhì)粗分）離子互換吸附、萃取、溶劑萃取、反膠團(tuán)萃取、超臨界流體萃取、雙水相萃取以上分離過(guò)程不具有特異性，只是進(jìn)行初分，可提高產(chǎn)物濃度和質(zhì)量。3．純化色譜、電泳、沉淀以上技術(shù)具有產(chǎn)物的高選擇性和雜質(zhì)的去除性。4．精制結(jié)晶、干燥在設(shè)計(jì)下游分離過(guò)程前，必須考慮哪些問(wèn)題方能保證我們所設(shè)計(jì)的工藝過(guò)程最為經(jīng)濟(jì)、可靠？（1）產(chǎn)品價(jià)值（2）產(chǎn)品質(zhì)量（3）產(chǎn)物在生產(chǎn)過(guò)程中出現(xiàn)的位置（4）雜質(zhì)在生產(chǎn)過(guò)程中出現(xiàn)的位置（5）重要雜質(zhì)獨(dú)特的物化性質(zhì)是什么？（6）不同分離方法的技術(shù)經(jīng)濟(jì)比較上述問(wèn)題的考慮將有助于優(yōu)質(zhì)、高效產(chǎn)物分離過(guò)程的優(yōu)化。5.生物分離效率有哪些評(píng)價(jià)指標(biāo)？目的產(chǎn)品的濃縮限度——濃縮率m2．目的產(chǎn)物的分離純化限度——分離因子或分離系數(shù)α3．回收率REC第二章細(xì)胞分離與破碎復(fù)習(xí)題1．簡(jiǎn)述細(xì)胞破碎的意義一、細(xì)胞破碎的目的由于有許多生化物質(zhì)存在于細(xì)胞內(nèi)部，必須在純化以前將細(xì)胞破碎，使細(xì)胞壁和細(xì)胞膜受到不同限度的破壞（增大通透性）或破碎，釋放其中的目的產(chǎn)物，然后方可進(jìn)行提取。細(xì)胞破碎方法的大體分類(lèi)破碎方法可歸納為機(jī)械破碎法和非機(jī)械破碎法兩大類(lèi)，非機(jī)械破碎法又可分為化學(xué)（和生物化學(xué)）破碎法和物理破碎法。1．機(jī)械破碎解決量大、破碎效率高速度快，是工業(yè)規(guī)模細(xì)胞破碎的重要手段。細(xì)胞的機(jī)械破碎重要有高壓勻漿、研磨、珠磨、噴霧撞擊破碎和超聲波破碎等。2．化學(xué)（和生物化學(xué)）滲透破碎法（1）滲透壓沖擊法（休克法）（2）增溶法（3）脂溶法（4）堿解決（5）酶溶（酶消化）法3．物理破碎法1）凍結(jié)－融化法（亦稱(chēng)凍融法）（2）干燥法空氣干燥法真空干燥法冷凍干燥法噴霧干燥法化學(xué)滲透法和機(jī)械破碎法相比有哪些優(yōu)缺陷？化學(xué)滲透破碎法與機(jī)械破碎法相比優(yōu)點(diǎn)：化學(xué)滲透破碎法比機(jī)械破碎法的選擇性高，胞內(nèi)產(chǎn)物的總釋放率低，特別是可有效地克制核酸的釋放，料液的粘度小，有助于后解決過(guò)程?；瘜W(xué)滲透破碎法與機(jī)械破碎法相比缺陷：化學(xué)滲透破碎法比機(jī)械破碎法速度低，效率差，并且化學(xué)或生化試劑的添加形成新的污染，給進(jìn)一步的分離純化增添麻煩。第三章初級(jí)分離復(fù)習(xí)題1．常用的蛋白質(zhì)沉淀方法有哪些？鹽析沉淀,等電點(diǎn)沉淀,有機(jī)溶劑沉淀,熱沉淀影響鹽析的重要因素有哪些？1）離子強(qiáng)度：Ks和β值,強(qiáng)度越大,蛋白質(zhì)溶解度越??；（2）蛋白質(zhì)的性質(zhì):因相對(duì)分子質(zhì)量和立體結(jié)構(gòu)而異,結(jié)構(gòu)不對(duì)稱(chēng)、相對(duì)分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)易于鹽析；（3）蛋白質(zhì)的濃度：蛋白質(zhì)濃度大，鹽的用量小，共沉作用明顯，分辨率低；蛋白質(zhì)濃度小，鹽的用量大，分辨率高；2.5%～3.0%時(shí)最適合；（4）pH值：通常調(diào)整到pI附近，鹽濃度較大會(huì)對(duì)等電點(diǎn)產(chǎn)生較大影響，pH對(duì)不同蛋白質(zhì)的共沉影響；（5）溫度：低鹽濃度下，溫度升高蛋白質(zhì)溶解度升高；高鹽濃度下，溫度升高，多數(shù)蛋白質(zhì)和肽溶解度反而下降。對(duì)于特定的蛋白質(zhì)，影響蛋白質(zhì)鹽析的重要因素是：無(wú)機(jī)鹽的種類(lèi)、濃度、溫度和pH值。何謂中性鹽的飽和度？硫酸銨的飽和度是指飽和硫酸銨溶液的體積占混合后溶液總體積的百分?jǐn)?shù)。鹽析操作中，中性鹽的用量（40%硫酸銨飽和度）如何計(jì)算？要達(dá)成某一飽和度所需加入飽和硫酸銨溶液的體積可按下式計(jì)算：V=V0(S2－S1)/(1－S2)V—所需加入飽和硫酸銨溶液的體積；V0——待鹽析溶液的體積；S1——待鹽析溶液的原始飽和度；S2—所需達(dá)成的硫酸銨的飽和度。簡(jiǎn)述鹽析的原理。水溶液中蛋白質(zhì)的溶解度一般在生理離子強(qiáng)度范圍內(nèi)（0.15~0.2mol/Kg）最大，而低于或高于此范圍時(shí)溶解度均減少。蛋白質(zhì)（酶）等生物大分子物質(zhì)在高離子強(qiáng)度的溶液中溶解度減少，產(chǎn)生沉淀的現(xiàn)象稱(chēng)為鹽析(鹽析是在高濃度的中性鹽存在下，蛋白質(zhì)（酶）等生物大分子物質(zhì)在水溶液中的溶解度減少，產(chǎn)生沉淀的過(guò)程。)簡(jiǎn)述有機(jī)溶劑沉析的原理。1．減少了溶質(zhì)的介電常數(shù)，使溶質(zhì)之間的靜電引力增長(zhǎng)，從而出現(xiàn)聚集現(xiàn)象，導(dǎo)致沉淀。2．由于有機(jī)溶劑的水合作用，減少了自由水的濃度，減少了親水溶質(zhì)表面水化層的厚度，減少了親水性，導(dǎo)致脫水凝聚。乙醇：沉析作用強(qiáng)，揮發(fā)性適中，無(wú)毒常用于蛋白質(zhì)、核酸、多糖等生物大分子的沉析；丙酮：沉析作用更強(qiáng)，用量省，但毒性大，應(yīng)用范圍不廣；特點(diǎn)：（1）介電常數(shù)小，60%乙醇的介電常數(shù)是48，丙酮的介電常數(shù)是22（2）容易獲取簡(jiǎn)述等電點(diǎn)沉析的原理。蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)，當(dāng)溶液pH值處在等電點(diǎn)時(shí)，分子表面凈電荷為0，雙電層和水化膜結(jié)構(gòu)被破壞，由于分子間引力，形成蛋白質(zhì)聚集體，進(jìn)而產(chǎn)生沉淀。第四章膜分離復(fù)習(xí)題1．膜分離技術(shù)的概念運(yùn)用膜的選擇性（孔徑大?。?，以膜的兩側(cè)存在的能量差作為推動(dòng)力，由于溶液中各組分透過(guò)膜的遷移率不同而實(shí)現(xiàn)分離的一種技術(shù)膜的概念在一種流體相間有一層薄的凝聚相物質(zhì)，把流體相分隔開(kāi)來(lái)成為兩部分，這一薄層物質(zhì)稱(chēng)為膜。1．膜自身是均一的一相或由兩相以上凝聚物構(gòu)成的復(fù)合體?？墒枪虘B(tài)或液態(tài)或氣態(tài)。2．被膜分開(kāi)的流體相物質(zhì)是液體或氣體。3．膜的厚度應(yīng)在0.5mm以下，否則不能稱(chēng)其為膜。根據(jù)膜孔徑大小，膜分離技術(shù)的分類(lèi)在生物分離領(lǐng)域應(yīng)用的膜分離法涉及微濾(Microfiltration，MF)、超濾(U1trafiltration，UF)、反滲透(Reverrseosmosis，RO)、納濾（Nanofiltration,NF）、透析(Dialysis，DS)、電滲析(E1ectrodialysis，KD)和滲透氣化(Pervaporation，PV)基本的膜材料有哪些？1．天然高分子材料膜2．合成高分子材料膜3．無(wú)機(jī)（多孔）材料膜5．常用的膜組件有哪些？要有管式、平板式、螺旋卷式和中空纖維(毛細(xì)管)式等四種何謂反滲透？實(shí)現(xiàn)反滲透分離的條件是什么？其特點(diǎn)有哪些？二、超濾和反滲透目的：將溶質(zhì)通過(guò)一層具有選擇性的薄膜，從溶液中分離出來(lái)。分離時(shí)的推動(dòng)力都是壓差，由于被分離物質(zhì)的分子量和直徑大小差別及膜孔結(jié)構(gòu)不同，其采用的壓力大小不同。反滲透膜的操作壓力高達(dá)10MPa1．超濾和反滲透操作中的滲透壓由于超濾和反滲透過(guò)程都是用一種半透膜把兩種不同濃度的溶液隔開(kāi)（淡水或鹽水），因此都存在滲透壓。滲透壓的大小取決于溶液的種類(lèi)、濃度和溫度；一般說(shuō)來(lái)，無(wú)機(jī)小分子的滲透壓要比有機(jī)大分子溶質(zhì)的滲透壓高得多。2．實(shí)現(xiàn)超濾和反滲透的條件超濾：需要增長(zhǎng)流體的靜壓力，改變天然過(guò)程的方向，才也許發(fā)生具有低分子量化合物的溶劑流通過(guò)膜，此時(shí)的推動(dòng)力是流體靜壓力與滲透壓的壓差；pp——操作壓p0——滲透壓patm——大氣壓反滲透：過(guò)程類(lèi)似于超濾，只是純?nèi)軇┩ㄟ^(guò)膜，而低分子量的化合物被截留。因此，操作壓力比超濾大得多。因此，超濾和反滲透通常又被稱(chēng)之為“強(qiáng)制膜分離過(guò)程”強(qiáng)制膜分離的概念？超濾和反滲透通常又被稱(chēng)之為“強(qiáng)制膜分離過(guò)程”電滲析的工作原理？電滲析操作所用的膜材料為離子互換膜，即在膜表面和孔內(nèi)共價(jià)鍵合有離子互換基團(tuán)，如磺酸基（—SO3H）等酸性陽(yáng)離子互換基和季銨基（—N+R3）等堿性陰離子互換基團(tuán)。鍵合陽(yáng)離子互換基的膜稱(chēng)作陽(yáng)離子互換膜，在電場(chǎng)作用下，選擇性透過(guò)陽(yáng)離子；鍵合陰離子互換基的膜稱(chēng)作陰離子互換膜，在電場(chǎng)作用下，選擇性透過(guò)陰離子。膜污染的重要因素是什么？常用的清洗劑有哪些？如何選擇？1．凝膠極化引起的凝膠層，阻力為Rg2．溶質(zhì)在膜表面的吸附層，阻力為Ras3．膜孔堵塞，阻力為Rp；4．膜孔內(nèi)的溶質(zhì)吸附，阻力為Rap膜的清洗一般選用水、鹽溶液、稀酸、稀堿、表面活性劑、絡(luò)合劑、氧化劑和酶溶液等為清洗劑具體采用何種清洗劑要根據(jù)膜的性質(zhì)(耐化學(xué)試劑的特性)和污染物的性質(zhì)而定，即使用的清洗劑要具有良好的去污能力，同時(shí)又不能損害膜的過(guò)濾性能。膜分離在生物產(chǎn)物的回收和純化方面的應(yīng)用有哪些方面？（1）細(xì)胞培養(yǎng)基的除菌；（2）發(fā)酵或培養(yǎng)液中細(xì)胞的收集或除去；（3）細(xì)胞破碎后碎片的除去；（4）目的產(chǎn)物部分純化后的濃縮或洗濾除去小分子溶質(zhì)；（5）最終產(chǎn)品的濃縮和洗濾除鹽；（6）制備用于調(diào)制生物產(chǎn)品和清洗產(chǎn)品容器的無(wú)熱原水。第五章萃取復(fù)習(xí)題1.什么是萃取過(guò)程？運(yùn)用溶質(zhì)在互不相溶的兩相之間分派系數(shù)的不同而使溶質(zhì)得到純化或濃縮的方法稱(chēng)為萃取。萃取是運(yùn)用液體或超臨界流體為溶劑提取原料中目的產(chǎn)物的分離純化操作。液－液萃取從機(jī)理上分析可分為哪兩類(lèi)？有機(jī)溶劑萃取（溶劑萃取）、雙水相萃取、液膜萃取和反膠團(tuán)萃取。常見(jiàn)物理萃取體系由那些構(gòu)成要素？溶質(zhì)：被萃取的物質(zhì)原溶劑：原先溶解溶質(zhì)的溶劑萃取劑：加入的第三組分何謂萃取的分派系數(shù)？其影響因素有哪些？溶質(zhì)在兩相中的總濃度之比表達(dá)溶質(zhì)的分派平衡pH（2）溫度（3）無(wú)機(jī)鹽何謂超臨界流體萃??？其特點(diǎn)有哪些？有哪幾種方法？超臨界流體（SupercriticalFluid,簡(jiǎn)稱(chēng)SCF或SF）：當(dāng)一種流體處在其臨界點(diǎn)的溫度和壓力之下，稱(chēng)為超臨界流體。超臨界流體萃?。⊿CFextraction）：運(yùn)用超臨界流體作為萃取劑的萃取操作。FHV超臨界流體的特點(diǎn)：（a）密度接近液體－－萃取能力強(qiáng)（b）黏度接近氣體－－傳質(zhì)性能好等溫變壓法、等壓變溫法以及吸附法何謂雙水相萃取?常見(jiàn)的雙水相構(gòu)成體系有哪些？雙水相萃取又稱(chēng)雙水相分派法：運(yùn)用物質(zhì)在不相溶的、兩水相間分派系數(shù)的差異進(jìn)行萃取的方法。1．高聚物－高聚物兩水相。2．高聚物－鹽兩水相3．非離子表面活性劑水膠束兩水相體系。4．陰陽(yáng)離子表面活性劑兩水相體系5．醇鹽兩水相體系7.反膠團(tuán)的構(gòu)成以及反膠團(tuán)萃取的基本原理表面活性劑的極性頭朝內(nèi)，疏水的尾部向外，中間形成極性的“核”（親水空腔）運(yùn)用表面活性劑在有機(jī)溶劑中形成的反膠團(tuán)，從而在有機(jī)相內(nèi)形成分散的親水微環(huán)境，使生物分子在有機(jī)相（萃取相）內(nèi)存在于反膠團(tuán)的親水微環(huán)境中，消除了生物分子，特別是蛋白質(zhì)類(lèi)生物活性物質(zhì)難溶解在有機(jī)相中或在有機(jī)相中發(fā)生不可逆變性的現(xiàn)象。第六章吸附分離技術(shù)和理論復(fù)習(xí)題吸附、吸附過(guò)程、離子互換吸附：吸附是運(yùn)用吸附劑對(duì)液體或氣體中某一組分具有選擇性吸附的能力，使其富集在吸附劑表面的過(guò)程?；蚴侨苜|(zhì)從液相或氣相轉(zhuǎn)移到固相的現(xiàn)象。吸附過(guò)程通常涉及：待分離料液與吸附劑混合、吸附質(zhì)被吸附到吸附劑表面、料液流出、吸附質(zhì)解吸回收等四個(gè)過(guò)程。離子互換：離子互換吸附簡(jiǎn)稱(chēng)離子互換。吸附作用力為靜電引力，所用吸附劑為離子互換劑，離子互換劑表面具有離子基團(tuán)或可離子化的基團(tuán)，通過(guò)靜電引力吸附帶有相反電荷的離子，吸附過(guò)程發(fā)生電荷轉(zhuǎn)移。通過(guò)調(diào)節(jié)pH或提高離子強(qiáng)度的方法洗脫。吸附的類(lèi)型有哪些？它們是如何劃分的？吸附劑對(duì)溶質(zhì)的吸附作用按吸附作用力區(qū)分重要有三類(lèi)，即物理吸附、化學(xué)吸附和離子互換。常用的吸附劑種類(lèi)有哪些？活性炭，硅膠，大孔網(wǎng)狀吸附劑以縣浮聚合法為例說(shuō)明多孔高分子微球吸附劑的制備方法。在機(jī)械攪拌作用下，有機(jī)反映物溶液在水分散相中分散成微小的液滴，逐漸升高反映溫度至85℃即可引以聚合反映，制而微球型高分子介質(zhì)pGTD。以乙醇抽提除去其中的惰性致孔劑后，再對(duì)GMA分子上的活性環(huán)氧基團(tuán)進(jìn)行化學(xué)修飾，可制備各種類(lèi)型的吸附劑。什么是吸附等溫線？其意義何在？當(dāng)溫度一定期，吸附量與濃度之間的函數(shù)關(guān)系稱(chēng)為吸附等溫線。影響吸附過(guò)程的因素有哪些？1．吸附劑的性質(zhì)：比表面積、粒度大小、極性2．吸附質(zhì)的性質(zhì)：對(duì)表面張力的影響，溶解度，極性，相對(duì)分子量3．溫度：吸附是放熱過(guò)程，吸附質(zhì)的穩(wěn)定性4．溶液pH值：影響吸附質(zhì)的解離5．鹽濃度：影響復(fù)雜，要視具體情況而定常用的吸附單元操作有哪些方式？間歇吸附連續(xù)攪拌吸附固定床吸附固定床吸附操作操作過(guò)程：平衡——吸附——洗脫——再生膨脹床吸附操作(a)用緩沖液膨脹床層，以便于輸入料液，(b)開(kāi)始膨脹床吸附操作。(c)當(dāng)吸附接近飽和時(shí)，停止進(jìn)料，轉(zhuǎn)入清洗過(guò)程。在清洗過(guò)程初期，為除去床層內(nèi)殘留的微粒子，仍需采用膨脹床操作。(d)待微粒子清除干凈后，則可恢復(fù)固定床操作，以減少床層體積，減少清洗劑用量和清洗時(shí)間。(e)清洗操作之后的目的產(chǎn)物洗脫過(guò)程亦采用固定床方式。第七章液相色譜復(fù)習(xí)題1.色譜方法共分幾類(lèi)？常用的蛋白質(zhì)分離方法有哪些？并簡(jiǎn)述其原理吸附色譜分派色譜離子互換色譜凝膠色譜2.何為理論塔板高度和理論塔板數(shù)？如何計(jì)算？3.簡(jiǎn)述高效反相液相色譜的工作原理？4.試分析HPLC和HIC技術(shù)的異同5.什么是色譜分離技術(shù)？色譜技術(shù)是一組相關(guān)分離方法的總稱(chēng)，色譜柱的一般結(jié)構(gòu)具有固定相（多孔介質(zhì)）和流動(dòng)相，根據(jù)物質(zhì)在兩相間的分派行為不同（由于親和力差異），通過(guò)多次分派（吸附-解吸-吸附-解吸…），達(dá)成分離的目的。8.吸附色譜及其分類(lèi)和基本原理固定相:顆粒狀的基質(zhì)。表面上有許許多多的吸附位點(diǎn)?？赏ㄟ^(guò)靜電引力、范德華力與蛋白質(zhì)、核酸等結(jié)合。并且由于各種欲分離物質(zhì)結(jié)構(gòu)不同，吸附力強(qiáng)弱不同。流動(dòng)相：一般為液體?？山馕健２煌搅Φ奈镔|(zhì)解吸附快慢不同。過(guò)程：吸附、解吸附、再吸附的連續(xù)過(guò)程。簡(jiǎn)言之：欲分離的物質(zhì)，依據(jù)它們結(jié)構(gòu)的差異性或分派系數(shù)的不同而被分離。9.什么是分派色譜？運(yùn)用溶質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間的分派系數(shù)不同而分離的方法10.離子互換色譜的分類(lèi)及應(yīng)用柱狀和薄板狀1.制備軟水、純水2．制備、純化生物大分子物質(zhì)，是蛋白質(zhì)、肽和核酸等生物產(chǎn)物的重要純化手段3.測(cè)定物質(zhì)pI11.常用的離子互換樹(shù)脂類(lèi)型有哪些？如何制備？離子互換纖維素葡聚糖離子互換樹(shù)脂共聚（加聚）法：指具有一個(gè)或一個(gè)以上雙鍵的單體為原料，在分散相中進(jìn)行聚合，無(wú)水產(chǎn)生。均聚（縮聚）法：基于縮合反映的聚合過(guò)程，有水產(chǎn)生。苯乙烯型離子互換樹(shù)脂將苯乙烯和二乙烯苯在水相中以明膠作為分散劑，以過(guò)氧苯甲酰作為引發(fā)劑，在適宜的溫度下（85℃左右）進(jìn)行懸浮聚合；將上述共聚物在有機(jī)溶劑（如二氯乙烷）中溶脹，以濃硫酸或氯磺酸進(jìn)行磺化，磺酸基可連在苯乙烯或二乙烯苯環(huán)上；酚醛型樹(shù)脂以弱酸122樹(shù)脂為例，它由水楊酸、苯酚和甲醛縮聚而成。先將水楊酸和甲醛在鹽酸催化下，縮合得線狀結(jié)構(gòu)；然后在堿性下，加入苯酚和甲醛作為交聯(lián)劑，在一定溫度下進(jìn)行反映。若在透平油中加少量油酸鈉作為分散劑進(jìn)行反映可制成球形樹(shù)脂。12.離子互換樹(shù)脂的分類(lèi)？其重要的理化性質(zhì)有哪些？13.凝膠色譜的分離原理及分類(lèi)1.葡聚糖凝膠2.瓊脂糖凝膠14.離子互換及疏水作用色譜的原理離子互換色譜通常是在一根充填有離子互換樹(shù)脂的色譜柱中進(jìn)行。具有待分離的離子的混合液通過(guò)離子互換柱時(shí)，各種離子即與離子互換劑上的帶電部位競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合。由于離子互換劑對(duì)各種離子和離子化合物親和力不同，故可以將混合離子分開(kāi)。高濃度鹽溶液中，親水性較強(qiáng)的物質(zhì)，分子內(nèi)部的疏水基團(tuán)外露，便可與疏水的固定相以疏水作用力相結(jié)合（吸附）。由于這種作用力大小不同，可以通過(guò)改變極性流動(dòng)相的離子強(qiáng)度（由高到低）使其依次解吸附。即高濃度的鹽溶液可將吸附力弱（?。O性大）的物質(zhì)先洗脫下來(lái)，而低濃度的鹽則使吸附力強(qiáng)（大）（極性?。┑奈镔|(zhì)被后洗脫下來(lái)。15.高效液相色譜的分離原理及應(yīng)用16.蛋白質(zhì)分離的常用色譜方法有哪些？免疫親和色譜,疏水色譜離子互換色譜17．用于蛋白質(zhì)提取分離的離子互換劑有哪些特殊規(guī)定，重要有哪幾類(lèi)？規(guī)定：良好的親水性、具有較大的均勻網(wǎng)格結(jié)構(gòu)、粒度越小分辨率越高葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠、纖維素和親水性聚乙烯等，其他尚有硅膠和可控孔玻璃第八章親和色譜復(fù)習(xí)題1.什么是親和作用?生物物質(zhì)，特別是酶和抗體等蛋白質(zhì)，具有辨認(rèn)特定物質(zhì)并與該物質(zhì)的分子相結(jié)合的能力。這種辨認(rèn)并結(jié)合的能力具有排他性，即生物分子可以區(qū)分結(jié)構(gòu)和性質(zhì)非常相近的其他分子，選擇性地與其中某一種分子相結(jié)合。生物間的這種特異性互相作用稱(chēng)為生物親和作用(bioaffinity)或簡(jiǎn)稱(chēng)親和作用2.親和作用的本質(zhì)涉及哪些方面?1.靜電作用2.氫鍵 3.疏水性互相作用4.配位鍵5.弱共價(jià)鍵3.影響親和作用的因素?離子強(qiáng)度pH溫度離液離子螯合劑4.親和色譜的原理是什么?親和色譜是運(yùn)用親和吸附作用分離純化生物物質(zhì)的液相色譜法。親和色譜的固定相是鍵合親和配基的親和吸附介質(zhì)（親和吸附劑），流動(dòng)相為液體。由于目的產(chǎn)物基于生物親和作用吸附在固定相上，具有高度的選擇性。5.親和色譜的配基有哪些?① 酶的克制劑② 抗體③ A蛋白④ 凝集素⑤ 輔酶和磷酸腺苷⑥ 色素配基⑦ 過(guò)渡金屬離子⑧ 組氨酸⑨ 肝素6.親和色譜的應(yīng)用有那些方面?1.t-PA的純化—酶的克制劑為親和配基2.干擾素的純化—免疫親和色譜3.脫氫酶的純化—色素親和色譜.4淀粉酶克制劑的純化—固定化金屬離子親和色譜5.基因重組融合蛋白的純化7.親和膜色譜的原理和特點(diǎn)親和配基固定在膜孔表面，流體在對(duì)流透過(guò)膜的過(guò)程中目的蛋白質(zhì)與配基接觸而被吸附。親和膜色譜的優(yōu)點(diǎn)無(wú)內(nèi)擴(kuò)散傳質(zhì)阻力，僅存在表面液膜傳質(zhì)能力，由于傳質(zhì)能力小，吸附速度快，達(dá)成吸附平衡所需時(shí)間短，配基運(yùn)用率高；設(shè)備體積小，壓降小，流速快，配基用量低；微孔膜介質(zhì)種類(lèi)多，價(jià)格便宜。5.親和膜色譜的缺陷從分離效率的角度，因膜的厚度(柱高)很小(一般為10~100μm)．理論板數(shù)很低，吸附和清洗效率低。膜的污染和膜孔的堵塞使操作速度、吸附效率和親和膜的壽命下降。8.除親和色譜外,其他親和分離技術(shù)有哪些?親和錯(cuò)流過(guò)濾親和雙水相分派親和反膠團(tuán)萃取親和沉淀第九章電泳和電色譜復(fù)習(xí)題電泳的定義電泳是荷電溶質(zhì)（電解質(zhì)）或粒子在電場(chǎng)作用下發(fā)生定向泳動(dòng)現(xiàn)象。電泳分離是運(yùn)用荷電溶質(zhì)在電場(chǎng)中泳動(dòng)速度的差別進(jìn)行分離的方法。電泳的基本原理蛋白質(zhì)、核酸、多糖等常以顆粒分散在溶液中，它們的凈電荷取決于介質(zhì)的H+濃度或與其它大分子的互相作用。帶電粒子在電場(chǎng)中的遷移方式重要依據(jù)分子尺寸大小和形狀、分子所帶電荷或分子的生物學(xué)與化學(xué)特性。電泳技術(shù)的分類(lèi)根據(jù)載體：紙電泳、膜電泳、凝膠電泳根據(jù)電場(chǎng)強(qiáng)度：常壓電泳（600V以下）、高壓電泳（600V以上）根據(jù)電場(chǎng)方向：平板電泳、垂直板電泳依據(jù)電泳原理，現(xiàn)有三種形式的電泳分離系統(tǒng)（1）移動(dòng)界面電泳（movingboundaryelectrophoresis）（2）區(qū)帶電泳（zoneelectrophoresis）（3）穩(wěn)態(tài)電泳（steadystateelectrophoresis）常用的凝膠電泳技術(shù)有哪些？區(qū)帶電泳中的常用技術(shù)載體電泳：粉末電泳、紙電泳、凝膠電泳、聚焦電泳無(wú)載體電泳：自由電泳、毛細(xì)管電泳聚丙稀酰胺凝膠電泳與SDS的異同瓊脂糖電泳的特點(diǎn)及其應(yīng)用（1）瓊脂糖凝膠孔徑較大，0.075%瓊脂糖的孔徑為800nm，可以分析百萬(wàn)道爾頓分子量的大分子，但分辨率較凝膠電泳低。（2）機(jī)械強(qiáng)度高：可以在濃度1%以下使用；（3）無(wú)毒；（4）染色、脫色程序簡(jiǎn)樸，背景色較低；（5）熱可逆性；（6）生物中性：一般不與生物材料結(jié)合；（7）電內(nèi)滲（EEO）大：對(duì)于對(duì)流電泳有益。等電聚焦電泳的基本原理載體兩性電解質(zhì)pH梯度等電聚焦就是在支持介質(zhì)中加入載體兩性電解質(zhì)，通以直流電后在兩極之間形成穩(wěn)定、連續(xù)和線性的pH梯度，當(dāng)帶電的蛋白質(zhì)分子進(jìn)入該體系時(shí)，便會(huì)產(chǎn)生移動(dòng)，并聚集于相稱(chēng)于其等電點(diǎn)的位置。二維電泳的概念及其特點(diǎn)二維電泳(two-dimensionalelectrophoresis)同時(shí)運(yùn)用分子尺寸和等電點(diǎn)這兩種性質(zhì)的差別進(jìn)行蛋白質(zhì)等生物大分子的分離，即將普通凝膠電泳和IEF相結(jié)合，使溶質(zhì)在二維平面上得到分離。可分離等電點(diǎn)相差小于0.01個(gè)pH單位的蛋白質(zhì)，分離度極高。第十章結(jié)晶復(fù)習(xí)題結(jié)晶操作的原理是什么？飽和溶液和過(guò)飽和溶液的概念飽和溶液：當(dāng)溶液中溶質(zhì)濃度等于該溶質(zhì)在同等條件下的飽和溶解度時(shí)，該溶液稱(chēng)為飽和溶液；過(guò)飽和溶液：溶質(zhì)濃度超過(guò)飽和溶解度時(shí)，該溶液稱(chēng)之為過(guò)飽和溶液；凱爾文公式的內(nèi)容和意義是什么？溶質(zhì)溶解度與溫度、溶質(zhì)分散度（晶體大小）有關(guān)。C2小晶體的溶解度； C1普通晶體的溶解度σ晶體與溶液間的表面張力；ρ晶體密度γ2小晶體的半徑；γ1普通晶體半徑R氣體常數(shù)； T絕對(duì)溫度結(jié)晶的一般環(huán)節(jié)是什么？（1）過(guò)飽和溶液的形成（2）晶核的形成（2）晶體生長(zhǎng)過(guò)飽和溶液形成的方法有哪些？（1）熱飽和溶液冷卻（等溶劑結(jié)晶）（2）部分溶劑蒸發(fā)法（等溫結(jié)晶法）（3）真空蒸發(fā)冷卻法（4）化學(xué)反映結(jié)晶繪制飽和溫度曲線和過(guò)飽和溫度曲線，并標(biāo)明穩(wěn)定區(qū)、亞穩(wěn)定區(qū)和不穩(wěn)定區(qū)。常用的工業(yè)起晶方法有哪些？自然起晶法、刺激起晶法和晶種起晶法。重結(jié)晶的概念重結(jié)晶是運(yùn)用雜質(zhì)和結(jié)晶物質(zhì)在不同溶劑和不同溫度下的溶解度不同，將晶體用合適的溶劑再次結(jié)晶，以獲得高純度的晶體的操作。第十一章干燥復(fù)習(xí)題1.什么是干燥？干燥是運(yùn)用熱能加熱物料，使物料中水分蒸發(fā)而干燥或者用冷凍法使水分結(jié)冰后升華而除去的單元操作；通常是生物產(chǎn)品分離的最后一步；是生物產(chǎn)物成品化前的最后下游加工過(guò)程。2.干燥的基本流程是什么？1．預(yù)熱階段物料溫度上升，時(shí)間很短，計(jì)算時(shí)可不考慮2．恒速干燥階段物料溫度不變3．降速干燥階段溫度再次上升干燥曲線3.物料中所含水分的種類(lèi)有哪些？除去的難易限度如何？（1）化學(xué)結(jié)合水水分與物料的離子型結(jié)合和結(jié)晶型分子結(jié)合（結(jié)晶水），結(jié)晶水的脫除必將引起晶體的崩潰；（2）物化結(jié)合水涉及吸附、滲透和結(jié)構(gòu)水分，其中吸附水分結(jié)合力最強(qiáng)；（3）機(jī)械結(jié)合水毛細(xì)管水、濕潤(rùn)水分、孔隙水份其中，結(jié)合水（涉及細(xì)胞含水、纖維束含水以及毛細(xì)管水）較難以除去；而非結(jié)合水（物料表面的濕潤(rùn)水分和孔隙水份）較容易除去。4.平衡水分和自由水分的概念？（1）平衡水分：當(dāng)一種物料與一定溫度及濕度的空氣接觸時(shí)，物料勢(shì)必會(huì)放出或吸取一定量的水分，物料的含水量會(huì)趨于一定值。此時(shí)，物料的含水量稱(chēng)為該空氣狀態(tài)下的平衡水分。平衡水分代表物料在一定空氣狀態(tài)下的干燥極限，即用熱空氣干燥法，平衡水分是不能去除的（2）自由水分在干燥過(guò)程中可以除去的水分，是物料中超過(guò)平衡水分的部分5.了解干燥曲線，并結(jié)合干燥速率曲線說(shuō)明什么是恒速干燥階段？什么是降速干燥階段？6.常用的干燥設(shè)備有哪些1.盤(pán)架干燥器2.冷凍干燥器3.傳送帶式干燥器4.轉(zhuǎn)筒干燥器5.氣流干燥器6.流化床干燥器7.噴霧干燥器8.紅外干燥器9.微波干燥器《生物分離工程》綜合題庫(kù)一、名詞解釋差速分離:是運(yùn)用外力驅(qū)動(dòng)遷移產(chǎn)生的速度差進(jìn)行分離的方法。離心:是運(yùn)用離心機(jī)旋轉(zhuǎn)時(shí)產(chǎn)生的強(qiáng)大離心力對(duì)大小、形狀和密度不同的混合物進(jìn)行分離的一種方法。沉淀:是指當(dāng)懸浮液靜置時(shí)，密度較大的固體顆粒在重力的作用下逐漸下沉，這一過(guò)程成為沉降。反萃?。赫{(diào)節(jié)水相條件，將目的產(chǎn)物從有機(jī)相轉(zhuǎn)入水相的萃取操作。吸附：吸附是運(yùn)用吸附劑對(duì)液體或氣體中某一組分具有選擇性吸附的能力，其富集在吸附劑表面的過(guò)程。鹽析：在高濃度的中性鹽存在下，蛋白質(zhì)（酶）等生物大分子物質(zhì)在水溶液中的溶解度減少，產(chǎn)生沉淀的過(guò)程。膜組件：由膜、固定膜的支撐體、間隔物以及收納這些部件的容器構(gòu)成的一個(gè)單元稱(chēng)為膜組件或膜裝置。膜：在一種流體相間有一層薄的凝聚相物質(zhì)，把流體相分隔開(kāi)來(lái)成為兩部分，這一薄層物質(zhì)稱(chēng)為膜。膜分離：運(yùn)用膜的選擇性（孔徑大小），以膜的兩側(cè)存在的能量差作為推動(dòng)力，由于溶液中各組分透過(guò)膜的遷移率不同而實(shí)現(xiàn)分離的一種技術(shù)。膜的濃度極化：在膜分離操作中，所有溶質(zhì)均被透過(guò)液傳送到膜表面上，不能完全透過(guò)膜的溶質(zhì)受到膜的截留作用，在膜表面附近濃度升高。這種在膜表面附近濃度高于主體濃度的現(xiàn)象。膠團(tuán)：是表面活性劑在水溶液中形成的一種聚集體。反膠團(tuán)：是分散于連續(xù)有機(jī)相中、由表面活性劑所形成的穩(wěn)定的納米尺度的聚集體。結(jié)晶：是從液相或氣相生成形狀一定、分子（或原子、離子）有規(guī)則排列的晶體的現(xiàn)象。重結(jié)晶：運(yùn)用雜質(zhì)和結(jié)晶物質(zhì)在不同溶劑和不同溫度下的溶解度不同，將晶體用合適的溶劑再次結(jié)晶，以獲得高純度的晶體的操作。晶體生長(zhǎng)：在過(guò)飽和溶液中已有晶核形成或加入晶種后，以過(guò)飽和度為推動(dòng)力，晶核或晶種將長(zhǎng)大，這種現(xiàn)象。反相液相色譜：運(yùn)用表面非極性的反相介質(zhì)為固定相，極性有機(jī)溶劑的水溶液為流動(dòng)相，是根據(jù)溶質(zhì)極性（疏水性）的差別進(jìn)行分離純化的洗脫色譜法。液相色譜：流動(dòng)相的相態(tài)為液相的色譜法。萃?。哼\(yùn)用溶質(zhì)在互不相溶的兩相之間分派系數(shù)的不同而使溶質(zhì)得到純化或濃縮的方法反萃?。赫{(diào)節(jié)水相條件，將目的產(chǎn)物從有機(jī)相轉(zhuǎn)入水相的萃取操作。親和吸附分離：運(yùn)用溶質(zhì)和吸附劑之間特殊的化學(xué)作用，從而實(shí)現(xiàn)分離。分派系數(shù)：在一定溫度、壓力下，溶質(zhì)分子分布在兩個(gè)互不相溶的溶劑里，達(dá)成平衡后，它在兩相的濃度為一常數(shù)叫分派系數(shù)。萃取過(guò)程：就是運(yùn)用在兩個(gè)互不相溶的液相中各種組分（涉及目的產(chǎn)物）溶解度的不同，從而達(dá)成分離的目的。超臨界流體：當(dāng)一種流體處在其臨界點(diǎn)的溫度和壓力之下，稱(chēng)為超臨界流體。臨界膠團(tuán)濃度：將表面活性劑在非極性有機(jī)溶劑相中能形成反膠團(tuán)的最小濃度稱(chēng)為臨界膠團(tuán)濃度，它與表面活性劑種類(lèi)有關(guān)。有機(jī)溶劑沉淀：在具有溶質(zhì)的水溶液中加入一定量親水的有機(jī)溶劑，減少溶質(zhì)的溶解度，使其沉淀析出。等電點(diǎn)沉淀：調(diào)節(jié)體系pH值，使兩性電解質(zhì)的溶解度下降，析出的操作稱(chēng)為等電點(diǎn)沉淀。微濾：以多孔細(xì)小薄膜為過(guò)濾介質(zhì)，壓力差為推動(dòng)力，使不溶性物質(zhì)得以分離的操作。超濾：根據(jù)高分子溶質(zhì)之間或高分子與小分子溶質(zhì)之間相對(duì)分子量的差別進(jìn)行分離折方法。反滲透：CM-SephadexC-50：羧甲基-葡聚糖離子互換樹(shù)脂。離子互換：借助于固體離子互換劑中的離子與稀溶液中的離子進(jìn)行互換,以達(dá)成提取或去除溶液中某些離子的目的,是一種屬于傳質(zhì)分離過(guò)程的單元操作。樹(shù)脂互換容量：?jiǎn)挝毁|(zhì)量干樹(shù)脂或單位體積濕樹(shù)脂所能吸附的一價(jià)離子的毫摩爾數(shù)稱(chēng)為樹(shù)脂互換容量。色譜技術(shù)：是一組相關(guān)分離方法的總稱(chēng)，色譜柱的一般結(jié)構(gòu)具有固定相（多孔介質(zhì)）和流動(dòng)相，根據(jù)物質(zhì)在兩相間的分派行為不同（由于親和力差異），通過(guò)多次分派（吸附-解吸-吸附-解吸…），達(dá)成分離的目的。色譜阻滯因數(shù)：在色譜系統(tǒng)中溶質(zhì)的移動(dòng)距離和標(biāo)準(zhǔn)物的遷移率之比，以Rf表達(dá)，它體現(xiàn)某一種溶質(zhì)與固定相之間的親和力大小。凝膠：又稱(chēng)凍膠。溶膠或溶液中的膠體粒子或高分子在一定條件下互相連接，形成空間網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，結(jié)構(gòu)空隙中充滿了作為分散介質(zhì)的液體(在干凝膠中也可以是氣體)，這樣一種特殊的分散體系稱(chēng)作凝膠。疏水層析：是運(yùn)用表面偶聯(lián)弱疏水性基團(tuán)（疏水性配基）的疏水性吸附劑為固定相，根據(jù)蛋白質(zhì)與疏水性吸附劑之間的弱疏水性互相作用的差別進(jìn)行分離純化的層析技術(shù)。高效液相色譜：只選用顆粒極細(xì)的高效耐壓新型固定相，借助高壓泵來(lái)輸送流動(dòng)相，并配有實(shí)時(shí)在線檢測(cè)器，實(shí)現(xiàn)色譜分離過(guò)程全不自動(dòng)化的液相色譜法。色譜聚焦：運(yùn)用各混合組分等電點(diǎn)差異和離子互換行為分離電荷量不同的物質(zhì)的方法。親和色譜：運(yùn)用親和吸附劑作用分離純化生物物質(zhì)的液相色譜法。離子互換色譜：運(yùn)用離子互換劑為固定相，根據(jù)荷電溶質(zhì)與離子互換劑之間靜電互相作用力的差別進(jìn)行溶質(zhì)分離的洗脫色譜法。電泳：是荷電溶質(zhì)（電解質(zhì)）或粒子在電場(chǎng)作用下發(fā)生定向泳動(dòng)現(xiàn)象。等電聚焦電泳：運(yùn)用蛋白質(zhì)分子或其它兩性分子的等電點(diǎn)不同，在一個(gè)穩(wěn)定的、連續(xù)的、線性的pH梯度中進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離和分析。二維電泳：同時(shí)運(yùn)用分子尺寸和等電點(diǎn)這兩種性質(zhì)的差別進(jìn)行蛋白質(zhì)等生物大分子的分離，即將普通凝膠電泳和IEF相結(jié)合，使溶質(zhì)在二維平面上得到分離。電滲現(xiàn)象：液體在電場(chǎng)中對(duì)于固體支持介質(zhì)的相對(duì)移動(dòng)。干燥：運(yùn)用熱能加熱物料，使物料中水分蒸發(fā)而干燥或者用冷凍法使水分結(jié)冰后升華而除去的單元操作。二、判斷題1．助濾劑是一種可壓縮的多孔微粒。（X）2．通過(guò)加入某些反映劑是發(fā)酵液進(jìn)行預(yù)解決的方法之一。（√）3．在生物制劑制備中，常用的緩沖系統(tǒng)有磷酸鹽緩沖液；碳酸鹽緩沖液；鹽酸鹽緩沖液；醋酸鹽緩沖液等。（X）4．珠磨法中適本地增長(zhǎng)研磨劑的裝量可提高細(xì)胞破碎率。（X）5．高級(jí)醇能被細(xì)胞壁中的類(lèi)脂吸取，使胞壁膜溶脹，導(dǎo)致細(xì)胞破碎。（X）6．極性溶劑與非極性溶劑互溶。（X）7．溶劑萃取中的乳化現(xiàn)象一定存在。（X）8．臨界壓力是液化氣體所需的壓力。（X）9．用冷溶劑溶出固體材料中的物質(zhì)的方法又稱(chēng)浸煮。（X）10．用熱溶劑溶出固體材料中的物質(zhì)的方法又稱(chēng)浸漬。（X）11．應(yīng)用有機(jī)溶劑提取生化成分時(shí)，一般在較高溫度下進(jìn)行。（X）12．溶劑的極性從小到大為丙醇＞乙醇＞水＞乙酸。（√）13.要增長(zhǎng)目的物的溶解度，往往要在目的物等電點(diǎn)附近進(jìn)行提取。（X）14．蛋白質(zhì)變性，一級(jí)、二級(jí)、三級(jí)結(jié)構(gòu)都被破壞。（X）15．蛋白質(zhì)類(lèi)的生物大分子在鹽析過(guò)程中，最佳在高溫下進(jìn)行，由于溫度高會(huì)增長(zhǎng)其溶解度。（X）16．蛋白質(zhì)變性后溶解度減少，重要是由于電荷被中和及水膜被去除所引起的。（X）17．進(jìn)料的溫度和pH會(huì)影響膜的壽命。（√）18．液膜能把兩個(gè)互溶但組成不同的溶液隔開(kāi)。（√）19．酸性、中性、堿性氨基酸在強(qiáng)堿性陰離子互換樹(shù)脂柱上的吸附順序是堿性氨基酸＞中性氨基酸＞酸性氨基酸（X）20．離子互換劑是一種不溶于酸、堿及有機(jī)溶劑的固態(tài)學(xué)分子化合物。（√）21.真空轉(zhuǎn)鼓過(guò)濾機(jī)工作一個(gè)循環(huán)通過(guò)緩沖區(qū)、過(guò)濾區(qū)、再生區(qū)、卸渣區(qū)。（×）22.真空轉(zhuǎn)鼓過(guò)濾機(jī)工作一個(gè)循環(huán)通過(guò)過(guò)濾區(qū)、緩沖區(qū)、再生區(qū)、卸渣區(qū)。（√）23.真空轉(zhuǎn)鼓過(guò)濾機(jī)工作一個(gè)循環(huán)通過(guò)過(guò)濾區(qū)、再生區(qū)、緩沖區(qū)、卸渣區(qū)。（×）24.真空轉(zhuǎn)鼓過(guò)濾機(jī)工作一個(gè)循環(huán)通過(guò)過(guò)濾區(qū)、卸渣區(qū)、緩沖區(qū)、再生區(qū)。（×）25.壓力是在重力場(chǎng)中，顆粒在靜止的流體中降落時(shí)受到的力。（×）26.向心力不是顆粒在離心力場(chǎng)中受到的力。（×）27.顆粒與流體的密度差越小，顆粒的沉降速度越大。（×）28.顆粒與流體的密度差越小，顆粒的沉降速度越小。（√）29.硫酸亞鐵和石灰屬于絮凝劑。（×）30.明礬屬于絮凝劑。（√）31.用來(lái)提取產(chǎn)物的溶劑稱(chēng)萃余液。（×）32.鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是中和電荷，破壞水膜。（√）33.鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是減少蛋白質(zhì)溶液的介電常數(shù)。（×）34.鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶性蛋白。（×）35.鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)溶液pH到等電點(diǎn)。（×）36.人血清清蛋白的等電點(diǎn)為4.64，在PH為7的溶液中將血清蛋白質(zhì)溶液通電，清蛋白質(zhì)分子向正極移動(dòng)。（√）37.人血清清蛋白的等電點(diǎn)為4.64，在PH為7的溶液中將血清蛋白質(zhì)溶液通電，清蛋白質(zhì)分子向負(fù)極移動(dòng)。（×）38.在蛋白質(zhì)初步提取的過(guò)程中，不能使用的方法是有機(jī)溶劑萃取。（√）39.在蛋白質(zhì)初步提取的過(guò)程中，能使用有機(jī)溶劑萃取的方法。（×）40.在蛋白質(zhì)初步提取的過(guò)程中，能使用雙水相萃取的方法。（√）41.在蛋白質(zhì)初步提取的過(guò)程中，不能使用超臨界流體萃取的方法。（×）42.在液膜分離的操作過(guò)程中，表面活性劑重要起到穩(wěn)定液膜的作用。（√）43.在液膜分離的操作過(guò)程中，增強(qiáng)劑重要起到穩(wěn)定液膜的作用。（×）44.在液膜分離的操作過(guò)程中，膜溶劑重要起到穩(wěn)定液膜的作用。（×）45．離子互換劑不合用于提取蛋白質(zhì)物質(zhì)。（√）46．離子互換劑合用于提取蛋白質(zhì)物質(zhì)。（×）47．離子互換劑合用于提取抗生素、氨基酸、有機(jī)酸等。（√）48．離子互換劑不合用于提取抗生素、氨基酸、有機(jī)酸等。（×）49．工業(yè)上強(qiáng)酸型和強(qiáng)堿型離子互換樹(shù)脂在使用時(shí)為了減少酸堿用量且避免設(shè)備腐蝕，一般先將其轉(zhuǎn)變?yōu)殁c型和氯型。（√）50．工業(yè)上強(qiáng)酸型和強(qiáng)堿型離子互換樹(shù)脂在使用時(shí)為了減少酸堿用量且避免設(shè)備腐蝕，一般先將其轉(zhuǎn)變?yōu)殁c型和磺酸型。（×）51．工業(yè)上強(qiáng)酸型和強(qiáng)堿型離子互換樹(shù)脂在使用時(shí)為了減少酸堿用量且避免設(shè)備腐蝕，一般先將其轉(zhuǎn)變?yōu)殇@型和磺酸型。（×）52．工業(yè)上強(qiáng)酸型和強(qiáng)堿型離子互換樹(shù)脂在使用時(shí)為了減少酸堿用量且避免設(shè)備腐蝕，一般先將其轉(zhuǎn)變?yōu)殇@型和氯型。（×）53．離子互換法是應(yīng)用離子互換劑作為吸附劑，通過(guò)靜電作用將溶液中帶相反電荷的物質(zhì)吸附在離子互換劑上。（√）54．離子互換法是應(yīng)用離子互換劑作為吸附劑，通過(guò)疏水作用將溶液中帶相反電荷的物質(zhì)吸附在離子互換劑上。（×）55．陰離子互換劑可互換的為陰離子。（√）56．陰離子互換劑可互換的為陽(yáng)離子。（×）57．陰離子互換劑可互換的為陰、陽(yáng)離子。（×）58．陰離子互換劑可互換的為蛋白質(zhì)。（×）59．陽(yáng)離子互換劑可互換的為陽(yáng)離子。（√）60．陽(yáng)離子互換劑可互換的為陰離子。（×）61．陽(yáng)離子互換劑可互換的為陰、陽(yáng)離子。（×）62．陽(yáng)離子互換劑可互換的為蛋白質(zhì)。（×）63．高效液相色譜儀的種類(lèi)很多，但是無(wú)論何種高效液相色譜儀，基本上由高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)或色譜工作站等五大部分組成。（√）64．高效液相色譜儀的種類(lèi)很多，但是無(wú)論何種高效液相色譜儀，基本上由高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、過(guò)濾系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)或色譜工作站等五大部分組成。（×）65．高效液相色譜儀的種類(lèi)很多，但是無(wú)論何種高效液相色譜儀，基本上由進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)或色譜工作站四大部分組成。（×）66．高效液相色譜儀的種類(lèi)很多，但是無(wú)論何種高效液相色譜儀，基本上由高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)四大部分組成。（×）67．氣相色譜分析中,選擇固定相是氣相色譜分析的關(guān)鍵,固定相可大體提成固體、液體及合成固定相三類(lèi)。（√）68．氣相色譜分析中,選擇固定相是氣相色譜分析的關(guān)鍵,固定相可大體提成固體和合成固定相二類(lèi)。（×）69．氣相色譜分析中,選擇固定相是氣相色譜分析的關(guān)鍵,固定相可大體提成固體和液體固定相二類(lèi)。（×）70．HPLC是高效液相色譜的簡(jiǎn)稱(chēng)。（√）71．HPLC是離子互換色譜的簡(jiǎn)稱(chēng)。（×）72．蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定可采用凝膠層析方法。（√）73．蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定可采用離子互換層析方法。（×）74．蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定可采用親和層析方法。（×）75．凝膠色譜分離的依據(jù)是各物質(zhì)分子大小不同。（√）76．凝膠色譜分離的依據(jù)是各物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相中的分派系數(shù)不同。（×）77．凝膠色譜分離的依據(jù)是各物質(zhì)與專(zhuān)一分子的親和力不同。（×）78．凝膠色譜分離的依據(jù)是固定相對(duì)各物質(zhì)的吸附力不同。（×）79．假如要將復(fù)雜原料中分子量大于5000的物質(zhì)與5000分子量以下的物質(zhì)分開(kāi)選用SephadexG-50。（√）80．假如要將復(fù)雜原料中分子量大于5000的物質(zhì)與5000分子量以下的物質(zhì)分開(kāi)選用SephadexG-150。（×）81．洗脫體積是與該溶質(zhì)保存時(shí)間相相應(yīng)的流動(dòng)相體積。（√）82．洗脫體積是溶質(zhì)從柱中流出時(shí)所用的流動(dòng)相體積。（×）83．洗脫體積是凝膠顆粒之間空隙的總體積。（×）84．親和層析是根據(jù)酶分子專(zhuān)一性結(jié)合的純化方法。（√）85．離子互換層析是根據(jù)酶分子專(zhuān)一性結(jié)合的純化方法。（×）86．根據(jù)支持物不同，電泳可以分為紙電泳、醋酸纖維薄膜電泳、瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳。（√）87．根據(jù)支持物不同，電泳可以分為區(qū)帶電泳、自由界面電泳、等速電泳、等電聚焦電泳。（×）88．根據(jù)支持物不同，電泳可以分為聚丙烯酰胺凝膠電泳、SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳、等速電泳、等電聚焦電泳。（×）89．根據(jù)支持物不同，電泳可以分為等速電泳、等電聚焦電泳、瓊脂凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳。（×）90．影響電泳分離的重要因素是待分離生物大分子的性質(zhì)。（√）91．影響電泳分離的重要因素電泳時(shí)間。（×）92．按分離原理不同，電泳可分為區(qū)帶電泳、自由界面電泳、等速電泳、等電聚焦電泳。（√）93．按分離原理不同，電泳可分為紙電泳、醋酸纖維薄膜電泳、瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳。（×）94．結(jié)晶過(guò)程中，溶質(zhì)過(guò)飽和度大小不僅會(huì)影響晶核的形成速度，并且會(huì)影響晶體的長(zhǎng)大速度。（√）95．結(jié)晶過(guò)程中，溶質(zhì)過(guò)飽和度大小只會(huì)影響晶核的形成速度，但不會(huì)影響晶體的長(zhǎng)大速度。（×）96．結(jié)晶過(guò)程中，溶質(zhì)過(guò)飽和度大小不會(huì)影響晶核的形成速度，但會(huì)影響晶體的長(zhǎng)大速度。（×）97.沉淀是物理環(huán)境的變化引起的溶質(zhì)的溶解度減少、生成固體凝聚物的現(xiàn)象。（√）98．絮凝是物理環(huán)境的變化引起的溶質(zhì)的溶解度減少、生成固體凝聚物的現(xiàn)象。（×）99.等電聚焦是運(yùn)用蛋白質(zhì)分子或其它兩性分子的等電點(diǎn)不同，在一個(gè)穩(wěn)定的、連續(xù)的、線性的pH梯度中進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離和分析。（√）100.親和色譜是運(yùn)用蛋白質(zhì)分子或其它兩性分子的等電點(diǎn)不同，在一個(gè)穩(wěn)定的、連續(xù)的、線性的pH梯度中進(jìn)行蛋白質(zhì)的分離和分析。（×）101.鹽析是在高濃度的中性鹽存在下，蛋白質(zhì)（酶）等生物大分子物質(zhì)在水溶液中的溶解度減少，產(chǎn)生沉淀的過(guò)程。（√）102.離子互換是在高濃度的中性鹽存在下，蛋白質(zhì)（酶）等生物大分子物質(zhì)在水溶液中的溶解度減少，產(chǎn)生沉淀的過(guò)程。（×）103.運(yùn)用生物大分子各混合組分等電點(diǎn)差異和離子互換行為分離電荷量不同的物質(zhì)的方法，稱(chēng)為色譜聚焦。（√）104.運(yùn)用生物大分子各混合組分等電點(diǎn)差異和離子互換行為分離電荷量不同的物質(zhì)的方法，稱(chēng)為親和色譜。（×）105.納濾（NF）以壓力差為推動(dòng)力，從溶液中分離300~1000小分子量的膜分離過(guò)程，孔徑分布平均在2nm；其膜具有納米級(jí)的孔徑和多帶電荷等結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。（√）106.反滲透是以壓力差為推動(dòng)力，從溶液中分離300~1000小分子量的膜分離過(guò)程，孔徑分布平均在2nm；其膜具有納米級(jí)的孔徑和多帶電荷等結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。（×）107．PEG-硫酸銨屬于高聚物－鹽雙水相體系。（√）108．PEG-Dextran/Dx高聚物－鹽雙水相體系。（×）109．重結(jié)晶是運(yùn)用雜質(zhì)和結(jié)晶物質(zhì)在不同溶劑和不同溫度下的溶解度不同，將晶體用合適的溶劑再次結(jié)晶，以獲得高純度的晶體的操作。（√）110．結(jié)晶是運(yùn)用雜質(zhì)和結(jié)晶物質(zhì)在不同溶劑和不同溫度下的溶解度不同，將晶體用合適的溶劑再次結(jié)晶，以獲得高純度的晶體的操作。（×）111．由膜、固定膜的支撐體、間隔物以及收納這些部件的容器構(gòu)成的一個(gè)單元稱(chēng)為膜組件。（√）112．由膜、固定膜的支撐體、間隔物以及收納這些部件的容器構(gòu)成的一個(gè)單元稱(chēng)為膜過(guò)濾。（×）113.運(yùn)用蛋白質(zhì)在pH值等于其等點(diǎn)的溶液中溶解度下降的原理進(jìn)行沉淀分級(jí)的方法稱(chēng)為等電點(diǎn)沉淀。（√）114.運(yùn)用蛋白質(zhì)在pH值等于其等點(diǎn)的溶液中溶解度下降的原理進(jìn)行沉淀分級(jí)的方法稱(chēng)為等電聚焦。（×）115．PEG-Dextran/Dx屬于高聚物－高聚物雙水相體系。（√）116．TritonX-114屬于高聚物－高聚物雙水相體系。（×）117．TritonX-114屬于非離子表面活性劑水膠束兩水相體系。（√）118．SDS-CTAB屬于非離子表面活性劑水膠束兩水相體系。（×）119．SDS-CTAB屬于陰陽(yáng)離子表面活性劑兩水相體系。（√）120．PEG-Dextran/Dx屬于陰陽(yáng)離子表面活性劑兩水相體系。（×）三、單項(xiàng)選擇題1．真空轉(zhuǎn)鼓過(guò)濾機(jī)工作一個(gè)循環(huán)通過(guò)（A）。A、過(guò)濾區(qū)、緩沖區(qū)、再生區(qū)、卸渣區(qū)B、緩沖區(qū)、過(guò)濾區(qū)、再生區(qū)、卸渣區(qū)C、過(guò)濾區(qū)、緩沖區(qū)、卸渣區(qū)、再生區(qū)D、過(guò)濾區(qū)、再生區(qū)、緩沖區(qū)、卸渣區(qū)2．以下哪項(xiàng)不是在重力場(chǎng)中，顆粒在靜止的流體中降落時(shí)受到的力（B）A.重力B.壓力C.浮力D.阻力3．以下哪項(xiàng)不是顆粒在離心力場(chǎng)中受到的力（C）A.離心力B.向心力C.重力D.阻力4．顆粒與流體的密度差越小，顆粒的沉降速度（A）A.越小B.越大C.不變D.無(wú)法擬定5．工業(yè)上常用的過(guò)濾介質(zhì)不涉及（D）A.織物介質(zhì)B.堆積介質(zhì)C.多孔固體介質(zhì)D.真空介質(zhì)6．下列物質(zhì)屬于絮凝劑的有（A）。A、明礬B、石灰C、聚丙烯類(lèi)D、硫酸亞鐵7．適合小量細(xì)胞破碎的方法是（B）A.高壓勻漿法B.超聲破碎法C.高速珠磨法D.高壓擠壓法8．絲狀（團(tuán)狀）真菌適合采用（A）破碎。A、珠磨法B、高壓勻漿法C、A與B聯(lián)合D、A與B均不行9．在蛋白質(zhì)初步提取的過(guò)程中，不能使用的方法（C）。A、雙水相萃取B、超臨界流體萃取C、有機(jī)溶劑萃取D、反膠團(tuán)萃取10．用來(lái)提取產(chǎn)物的溶劑稱(chēng)（C）。A、料液B、萃取液C、萃取劑D、萃余液。11．關(guān)于用氫鍵形成來(lái)判斷各類(lèi)溶劑互溶規(guī)律，下列（A）項(xiàng)是對(duì)的的敘述。A、氫鍵形成是能量釋放的過(guò)程，若溶劑混合后形成的氫鍵增長(zhǎng)或強(qiáng)度更大，則有助于互溶。B、氫鍵形成是能量吸取的過(guò)程，若溶劑混合后形成的氫鍵增長(zhǎng)或強(qiáng)度更大，則有助于互溶。C、氫鍵形成是能量釋放的過(guò)程，若溶劑混合后形成的氫鍵增長(zhǎng)或強(qiáng)度更大，則不利于互溶。D、氫鍵形成是能量吸取的過(guò)程，若溶劑混合后形成的氫鍵增長(zhǎng)或強(qiáng)度更大，則不利于互溶。12．鹽析法沉淀蛋白質(zhì)的原理是（B）A.減少蛋白質(zhì)溶液的介電常數(shù)B.中和電荷，破壞水膜C.與蛋白質(zhì)結(jié)合成不溶性蛋白D.調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)溶液pH到等電點(diǎn)13．從組織中提取酶時(shí)，最抱負(fù)的結(jié)果是（C）A.蛋白產(chǎn)量最高B.酶活力單位數(shù)值很大C.比活力最高D.Km最小14．人血清清蛋白的等電點(diǎn)為4.64，在PH為7的溶液中將血清蛋白質(zhì)溶液通電，清蛋白質(zhì)分子向（A）A：正極移動(dòng)；B：負(fù)極移動(dòng)；C：不移動(dòng)；D：不擬定。15．蛋白質(zhì)具有兩性性質(zhì)重要因素是（B）A：蛋白質(zhì)分子有一個(gè)羧基和一個(gè)氨基；B：蛋白質(zhì)分子有多個(gè)羧基和氨基；C：蛋白質(zhì)分子有苯環(huán)和羥基；D：以上都對(duì)16．使蛋白質(zhì)鹽析可加入試劑（D）A：氯化鈉；B：硫酸；C：硝酸汞；D：硫酸銨17．在蛋白質(zhì)初步提取的過(guò)程中，不能使用的方法（C）。A、雙水相萃取B、超臨界流體萃取C、有機(jī)溶劑萃取D、反膠團(tuán)萃取18．基因工程藥物分離純化過(guò)程中，細(xì)胞收集常采用的方法（C）A．鹽析B.超聲波C.膜過(guò)濾D.層析19．非對(duì)稱(chēng)膜的支撐層（C）。A、與分離層材料不同B、影響膜的分離性能C、只起支撐作用D、與分離層孔徑相同20．乳化液膜的制備中強(qiáng)烈攪拌（C）。A、是為了讓濃縮分離充足B、應(yīng)用在被萃取相與W/O的混合中C、使內(nèi)相的尺寸變小D、應(yīng)用在膜相與萃取相的乳化中21．在液膜分離的操作過(guò)程中，（B）重要起到穩(wěn)定液膜的作用。A、載體B、表面活性劑C、增強(qiáng)劑D、膜溶劑22．乳化液膜的制備中強(qiáng)烈攪拌（B）。A、是為了讓濃縮分離充足B、應(yīng)用在被萃取相與W/O的混合中C、使內(nèi)水相的尺寸變小D、應(yīng)用在膜相與反萃取相的乳化中23．適合于親脂性物質(zhì)的分離的吸附劑是（B）。A．活性炭B.氧化鋁C.硅膠D.磷酸鈣24．離子互換劑不合用于提取（D）物質(zhì)。A．抗生素B.氨基酸C.有機(jī)酸D.蛋白質(zhì)25．工業(yè)上強(qiáng)酸型和強(qiáng)堿型離子互換樹(shù)脂在使用時(shí)為了減少酸堿用量且避免設(shè)備腐蝕，一般先將其轉(zhuǎn)變?yōu)椋˙）。A、鈉型和磺酸型B、鈉型和氯型C、銨型和磺酸型D、銨型和氯型26．依離子價(jià)或水化半徑不同，離子互換樹(shù)脂對(duì)不同離子親和能力不同。樹(shù)脂對(duì)下列離子親和力排列順序?qū)Φ牡挠校ˋ）。A、Fe3+﹥Ca2+﹥Na+B、Na+﹥Ca2+﹥Fe3+C、Na+﹥Rb+﹥Cs+D、Rb+﹥Cs+﹥Na+27．離子互換法是應(yīng)用離子互換劑作為吸附劑，通過(guò)（A）將溶液中帶相反電荷的物質(zhì)吸附在離子互換劑上。A、靜電作用B、疏水作用C、氫鍵作用D、范德華力28．陰離子互換劑（C）。A、可互換的為陰、陽(yáng)離子B、可互換的為蛋白質(zhì)C、可互換的為陰離子D、可互換的為陽(yáng)離子29．工業(yè)上強(qiáng)酸型和強(qiáng)堿型離子互換樹(shù)脂在使用時(shí)為了減少酸堿用量且避免設(shè)備腐蝕，一般先將其轉(zhuǎn)變?yōu)椋˙）。A、鈉型和磺酸型B、鈉型和氯型C、銨型和磺酸型D、氫型和氯型30．依離子價(jià)或水化半徑不同，離子互換樹(shù)脂對(duì)不同離子親和能力不同。樹(shù)脂對(duì)下列離子親和力排列順序?qū)Φ牡挠校ˋ）。A、Fe3+>Ca2+>Na+B、Na+>Ca2+>Fe3+C、硫酸根>檸檬酸根>硝酸根D、硝酸根>硫酸根>檸檬酸根31．氣相色譜柱重要有（C）。A填充柱B毛細(xì)管柱CA或BDA或B及其他32．高效液相色譜儀的種類(lèi)很多，但是無(wú)論何種高效液相色譜儀，基本上由（D）組成。A高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、過(guò)濾系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)或色譜工作站等五大部分B進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)或色譜工作站四大部分C高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)四大部分D高壓輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、記錄系統(tǒng)或色譜工作站等五大部分33．關(guān)于分派柱層析的基本操作錯(cuò)誤(D)。A裝柱分干法和濕法兩種B分派柱層析法使用兩種溶劑，事先必須先使這兩個(gè)互相相飽和C用硅藻土為載體，需分批小量地倒入柱中，用一端是平盤(pán)的棒把硅藻壓緊壓平D分派柱層析合用于分離極性比較小、在有機(jī)溶劑中溶解度大的成分，或極性很相似的成分。34．氣相色譜分析中,擇固定相是氣相色譜分析的關(guān)鍵,固定相可大體提成(C)A固體一類(lèi)B固體和合成固定相二類(lèi)C固體、液體及合成固定相三類(lèi)D固體、液體固定相二類(lèi)35．關(guān)于疏水柱層析的操作錯(cuò)誤(D)A疏水層析柱裝柱完畢后，通常要用品有高鹽濃度的緩沖液進(jìn)行平衡B疏水層析是運(yùn)用蛋白質(zhì)與疏水性吸附劑之間的弱疏水性互相作用的差別進(jìn)行分離純化的層析技術(shù)C洗脫后的層析柱再生解決，可用8mol/L尿素溶液或含8mol/L尿素的緩沖溶液洗滌，然后用平衡緩沖液平衡D疏水柱層析分辨率很高、流速慢、加樣量小36．HPLC是哪種色譜的簡(jiǎn)稱(chēng)（C）。A．離子互換色譜B.氣相色譜C.高效液相色譜D.凝膠色譜37．針對(duì)配基的生物學(xué)特異性的蛋白質(zhì)分離方法是（C）。A.凝膠過(guò)濾B.離子互換層析C.親和層析D.紙層析38．用于蛋白質(zhì)分離過(guò)程中的脫鹽和更換緩沖液的色譜是（C）A．離子互換色譜B.親和色譜C.凝膠過(guò)濾色譜D.反相色譜39．蛋白質(zhì)分子量的測(cè)定可采用（C）方法。A．離子互換層析B.親和層析C.凝膠層析D.聚酰胺層析40．凝膠色譜分離的依據(jù)是（B）。A、固定相對(duì)各物質(zhì)的吸附力不同B、各物質(zhì)分子大小不同C、各物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相中的分派系數(shù)不同D、各物質(zhì)與專(zhuān)一分子的親和力不同41．假如要將復(fù)雜原料中分子量大于5000的物質(zhì)與5000分子量以下的物質(zhì)分開(kāi)選用（D）。A、SephadexG-200B、SephadexG-150C、SephadexG-100D、SephadexG-5042．分派層析中的載體（C）。A、對(duì)分離有影響B(tài)、是固定相C、能吸附溶劑構(gòu)成固定相D、是流動(dòng)相43．凝膠色譜分離的依據(jù)是（B）。A、固定相對(duì)各物質(zhì)的吸附力不同B、各物質(zhì)分子大小不同C、各物質(zhì)在流動(dòng)相和固定相中的分派系數(shù)不同D、各物質(zhì)與專(zhuān)一分子的親和力不同44．洗脫體積是（C）。A、凝膠顆粒之間空隙的總體積B、溶質(zhì)進(jìn)入凝膠內(nèi)部的體積C、與該溶質(zhì)保存時(shí)間相相應(yīng)的流動(dòng)相體積D、溶質(zhì)從柱中流出時(shí)所用的流動(dòng)相體積45．下面哪一種是根據(jù)酶分子專(zhuān)一性結(jié)合的純化方法（A）。A.親和層析B.凝膠層析C.離子互換層析D.鹽析46．分子篩層析純化酶是根據(jù)（C）進(jìn)行純化。A.根據(jù)酶分子電荷性質(zhì)的純化方法B.調(diào)節(jié)酶溶解度的方法C.根據(jù)酶分子大小、形狀不同的純化方法D.根據(jù)酶分子專(zhuān)一性結(jié)合的純化方法47．根據(jù)支持物不同，電泳可以分為（A）。A．紙電泳、醋酸纖維薄膜電泳、瓊脂凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳B．區(qū)帶電泳、自由界面電泳、等速電泳、等電聚焦電泳C．聚丙烯酰胺凝膠電泳、SDS－聚丙烯酰胺凝膠電泳、等速電泳、等電聚焦電泳D．等速電泳、等電聚焦電泳、瓊脂凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳48．影響電泳分離的重要因素（B）A光照B待分離生物大分子的性質(zhì)C濕度D電泳時(shí)間49．按分離原理不同，電泳可分為（A）A區(qū)帶電泳、自由界面電泳、等速電泳、等電聚焦電泳B紙電泳、醋酸纖維薄膜電泳、瓊脂凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳C區(qū)帶電泳、自由界面電泳、紙電泳、醋酸纖維薄膜電泳D等速電泳、等電聚焦電泳、瓊脂凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳50．氨基酸的結(jié)晶純化是根據(jù)氨基酸的（A）性質(zhì)。A．溶解度和等電點(diǎn)B.分子量C.酸堿性D.生產(chǎn)方式51．關(guān)于精餾回流比控制，對(duì)于一定的分離任務(wù)，以下對(duì)的的兩項(xiàng)是（A）A、若回流比變大，則精餾能耗增大；B、若回流比變大，則精餾能耗減?。籆、若回流比變大，則所需理論塔板數(shù)變大；D、若回流比變小，則所需理論塔板數(shù)變小。52．結(jié)晶過(guò)程中，溶質(zhì)過(guò)飽和度大?。ˋ）A、不僅會(huì)影響晶核的形成速度，并且會(huì)影響晶體的長(zhǎng)大速度B、只會(huì)影響晶核的形成速度，但不會(huì)影響晶體的長(zhǎng)大速度C、不會(huì)影響晶核的形成速度，但會(huì)影響晶體的長(zhǎng)大速度D、不會(huì)影響晶核的形成速度，并且不會(huì)影響晶體的長(zhǎng)大速度53．下列哪項(xiàng)不是蛋白質(zhì)的濃度測(cè)定的方法（D）。A、凱氏定氮法B.雙縮脲法C.福林-酚法D.核磁共振54．供生產(chǎn)生物藥物的生物資源不涉及（D）A.動(dòng)物B植物C.微生物D.礦物質(zhì)四、填空題1.生物產(chǎn)品的分離涉及固液分離、濃縮、純化、和干燥。2.發(fā)酵液常用的固液分離方法有離心沉降和重力沉降等。3.離心設(shè)備從形式上可分為間歇式，連續(xù)式等型式。4.膜分離過(guò)程中所使用的膜，依據(jù)其膜特性（孔徑）不同可分為微濾，超濾，反滲透和納濾。5.多糖基離子互換劑涉及離子互換纖維素和葡聚糖離子互換樹(shù)脂兩大類(lèi)。6.工業(yè)上常用的超濾裝置（膜組件）有板式、管式、螺旋卷式、中空纖維式。7.影響吸附的重要因素有吸附劑的性質(zhì)、吸附質(zhì)的性質(zhì)、溫度、溶液的PH值、鹽濃度。8.離子互換樹(shù)脂由具有三維空間立體結(jié)構(gòu)的網(wǎng)絡(luò)骨架、活性基團(tuán)、活性離子組成。9.電泳用凝膠制備時(shí)，過(guò)硫酸銨的作用是引發(fā)劑甲叉雙丙烯酰胺的作用是交聯(lián)劑。TEMED的作用是增塑劑。10影響鹽析的因素有_無(wú)機(jī)鹽的種類(lèi)__，__鹽的濃度__，____溫度___和____pH值__。11.在結(jié)晶操作中，工業(yè)上常用的起晶方法有自然起晶法、刺激起晶法、晶種起晶法。12.簡(jiǎn)樸地說(shuō)，離子互換過(guò)程事實(shí)上只有吸附，離子互換和洗脫三步。13.在生物制品進(jìn)行吸附或離子互換分離時(shí)，通常遵循Langmuir吸附方程，其形式為_(kāi)Q＝qmc/(Kd+c)__。14.反相高效液相色譜的固定相是非極性的，而流動(dòng)相是極性的；常用的固定相有ODS和C8；常用的流動(dòng)相有甲醇和乙腈。15.超臨界流體的特點(diǎn)是與氣體有相似的__密度__，與液體有相似的___黏度____。16.離子互換樹(shù)脂的合成方法有___加聚法_______和____縮聚法___兩大類(lèi)。17.常用的化學(xué)細(xì)胞破碎方法有滲透沖擊法、酶消化法、增溶法、脂溶法、和脂溶法。

18.等電聚焦電泳法分離不同蛋白質(zhì)的原理是依據(jù)其_等電點(diǎn)的不同。19.離子互換分離操作中，常用的洗脫方法有___提高離子強(qiáng)度_______和__調(diào)節(jié)pH值__。20.晶體質(zhì)量重要指___晶體大小_______，_____晶體形狀_____和___晶體純度__三個(gè)方面。21.親和吸附原理涉及__吸附________，___清洗_______和____洗脫__三步。22.根據(jù)分離機(jī)理的不同，色譜法可分為吸附色譜_，分派色譜，離子互換色譜和凝膠色譜。23.鹽析實(shí)驗(yàn)中用于關(guān)聯(lián)溶質(zhì)溶解度與鹽濃度的Cohn方程為_(kāi)lgS=β-KsI___。當(dāng)_pH和溫度一定期，改變體系離子強(qiáng)度進(jìn)行鹽析的方法______稱(chēng)為Ks鹽析法；當(dāng)_離子強(qiáng)度一定期，改變pH值和溫度______稱(chēng)為β鹽析法。24.蛋白質(zhì)分離常用的色譜法有紙色譜法、離子互換色譜、疏水色譜、免疫親和色譜。25.SDSPAGE電泳制膠時(shí)，加入十二烷基磺酸鈉（SDS）的目的是消除各種待分離蛋白的___分子形狀和自身電荷___差異，而將___相對(duì)分子質(zhì)量__作為分離的依據(jù)。26.常用的蛋白質(zhì)沉析方法有__鹽析沉淀__，___等電點(diǎn)沉淀__和有機(jī)溶劑沉淀__。27.常用的工業(yè)絮凝劑有__聚丙烯酰胺類(lèi)衍生物__和__聚乙烯亞胺類(lèi)衍生物__兩大類(lèi)。28.典型的工業(yè)過(guò)濾設(shè)備有_加壓葉濾機(jī)_、_板框過(guò)濾機(jī)_和_回轉(zhuǎn)真空過(guò)濾機(jī)__。29.常用離心設(shè)備可分為_(kāi)_管式__和__碟片式_兩大類(lèi)。30.根據(jù)物化理論，萃取達(dá)成平衡時(shí)，溶質(zhì)在萃取相和萃余相中的__化學(xué)勢(shì)_____相等。31.根據(jù)吸附劑與吸附質(zhì)之間存在的吸附力性質(zhì)的不同，可將吸附分為_(kāi)物理吸附_、_化學(xué)吸附_和__離子互換32.影響親和吸附的因素有配基濃度、空間位阻、配基與載體的結(jié)合位點(diǎn)、載體孔徑和微環(huán)境。33.陽(yáng)離子互換樹(shù)脂按照活性基團(tuán)分類(lèi)，可分為_(kāi)_強(qiáng)酸型__、____中強(qiáng)酸型__和__弱酸型__；其典型的活性基團(tuán)分別有_磺酸基團(tuán)__、__磷酸基_、_羧基___。34.陰離子互換樹(shù)脂按照活性基團(tuán)分類(lèi)，可分為_(kāi)_強(qiáng)堿型__、中強(qiáng)堿型_和___弱堿型_；其典型的活性基團(tuán)分別有__季氨基_、___叔氨基__、___仲氨基和伯氨基。35.DEAESepharose是__陰___離子互換樹(shù)脂，其活性基團(tuán)是_二乙基氨基乙基__。36.CMSepharose是__陽(yáng)__離子互換樹(shù)脂，其活性基團(tuán)是__羧甲基__。37.影響離子互換選擇性的因素有_水和離子半徑、離子化合價(jià)、離子半徑、溶液pH、樹(shù)脂與離子間作用力、有機(jī)溶劑和__交聯(lián)度。38.離子互換操作一般分為_(kāi)_動(dòng)態(tài)__和__靜態(tài)_兩種。39.蛋白質(zhì)等生物大分子，在溶液中呈穩(wěn)定的分散狀態(tài)，其因素是由于_分子表面電荷__和__水化層_。40.鹽析用鹽的選擇需考慮（同10）無(wú)機(jī)鹽的種類(lèi)，__鹽的濃度，_溫度__和_pH值_等幾個(gè)方面的因素。41.影響有機(jī)溶劑沉淀的因素有__溫度_、_pH_、_攪拌速度_、_中性鹽濃度_和_金屬離子_。42.常用的超濾裝置有__板式__、_管式__、_螺旋卷式__和__中空纖維式___。43.依據(jù)電泳原理，現(xiàn)有電泳分離系統(tǒng)可分為移動(dòng)界面電泳_、_區(qū)帶電泳__和_穩(wěn)態(tài)電泳__。44.依據(jù)建立pH梯度的原理不同，等電聚焦（IEF）可分為_(kāi)載體兩性電解質(zhì)梯度_和_固相梯度_。45.二維電泳中，第一相是__等電聚焦_；第二相是_SDS－PAGE_。46.結(jié)晶涉及三個(gè)過(guò)程__過(guò)飽和溶液的形成、晶核的形成和____晶體生長(zhǎng)____。47.過(guò)飽和溶液的形成方法有__熱飽和溶液冷卻_、_部分溶劑蒸發(fā)法_、__真空蒸發(fā)冷卻法___和_化學(xué)反映結(jié)晶質(zhì)。48.晶核自動(dòng)形成時(shí)，體系總的吉布斯自由能的改變?chǔ)由_表面過(guò)剩自由能（ΔGs）和__體積過(guò)剩自由能（ΔGv）組成。49.物料中所含水分可分為_(kāi)_化學(xué)結(jié)合水_、__物化結(jié)合水___和__機(jī)械結(jié)合水分_三種。50.根據(jù)干燥曲線，物料干燥可分為_(kāi)恒速干燥階段__和__降速干燥階段__兩個(gè)階段。51.工業(yè)生產(chǎn)中常用的助濾劑有__硅藻土__和_珍珠巖__。52.液－液萃取從機(jī)理上分析可分為_(kāi)_物理萃取__和___化學(xué)萃取__兩類(lèi)。53.基本的離子互換過(guò)程由_樹(shù)脂預(yù)解決__、離子互換吸附_、_洗脫和__樹(shù)脂再生__組成。54.吸附涉及_待分離料液與吸附劑混合_，_吸附質(zhì)被吸附到吸附劑表面_、_料液流出_和_吸附質(zhì)解吸回收_四個(gè)過(guò)程組成。55.大孔網(wǎng)狀吸附劑有_非極性__，__中檔極性_和__極性__三種重要類(lèi)型。56.親和吸附劑表面連接的“手臂鏈”的作用是___減少空間位阻______。57.根據(jù)修飾基團(tuán)的不同，離子互換樹(shù)脂可分為_(kāi)強(qiáng)酸性陽(yáng)離子互換樹(shù)脂_，弱酸性陽(yáng)離子互換樹(shù)脂，_強(qiáng)堿性陰離子互換樹(shù)脂_和_弱堿性陰離子互換樹(shù)脂_等四大類(lèi)。58.根據(jù)聚合方法，離子互換樹(shù)脂的合成方法可分為_(kāi)乳液聚合法_和_懸浮聚合法_兩類(lèi)。59.根據(jù)聚合單體，離子互換樹(shù)脂可分為_(kāi)無(wú)機(jī)_和_有機(jī)高分子材料_兩類(lèi)。60.影響離子互換速度的因素有顆粒大小、交聯(lián)度、溫度、離子化合價(jià)、離子大小、攪拌速度、溶液濃度。61.分派色譜的基本構(gòu)成要素有固定相、載體、流動(dòng)相_。62.反相色譜常用的流動(dòng)相有乙腈、甲醇_。63.反相色譜常用的固定相有ODS和C4和C8烷基或苯基硅烷化試劑制備64.Sepharose系列的離子互換樹(shù)脂的載體是____瓊脂糖凝膠__。65.分子篩色譜（凝膠色譜）的重要應(yīng)用是生物大分子的初級(jí)分離，脫鹽。66.影響有機(jī)溶劑沉析的重要因素有_溫度__、_攪拌速度、溶液pH值、___離子強(qiáng)度__、_樣品濃度_和__金屬離子的助沉析作用。67.根據(jù)膜材料的不同，常用的膜可分為_(kāi)_有機(jī)高分子膜__和__無(wú)機(jī)材料膜__兩類(lèi)。68.根據(jù)膜結(jié)構(gòu)的不同，常用的膜可分為_(kāi)對(duì)稱(chēng)性膜__、_非對(duì)稱(chēng)膜_和__復(fù)合膜__三類(lèi)。69.強(qiáng)制膜分離過(guò)程是指_超濾__和_反滲透_過(guò)程。70.電泳系統(tǒng)的基本組成有__電泳槽_、_電源_、__外循環(huán)恒溫系統(tǒng)__、__凝膠干燥器__、_灌膠模具_(dá)__、__電泳轉(zhuǎn)移裝置_、__電泳洗脫儀__和__凝膠掃描和攝錄裝置__。71.電泳后，樣品的重要染色方法有_考馬斯亮藍(lán)R-250__和__銀染色___。72.SDS－PAGE電泳中，SDS的加入是為了消除不同樣品分子間__形狀__和_電荷_的差異；加入二硫叔糖醇的目的是_強(qiáng)還原劑使半胱氨酸殘基之間的二硫鍵斷裂。73.電泳過(guò)程中，加入溴酚蘭的目的是_以溴酚藍(lán)作對(duì)照，因其有色，分子量小電泳速度快，待其前沿到達(dá)陽(yáng)極底部即可停止電泳。74.固體可分為結(jié)晶和無(wú)定形兩種狀態(tài)。75.結(jié)晶過(guò)程涉及過(guò)飽和溶液的形成、晶體的形成和晶體生長(zhǎng)三個(gè)過(guò)程。76.結(jié)晶的前提是_溶液達(dá)成過(guò)飽和狀態(tài)；結(jié)晶的推動(dòng)力是_過(guò)飽和度_____。77.根據(jù)晶體生長(zhǎng)擴(kuò)散學(xué)說(shuō)，晶體的生長(zhǎng)涉及_溶質(zhì)穿過(guò)晶體表面的滯留層、_溶質(zhì)到達(dá)晶體表面__和__放熱結(jié)晶三個(gè)過(guò)程。78.影響晶體生長(zhǎng)的重要因素有雜質(zhì)、攪拌、溫度。79.Sephadex系列的離子互換樹(shù)脂的載體是葡聚糖。80．常用的液液萃取設(shè)備分為兩大類(lèi)，一類(lèi)是混合澄清式萃取設(shè)備，另一類(lèi)是塔式萃取設(shè)備，涉及噴淋塔、轉(zhuǎn)盤(pán)塔、篩板塔、脈沖篩板塔、填料塔、往復(fù)振動(dòng)篩板塔等。81．晶體質(zhì)量重要指晶體大小、晶體形狀和晶體純度三個(gè)方面；討論題

1.請(qǐng)結(jié)合圖示簡(jiǎn)述凝膠排阻色譜（分子篩）的分離原理；分子篩凝膠色譜原理 不同的化合物由于其大小差異，在流經(jīng)GPC柱時(shí)，不同分子量的化合物流經(jīng)體積不同（大分子不能或難以進(jìn)入凝膠網(wǎng)格結(jié)構(gòu)的內(nèi)部，直接從凝膠顆粒之間穿過(guò)，保存時(shí)間短；而小分子恰恰相反，保存時(shí)間較長(zhǎng)）而得以分離（如上圖所示）繪制結(jié)晶過(guò)程中飽和曲線和過(guò)飽和曲線圖，并簡(jiǎn)述其意義；結(jié)晶過(guò)程中的飽和溫度曲線和不飽和溫度曲線的簡(jiǎn)圖如右圖所示：S-S曲線為飽和溫度曲線，在其下方為穩(wěn)定區(qū)，在該區(qū)域溶液為不飽和溶液，不會(huì)自發(fā)形成結(jié)晶；T-T曲線為過(guò)飽和溫度曲線，在其上方為不穩(wěn)定區(qū)，可以自發(fā)形成結(jié)晶；S-S曲線和T-T曲線之間為亞穩(wěn)定區(qū)，在該區(qū)域，溶液為過(guò)飽和溶液，但若無(wú)晶種存在，也不能自發(fā)形成結(jié)晶。何謂親和吸附，有何特點(diǎn)？親和吸附分離是運(yùn)用溶質(zhì)和吸附劑之間特殊的化學(xué)作用，從而實(shí)現(xiàn)分離。特點(diǎn)（a）效率高（b）分離精度高（c）但通用性較差，洗脫條件苛刻簡(jiǎn)述結(jié)晶過(guò)程中晶體形成的條件；形成新相（固體）需要一定的表面自由能。因此，溶液濃度達(dá)成飽和溶解度時(shí)，晶體尚不能析出，只有當(dāng)溶質(zhì)濃度超過(guò)飽和溶解度后，才也許有晶體析出。一方面形成晶核，由Kelvin公式，微小的晶核具有較大的溶解度。實(shí)質(zhì)上，在飽和溶液中，晶核是處在一種形成—溶解—再形成的動(dòng)態(tài)平衡之中，只有達(dá)成一定的過(guò)飽和度以后，晶核才可以穩(wěn)定存在。試比較常規(guī)聚丙稀酰胺凝膠電泳與SDSPAGE的分離原理；由于聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）是多孔介質(zhì)，不僅能防止對(duì)流，把擴(kuò)散減少到最低；并且其孔徑大小與生物大分子具有相似的數(shù)量級(jí)，能積極參與生物分子的分離，具有分子篩效應(yīng)。因此，在使用聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行蛋白質(zhì)分離時(shí)，在電泳過(guò)程中不僅取決于蛋白質(zhì)的電荷密度，還取決于蛋白質(zhì)的尺寸和形狀。SDS是一種陰離子去污劑，作為變性劑和助溶性試劑，能斷裂分子內(nèi)和分子間的氫鍵，使分子去折疊，破壞蛋白質(zhì)分子的二級(jí)、三級(jí)結(jié)構(gòu)；而強(qiáng)還原劑，如二硫蘇糖醇、β-巰基乙醇能使半胱氨酸殘基之間的二硫鍵斷裂。因此，在樣品和凝膠中加入SDS和還原劑后，蛋白質(zhì)分子被解聚為組成它們的多肽鏈，解聚后的氨基酸側(cè)鏈與SDS結(jié)合后，形成帶負(fù)電的蛋白質(zhì)-SDS膠束，所帶電荷遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)了蛋白質(zhì)原有的電荷量，消除了不同分子間的電荷差異；同時(shí)，蛋白質(zhì)-SDS聚合體的形狀也基本相同，這就消除了在電泳過(guò)程中分子形狀對(duì)遷移率的影響。簡(jiǎn)述生物分離過(guò)程的特點(diǎn)；產(chǎn)品豐富：產(chǎn)品的多樣性導(dǎo)致分離方法的多樣性；2、絕大多數(shù)生物分離方法來(lái)源于化學(xué)分離；3、生物分離一般比化工分離難度大：（1）成分復(fù)雜（2）懸液中的目的產(chǎn)物濃度低（3）生物活性，條件相對(duì)溫和（4）生物產(chǎn)品規(guī)定高質(zhì)量（5）獲得高純度的干燥產(chǎn)品（6）衛(wèi)生因此，生物分離過(guò)程往往成本很高，在某些產(chǎn)品的生產(chǎn)過(guò)程中，分離成本也許占到總成本的80％以上。因此必須仔細(xì)考慮和設(shè)計(jì)產(chǎn)品的回收和純化過(guò)程。生物親和作用的本質(zhì)及其影響親和作用的重要因素；本質(zhì)：參與親和作用的兩個(gè)分子(或物質(zhì))中，其中之一為蛋白質(zhì)的情況占絕大多數(shù)，或者兩者均為蛋白質(zhì)。一般認(rèn)為，蛋白質(zhì)的立體結(jié)構(gòu)中具有某些參與親和結(jié)合的部位，這些結(jié)合部位呈凹陷或凸起的結(jié)構(gòu)，能與該蛋白質(zhì)發(fā)生親和作用的分子恰好可以進(jìn)入到此凹陷結(jié)構(gòu)中，或者該蛋白質(zhì)的凸起部位恰好可以進(jìn)入與其發(fā)生親和作用的分子(一般也是蛋白質(zhì))的凹陷部位，就象鑰匙和鎖孔的關(guān)系同樣。影響因素：離子強(qiáng)度、pH、克制氫鍵形成的物質(zhì)、溫度、離液離子、螯合劑簡(jiǎn)述超臨界流體萃取的原理及其特點(diǎn)；運(yùn)用超臨界流體的特殊性質(zhì)，使其在超臨界狀態(tài)下，與待分離的物料接觸，萃取出目的產(chǎn)物，然后通過(guò)降壓或升溫的方法，使萃取物得到分離。其特點(diǎn)是安全、無(wú)毒、產(chǎn)品分離簡(jiǎn)樸，但設(shè)備投資大。何謂反膠團(tuán)，反膠團(tuán)萃?。科涮攸c(diǎn)有哪些？反膠團(tuán)是分散于連續(xù)有機(jī)相中、由表面活性劑所形成的穩(wěn)定的納米尺度的聚集體。反膠團(tuán)萃取是運(yùn)用表面活性劑在有機(jī)溶劑中形成的反膠團(tuán)，從而在有機(jī)相內(nèi)形成分散的親水微環(huán)境，使生物分子在有機(jī)相（萃取相）內(nèi)存在于反膠團(tuán)的親水微環(huán)境中，消除了生物分子，特別是蛋白質(zhì)類(lèi)生物活性物質(zhì)難溶解在有機(jī)相中或在有機(jī)相中發(fā)生不可逆變性的現(xiàn)象。特點(diǎn)1．成本低，溶劑可反復(fù)使用；2．萃取率高；3．反膠團(tuán)是透明的、熱穩(wěn)定的體系；4．極性“水核”具有較強(qiáng)的溶解能力；5．生物大分子由于具有較強(qiáng)的極性，可溶解于極性水核中，防止與外界有機(jī)溶劑接觸，減少變性作用。6．由于“水核”的尺度效應(yīng)，可以穩(wěn)定蛋白質(zhì)的立體結(jié)構(gòu)，增長(zhǎng)其結(jié)構(gòu)的剛性，提高其反映性能。何謂色譜的理論塔板數(shù)，如何計(jì)算？反映不同時(shí)刻溶質(zhì)在色譜柱中的分布以及分離度與柱高之間的關(guān)系理論塔板數(shù)的計(jì)算方法：N理論塔板數(shù)θR保存時(shí)間W1/2半峰寬Wb峰底寬度理論塔板高度：L柱長(zhǎng)簡(jiǎn)述疏水色譜的原理，并說(shuō)明基本操作環(huán)節(jié)；原理：高濃度鹽溶液