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文檔簡介
《食品微生物檢驗技術》課程作業(yè)要求班級食生111 學號53 姓名:樊繼國分 黃豆醬中微生物的檢驗一、國家標準中魚類罐頭需檢測的微生物種類及標準微生物種類菌落總數(shù)酵母霉菌金黃色葡萄球菌國家標準<100cfu/ml≤100cfu/ml≤30cfu/ml1、實驗原理菌落總數(shù)就是指在一定條件下(如需氧情況、營養(yǎng)條件、pH、培養(yǎng)溫度和時間等)每克(每毫升)檢樣所生長出來的細菌菌落總數(shù)。菌落是指細菌在固體培養(yǎng)基上生長繁殖而形成的能被肉眼識別的生長物,它是由數(shù)以萬計相同的細菌集合而成。當樣品被稀釋到一定程度,與培養(yǎng)基混合,在一定培養(yǎng)條件下,每個能夠生長繁殖的細菌細胞都可以在平板上形成一個可見的菌落。菌落總數(shù)測定是用來判定食品被細菌污染的程度及衛(wèi)生質量,它反映食品在生產(chǎn)過程中是否符合衛(wèi)生要求,以便對被檢樣品做出適當?shù)男l(wèi)生學評價。菌落總數(shù)的多少在一定程度上標志著食品衛(wèi)生質量的優(yōu)劣。本方法規(guī)定的培養(yǎng)條件下所得到的結果,僅包括在培養(yǎng)瓊脂上面生長的嗜中溫性的菌落總數(shù)。22.1冰箱:2℃~5℃。恒溫培養(yǎng)箱:28℃±1℃顯微鏡:10~1000.1g。無菌錐形瓶:容量500mL、250mL。無菌廣口瓶:500mL。無菌吸管:1mL0.01mL10mL0.1mL90mm:10mm75mm2.2培養(yǎng)基:平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基⑴組成成分1.0g葡萄糖2.5g5.0g15.0g瓊脂1000mL蒸餾水PH7.0±0.2⑵營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的配置20g1000mL③放到高壓鍋內以高溫、十五分鐘殺菌④殺菌后,取出培養(yǎng)基,自然冷卻到40℃左右備用⑶瓊脂培養(yǎng)基做法把組成成分里面的成分加入到蒸餾水中煮沸溶解,然后調節(jié)PH,裝到試管里面和三角瓶中,在高溫殺菌十五分鐘左右。2.32.3134.0g500.0mL蒸餾水PH7.234g500mLPH,1000mL冰箱。1.25mL,1000mL角瓶中高壓滅菌鍋中滅菌十五分鐘。2.48.5g1000mL3步驟(1)樣品處理25mL225mL1:10(2)具體操作方法1mL1:101mL9mL1:100451℃營養(yǎng)瓊脂將平皿底覆蓋,放1mL3537菌落計數(shù)的方法:在做平板計數(shù)的時候,可以用肉眼觀察,必要的時候用放大鏡觀察,以防止遺漏。在記下各個平板的菌落數(shù)后,求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。4、結果處理21210-131210-231210-331.實驗原理霉菌和酵母菌菌數(shù)的測定是指食品檢樣經(jīng)過處理,在1g1mL2.2.1菌吸管無菌錐形瓶無菌廣口瓶無菌平皿無菌試管2.2培養(yǎng)基和試劑馬鈴薯-葡萄糖-瓊脂培養(yǎng)基、孟加拉紅培養(yǎng)基3.檢樣程序及方法3.1檢樣↓25g(mL)樣品+225mL無菌水,均質↓10倍系列稀釋↓選擇2-3個適宜稀釋度的樣品勻液,各取1mL分別加入無菌培養(yǎng)皿內↓15-20mL28±1℃,5d↓3.225g225mL1:10225mL2min,1:103樣品勻液。25mL225mL1:101mL1:109mL1:1003.2..43.2.21011mL101mL21mL23.2.515mL~20mL46℃46℃±1℃皿使其混合均勻。3.3培養(yǎng)待瓊脂凝固后,將平板倒置,28℃±1℃培養(yǎng)5d,觀察并記錄。3.4菌落計數(shù)肉眼觀察,必要時可用放大鏡,記錄各稀釋倍數(shù)和相應的霉菌和酵母數(shù)。以菌落形成單位(CFU)表示。10CFU~150CFU酵母數(shù)。霉菌蔓延生長覆蓋整個平板的可記錄為多不可計。菌落數(shù)應采用兩個平板的平均數(shù)。4.123123123平均每mL菌液中霉菌。酵母菌測定結果酵母菌測定結果稀釋度平板酵母菌落數(shù)123平均123平均123平均每mL菌液中酵母菌。四、金黃色葡萄球菌的檢測1.實驗原理葡萄球菌在自然界分布極廣,空氣、土壤、水、飼料、食品以及人和動物的體表粘膜等處均有存在,大部分是不致病,也有一些病的球菌,金黃色葡萄球菌是葡萄球菌屬一個種。可引起皮膚組織炎癥還能產(chǎn)生腸毒素。如果在食品中大量生長繁殖,產(chǎn)生毒素,人誤食了含毒素的食品,就會發(fā)生食物中毒,故食品中存在金黃色葡萄球菌對人的康是一種潛在危險,檢查食品中金黃色葡萄球菌及數(shù)量具有實際意義。金黃色葡萄球菌能產(chǎn)生凝固酶,使血漿凝固,多數(shù)致病菌株能產(chǎn)生溶血毒素,使血瓊脂平板菌落周圍出現(xiàn)溶血環(huán),在試管中出現(xiàn)溶血反應。這些是鑒定致病性金黃色葡萄球菌的重要指標。2.實驗器材4恒溫培養(yǎng)箱:36℃±1℃。冰箱:2℃~5℃。恒溫水浴箱:37℃~65℃。天平:感量0.1g。均質器。振蕩器。無菌吸管:1mL(0.01mL)10mL(0.1mL)或微量移液器及吸頭。無菌錐形瓶:容量100mL、500mL。無菌培養(yǎng)皿:直徑90mmpH計或pHpH2.110%7.5%氯化鈉肉湯血瓊脂平板Baird-Prker3.檢樣程序及方法25g(mL)+225mL7.510%36±1℃↓18-24hBaird-Prker平板,血平板36±1℃↓18-24h涂片染色觀察溶皿BHI36±1℃↓18-24h3.125g25mL225mL固體樣品研磨或置均質器中制成混懸液。增菌及分離培養(yǎng)5mL7.5%氯化鈉肉湯或胰酪陳大豆肉湯50mL36±1℃24h,轉種血平板和平板,36±1℃24h,挑取金黃色葡萄球菌菌落進行革蘭氏染色鏡檢及血漿凝固酶試驗。鑒定0.5~1μm。1∶40.5mL2
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