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微生物習題厭氧菌第十八~二一章厭氧性細菌……其它細菌一名詞解釋OT試驗錫克試驗二選擇題A型題1破傷風梭菌的致病因素是:A溶血毒素B紅疹毒素C腸毒素D痙攣毒素E內毒素2為預防破傷風應注射:A破傷風減毒活菌苗B破傷風死菌苗C破傷風類毒素D破傷風外毒素E丙種球蛋白3下列毒素毒性最強的是:A破傷風毒素B肉毒毒素C腸毒素D紅疹毒素E內毒素4下列細菌不侵入血流的是:A金黃色葡萄球菌B腦膜炎奈瑟菌C傷寒桿菌D破傷風梭菌E鏈球菌5新生兒因斷臍時使用未徹底滅菌的接生用具,可發(fā)生:A肉毒中毒B破傷風C痢疾D壞死性腸炎E猩紅熱6有關結核分支桿菌生物學特性描述錯誤的是:A菌體細長略彎曲B培養(yǎng)24小時后觀察菌落C對干燥抵抗力強D對紫外線敏感E對酸堿有一定的耐受性7采用何種最佳方法檢測人體對結核桿菌具有免疫力:A直接涂片B分離培養(yǎng)C動物試驗D結核菌素試驗E暗視野顯微鏡檢查8OT試驗的原理是:AI型變態(tài)反應BII型變態(tài)反應CIII型變態(tài)反應DIV型變態(tài)反應E以上都不對9下列疾病通過吸血昆蟲作為媒介傳播的是:A白喉B炭疽C百日咳D鼠疫E傷寒10.波浪熱由下列哪種病原菌引起:A布魯桿菌B空腸彎曲菌C鼠疫桿菌D綠膿桿菌E大腸桿菌11下列哪種細菌不屬于動物源性細菌:A小腸結腸炎耶森菌B炭疽桿菌C鼠疫桿菌D綠膿桿菌E布氏菌屬12培養(yǎng)時需厭氧環(huán)境的細菌是:A綠膿桿菌B鼠疫桿菌C變形桿菌D傷寒沙門菌E脆弱類桿菌13無芽孢厭氧菌感染中,最常見的是:A脆弱類桿菌B產黑色素類桿菌C消化鏈球菌屬D乳酸桿菌屬E雙歧桿菌屬14破傷風的緊急預防應注射:A類毒素B抗生素C抗毒素D干擾素E丙種球蛋白15引起氣性壞疽的主要病原菌是:A炭疽桿菌B變形桿菌C產氣桿菌D鼠疫桿菌E產氣莢膜梭菌可引起食物中毒的病原菌是:A炭疽桿菌B破傷風梭菌C產黑色素桿菌D脆弱類桿菌E產氣莢膜梭菌18“洶涌發(fā)酵”現象是用于鑒定:A炭疽桿菌B破傷風梭菌C產黑色素桿菌D脆弱類桿菌E產氣莢膜梭菌19毒素的產生與前噬菌體有關的細菌是:A霍亂弧菌B破傷風梭菌C大腸桿菌D結核桿菌E白喉棒狀桿菌20結核分枝桿菌常用哪種培養(yǎng)基培養(yǎng)?A沙保培養(yǎng)基B羅氏培養(yǎng)基C庖肉培養(yǎng)基D巧克力色培養(yǎng)基E亞碲酸鉀培養(yǎng)基21與結核分枝桿菌抗酸性密切相關的成分是:A磷脂B蠟質DC分枝菌酸D索狀因子E硫酸腦苷脂22不產生內、外毒素的細菌有:A綠膿桿菌B炭疽桿菌C布氏桿菌D白喉棒狀桿菌E結核分枝桿菌23放線菌與結核分枝桿菌的區(qū)別是:A革蘭染色陽性B抗酸染色陰性C菌體細長有分枝D菌落為R型E對抗生素敏感24放線菌引起的化膿性感染其膿液特征是:A粘稠,呈金黃色B稀薄,呈血水樣C稀薄,呈藍綠色D稀薄,呈暗黑色E膿液中可見硫磺顆粒25衣氏放線菌引起的化膿性感染類型屬于:A急性感染B隱性感染C外源性感染D內源性感染E接觸感染26對炭疽桿菌致病性的敘述,下列錯誤的有:A莢膜的抗吞噬作用使該菌易于在體內生長B炭疽毒素由三種成分組成C其毒素易發(fā)生DIC和感染性休克D組成毒素的三種成分可以各自獨立發(fā)揮毒性作用E炭疽毒素主要損害微血管的內皮細胞27對嗜肺軍團菌致病性敘述下列錯誤的是:A通過呼吸道侵入機體B其胞內寄生性是重要的致并因素C通過莢膜抗吞噬致病D軍團病有肺炎型和流感傷寒型兩種類型E機體免疫力低下是發(fā)病的重要因素28下列哪種是條件致病菌?A傷寒沙門菌B綠膿桿菌C霍亂弧菌D破傷風梭菌E結核分枝桿菌29下列細菌中,引起嬰幼兒急性腸炎的常見細菌是:A霍亂弧菌B傷寒沙門菌C痢疾志賀菌D空腸彎曲菌E綠膿桿菌30與B型胃炎、胃和十二指腸潰瘍密切相關的是:A霍亂弧菌B幽門螺桿菌C痢疾志賀菌D空腸彎曲菌E綠膿桿菌X型題1綠膿桿菌的特點包括:A革蘭陰性,端鞭毛B專性厭氧C能產生水溶性色素D常引起繼發(fā)感染E對多種抗生素易形成耐藥性2結核分枝桿菌侵入機體的途徑有:A呼吸道B消化道C直接接觸D蟲媒傳播E破損的皮膚3結核菌素試驗陽性反應,可以表明:A接種卡介苗成功B已感染過結核分枝桿菌C對結核分枝桿菌發(fā)生II型超敏反應D細胞免疫功能狀態(tài)正常E對結核分枝桿菌有遲發(fā)型超敏反應4結核菌素試驗的用途有:A選擇卡介苗的接種對象B判斷卡介苗接種后的免疫效果C測定腫瘤患者的細胞免疫功能D作為嬰幼兒結核病的輔助診斷E流行病學的調查5關于白喉毒素,下述哪些正確?A溶原性白喉棒狀桿菌才能產生白喉毒素B由A、B片段組成C由FOX+基因編碼DA片段發(fā)揮毒性作用,抑制蛋白質的合成EB片段與細胞結合6下列屬于專性厭氧菌的是:A脆弱類桿菌B肉毒梭菌C破傷風梭菌D炭疽桿菌E產黑色素類桿菌7破傷風梭菌侵入哪些特征的傷口易造成破傷風:A傷口深而窄B混有泥土和異物C傷口壞死組織多D傷口淺而寬E合并有需氧菌和兼性厭氧菌感染8關于產氣莢膜梭菌的致病性,下述哪些是正確?A可引起嚴重的創(chuàng)傷感染B可以導致食物中毒C可以引起壞死性腸炎D致病因素為莢膜、毒素和酶E以組織氣腫、水腫、壞死為主要病理表現9下列細菌中,主要以外毒素致病的細菌有:A結核分枝桿菌B肉毒梭菌C破傷風梭菌D白喉棒狀桿菌E淋病奈氏菌10關于肉毒梭菌致病性,下述正確的有:A其產生的毒素為嗜神經毒素B可引起肉毒中毒C可引起敗血癥D可引起嬰幼兒肉毒病E其產生的毒素阻礙乙酰膽堿釋放,導致肌肉松弛性麻痹三簡答題1列表比較厭氧芽孢梭菌的致病性。2簡述結核分枝桿菌類脂成分在致病中的作用。簡述結核菌素試驗的原理、結果判斷及實際應用。1D2C3B4D5B6B7D8D9D10A11D12E13A14C15E17E18E19E20B21C22E23B24E25D26D27D28B29D30BX題1ACDE2ABE3ABDE4ABCDE5ABCDE6ABCE7ABCE8ABCDE9BCD10ABDE實驗一微生物培養(yǎng)基的配制和滅菌培養(yǎng)基是將微生物生長繁殖所需要的各種營養(yǎng)物質,用人工方法配制而成的各種營養(yǎng)基質。它具有微生物正常生活所需的各種養(yǎng)料和適宜的環(huán)境條件:(1)適當組分和比例的營養(yǎng)物質;(2)適宜的pH值;(3)合適的滲透壓;(4)保持無菌狀態(tài)。所以培養(yǎng)基是培養(yǎng)微生物所必需的最主要材料。培養(yǎng)基的配制是微生物工作者的主要技術操作之一。一、實驗目的與耍求:1.了解培養(yǎng)基的配制原理和方法,掌握其配制過程。2.了解幾種滅菌方法,掌握干熱滅菌法和加壓蒸汽滅菌法的原理及其使用方法。3.熟悉分離、培養(yǎng)微生物前的有關準備工作及操作方法。二、實驗原理與材料:(一)培養(yǎng)基的種類根據培養(yǎng)基的組成成分,可將培養(yǎng)基分為三類:合成培養(yǎng)基:由各種純化學物質按一定比例配制而成。半合成培養(yǎng)基:由一部分純化學物質和另一部分天然物質配制而成。天然培養(yǎng)基:利用天然來源的有機物配制而成的。從培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來分:液體培養(yǎng)基:不加凝固劑。固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加2%左右的凝固劑。半固體培養(yǎng)基:在液體培養(yǎng)基中加入0.2%一0.5%凝固劑。微生物最常用的凝固劑為瓊脂(其次為明膠),又叫洋菜、凍粉。它不是一種營養(yǎng)物質,只能被極少數種類的細菌分解利用。瓊脂是從海藻中(主要是石花菜)提取而制成的。是一種多糖類化合物,主要成分是復雜的多糖硫酸酯鈣鹽,瓊脂是一種可逆性膠體,在常規(guī)濃度下加熱到96℃以上即成溶膠狀態(tài),融化的瓊脂,當溫度下降到42℃表3-1瓊脂與明膠特性比較比較項目瓊脂明膠比較項目瓊脂明膠熔點(℃)凝固點(℃)酸堿度灰分(%)氧化鈣(%)氯化鎂(%)氮(%)9640微酸16.01.15O.77O.402520酸性14.0—15.00.00.018.3微生物可利用性耐熱性來源化學本質常用濃度(%)絕大多數微生物不能水解利用強植物多糖1.5—2部分微生物能水解利用弱動物蛋白質5一12(二)實驗材料1.藥品:牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂;馬鈴薯,蔗糖;可溶性淀粉、K2HPO4、KN03,MgS04·7H20、FeSO4·7H20、等。2.高壓蒸汽滅菌器、恒溫干熱滅菌箱、細菌過濾器、紫外線殺菌。3.其它:天平、牛角匙、電爐、1NHCl、1NNaOH、pH試紙、刻度搪瓷杯、量筒、漏斗、漏斗架、玻棒、帶玻璃珠的三角瓶、帶棉塞的無菌試管、無棉塞的空試管、培養(yǎng)皿、吸管、各種包裝紙、防水紙、繩索、棉花、標簽等。三、實驗方法與步驟:(一)、培養(yǎng)基的配置1.培養(yǎng)基的配制常用方法和步驟:(1)稱量:按照培養(yǎng)基配方,正確稱取各種原料放于搪瓷杯中。(2)溶化:在搪瓷杯中加入所需水量(根據實驗需要加入蒸餾水或自來水),用玻棒攪勻,加熱溶解。(3)調pH值(調pH也可以在加瓊脂后再調),用1NNaOH或1NHCl調pH,用pH試紙對照。(4)加瓊脂熔化,在瓊脂熔化過程中,需不斷攪拌,并控制火力不要使培養(yǎng)基溢出或燒焦,待完全熔化后,補足所失水分,一般數量少,時間短不必補水。(5)分裝:在漏斗架上分裝。根據不同的需要進行分裝,一般制斜面的裝量為管高的五分之一。特別注意不要使培養(yǎng)基粘污在管(瓶)口上以免浸濕棉塞,引起污染。(6)包扎成捆、掛上標簽。培養(yǎng)基分裝好后,塞上棉塞,用防水紙包扎成捆,掛上所配培養(yǎng)基名稱的標簽。(7)滅菌備用。滅菌后如需制成斜面的,應在下磅后取出,擺成斜面,(見圖3一1)。培養(yǎng)基經滅菌后,必須放在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24小時,如確無菌生長,方可使用。2.三種培養(yǎng)基的配方及配制(1).牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基(用于分離和培養(yǎng)細菌,是一種天然培養(yǎng)基)。配方:牛肉膏3克蛋白胨5克氯化鈉3克瓊脂20克自來水1000毫升pH7.2~7.4滅菌15磅/英寸2,30分鐘。本實驗將原配方配成各種濃縮液。各種濃度如下:30%牛肉膏、50%蛋白胨,30%氯化鈉。以配制200毫升培養(yǎng)基為例:吸取30%牛肉膏2毫升,50%蛋白胨2毫升,30%氯化鈉2毫升,加入有刻度的搪瓷燒杯中,然后用自來水補足到200毫升。用玻捧攪勻,在電爐上稍加熱,調pH至7.4,加瓊脂4克,加熱熔化,用玻棒不斷攪拌,至瓊脂完全溶解為止,趁熱在漏斗架上裝試管,(見圖3—2)。裝帶有棉塞的無菌試管,裝置五分之一的試管高度共12支,作斜面培養(yǎng)基。用鋁殼試管帽的各裝10毫升,約試管高度的二分之一以上,用作分離時倒平板用。分裝完畢,以12支為一捆,用防水紙包扎成捆,(圖3—3)掛上標簽,滅菌備用。(2).馬鈴薯(或豆芽汁)蔗糖(或葡萄糖)瓊脂培養(yǎng)基。(用于分離和培養(yǎng)真菌之用,是一種半合成培養(yǎng)基)。配方:去皮馬鈴薯(或鮮豆芽)200克蔗糖(或葡萄糖)20克自來水1000毫升瓊脂20克pH自然滅菌:(含蔗糖)15磅/英寸230分鐘。(含葡萄糖)10磅/英寸220分鐘。制備方法:配制200毫升培養(yǎng)基。取去皮馬鈴薯40克,切成小塊,放入無刻度的搪瓷杯中,加水200毫升,置電爐上加熱,煮沸十分鐘,用四層紗布過濾至具刻度的搪瓷杯中,濾液加水補足至200毫升,然后加蔗糖4克,加瓊脂4克,加熱熔化,并用玻棒不斷攪拌,直至瓊脂完全熔化,分裝試管,下面一系(3)淀粉瓊脂培養(yǎng)基(高氏一號Gause’S1),用于分離和培養(yǎng)放線菌之用,是一種合成培養(yǎng)基。配方:可溶性淀粉20.O克KN031K2HP04O.5克MgS04·7H20O.5克NaClO.5克FeS04·7H20,O.01克瓊脂20克自來水1000毫升滅菌:15磅/英寸2,30分鐘。制備方法:配制200毫升培養(yǎng)基吸取配方液:1%KN0320毫升;l%K2HP04lO毫升;l%MgSO4·7H2OlO毫升;l%NaCl10毫升;1%FeSO4·7H2OO.2毫升,加水補足至200毫升,置電爐上加熱。用另一只搪瓷杯稱取可溶性淀粉4克,從200毫升中取出少量加入淀粉中,用玻棒調成糊狀,待液體沸騰后,將淀粉糊洗入培養(yǎng)液中,攪勻,取下調pH至7.4,加瓊脂4克,加熱至瓊脂完全熔化為止,趁熱分裝試管,下面一系例步驟同于配制細菌培養(yǎng)基的操作方法。(4).無菌水的制備:無菌水,為下一次微生物分離實驗中所需用的材料。100毫升三角瓶(裝有玻璃珠),裝自來水45毫升,試管中裝9毫升自來水,塞上棉塞,包扎、滅菌備用。三角瓶和試管須預先塞好棉塞,并經干熱滅菌。(二)分離培養(yǎng)微生物常用器皿的準備1.清洗一些玻璃儀器:如三角瓶,試管,培養(yǎng)皿、吸管等。2.棉塞的制作:裝培養(yǎng)基和分離培養(yǎng)需用的部分玻璃器皿,需加棉花塞。棉塞的作用為過濾空氣,使試管內外空氣可以流通,但外界空氣中雜菌不能進入,避免污染。試管、三角瓶都要做棉塞。吸管上部也要塞入棉花,在管口約l~2毫米處,用解剖針塞入少許棉花,(約1—1.5厘米長),以防止細菌吸入口中,并避免將口中細菌吹入管內。棉花要塞得松緊適宜。吹時以能通氣但不使棉花滑下為準。教師示范做試管棉塞,同學每人做5支試管棉塞。棉塞要求不緊不松,兩頭光滑,試管棉塞的長度約3厘米左右。塞入試管內部分約占2/3,頭部稍大約占l/3左右,見圖3—4。12345.圖3-4棉塞的要求條件1.正確的式樣2.管內部太短,管外太松3.管外太小4.整個棉塞過松5.管內部太緊,管外太松3.包裝培養(yǎng)皿和吸管等。為了使培養(yǎng)皿、吸管,三角玻棒等洗凈,干熱滅菌后,不讓表面暴露,以保證無菌狀態(tài),為此干熱滅菌前先用舊報紙包裝妥當(見示范),每組同學包培養(yǎng)皿6只(一包)。吸管的包裝,將塞好棉花的吸管尖端,放在4~5厘米寬的長紙條的一端,約成45o角,折疊紙條,包住吸管尖部,用左手握住移液管身,右手將移液管壓緊,在桌面上向前搓轉,以螺旋式包扎起來。上端剩余紙條,折疊打結,準備滅菌。見圖3—5。(三)培養(yǎng)基和玻璃器材的滅菌方法滅菌的方法,通常可以分為四大類:(1)加熱滅菌:包括直接灼燒滅菌、干熱滅菌、加壓蒸汽滅菌、間歇滅菌和煮沸消毒;(2)過濾去菌;(3)射線滅菌和消毒;(4)化學藥劑滅菌和消毒。在本實驗中,以介紹與培養(yǎng)基和玻璃器材滅菌有關的部份滅菌方法。1.干熱滅菌法(即熱空氣滅菌法):干熱滅菌—般是利用電熱烘箱作為干熱滅菌器。前面所包裝好的玻璃器皿,如帶棉塞的三角瓶,試管、包裝好的吸管、培養(yǎng)皿等蛋白質含水量(%)凝固溫度(℃)5025186O5674—8080—90145160一170,放入電熱烘箱中。打開烘箱頂部的通氣孔,接上電源加熱,使箱內空氣的溫度達到160℃一170℃,關閉通氣孔,使箱內的溫度保持在160℃左右,并維持1.5—2小時。時間一到,切斷電源。待溫度下降至60一70℃以下,方可打開箱門取滅菌物品,否則驟冷后易使箱內玻璃儀器破損。2.加壓蒸汽滅菌法利用高壓滅菌器,使水的沸點在密閉的滅菌器內隨壓力升高而增高(見表3—2),來提高蒸汽的溫度和滅菌的效率。表3-2加壓蒸汽滅菌器壓力數與蒸汽溫度間的關系壓力表所示壓力全部水蒸汽(無空氣)50%空氣全部空氣磅/英寸2公斤/厘米25101520O.350.71.051.4l108115121126941051121187290100109在同一溫度下,濕熱的殺菌效率比干熱大,因為微生物細胞蛋白質在濕熱情況下,易于凝固,(見表6—2)。同時濕熱的穿透力強,當水蒸汽與被滅菌的物品相接觸后,便放出汽化潛熱,逐步提高被滅菌物品的溫度,直至與水蒸汽的溫度相等,達到平衡為止,從而提高滅菌效率。手提式高壓滅菌鍋滅菌的操作步驟如下:(1)在滅菌器內加入一定量的水(有的滅菌器內加水至止水線)。將用防水紙包扎好的滅菌物品如:培養(yǎng)基、無菌水等,放進滅菌器內。(2)接通電源,進行加熱。(3)當壓力到達5磅/英寸2時,打開放氣閥,使鍋內的空氣和水蒸汽一同排出,直至壓力表的壓力恢復到零,然后關閉排氣閥,繼續(xù)加熱。(4)當壓力表上的壓力到達15磅/英寸2(即1.05公斤/平方厘米)時,此時滅菌器內的溫度達到121℃,維持30分鐘不變。對熱不穩(wěn)定的培養(yǎng)基滅菌時,應適當降低壓力,延長時間。(5)滅菌時間一到,切斷電源,待壓力下降至零時,才能打開排氣孔,然后打開滅菌器蓋,取出物品。如果滅菌后的固體培養(yǎng)基要做成斜面,需趁熱放置。還需檢查培養(yǎng)基滅菌是否徹底。3.間歇滅菌法:常采用阿諾(Arnold)氏滅菌器和柯赫(Koch)氏滅菌器或蒸籠滅菌,常壓條件下,蒸汽溫度不超過100度。在沒有高壓滅菌器設備的情況下或不宜加壓滅菌的物品,可采用此法滅菌。做法是:待滅菌物品放在滅菌器或蒸籠里,每天蒸煮一次,每次煮沸一小時,連續(xù)三天重復進行。在每兩次蒸煮之間,將物品(指培養(yǎng)基)放在37℃恒溫條件下培養(yǎng)過夜,這樣可以使每次蒸煮后未殺死殘留的芽孢萌發(fā)成營養(yǎng)體,以使下一次蒸煮時殺滅。4.過濾除菌法:一些不能加熱滅菌的液體物質(如維生素、血清),可以用過濾除菌法,一般用細菌過濾器進行除菌。(教師示范)細菌過濾器中的過濾板常用陶瓷、硅藻土或石棉等做成,過濾板孔眼很小,細菌不能通去。因此,過濾后的液體就除去了細菌。在進行過濾除菌前,整個細菌過濾器和接受液體的器皿,必須包裝妥當進行加壓蒸汽滅菌后方可使用。5.紫外線滅菌:波長2600一2800A(A=1/10nm)之間的紫外線有很強的殺菌能力,一般紫外燈管能產生2537A的紫外光,殺死力強而穩(wěn)定,但穿透力弱,一般只適宜物體表面、空氣滅菌。例如接種室、培養(yǎng)室、手術室、藥廠包裝室等空氣滅菌。一般30瓦燈管,9立方米空間,距地面2米,每次打開紫外線照射半小時,就使室內空氣滅菌。若照射紫外線時,先噴灑石碳酸等化學消毒劑,可增強滅菌效果。在進行微生物接種和分離等操作時,常須用紫外線來殺滅接種室(箱)空氣、臺面等處的微生物。(參觀示范)紫外線雖有較強的殺菌力,但穿透力弱,即使一薄層玻璃或水層就能將大部分紫外線濾除,因此只適用于空氣及表面殺菌。表3—4常用化學抑茵劑和殺毒劑類別代表常用濃度作用方式用途及用法醇類乙醇70—75%抑制細菌使蛋白質凝固變性皮膚和器皿消毒對芽孢\孢子無效醛類甲醛37—40%2毫升/米3與蛋白質胺基結合使其變性接中寶、接中箱熏蒸,殺死空氣中微生物酚類石炭酸來蘇兒5%2—5%破壞細胞膜,蛋白質變性接中室空氣及器皿消毒空氣及皮膚消毒重金屬離子升汞O.1%細菌細胞酶失活而中毒死亡植物組織,如根瘤的消毒(有劇毒)氧化劑高錳酸鉀漂白粉0.1—3%1一5%蛋白質及酶氧化變性水果、皮膚、器皿消毒飲水及糞便消毒表面活性劑肥皂新潔爾滅水稀20倍破壞細胞膜的滲透壓皮膚、手及器血的消毒鹵素碘l%碘酒蛋白質、酶受破壞皮膚消毒染料結晶紫2—4%水溶液抑制細胞壁的合成作用皮膚創(chuàng)傷消毒酸類乳酸食醋80%乳酸l毫升/米33—5毫升/米3與細胞原生質結合熏蒸消毒空氣,可預防流感病毒堿類石灰水3—5%水溶液破環(huán)酶的活性地面消毒紫外線對眼粘膜及視神經有損傷作用,對皮膚有刺激作用,所以不能直接在紫外線燈開啟下工作。6.化學藥劑消毒滅菌:微生物實驗室中常用的化學殺菌劑有升汞、甲醛、高錳酸鉀、酒精、碘酒、龍膽紫、石炭酸、漂白粉、新潔爾滅、煤酚皂溶液,它們有的是殺菌劑,有的是抑菌劑。具體見表6—4。四、實驗注意事項使用高壓蒸汽鍋時應加充足水分,以免蒸干。鍋內的冷空氣要排盡,否則壓力雖達要求,而溫度未達到要求,滅菌不完全。每次使用干熱滅菌箱時,要滅菌的玻璃器皿,必須完全干燥,以免引起玻璃的破裂。調節(jié)溫度不能高于180℃,否則會使棉花、紙張烤焦。滅菌后,需等溫度下降到l60℃以下,才能打開箱門,否則易使玻璃因驟冷在使用過濾器前應檢查過濾器有無裂隙及漏氣,濾器用后應立即清洗。五、實驗記錄六、實驗數據處理七、思考題配制培養(yǎng)基為什么要調節(jié)pH值?培養(yǎng)基中加瓊脂的作用是什么?配固體培養(yǎng)基加瓊脂后加熱溶化時要注意那些問題?為什么牛肉汁蛋白胨培養(yǎng)基不加礦物鹽類?配制培養(yǎng)基要注意哪些問題?可否用橡皮塞、木塞來代替棉花塞?干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌和間歇滅菌應用的的場合有何不同?如何檢查培養(yǎng)基滅菌是否徹底?I.環(huán)境中的微生物因為微生物是肉眼看不見的,所以初學微生物學的學生常不知道外界環(huán)境和所有與外界接觸的身體各部位均有微生物的存在。實際上它們廣泛分布于室內外的空氣、水和土壤中,桌、椅和板凳的表面,衣服以及身體的皮膚、粘膜(例如鼻腔、口腔、喉頭等的粘膜)等處,因此,可以說微生物是無縫不鉆,無孔不入的。在學生第一次進入微生物學實驗室時,建立起“微生物無所不在”這一概念是特別重要的,因為這樣才能體會到無菌技術和環(huán)境衛(wèi)生的必要性,才能防止外界微生物對培養(yǎng)物的污染,才能防止病原性細菌或病毒通過手或衣服進入人體而引起傳染。從周圍環(huán)境和體表各部取樣生長出來的微生物,雖然大多數屬正常菌群,但當進入破損的皮膚或傳入口內或眼睛等處也會引起傳染,這一方面是因為通過培養(yǎng),微生物的量大;另一方面,有些微生物在一定的部位是非致病菌,但當條件改變時也可能致?。ǚQ為條件致病菌),因此必須詳細閱讀操作步驟和聽從指導者的說明,特別是用過的棉簽和工作完畢后的培養(yǎng)物等均要放在指定的容器內,接種環(huán)不僅在用前必須燒灼滅菌,而且用后也應立即燒灼。這是整個微生物學實驗課程和今后進行微生物學實驗時均需注意的。下面的實驗就是從實驗室空氣、實驗臺、門的旋扭(或把手)和人的頭發(fā)、皮膚、洗手前后的手指和鼻腔粘膜等處取樣,接種于瓊脂平板上,經培養(yǎng)1—2天后,觀察并比較不同來源的微生物生長的數量和類型。實驗二實驗室環(huán)境和人體表面微生物的檢查一、目的要求1.證明實驗室環(huán)境與體表存在微生物。2.比較來自不同場所與不同條件下細菌的數量和類型。3.體會無菌操作的重要性。二、基本原理平板培養(yǎng)基含有細菌生長所需要的營養(yǎng)成分,當取自不同來源的樣品接種于培養(yǎng)基上,在37℃溫度下培養(yǎng),1—2三、器材肉膏蛋白胨瓊脂平板,無菌水,滅菌棉簽(裝在試管內),接種環(huán),試管架,酒精燈或煤氣燈,記號筆(或蠟筆),廢物缸。四、操作步驟每組在“實驗室”和“人體”兩大部分中各選擇一個內容做實驗,或由教師指定分配,最后結果供全班討論。1.寫標簽任何一個實驗,在動手操作前均需首先將器皿用記號筆做上記號,培養(yǎng)皿的記號一般寫在皿底上。如果寫在皿蓋上,同時觀察兩個以上培養(yǎng)皿的結果,打開皿蓋時,容易混淆。用記號筆寫上班級、姓名、日期,本次實驗還要寫上樣品來源(如實驗室空氣或無菌室空氣或頭發(fā)等),字盡量小些,寫在皿底的一邊,不要寫在當中,以免影響觀察結果。2.實驗室細菌檢查(1)空氣將一個肉膏蛋白胨瓊脂平板放在當時做實驗的實驗室,移去皿蓋,使瓊脂培養(yǎng)基表面暴露在空氣中;將另一肉膏蛋白胨瓊脂平板放在無菌室或無人走動的其他實驗室,移去皿蓋。一小時后蓋上兩個皿蓋。(2)實驗臺和門的旋鈕(a)用記號筆在皿底外面中央畫一直線,再在此線中間處畫一垂直線,如圖。(b)取棉簽左手拿含有棉簽的試管,在火焰旁用右手的手掌邊緣和小指、無名指夾持棉塞(或試管帽),將其取出,將管口很快地通過煤氣燈(或酒精燈)的火焰,燒灼管口;輕輕地傾斜試管,用右手的拇指和食指將棉簽小心地取出。放回棉塞(或試管帽),并將空試管放在試管架上。(c)弄濕棉簽左手取滅菌水試管,如上法拔出棉塞(或試管帽)并燒灼管口,將棉簽插入水中,再提出水面,在管壁上擠壓一下以除去過多的水分,小心將棉簽取出,燒灼管口,放回棉塞(或試管帽),并將滅菌水試管放在試管架上。(d)取樣將濕棉簽在實驗臺面或門旋鈕上擦拭約2平方厘米的范圍。(e)接種在火焰旁用左手拇指和食指或中指使平皿開啟成一縫。再將棉簽伸入,在瓊脂表面頂端接種(滾動一下),立即閉合皿蓋。將原放棉簽的空試管拔出棉塞(或試管帽),燒灼管口,插入用過的棉簽,將試管放回試管架。(f)劃線另取接種環(huán)在火焰上滅菌,先將環(huán)端燒熱,然后將接種環(huán)提起垂直放在火焰上,以使火焰接觸金屬絲的范圍廣一些,待接種環(huán)燒紅,再將接種環(huán)斜放,沿環(huán)向上,燒至可能碰到培養(yǎng)皿的部分,再移向環(huán)端,如此很快地來回通過火焰數次。左手拿起平板,同樣開啟一縫,將滅過菌并冷卻了的接種環(huán)(可在瓊脂表面邊緣空白處試溫度,若發(fā)出濺潑聲,表示太燙),通過瓊脂頂端的接種區(qū),向下劃線,直到平板的一半處。注意:接種環(huán)與瓊脂表面的角度要小,移動的壓力不能太大,否則會刺破瓊脂。閉合皿蓋,左手將平板向左轉動至空白處,右手拿的接種環(huán)再在火焰上燒灼,使冷。接種環(huán)通過前面劃的線條再在瓊脂的另一半,從上向下來回劃線至1/2處。燒灼接種環(huán),轉動平板,劃最后1/4,立刻蓋上皿蓋,燒灼接種環(huán),放回原處。整個劃線操作均要求無菌操作,即靠近火焰,而且動作要快。3.人體細菌的檢查(1)手指(洗手前與洗手后)(a)分別在兩個瓊脂平板上標明洗手前與洗手后(當然,班級、姓名、日期各項在每次寫標簽時是必不可少的)。(b)移去皿蓋,將未洗過的手指在瓊脂平板的表面,輕輕地來回劃線,蓋上皿蓋。(c)用肥皂和刷子,用力刷手,在流水中沖洗干凈,干燥后,在另一瓊脂平板表面來回移動,蓋上皿蓋。(2)頭發(fā)在揭開皿蓋的瓊脂平板的上方,用手將頭發(fā)用力搖動數次,使細菌降落到瓊脂平板表面,然后蓋上皿蓋。(3)咳嗽將去蓋瓊脂平板放在離口約6—8cm處,對著瓊脂表面用力咳嗽,然后蓋上皿蓋。(4)鼻腔(a)按照實驗臺檢查法的步驟(b)和(c),取出棉簽,并將其弄濕。(b)用濕棉簽在鼻腔內滾動數次。(c)按實驗臺檢查法的步驟(e)和(f),接種與劃線,然后蓋上皿蓋。4.將所有的瓊脂平板翻轉,使皿底在上,放37℃培養(yǎng)箱,培養(yǎng)1—25.結果記錄方法(1)菌落計數在劃線的平板上,如果菌落很多而重疊,則數平板最后1/4面積內的菌落數。不是劃線的平板,也一分為四,數1/4面積的菌落數。(2)根據菌落大小、形狀、高度、干濕等特征觀察不同的菌落類型。但要注意,如果細菌數量太多,會使很多菌落生長在一起,或者限制了菌落生長而變得很小,因而外觀不典型,故觀察菌落的特點時,要選擇分離得很開的單個菌落。菌落特征描寫方法如下:(a)大小大、中、小、針尖狀??上葘⒄麄€平板上的菌落粗略觀察一下,再決定大、中、小的標準,或由教師指出一個大小范圍。(b)顏色黃色、金黃色、灰色、乳白色、紅色、粉紅色等。(c)干濕情況干燥、濕潤、粘稠。(d)形態(tài)圓形、不規(guī)則等。(e)高度扁平、隆起、凹下。(f)透明程度透明、半透明、不透明。(g)邊緣整齊、不整齊。五、實驗報告1.結果(1)將你自己的平板結果記錄于下表中。(2)與其他同學所做的結果進行比較。2.思考題(1)比較各種來源的樣品,哪一種樣品的平板菌落數與菌落類型最多?(2)人多的實驗室與無菌室(或無人走動的實驗室)相比,平板上的菌落數與菌落類型有什么區(qū)別?你能解釋一下造成這種區(qū)別的原因嗎?(3)洗手前后的手指平板,菌落數有無區(qū)別?(4)通過本次實驗,在防止培養(yǎng)物的污染與防止細菌的擴散方面,你學到些什么?有什么體會?實驗三顯微鏡油鏡的使用和細菌形態(tài)的觀察微生物的個體微小,肉眼難以見到,要研究它們,必須要用顯微鏡來觀察。因此,顯微鏡是研究微生物的重要工具。顯微鏡是一種精密的光學儀器,使用時必須了解其基本原理和構造,才能充分發(fā)揮其性能。一、實驗目的和要求:1.學習并掌握顯微鏡油鏡的使用技術及維護的基本知識。2.使用油鏡觀察細菌的幾種基本形態(tài)。3.用懸滴法在高倍鏡或油鏡下觀察細菌的運動。二、實驗裝置與材料:(一)光學顯徽鏡1.顯微鏡的構造普通光學顯微鏡可分為兩大部份:光學部分和機械部分。光學部分通常是由接目鏡、接物鏡和照明裝置(聚光鏡、虹彩光圈、反光鏡等)組成的。它使檢視物放大,造成物象,是顯微鏡的重要組成部份。機械部分由鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡轉換器、載物臺、載物臺移器、粗調節(jié)器、細調節(jié)器等部件組成,它起著支持、調節(jié)、固定等作用。2.顯微鏡的放大倍數和分辨率(1)顯微鏡的放大倍數顯微鏡放大物體,首先經過物鏡第一次放大造像,再經過目鏡在明視距離內第二次放造像。因此,顯微鏡的放大倍數等于接物鏡放大倍數和接目鏡放大倍數的乘積。即:顯微鏡放大倍數=接物鏡放大倍數×接目鏡放大倍數。(2)顯微鏡的分辨率顯微鏡的分辨率是表示顯微鏡辨析物體(兩端)兩點之間距離的能力,能夠辨析物體兩點問的距離愈小,則分辨率愈高,分辨率的高低,首先取決于物鏡的鏡口率所使用光線的波長,見圖(1—2)顯微鏡的分辨率可以用以下公式表示:式中D:為物鏡分辨出物體兩點間的最短距離。λ:為可見光的波長(平均O.55微米)。n:為物鏡和被檢標本間介質的折射率。α:為鏡口角(即入射角)。λ愈大,D值愈大,分辨率愈低,n和α愈大,D值愈小,分辨率愈高,因此,可以通過降低光線波長,增大介質折射率和加大鏡口角(入射角)來提高分辨率。3.油鏡使用的原理:對于個體微小,用高倍鏡仍觀察不清的微生物,則必須使用油鏡。使用時,需要在標本和物鏡間加入一種鏡頭油。如香柏油,所以叫油浸接物鏡,簡稱油鏡。一般在鏡頭上有一黑圈或紅圈的,表示為油鏡物鏡,也有的以“OI”或”HI”字樣來表示。由于油鏡鏡面很小,使用時檢視物與鏡面又非??拷?O.14一O.19毫米左右),因而使進入鏡頭的光線較少。當光線由反光鏡通過玻片與鏡頭間的空氣時,由于玻片與物鏡之間的介質為空氣(接物鏡干燥系),空氣折射率為l,由于空氣與玻片的密度不同,使光線受到曲折,發(fā)生散射現象,結果進入物鏡的光線必然減少,這樣就降低了視野的照明度。若載玻片與物鏡之間的介質不是空氣,而是一層油質,一般常用香柏油,其折射率為1.515,與玻璃的折射率(1.52)相近。光線通過載玻片后可直接通過香柏油進入物鏡而幾乎不發(fā)生折射(接物鏡油浸系),使視野增加照明度,這樣就能使物像更加清晰;(二)、實驗材料1.顯微鏡,(顯微鏡燈)、香柏油、二甲苯、擦鏡紙、吸水紙等。2.細菌的染色標本。3.培養(yǎng)12~18小時的枯草桿菌(B.Subtilis)4.蓋玻片、凹玻片、接種環(huán)、酒精燈。三、實驗方法與步驟(一)顯微鏡的使用方法與步驟1.用前檢查:從顯微鏡箱中取出顯微鏡時,用右手拿鏡臂,左手托鏡座,直立移動,輕放在平穩(wěn)的桌面上,檢查各部零件是否齊全,鏡頭是否清潔,否則報告老師。2.調節(jié)光照:正確的照明是獲得良好檢查效果的前提。用粗調節(jié)器提升鏡筒,將低倍物鏡旋到鏡筒下方,使鏡頭和載物臺距離約為5毫米左右,左眼看目鏡調節(jié)反光鏡鏡面角度(在天然的光線下觀察,一般用平面反光鏡;若以燈光為光源,則一般多用凹面反光鏡)。調節(jié)光線強弱,然后調節(jié)聚光鏡的位置(酌予升降),直至視野內得到最均勻最適宜的光亮為止。3.低倍鏡觀察:低倍物鏡視野面廣,焦點深度較深,易于發(fā)現目標確定觀察位置,故應先用低倍鏡觀察為宜。將載片標本(涂面朝上)置于載物臺的標本夾上,并將標本部位處于物鏡的正下方,轉動粗調節(jié)器,使鏡頭下降至鏡面距離檢視物大約10毫米處。然后以左眼看目鏡,另一眼睜開,一邊觀察視野,一邊扭動粗調節(jié)器使鏡頭緩慢地升高,至視野內出現物像后,改用細調節(jié)器,上下微微轉動,仔細調節(jié)焦距和照明,直至視野內獲得清晰的物像,選擇適宜部位,移到視野中心,待換中、高倍鏡觀察。4.依次再進行中倍、高倍觀察。在物鏡依次由低倍至中倍、高倍的觀察過程中,應逐次上升聚光鏡以調節(jié)光線亮度,同樣選擇適宜的部位移至視野中央。5.油鏡觀察:將聚光鏡提升至最高點,轉動轉換器,移開高倍鏡,使高倍鏡和油鏡成“八”字形,在標本中央滴一小滴香柏油,使油鏡鏡頭浸入香柏油中,微微轉動細調節(jié)器,可見清晰物像,如果油鏡上升已離開由面還未看清物像的話,需重新調節(jié)。此時可從側面注視,用粗調節(jié)器將鏡筒小心地降下,使油鏡浸在香柏油中,其鏡頭幾乎與標本相接。應特別注意不能壓在標本上,更不能用力過猛,否則不僅壓碎玻片,也會損壞鏡頭。用右手向上轉動粗調節(jié)器,當視野中有模糊的標本物像時,改用細調節(jié)器,直到看清物象為止。6.換片:另換新的標本片,必須從第三條開始操作。7.用后復原:觀察完畢,上旋鏡筒,先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油,然后再用擦鏡紙沾取少許二甲苯(香柏油溶于二甲苯)擦去鏡頭上的殘留油跡,最后再用擦鏡紙擦去殘留的二甲苯。機械部件用細軟布擦去灰塵和冷凝水,下降鏡筒,將接物鏡轉成八字形置于載物臺上。下降聚光鏡,(切勿使接物鏡與聚光鏡相碰受損),反光鏡垂直于鏡座。放進顯微鏡箱中鎖好,并放入指定的顯微鏡柜中。四、實驗注意事項顯微鏡顯微鏡保養(yǎng)和使用中的注意事項:(1)不準擅自拆卸顯微鏡的任何部件,以免損壞。(2)鏡面只能用擦鏡紙擦,不能用手指或粗布擦,以保證鏡面的光潔度。(3)觀察標本時,必須依次用低倍鏡、中倍鏡、高倍鏡,最后用油鏡。當目視接目鏡時,特別在使用油鏡時,切不可用粗調節(jié)器向下旋,以免物鏡碰到玻片損傷鏡面或壓碎玻片。(4)觀察時,兩眼睜開,養(yǎng)成兩眼能夠輪換觀察的習慣,。以免眼睛疲勞,并且能夠在左眼觀察時,右眼注視繪圖。(5)拿顯微鏡時,一定要右手拿鏡臂,左手托鏡座,不可單手拿,更不可傾斜拿動。(6)顯微鏡應存放在陰涼干燥處,以免鏡片生霉菌而腐蝕鏡片。(7)在轉動粗細調節(jié)器調節(jié)焦距時,要從側面觀察,切勿使物鏡鏡頭與玻片相碰,以免損壞鏡頭。(8)在觀察細菌、放線菌的形態(tài)時,由于采用油鏡頭透鏡口徑較小,所以光線要調到最強,便于觀察。五、實驗記錄六、實驗數據處理七、思考題如何區(qū)別顯微鏡的低倍鏡、高倍鏡和油鏡?使用油鏡時,為何必須鏡頭油?鏡檢標本時,為什么先用低倍鏡觀察,而不是直接用高倍鏡或油鏡觀察?實驗四顯微鏡直接計數法一、目的要求1.明確顯微鏡計數的原理。2.學習使用血球計數板進行微生物計數的方法。二、基本原理利用血球計數板在顯微鏡下直接計數,是一種常用的微生物計數方法。此法的優(yōu)點是直觀、快速。將經過適當稀釋的菌懸液(或孢子懸液)放在血球計數板載玻片與蓋玻片之間的計數室中,在顯微鏡下進行計數。由于計數室的容積是一定的(0.1mm2),所以可以根據在顯微鏡下觀察到的微生物數目來換算成單位體積內的微生物總數目。由于此法計得的是活菌體和死菌體的總和,故又稱為總菌計數法。血球計數板,通常是一塊特制的載玻片,其上由四條槽構成三個平臺。中間的平臺又被一短橫槽隔成兩半,每一邊的平臺上各刻有一個方格網,每個方格網共分九個大方格,中間的大方格即為計數室,微生物的計數就在計數室中進行。。計數室的刻度一般有兩種規(guī)格,一種是一個大方格分成16個中方格,而每個中方格又分成25個小方格;另一種是一個大方格分成25個中方格,而每個中方格又分成16個小方格(圖Ⅷ-1,C)。但無論是哪種規(guī)格的計數板,每一個大方格中的小方格數都是相同的,即16×25=400小方格,如圖Ⅷ-2。每一個大方格邊長為1mm,則每一大方格的面積為1mm2,蓋上蓋玻片后,載玻片與蓋玻片之間的高度為0.1mm,所以計數室的容積為0.1mm3。在計數時,通常數五個中方格的總菌數,然后求得每個中方格的平均值,再乘上16或25,就得出一個大方格中的總菌數,然后再換算成1ml菌液中的總菌數。下面以一個大方格有25個中方格的計數板為例進行計算:設五個中方格中總菌數為A,菌液稀釋倍數為B,那么,一個大方格中的總菌數因1ml=1cm3=1000mm3,=50000A·B(個)同理,如果是16個中方格的計數板,設五個中方格的總菌數為A',則三、器材釀酒酵母菌懸液,血球計數板,顯微鏡,蓋玻片,無菌毛細管。四、操作步驟1.稀釋將釀酒酵母菌懸液進行適當稀釋,菌液如不濃,可不必稀釋。2.鏡檢計數室在加樣前,先對計數板的計數室進行鏡檢。若有污物,則需清洗后才能進行計數。3.加樣品將清潔干燥的血球計數板蓋上蓋玻片,再用無菌的細口滴管將稀釋的釀酒酵母菌液由蓋玻片邊緣滴一小滴(不宜過多),讓菌液沿縫隙靠毛細滲透作用自行進入計數室,一般計數室均能充滿菌液。注意不可有氣泡產生。4.顯微鏡計數靜止5分鐘后,將血球計數板置于顯微鏡載物臺上,先用低倍鏡找到計數室所在位置,然后換成高倍鏡進行計數。在計數前若發(fā)現菌液太濃或太稀,需重新調節(jié)稀釋度后再計數。一般樣品稀釋度要求每小格內約有5—10個菌體為宜。每個計數室選5個中格(可選4個角和中央的中格)中的菌體進行計數。位于格線上的菌體一般只數上方和右邊線上的。如遇酵母出芽,芽體大小達到母細胞的一半時,即作兩個菌體計數。計數一個樣品要從兩個計數室中計得的值來計算樣品的含菌量。5.清洗血球計數板使用完畢后,將血球計數板在水籠頭上用水柱沖洗,切勿用硬物洗刷,洗完后自行晾干或用吹風機吹干。鏡檢,觀察每小格內是否有殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈,則必須重復洗滌至干凈為止。五、實驗報告1.結果將結果記錄于下表中。A表示五個中方格中的總菌數;B表示菌液稀釋倍數。2.思考題根據你實驗的體會,說明用血球計數板計數的誤差主要來自哪些方面?應如何盡量減少誤差,力求準確?

高考語文試卷一、語言文字運用(15分)1.在下面一段話的空缺處依次填入詞語,最恰當的一組是(3分)提到桃花源,許多人會聯想到瓦爾登湖。真實的瓦爾登湖,早已成為▲的觀光勝地,梭羅的小木屋前也經常聚集著▲的游客,不復有隱居之地的氣息。然而虛構的桃花源一直就在我們的心中,哪怕▲在人潮洶涌的現代城市,也可以獲得心靈的寧靜。A.名聞遐邇聞風而至雜居 B.名噪一時聞風而至棲居C.名噪一時紛至沓來雜居 D.名聞遐邇紛至沓來棲居2.在下面一段文字橫線處填入語句,銜接最恰當的一項是(3分)在南方,芭蕉栽植容易,幾乎四季常青?!劣谠掠辰队?、雪壓殘葉,那更是詩人畫家所向往的了。①它覆蓋面積大,吸收熱量大,葉子濕度大。②古人在走廊或書房邊種上芭蕉,稱為蕉廊、蕉房,饒有詩意。③因此蕉陰之下,是最舒適的小坐閑談之處。④在旁邊配上幾竿竹,點上一塊石,真像一幅元人的小景。⑤在夏日是清涼世界,在秋天是分綠上窗。⑥小雨乍到,點滴醒人;斜陽初過,青翠照眼。A.①③②④⑥⑤ B.①④②③⑥⑤C.②①④③⑤⑥ D.②③④①⑤⑥3.下列詩句與“憫農館”里展示的勞動場景,對應全部正確的一項是(3分)①笑歌聲里輕雷動,一夜連枷響到明②種密移疏綠毯平,行間清淺縠紋生③分疇翠浪走云陣,刺水綠針抽稻芽④陰陰阡陌桑麻暗,軋軋房櫳機杼鳴A.①織布②插秧③車水④打稻 B.①織布②車水③插秧④打稻C.①打稻②插秧③車水④織布D.①打稻②車水③插秧④織布4.閱讀下圖,對VR(即“虛擬現實”)技術的解說不正確的是一項是(3分)A.VR技術能提供三個維度的體驗:知覺體驗、行為體驗和精神體驗。 B.現有的VR技術在精神體驗上發(fā)展較快,而在知覺體驗上發(fā)展較慢。C.VR技術的未來方向是知覺體驗、行為體驗和精神體驗的均衡發(fā)展。D.期許的VR體驗將極大提高行為體驗的自由度和精神體驗的滿意度。二、文言文閱讀(20分)閱讀下面的文言文,完成5—8題。臨川湯先生傳鄒迪光先生名顯祖,字義仍,別號若士。豫章之臨川人。生而穎異不群。體玉立,眉目朗秀。見者嘖嘖曰:“湯氏寧馨兒?!蔽鍤q能屬對。試之即應,又試之又應,立課數對無難色。十三歲,就督學公試,補邑弟子員。每試必雄其曹偶。庚午舉于鄉(xiāng),年猶弱冠耳。見者益復嘖嘖曰:“此兒汗血,可致千里,非僅僅蹀躞康莊也者?!倍〕髸?,江陵公①屬其私人啖以巍甲而不應。曰:“吾不敢從處女子失身也?!惫m一老孝廉乎,而名益鵲起,海內之人益以得望見湯先生為幸。至癸未舉進士,而江陵物故矣。諸所為附薰炙者,骎且澌沒矣。公乃自嘆曰:“假令予以依附起,不以依附敗乎?”而時相蒲州、蘇州兩公,其子皆中進士,皆公同門友也。意欲要之入幕,酬以館選,而公率不應,亦如其所以拒江陵時者。以樂留都山川,乞得南太常博士。至則閉門距躍,絕不懷半刺津上。擲書萬卷,作蠹魚其中。每至丙夜,聲瑯瑯不輟。家人笑之:“老博士何以書為?”曰:“吾讀吾書,不問博士與不博士也?!睂ひ圆┦哭D南祠部郎。部雖無所事事,而公奉職毖慎,謂兩政府進私人而塞言者路,抗疏論之,謫粵之徐聞尉。居久之,轉遂昌令。又以礦稅事多所蹠戾②,計偕之日,便向吏部堂告歸。雖主爵留之,典選留之,御史大夫留之,而公浩然長往,神武之冠竟不可挽矣。居家,中丞惠文,郡國守令以下,干旄往往充斥巷左,而多不延接。即有時事,非公憤不及齒頰。人勸之請托,曰:“吾不能以面皮口舌博錢刀,為所不知后人計?!敝复采蠒局骸坝写瞬回氁??!惫跁鵁o所不讀,而尤攻《文選》一書,到掩卷而誦,不訛只字。于詩若文無所不比擬,而尤精西京六朝青蓮少陵氏。公又以其緒余為傳奇,若《紫簫》、《還魂》諸劇,實駕元人而上。每譜一曲,令小史當歌,而自為之和,聲振寥廓。識者謂神仙中人云。公與予約游具區(qū)靈巖虎丘諸山川,而不能辦三月糧,逡巡中輟。然不自言貧,人亦不盡知公貧。公非自信其心者耶?予雖為之執(zhí)鞭,所忻慕焉。(選自《湯顯祖詩文集》附錄,有刪節(jié))[注]①江陵公:指時相張居正,其為江陵人。②蹠戾:乖舛,謬誤。5.對下列加點詞的解釋,不正確的一項是(3分)A.每試必雄其曹偶 雄:稱雄B.酬以館選 酬:應酬C.以樂留都山川 樂:喜愛D.為所不知后人計 計:考慮6.下列對原文有關內容的概括和分析,不正確的一項是(3分)A.湯顯祖持身端潔,拒絕了時相張居正的利誘,海內士人都以結識他為榮幸。B.因為上書批評當權者徇私情、塞言路,湯顯祖被貶官至廣東,做了徐聞尉。C.湯顯祖辭官回家后,當地官員爭相與他交往,而湯顯祖不為私事開口求人。D.湯顯祖與鄒迪光相約三月份到江南一帶游玩,但沒準備好糧食,因而作罷。7.把文中畫線的句子翻譯成現代漢語。(10分)(1)見者益復嘖嘖曰:“此兒汗血,可致千里,非僅僅蹀躞康莊也者。”(2)然不自言貧,人亦不盡知公貧。公非自信其心者耶?予雖為之執(zhí)鞭,所忻慕焉。8.請簡要概括湯顯祖讀書為文的特點。(4分)三、古詩詞鑒賞(11分)閱讀下面這首唐詩,完成9—10題。學諸進士作精衛(wèi)銜石填海韓愈鳥有償冤者,終年抱寸誠??阢暽绞殻耐2ㄆ?。渺渺功難見,區(qū)區(qū)命已輕。人皆譏造次,我獨賞專精。豈計休無日,惟應盡此生。何慚刺客傳,不著報讎名。9.本讀前六句是怎樣運用對比手法勾勒精衛(wèi)形象的?請簡要分析。(6分)10.詩歌后六句表達了作者什么樣的人生態(tài)度?(5分)四、名句名篇默寫(8分)11.補寫出下列名句名篇中的空缺部分。(1)名余曰正則兮,__________________。(屈原《離騷》)(2)__________________,善假于物也。(荀子《勸學》)(3)艱難苦恨繁霜鬢,__________________。(杜甫《登高》)(4)樹林陰翳,__________________,游人去而禽鳥樂也。(歐陽修《醉翁亭記》)(5)__________________,抱明月而長終。(蘇軾《赤壁賦》)(6)浩蕩離愁白日斜,__________________。(龔自珍《己亥雜詩》)(7)道之以德,__________________,有恥且格。(《論語·為政》)(8)蓋文章,經國之大業(yè),__________________。(曹丕《典論·論文》)五、現代文閱讀(一)(15分)閱讀下面的作品,完成12~14題。表妹林斤瀾矮凳橋街背后是溪灘,那灘上鋪滿了大的碎石,開闊到叫人覺著是不毛之地。幸好有一條溪,時寬時窄,自由自在穿過石頭灘,帶來水草野樹,帶來生命的歡喜。灘上走過來兩個女人,一前一后,前邊的挎著個竹籃子,簡直有搖籃般大,里面是衣服,很有點分量,一路拱著腰身,支撐著籃底。后邊的女人空著兩手,幾次伸手前來幫忙,前邊的不讓。前邊的女人看來四十往里,后邊的四十以外。前邊的女人不走現成的小路,從石頭灘上斜插過去,走到一個石頭圈起來的水潭邊,把竹籃里的東西一下子控在水里,全身輕松了,透出來一口長氣,望著后邊的。后邊的走不慣石頭灘,盯著腳下,挑著下腳的地方。前邊的說:“這里比屋里清靜,出來走走,說說話……再呢,我要把這些東西洗出來,也就不客氣了?!闭f著就蹲下來,抓過一團按在早鋪平好了的石板上,拿起棒槌捶打起來,真是擦把汗的工夫也節(jié)約了??雌饋砗筮叺氖强腿?,轉著身于看這個新鮮的地方,有一句沒一句地應著:“水倒是清的,碧清的……樹也陰涼……石頭要是走慣了,也好走……”“不好走,一到下雨天你走走看,只怕擔斷了腳筋。哪有你們城里的馬路好走。”“下雨天也洗衣服?”“一下天呢,二十天呢。就是三十天不洗也不行。嗐,現在一天是一天的事情,真是日日清,月月結?!笨腿穗S即稱贊:“你真能干,三表妹,沒想到你有這么大本事,天天洗這么多。”主人微微笑著,手里捶捶打打,嘴里喜喜歡歡的:事情多著呢。只有晚上吃頓熱的,別的兩頓都是馬馬虎虎。本來還要帶子,現在托給人家。不過洗完衣服,還要踏縫紉機?!笨腿似鋵嵤莻€做活的能手,又做飯又帶孩子又洗衣服這樣的日子都過過。現在做客人看著人家做活,兩只手就不知道放在哪里好。把左手搭在樹杈上,右手背在背后,都要用點力才在那里閑得住。不覺感慨起來:“也難為你,也虧得是你,想想你在家里的時候,比我還自在呢?!敝魅朔畔掳糸?,兩手一刻不停地揉搓起來:“做做也就習慣了。不過,真的,做慣了空起兩只手來,反倒沒有地方好放。鄉(xiāng)下地方,又沒有什么好玩的,不比城里?!笨腿诵睦镉行┟?,就學點見過世面的派頭,給人家看,也壓壓自己的煩惱:“說的是,”右手更加用力貼在后腰上,“空著兩只手不也沒地方放嘛。城里好玩是好玩,誰還成天地玩呢。城里住長久了,一下鄉(xiāng),空氣真就好,這個新鮮空氣,千金難買?!眴慰淇諝?,好比一個姑娘沒有什么好夸的,單夸她的頭發(fā)。主人插嘴問道:“你那里工資好好吧?”提起工資,客人是有優(yōu)越感的,卻偏偏埋怨道:“餓不死吃不飽就是了,連獎金帶零碎也有七八十塊?!薄澳鞘亲龆嘧錾僬諛幽醚?!”“還吃著大鍋飯。”“不做不做也拿六七十吧?”“鐵飯碗!”客人差不多叫出來,她得意。主人不住手地揉搓,也微微笑著??腿说勾蚱稹氨Р黄健眮恚骸澳愫闷?,要是我,氣也氣死了,做多做少什么也不拿?!薄按蟊斫悖覀円哺愠邪?。我們家庭婦女洗衣店,給旅店洗床單,給工廠洗工作服都洗不過來?!薄澳且粋€月能拿多少呢?”客人問得急點。主人不忙正面回答,笑道:“還要苦干個把月,洗衣機買是買來了,還沒有安裝。等安裝好了,有時間多踏點縫紉機,還可以翻一番呢!”“翻一番是多少?”客人急得不知道轉彎。主人停止揉搓,去抓棒槌,這功夫,伸了伸兩個手指頭??腿说哪X筋飛快轉動:這兩個手指頭當然不會是二十,那么是二百……聽著都嚇得心跳,那頂哪一級干部了?廠長?……回過頭來說道:“還是你們不封頂好,多勞多得嘛?!薄安贿^也不保底呀,不要打算懶懶散散混日子。”客人兩步撲過來,蹲下來抓過一堆衣服,主人不讓,客人已經揉搓起來了,一邊說:“懶懶散散,兩只手一懶,骨頭都要散……鄉(xiāng)下地方比城里好,空氣第一新鮮,水也碧清……三表妹,等你大侄女中學一畢業(yè),叫她頂替我上班,我就退下來……我到鄉(xiāng)下來享幾年福,你看怎么樣?”(選自《十月》1984年第6期,有刪改)12.下列對小說相關內容和藝術特色的賞析,不正確的一項是?A.小說開頭的景物描寫,以自由流動的溪水所帶來的“水草野樹”以級“生命的歡喜”,暗示著農村的新氣象。B.小說中“一路拱著腰身”等動作描寫,以及“真是日日清,月月結”等語言描寫,為下文表妹承包洗衣服這件事做了鋪墊。C.表姐兩次提到鄉(xiāng)下空氣“新鮮”,第一次是出于客套,第二次提到時,表姐對農村的好已有了更多體會。D.表妹說的“不要打算懶懶散散混日子”,既表達了自己對生活的態(tài)度,也流露出對自己得不到休息的些許不滿。13.請簡要分析表姐這一人物形象。(6分)14.小說刻畫了兩個人物,作者以“表妹”為題,表達了哪些思想感情?(6分)六、現代文閱讀(二)(12分)閱讀下面的作品,完成15~17題。書家和善書者沈尹默“古之善書者,往往不知筆法?!鼻叭耸沁@樣說過。就寫字的初期來說,這句話,是可以理解的,正同音韻一樣,四聲清濁,是不能為晉宋以前的文人所熟悉的,他們作文,只求口吻調利而已。筆法不是某一個人憑空創(chuàng)造出來的,而是由寫字的人們逐漸地在寫字的點畫過程中,發(fā)現了它,因而很好地去認真利用它,彼此傳授,成為一定必守的規(guī)律。由此可知,書家和非書家的區(qū)別,在初期是不會有的。寫字發(fā)展到相當興盛之后(尤其到唐代),愛好寫字的人們,一天比一天多了起來,就產生出一批好奇立異、相信自己、不大愿意守法的人,各人使用各人的手法,各人創(chuàng)立各人所愿意的規(guī)則。凡是人為的規(guī)則,它本身與實際必然不能十分相切合,因而它是空洞的、缺少生命力的,因而也就不會具有普遍的、永久的活動性,因而也就不可能使人人都滿意地沿用著它而發(fā)生效力。在這里,自然而然地便有書家和非書家的分別了。有天分、有休養(yǎng)的人們,往往依他自己的手法,也可能寫出一筆可看的字,但是詳細監(jiān)察一下它的點畫,有時與筆法偶然暗合,有時則不然,尤其是不能各種皆工。既是這樣,我們自然無法以書家看待他們,至多只能稱之為善書者。講到書家,那就得精通八法,無論是端楷,或者是行草,他的點畫使轉,處處皆須合法,不能四號茍且從事,你只要看一看二王、歐、虞、褚、顏諸家遺留下來的成績,就可以明白的。如果拿書和畫來相比著看,書家的書,就好比精通六法的畫師的畫;善書者的書,就好比文人的寫意畫,也有它的風致可愛處,但不能學,只能參觀,以博其趣。其實這也是寫字發(fā)展過程中,不可避免的現象。六朝及唐人寫經,風格雖不甚高,但是點畫不失法度,它自成為一種經生體,比之后代善書者的字體,要嚴謹得多。宋代的蘇東坡,大家都承認他是個書家,但他因天分過高,放任不羈,執(zhí)筆單鉤,已為當時所非議。他自己曾經說過:“我書意造本無法。”黃山谷也嘗說他“往往有意到筆不到處”。就這一點來看,他又是一個道地的不拘拘于法度的善書的典型人物,因而成為后來學書人不須要講究筆法的借口。我們要知道,沒有過人的天分,就想從東坡的意造入手,那是毫無成就可期的。我嘗看見東坡畫的枯樹竹石橫幅,十分外行,但極有天趣,米元章在后邊題了一首詩,頗有相互發(fā)揮之妙。這為文人大開了一個方便之門,也因此把守法度的好習慣破壞無遺。自元以來,書畫都江河日下,到了明清兩代,可看的書畫就越來越少了。一個人一味地從心所欲做事,本來是一事無成的。但是若能做到從心所欲不逾矩(自然不是意造的矩)的程度,那卻是最高的進境。寫字的人,也需要做到這樣。(有刪改)15.根據原文內容,下列說法不正確的一項是(3分)A.善書而不知筆法,這一現象出現在寫字初期,當時筆法還未被充分發(fā)現和利用。B.唐代愛好寫字的人漸多,有一批人好奇立異,自創(chuàng)規(guī)則,經生體就是這么產生的。C.二王、歐、虞、褚、顏諸家都是嚴格遵守筆法的典型,他們都屬于書家的行列。D.元明清三代,書畫創(chuàng)作每況愈下,優(yōu)秀作品越來越少,與守法度的習慣被破壞有關。16.下列關于原文內容的理解和分析,不正確的一項是(3分)A.在寫字過程中,那些與實際不能完全切合的人為的規(guī)則,不具有普遍的永久的活動性,因而不能稱之為筆法。B.書與畫相似,書家之書正如畫師之畫,謹嚴而不失法度,而善書者之書正如文人的寫意,別有風致。C.蘇東坡天分高,修養(yǎng)深,意造的書畫自有天然之趣,但率先破法,放任不羈,成為后世不守法度的借口。D.一味從心所欲做事是不可取的,但寫字的人如能做到“從心所欲不逾矩”,卻能達到最高的境界。17.書家和善書者的區(qū)別體現在哪些方面?請簡要概括。(6分)七、現代文閱讀(三)(12分)閱讀下面的作品,完成18~20題。天津的開合橋茅以升開合橋就是可開可合的橋,合時橋上走車,開時橋下行船,一開一合,水陸兩便,是一種很經濟的橋梁結構。但在我國,這種橋造得很少,直到現在,幾乎全國的開合橋都集中在天津,這不能不算是天津的一種“特產”。南運河上有金華橋,于牙河上有西河橋,海河上有全鋼橋、全湯橋、解放橋。這些都是開合橋。為什么天津有這樣多的開合橋呢?對陸上交通說,過河有橋,當然是再好沒有了。但是河上要行船,有了橋,不但航道受限制,而且船有一定高度,如果橋的高度不變,水漲船高,就可能過不了橋。要保證船能過橋,就要在橋下預留一個最小限度的空間高度,雖在大水時期,仍然能讓最高的船通行無阻。這個最小限度的空間高度,名為“凈空”,要等于河上航行的船的可能最大高度。根據河流在洪水時期的水位,加上凈空,就定出橋面高出兩岸的高度。如果河水漲落差距特別大,如同天津的河流一樣,那么,這橋面的高度就很驚人了。橋面一高,就要在橋面和地面之間造一座有坡度的“引橋”,引橋不僅增加了橋梁的造價,而且對兩旁的房屋建筑非常不利。這在城市規(guī)劃上成了不易解決的問題。這便是水陸文通之同的一個矛盾。為了陸上交通,就要有正橋過河,而正橋就妨礙了水上交通;為了水上交通,就要有兩岸的引橋,而引橋又妨礙了陸上交通,因為上引橋的車輛有的是要繞道而行的,而引橋兩旁的房屋也是不易相互往來的。在都市里,除非長度有限,影響不大的以外,引橋總是一種障礙物,應當設法消除。開合橋就是消除引橋的一種橋梁結構。天津開河橋多,就是這個原因。開合橋的種類很多,一種是“平旋橋”,把兩孔橋聯在一起,在兩孔之間的橋墩上,安裝機器,使這兩孔橋圍繞這橋墩在水面上旋轉九十度,與橋的原來位置垂直,讓出兩孔航道,上下無阻地好過船。一種“升降橋”,在一孔橋的兩邊橋墩上,各立塔架,安裝機器,使這一孔橋能在塔架間升降,就像電梯一樣,橋孔升高時,下面就可以過船了。一種是“吊旋橋”,把一孔橋分為兩葉,每葉以橋墩支座為中心,用機器轉動,使其臨空一頭,逐漸吊起,高離水面,這樣兩葉同時展開,就可讓出中間通道,以便行船。一是“推移橋”把一孔橋用機器沿著水平面拖動,好像拉抽屜是一樣,以使讓出河道行船。開合橋橋面不必高出地面,不用引橋,但開時不能走車,合時不能通船,水陸交通不可同時進行。特別是,橋在開合的過程中,既非全開,又非全合,于是在這一段時間里,水陸都不能通行,這在運輸繁忙的都市,如何能容許呢?因此,在橋梁史上,開合橋雖曾風行一時,但在近數十年來,就日益減少了。那么,開合橋怎樣才能更好地服務呢?應當說,有幾種改進的可能:一是將橋身減輕,改用新材料,使它容易開動;二是強化橋上的機器,提高效率,大大縮減開橋合橋的時間;三是利用電子儀器,使橋的開合自動化,以期達到每次開橋時間不超過3分鐘,如同十字道口的錯車時間一樣。這些都不是幻想,也許在不久的將來就會實現。(有刪改)18.下列對文中“引橋”的理解,不正確的一項(3分)A.引橋是建造在河的兩岸有一定坡度的橋,其作用是引導車輛駛上正橋。B.在設計引橋時,需要綜合考慮空間高度、橋梁造價、城市規(guī)劃等因素。C.引橋方便了水上交通,但會妨礙陸上交通,因為上引橋的車輛必須繞道。D.在都市里,長度過長、影響太大的引橋是一種障礙物,應該設法消除。19.下列對原文內容的概括和分析,不正確的一項是(3分)A.開合橋成為天津的“特產”,與天津河流水位漲落差距特別大密切相關。B.建橋時,正橋橋面高出兩岸的高度等于河流平時的水位加上橋的凈空。C.除平旋橋之外,升降橋、吊旋橋、推移橋這三種都屬于一孔橋。D

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