血液分析儀及臨床應(yīng)用課件

第三節(jié)血液分析儀及其臨床應(yīng)用

【檢測原理】

根據(jù)血細(xì)胞非傳導(dǎo)性的性質(zhì)，以對電解質(zhì)溶液中懸浮顆粒在通過計數(shù)小孔時引起的電阻變化進行檢測為基礎(chǔ)，來進行血細(xì)胞計數(shù)和體積測定，這種方法也被稱為庫爾特原理圖3-1細(xì)胞計數(shù)電阻抗原理電阻抗法白細(xì)胞檢測原理

根據(jù)電阻抗的原理，不同體積的白細(xì)胞通過小孔時產(chǎn)生的脈沖大小有明顯的差異，而不同類型的白細(xì)胞（如淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞）經(jīng)溶血劑作用后有明顯的差異，根據(jù)脈沖的大小，即可人為地將血內(nèi)的白細(xì)胞分成幾群（2分群、3分群）。圖3-2.直方圖與脈沖信號的關(guān)系

圖3-3.白細(xì)胞體積分布直方圖fL將白細(xì)胞體積從30-450fl分為256個通道，每個通道為1.64fl。第一群（小細(xì)胞群，35-90fl）是淋巴細(xì)胞；第二群（90-160fl）是單個核細(xì)胞區(qū)，也稱為中間細(xì)胞，白血病細(xì)胞、異型淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、漿細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞等；第三群（160fl以上）大細(xì)胞區(qū)，中性粒。

血紅蛋白測定原理被稀釋的血液加入溶血劑后，紅細(xì)胞溶解，釋放血紅蛋白，后者與溶血劑中有關(guān)成分結(jié)合形成血紅蛋白衍生物，進入血紅蛋白測試系統(tǒng)，在特定波長（一般在530～550nm）下比色，吸光度的變化與液體中血紅蛋白含量成正比，儀器便可顯示其濃度。

電阻抗法血小板測定原理血小板隨紅細(xì)胞一起在一個系統(tǒng)中進行檢測，根據(jù)不同的閾值，計算機分別給出血小板與紅細(xì)胞數(shù)目

識別器小孔血小板分別儲存于64個通道內(nèi)，直方圖范圍為2-20fl之間。不同儀器的血小板直方圖范圍不一。MPV就是此平整曲線所含的群體算術(shù)平均體積，MPV也就是血小板體積分布直方圖的產(chǎn)物。

圖3-5.電阻抗法血小板體積分布直方圖【臨床應(yīng)用】細(xì)胞直方圖：血液分析儀在計數(shù)細(xì)胞數(shù)量的同時，還提供細(xì)胞體積分布圖形，橫坐標(biāo)為血細(xì)胞體積大小，縱坐標(biāo)為不同體積細(xì)胞的相對頻率，這些用以表示細(xì)胞群體分布情況的曲線圖形稱細(xì)胞直方圖。紅細(xì)胞直方圖的臨床應(yīng)用正常紅細(xì)胞直方圖：儀器在35-250fl的范圍內(nèi)分析紅細(xì)胞。紅細(xì)胞體積分布直方圖的顯示范圍為25-250fl。正常紅細(xì)胞主要分布在50～150fl范圍內(nèi)，從紅細(xì)胞直方圖上看好似兩側(cè)對稱正態(tài)分布曲線。

缺鐵性貧血的直方圖：曲線峰左移，峰底變寬，顯示小細(xì)胞不均一性。MCV：66.2fl，RDW：23.9%

鐵粒幼細(xì)胞性貧血的直方圖：曲線峰左移，可呈“雙峰”形，峰底明顯變寬。缺鐵性貧血經(jīng)鐵劑治療有效，在三周左右時也可出現(xiàn)類似的“雙峰”狀圖形，但峰底更寬。MCV:73.6fl，RDW:22.8%

巨幼紅細(xì)胞貧血的直方圖：治療前的直方圖曲線峰變低、右移，峰底明顯變寬，顯示明顯的大細(xì)胞不均一性，是葉酸或維生素B12缺乏引起巨幼細(xì)胞性貧血的重要直方圖特征。經(jīng)葉酸或B12治療后，正常紅細(xì)胞群逐步釋放進入外周血，而病理性紅細(xì)胞并未完全消亡，檢測的紅細(xì)胞直方圖可呈“雙峰”形，說明治療有效。MCV：131.2fl，RDW：24.2%

急性失血性貧血的直方圖：直方圖的曲線峰變低，其它特點與正常紅細(xì)胞直方圖一致。MCV：91.3fl，RDW：13.0%

表3-2貧血的MCV/RDW分類法貧血類型MCV/RDW特征常見原因或疾病小細(xì)胞均一性MCV減少，RDW正常輕型珠蛋白生成障礙性貧血、某些繼發(fā)性貧血等小細(xì)胞不均一性MCV減少，RDW增高缺鐵性貧血、β-珠蛋白生成障礙性貧血、HbH病等大細(xì)胞均一性MCV增大，RDW正常MDS、部分再障、部分肝病性貧血、某些腎病性貧血等大細(xì)胞不均一性MCV、RDW均增高巨幼細(xì)胞性貧血、某些肝病性貧血等

血小板細(xì)胞直方圖的臨床應(yīng)用正常血小板直方圖：血細(xì)胞分析儀通常在2～30fl范圍分析血小板，正常血小板主要集中在于2～20fl范圍內(nèi)，一般在25～30fl之間的某一點與橫坐標(biāo)重合，直方圖是一條呈對數(shù)正態(tài)分布的光滑曲線。

大血小板直方圖：曲線峰右側(cè)右移，在大于30fl的某一點與橫坐標(biāo)重合，MPV明顯增高。如果血小板數(shù)減低，可見于ITP及體外循環(huán)時；如果血小板數(shù)升高，見于脾切除術(shù)后。如果血小板數(shù)正常，可見于慢性髓性白血病、骨髓纖維化等聚集的血小板直方圖：曲線峰變低，如果以<20個的血小板聚集為主，曲線峰右側(cè)抬高呈拖尾狀，不與橫坐標(biāo)重合；如果以>20個的血小板聚集為主，則曲線峰變低、變平，右側(cè)抬高不明顯。此時，在白細(xì)胞直方圖的35fl處有一個小峰。見于標(biāo)本采集不當(dāng)或EDTA依賴性血小板聚集等

小紅細(xì)胞干擾的血小板直方圖：在曲線峰的右側(cè)抬起并上揚，不與橫坐標(biāo)重合?？梢娪贗DA或發(fā)生溶血的標(biāo)本。中性粒細(xì)胞比例減低或淋巴細(xì)胞比例增高：白細(xì)胞直方圖表現(xiàn)為粒細(xì)胞峰明顯變小，淋巴細(xì)胞峰明顯變大

單核細(xì)胞比例增高：在單個核細(xì)胞區(qū)出現(xiàn)一個明顯的峰，其大小與單核細(xì)胞比例增高的程度有關(guān)。值得注意的是，儀器顯示的“MO”或“MID”增高僅表示可能是單核細(xì)胞增高，也可能是嗜酸性粒細(xì)胞或幼稚細(xì)胞等，因此，必須涂片染色后經(jīng)顯微鏡確認(rèn)。

嗜酸性粒細(xì)胞比例增高：在單個核細(xì)胞區(qū)出現(xiàn)一個明顯的峰，其大小也與嗜酸性粒細(xì)胞增高的程度有關(guān)。注意事項與單核細(xì)胞比例增高相同

急性淋巴細(xì)胞白血病：白細(xì)胞直方圖表現(xiàn)為淋巴細(xì)胞峰向單個核細(xì)胞區(qū)擴展變寬，其程度與原始及幼稚淋巴細(xì)胞的比例高低有關(guān)

急性非淋巴細(xì)胞性白血?。喊准?xì)胞直方圖常以單個核細(xì)胞峰增高為主，并向淋巴細(xì)胞區(qū)和粒細(xì)胞區(qū)擴展。其異常峰的高低及擴展的程度與原始及幼稚細(xì)胞的比例高低有關(guān)。

慢性淋巴細(xì)胞白血?。喊准?xì)胞直方圖與正常淋巴細(xì)胞比例增高時相似，但淋巴細(xì)胞峰底略寬。慢性粒細(xì)胞白血?。喊准?xì)胞直方圖表現(xiàn)為多區(qū)異常，為形狀單一而分布廣泛的圖形，淋巴細(xì)胞峰可有可無，隨淋巴細(xì)胞所占的比例大小而異

各種干擾因素引起的白細(xì)胞直方圖變化白細(xì)胞計數(shù)時先加入溶血劑，使紅細(xì)胞破壞，保留的“膜包核”狀的白細(xì)胞進行計數(shù)。①某些貧血的病理紅細(xì)胞及新生兒紅細(xì)胞對溶血劑有較強的抵抗力，使之不溶解或不完全溶解；②有核紅細(xì)胞；③血小板聚集成團，這些均可誤計數(shù)為白細(xì)胞等，此時白細(xì)胞直方圖也可發(fā)生相應(yīng)的改變。因此，當(dāng)實驗結(jié)果出現(xiàn)這些圖形時，提示白細(xì)胞計數(shù)和分群結(jié)果均不準(zhǔn)確，需要復(fù)查。

聚集的血小板干擾

不完全溶解的紅細(xì)胞干擾

巨大血小板干擾

冷球蛋白干擾

圖形和報警提示相同、細(xì)胞不同的白細(xì)胞直方圖變化

異型淋巴細(xì)胞(Ⅰ、Ⅱ型)22%非典型淋巴細(xì)胞