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文檔簡介

15細胞破碎定義:細胞破碎就是采用一定的方法，在一定程度上破壞細胞壁和細胞膜，設(shè)法使胞內(nèi)產(chǎn)物最大程度地釋放到液相中，破碎后的細胞漿液經(jīng)固液分離除去細胞碎片后，再采用不同的分離手段進一步純化.15.1細胞壁的組成和結(jié)構(gòu)微生物細胞壁的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)細菌，肽聚糖的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)酵母菌：葡聚糖，甘露聚糖，蛋白質(zhì)真菌：細胞壁更厚植物細胞壁的化學(xué)組成和結(jié)構(gòu)初生壁，次生壁具有很高的機械強度高壓勻漿器影響勻漿破碎的主要因素是壓力、溫度和通過勻漿器閥的次數(shù)。高壓勻漿法的適用范圍較廣，在微生物細胞和植物細胞的大規(guī)模處理中常采用.高速珠磨機(highspcedbeadmill)研磨是常用的一種方法，它將細胞懸浮液與玻璃小珠、石英砂或氧化鋁等研磨劑一起快速攪拌，使細胞獲得破碎。在工業(yè)規(guī)模的破碎中常采用高速珠磨機超聲波破碎器超聲波處理細胞懸浮液時，破碎作用受許多因素的影響，通常聲強和振幅影響很大，但強度太高易使蛋白質(zhì)變性，頻率的變化影響不明顯：此外介質(zhì)的離子強度、pH值、菌體的種類和濃度也有很大的影響.超聲波振蕩過程中遇到的最大問題就是產(chǎn)生的熱量不容易驅(qū)散，所以影響了它在大規(guī)模工業(yè)上的應(yīng)用，但在實驗室和小規(guī)模生產(chǎn)中是一種很好的方法15.2.2非機械法非機械方法很多，包括酶解、滲透壓沖擊、凍結(jié)和融化、干燥法和化學(xué)法溶胞等.1)酶解法是利用酶反應(yīng)，分解破壞細胞壁上特殊的鍵，從而達到破碎目的。酶解法可以在細胞懸浮液中加入特定的酶，也可以采用自溶作用。酶解法的優(yōu)點是發(fā)生酶解的條件溫和、能選擇性地釋放產(chǎn)物、胞內(nèi)核酸等泄出量少、細胞外形較完整、便于后步分離等；但酶水解價格高，故小規(guī)模應(yīng)用較廣.15.2.3選擇破碎方法的依據(jù)(1)細胞的處理量(2)細胞壁的強度和結(jié)構(gòu)(3)目標產(chǎn)物對破碎條件的敏感性(4)破碎程度適宜的操作條件應(yīng)從高的產(chǎn)物釋放率，低的能耗和便于后步提取這二方面進行權(quán)衡15.2.4破碎技術(shù)研究的方向(1)多種破碎法的結(jié)合(2)與上游技術(shù)結(jié)合(3)與下游操作技術(shù)結(jié)合15.4基因工程包涵體的純化方法包涵體的洗滌和目標蛋

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