基因診斷與治療課件

第六篇基因疾病與治療一、人類所有疾病均可視為基因病按參與疾病的基因的性質和來源，可將基因病分為3大類:

單基因?。╩onogenicdisease）:由一種基因所引致。

多基因?。╬olygenicdisease）:由數(shù)目不等、作用不同的若干種基因相互協(xié)作而引起。

獲得性基因?。╝cquiredgeneticdisease）:由外源性病原體攜帶其致病基因或毒力基因侵入人體細胞后所引起。二、疾病基因與遺傳易感性有關三、基因突變可能誘發(fā)疾病四、基因突變改變表達產物的“質”和“量”引起疾病正?；蚍Q為野生型基因，具有野生型基因的細胞或個體稱為野生型（wildtype）。

基因突變（genemutation），攜帶突變基因的各種類型的細胞或個體稱為突變體或突變型（mutant）。傳統(tǒng)的疾病診斷方法基因診斷

GeneDiagnosis

基因診斷又稱分子診斷，就是應用分子生物學和分子遺傳學的原理、技術，通過檢測基因及基因表達產物的存在狀態(tài)，對人體疾病作出診斷的方法?；蛟\斷可用于單基因病、多基因病及感染性疾病診斷。核酸分子雜交聚合酶鏈式反應單鏈構象多態(tài)性（SSCP）檢測限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）分析DNA序列測定芯片技術免疫印跡免疫組織化學法基因診斷的基本技術結合目的選擇基因診斷技術路線和方法點突變的檢測：

導致特異性限制性核酸內切酶位點改變：

無特異性限制性核酸內切酶位點改變：基因序列缺失/插入的檢測：RFLP…PCR-ASO,SSCP…核酸分子雜交，PCR…轉錄水平檢查基因表達異常：RT-PCR,RT-qPCR…疾病易感性檢測（SNP檢測）：……

RFLP導致某一限制酶識別位點喪失或獲得的點突變，分析限制性酶切圖，即可診斷出此類突變。x110bp

34bp76bpPCR-RFLPPCR/單鏈構象多態(tài)性分析(singlestrandconformationpolymorphism,SSCP)基因治療

（genetherapy）通過一定方式將人正?；蛞吧停╳ildtype）基因或有治療作用的DNA片段導入人體靶細胞以矯正或置換致病基因的治療方法。

反義核酸技術核酶的作用機制

天然核酶多為單一的RNA分子，具有自我剪切作用。但核酶也可以由兩個RNA分子組成。自殺基因的作用機制

基因轉移可由病毒和非病毒介導病毒介導（生物學方法）：反轉錄病毒腺病毒腺相關病毒非病毒介導（非生物學方法）：脂質體受體直接注射其他：磷酸鈣共沉淀法、電穿孔法、DEAE-葡聚糖法、細胞顯微注射、基因槍兩端各有一長末端重復序列LTR。

反轉錄病毒前病毒的結構特點

LTR由U3、R和U5三部分組成。病毒有三個結構基因5ˊ端LTR下游有一段病毒包裝所必需的序列（ψ）及剪接供體位點(SD)和剪接受體位點(SA)。

在U3內有增強子和啟動子；

U3和U5兩端分別有病毒整合序列(IS)；

在R內還有poly(A)加尾信號。

gag基因，編碼核心蛋白和屬特異性抗原；pol基因，編碼反轉錄酶；env基因，編碼病毒外殼或包膜糖蛋白(包括外膜糖蛋白和穿膜蛋白)。

反轉錄病毒包裝受體介導轉移技術示意圖目錄存在問題★許多基因缺陷的早期診斷還有困難★間接體內法回輸?shù)霓D基因細胞不可能在體內長期存活;

★有些導入的基因表達不穩(wěn)定，易于丟失；

★外源基因的調控問題;

★基因插入失活或