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植物組織培養(yǎng)綜合實(shí)驗(yàn)繼第1頁,共10頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊饬x
通過滿天星等的莖尖繼代培養(yǎng)獲得大量的莖段和小苗,為后續(xù)不斷增殖和和生根準(zhǔn)備材料,并學(xué)習(xí)增殖速率的計(jì)算和提高增殖速率的方法,以及增殖過程中應(yīng)注意的相關(guān)問題.
第2頁,共10頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)原理
叢生芽的誘導(dǎo):在離體培養(yǎng)條件下,利用細(xì)胞分裂素誘導(dǎo)叢生芽的分化..第3頁,共10頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)材料:上一次初代培養(yǎng)所得的滿天星及波斯菊、報(bào)春等材料的無菌培養(yǎng)物增殖培養(yǎng)基:MS+6-BA0.2mg/L第4頁,共10頁,2023年,2月20日,星期六首先清理自己的實(shí)驗(yàn)材料,找出未污染的材料,觀察其形態(tài)分化等情況。根據(jù)材料的多少配制相應(yīng)的培養(yǎng)基。如已全部污染,可采波斯菊的莖尖和莖段接種進(jìn)行補(bǔ)救實(shí)驗(yàn)。將分化形成的叢生芽及伸長(zhǎng)的莖段在無菌操作臺(tái)上進(jìn)行分離和切割,將切割好單芽和單莖段接種在增殖培養(yǎng)基上。將培養(yǎng)瓶放置在合適的環(huán)境條件下(培養(yǎng)間)進(jìn)行培養(yǎng)。定期進(jìn)行觀察和處理。實(shí)驗(yàn)操作:第5頁,共10頁,2023年,2月20日,星期六波斯菊的培養(yǎng)莖尖和莖段的選擇清洗和消毒(同滿天星)外植體的切割和接種培養(yǎng)觀察第6頁,共10頁,2023年,2月20日,星期六胡蘿卜愈傷組織的繼代培養(yǎng)通過愈傷組織的繼代培養(yǎng),獲得疏松性的愈傷組織,為胡蘿卜細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)準(zhǔn)備材料,同時(shí)學(xué)習(xí)愈傷組織在不同培養(yǎng)條件下的分化及控制。實(shí)驗(yàn)?zāi)康模旱?頁,共10頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)材料:上一次初代培養(yǎng)所得的胡蘿卜愈傷組織增殖培養(yǎng)基:MS+2,2-D0.4mg/L第8頁,共10頁,2023年,2月20日,星期六實(shí)驗(yàn)步驟首先清理自己的實(shí)驗(yàn)材料,找出未污染的材料,觀察其形態(tài)分化等情況。根據(jù)材料的多少配制相應(yīng)的培養(yǎng)基。將長(zhǎng)出的愈傷組織連同外植體切割成合適的大小,接種到新的增殖培養(yǎng)基中。將培養(yǎng)瓶放置在合適的環(huán)境條件下(人工氣候室)進(jìn)行培養(yǎng)。定期進(jìn)行觀察和處理。第9頁,共10頁,2023年,2月20日,星期六滿天星莖尖增殖培養(yǎng)基:MS+6-BA
0.2mg/L+3%蔗糖+1%瓊脂胡蘿卜愈傷組織增殖培養(yǎng)基:MS+2,2-D
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