細(xì)菌病的一搬診斷程序

細(xì)菌病的一搬診斷程序第1頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六二、培養(yǎng)基種類液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基三種。液體培養(yǎng)基：含有各種營(yíng)養(yǎng)成分的水溶液。

固體培養(yǎng)基：在液體培養(yǎng)基中加入2～3%瓊脂即為固體培養(yǎng)基。半固體培養(yǎng)基：加入0.3～

0.5%瓊脂即為半固體培養(yǎng)基。(一)按其物理性狀分為第2頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六1、基礎(chǔ)培養(yǎng)基

含有培養(yǎng)一般細(xì)菌的最基本成分?？晒┐蠖鄶?shù)細(xì)菌人工培養(yǎng)用。如肉湯培養(yǎng)基、普通瓊脂培養(yǎng)基和蛋白胨水等。(二)按其用途分為第3頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六2、營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基于基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)如葡萄糖、血液、血清、腹水、生長(zhǎng)因子等，以滿足營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌生長(zhǎng)需要。有的細(xì)菌還需加入特殊物質(zhì)，如結(jié)核桿菌需加入雞蛋清、馬鈴薯、甘油等才能良好生長(zhǎng)。第4頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3、選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì)，而選擇性地讓欲分離的細(xì)菌旺盛生長(zhǎng)的培養(yǎng)基，使用后可以達(dá)到選擇分離的目的。如膽鹽和薔薇色酸可以選擇性地抑制G+菌的生長(zhǎng)，而不影響Gˉ菌的生長(zhǎng)。在培養(yǎng)基中加入二藥后可選擇性地分離出腸道桿菌。第5頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六

利用細(xì)菌分解底物及其代謝產(chǎn)物的不同，可在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)和指示劑，即制為鑒別培養(yǎng)基，目的是使得混合在一起的多種細(xì)菌在同一種培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)，表現(xiàn)出不同的、肉眼可鑒別的變化，從而達(dá)到鑒別細(xì)菌的目的。

4、鑒別培養(yǎng)基第6頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六5.厭氧培養(yǎng)基厭氧菌不能在有氧環(huán)境中生長(zhǎng)。將培養(yǎng)基與空氣隔絕，或向培養(yǎng)基中加入一些物質(zhì)，使培養(yǎng)基中的氧氣耗盡，則可用于培養(yǎng)厭氧菌。如肝片肉湯培養(yǎng)基，應(yīng)用時(shí)于液體表面加蓋液體石蠟以隔絕空氣。第7頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六區(qū)分選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基上的菌類，有2種或兩種以上時(shí)，只有適應(yīng)環(huán)境（選擇培養(yǎng)基的基底）的菌種才能存活。鑒別培養(yǎng)基上的菌類，有兩種或兩種以上時(shí)，在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品，使培養(yǎng)后會(huì)發(fā)生某種變化，從而區(qū)別不同類型的微生物（但培養(yǎng)基上的各個(gè)菌種均不死亡）。第8頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六三、制備培養(yǎng)基的基本程序配料溶化測(cè)定及矯正pH過(guò)濾分裝滅菌無(wú)菌檢驗(yàn)備用培養(yǎng)基的基本要求1.含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，不含任何抑菌物質(zhì)。2.具有適當(dāng)?shù)膒H值和水分。3.均勻透明，易于觀察。4.經(jīng)過(guò)滅菌和無(wú)菌檢驗(yàn)。第9頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六1、細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)現(xiàn)象：

觀察細(xì)菌在平板上的菌落特征：菌落：細(xì)菌接種在固體培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的培養(yǎng)后，表面可出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的單個(gè)細(xì)菌集團(tuán)，稱為菌落。四、細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況形態(tài)、大小、邊緣、表面構(gòu)造（濕潤(rùn)度和光滑度）、隆起度、透明度、顏色等，及在血平板上的溶血現(xiàn)象（β溶血、α溶血）。第10頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六2、細(xì)菌在半固體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象有鞭毛的細(xì)菌，沿穿剌線呈模糊羽毛狀生長(zhǎng)。無(wú)鞭毛的細(xì)菌，沿穿剌線呈清晰的線狀生長(zhǎng)。第11頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六3、細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)現(xiàn)象觀察肉湯培養(yǎng)物的混濁度、管底沉淀、肉湯表面菌膜或菌環(huán)，以及有無(wú)汽泡等。⑴⑵

⑶⑷第12頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六臨床標(biāo)本預(yù)處理增菌接種培養(yǎng)基，分離單個(gè)菌落各種鑒定試驗(yàn)涂片染色快速診斷試驗(yàn)生化試驗(yàn)血清學(xué)實(shí)驗(yàn)涂片染色藥敏試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)初步診斷報(bào)告最終診斷報(bào)告第四節(jié)細(xì)菌病的一般診斷程序第13頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六一、病料的采集、保存及運(yùn)送1）盡早采集一旦懷疑細(xì)菌感染，應(yīng)及時(shí)采集標(biāo)本進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)，盡早獲得病原學(xué)診斷和抗生素敏感資料，對(duì)細(xì)菌感染的治療具有極其重要意義；2）標(biāo)本采集盡量在用藥前進(jìn)行；3）根據(jù)可疑病原菌和實(shí)驗(yàn)方法的不同選擇合適的采集時(shí)期；第14頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六4）注意無(wú)菌操作，盡量避免雜菌污染；5）注意采集的方法和部位；6）標(biāo)本必須新鮮，及時(shí)運(yùn)送；7）標(biāo)本的保存、處理要嚴(yán)格。第15頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六二、細(xì)菌的形態(tài)檢查1.單染色法2.復(fù)染色法革蘭氏（G）染色法革蘭氏陽(yáng)性菌（G+菌）－藍(lán)紫色革蘭氏陰性菌（G-菌）－紅色第16頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六第17頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六細(xì)菌的接種培養(yǎng)方法1.傾注平皿接種法2.平板劃線分離法3.斜面接種法4.穿刺接種法5.液體培養(yǎng)基接種法三、細(xì)菌的分離培養(yǎng)第18頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六必須用純培養(yǎng)物鑒定——選用單個(gè)菌落第19頁(yè)，共21頁(yè)，2023年，2月20日，星期六四、細(xì)菌的生化試驗(yàn)1.糖分解試驗(yàn)2.維-培試驗(yàn)3.甲基紅試驗(yàn)4.枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)5.吲哚試驗(yàn)6.硫化氫試驗(yàn)7.觸媒試驗(yàn)8.氧化酶試驗(yàn)9.脲