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艾滋病實(shí)驗(yàn)室檢查第1頁(yè)/共20頁(yè)2艾滋病(AIDS)第2頁(yè)/共20頁(yè)3實(shí)驗(yàn)室檢查第3頁(yè)/共20頁(yè)4免疫學(xué)檢測(cè)AIDS患者正常(×109/L)CD4<0.21(0.8~1.2)CD4/CD8<11.2~2.1淋巴細(xì)胞總數(shù)<12~3流式細(xì)胞儀測(cè)定第4頁(yè)/共20頁(yè)5血清學(xué)檢測(cè)(1)HIV抗體的初篩試驗(yàn)——ELISA(酶聯(lián)免疫試驗(yàn))第5頁(yè)/共20頁(yè)6血清學(xué)檢測(cè)(2)HIV抗體的確證試驗(yàn)——Westernblot(免疫印跡試驗(yàn))第6頁(yè)/共20頁(yè)7血清學(xué)檢測(cè)(3)HIV抗原檢測(cè)——ELISA夾心法測(cè)定p24抗原敏感性很高(7~10pg/ml)特異性稍差(可有假陽(yáng)性)第7頁(yè)/共20頁(yè)8分子生物學(xué)檢測(cè)(1)HIVRNA檢測(cè)—RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng))PCR:高溫變性(94℃)→低溫退火(55℃)→適溫延伸(72℃);經(jīng)25~30個(gè)循環(huán),成倍數(shù)擴(kuò)增熒光定量PCR:比常規(guī)PCR多一個(gè)寡聚核苷酸探針(帶一個(gè)熒光發(fā)光分子和一個(gè)熒光淬滅分子)應(yīng)用:PCR查PBMCs前病毒DNA;RT-PCR查血漿中的病毒RNA第8頁(yè)/共20頁(yè)9分子生物學(xué)檢測(cè)(2)淋巴細(xì)胞HIVRNA檢測(cè)——Northern印跡雜交(Northernblot)
原理:RNA片段經(jīng)電泳分離,從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜,再用探針雜交第9頁(yè)/共20頁(yè)10分子生物學(xué)檢測(cè)(3)HIV變異株檢測(cè)——Sanger測(cè)序法
原理:核酸擴(kuò)增時(shí),核苷酸在某一固定點(diǎn)開始,隨機(jī)在某一特定的堿基處終止,產(chǎn)生A、T、C、G四組不同長(zhǎng)度的一系列核苷酸,通過(guò)在尿素變性的PAGE膠上電泳,獲得DNA序列第10頁(yè)/共20頁(yè)11病毒檢測(cè)血漿、單核細(xì)胞、腦脊液可分離出HIV操作復(fù)雜,主要用于科研第11頁(yè)/共20頁(yè)12診斷第12頁(yè)/共20頁(yè)13診斷原則流行病學(xué)史:有靜脈注射毒品史;多個(gè)性伴和不潔性生活史;輸入未經(jīng)HIV抗體檢測(cè)的血液和血制品史;HIV抗體陽(yáng)性所生的子女;其它(如職業(yè)暴露或醫(yī)源性感染史)。臨床表現(xiàn):
高危對(duì)象出現(xiàn)上感樣及單核細(xì)胞增多癥樣表現(xiàn),頸、腋及枕部淋巴結(jié)腫大,肝脾腫大,可考慮急性HIV感染。無(wú)癥狀期、艾滋病期臨床表現(xiàn)。
實(shí)驗(yàn)室檢查:①HIV抗體陽(yáng)性,并經(jīng)確證試驗(yàn)確認(rèn)。②CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)明顯減少。③HIVRNA和P24抗原的檢測(cè)有助于早期診斷新生兒的HIV感染。第13頁(yè)/共20頁(yè)14診斷標(biāo)準(zhǔn)急性期
★流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)、HIV抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽(yáng)性
★僅實(shí)驗(yàn)室檢查HIV抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽(yáng)性無(wú)癥狀期
★流行病學(xué)史、HIV抗體陽(yáng)性
★僅實(shí)驗(yàn)室檢查HIV抗體陽(yáng)性
第14頁(yè)/共20頁(yè)15診斷標(biāo)準(zhǔn)艾滋病期
★
流行病學(xué)史,HIV抗體陽(yáng)性,臨床表現(xiàn)有下列一項(xiàng)或以上:
1.短期(6個(gè)月內(nèi))體重下降10%以上;2.咳嗽或腹瀉超過(guò)4周;3.持續(xù)或間歇發(fā)熱超過(guò)4周;4.全身淋巴結(jié)腫大;5.反復(fù)帶狀皰疹或慢性播散性HSV感染;6.口咽念珠菌??;7.全身搔癢性皮炎;8.反復(fù)發(fā)生的敗血癥;9.深部真菌感染,馬爾尼非青霉菌;10.肺孢子蟲肺炎;11.活動(dòng)性巨細(xì)胞病毒感染;12.弓形蟲腦病。13.反復(fù)發(fā)生、難治性肺部感染或進(jìn)展迅速的活動(dòng)性結(jié)核病;14.中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損、占位性病變或中、青年癡呆癥;15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。ⅠⅠ第15頁(yè)/共20頁(yè)16診斷標(biāo)準(zhǔn)
★HIV抗體陽(yáng)性
CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)<200/mm3無(wú)上述表現(xiàn)或癥狀第16頁(yè)/共20頁(yè)17鑒別診斷原發(fā)性CD4+淋巴細(xì)胞減少癥
無(wú)HIV感染流行病學(xué)資料,HIV-1和HIV-2病原學(xué)檢測(cè)陰性。繼發(fā)性CD4+淋巴細(xì)胞減少
腫瘤和自生免疫性疾病(autoimmunedisease)化療或免疫抑制治療后。第17頁(yè)/共20頁(yè)18預(yù)后第18頁(yè)/共20頁(yè)19影響預(yù)后的因素感染的HIV型別及亞型:
HIV-1較HIV-2臨床進(jìn)展快并發(fā)的機(jī)會(huì)性感染:
同時(shí)合并卡波濟(jì)
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