催吐蘿芙木脂溶性生物堿提取工藝研究

第第頁催吐蘿芙木脂溶性生物堿提取工藝研究

催吐蘿芙木干根〔海南省五指山市海南制藥廠提供〕。冰醋酸、醋酸酐、高氯酸、硫酸銀、氯化鋇、雷氏銨鹽等均為分析純，95%的酒精為工業(yè)級。

BT244S型電子天平〔德國Sartorius〕；RE-52-CS型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀〔上海亞榮生化儀器廠〕；DZF-6020型真空干燥箱〔上海博迅實業(yè)有限公司〕。

2、方法與結(jié)果

2.1蘿芙木生物堿的提取催吐蘿芙木干根經(jīng)粉碎，過40目篩后真空干燥。考慮到不破壞蘿芙木提取物的生物活性，本試驗在溫水浴條件下采納工業(yè)酒精浸漬法。提取液經(jīng)減壓濃縮，回收乙醇得浸膏。

2.2水溶性生物堿含量的測定雷氏銨鹽在酸性介質(zhì)中可與大部分的生物堿生成沉淀。因此本試驗將提取物用稀酸水溶解并調(diào)pH=2，加入新鮮配制的雷氏銨鹽飽和水溶液，濾誕生成的生物堿雷氏鹽沉淀，用少量冰水洗滌1～2次，抽干。將沉淀溶于丙酮，濾除不溶物，再向生物堿雷氏鹽丙酮溶液中加入硫酸銀飽和水溶液，使生物堿雷氏鹽分解，生成生物堿硫酸鹽和雷氏銀鹽沉淀，過濾后再向濾液中加入計算量的氯化鋇溶液，生成生物堿鹽酸鹽和硫酸鋇沉淀，過濾，濾液蒸干得生物堿鹽酸鹽，稱重。蘿芙木生物堿的藥用形式多為水溶性鹽［7］，因此本試驗以沉淀法得到的鹽酸鹽的量作為提取物中水溶性生物堿的量。

2.3統(tǒng)計分析采納SAS〔STATISTICALANALYSISSYSTEM〕8.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理，以GLM過程做總模型方差分析，從而選擇較優(yōu)提取條件。

2.4提取條件的.優(yōu)選稱取催吐蘿芙木粗粉20g，依據(jù)影響溶劑提取的主要因素，選擇溶劑用量〔A〕、提取時間〔B〕、提取溶液的pH條件〔D〕作為考察因素，每個因素依據(jù)實際狀況取3個水平，按L9〔34〕表進行正交試驗，分別按“2.1項”下所述方法制得浸膏。以提取物中的生物堿鹽酸鹽為指標(biāo)，采納SAS8.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。正交試驗表頭設(shè)計見表1，試驗結(jié)果及處理數(shù)據(jù)見表2～3。

正交試驗結(jié)果經(jīng)方差分析，各提取因素對提取效果均有顯著影響，其中pH條件影響較顯著，提取時間和溶劑用量次之。分別對各因素不同水平做差異顯著性分析，可知A2與A3，C2與C3皆無顯著性差異，其余兩兩之間差異顯著。依據(jù)正交試驗結(jié)果，結(jié)合大生產(chǎn)可能性，并從降低成本角度考慮，最終確定提取工藝為A2B1D1，即藥材粉碎成細(xì)粉，加10倍量95%的工業(yè)酒精在pH為2的條件下，浸提5h。經(jīng)過濾，濃縮，回收乙醇，制得浸膏。

2.5最正確工藝條件的驗證以正交試驗的最正確工藝參數(shù)進行驗證試驗，結(jié)果如表4?？芍?，應(yīng)用優(yōu)化后的工藝進行提取試驗，每100g生藥提取后能制得12.8g水溶性生物堿鹽酸鹽。3次所得提取物中生物堿鹽酸鹽的量基本平行，說明此工藝條件重復(fù)性好。傳統(tǒng)的醇提工藝大多徑直以工業(yè)酒精浸漬3～7d，優(yōu)化后的提取工藝只需5h，生物堿鹽酸鹽的提取率可達12.8%。

3、結(jié)果

催吐蘿芙木中的脂溶性生物堿進行了大量討論，發(fā)覺了一系列的單萜吲哚類生物堿［2～5］。催吐蘿芙木原產(chǎn)于西非加納，是蘿芙木中的優(yōu)良品種，其干燥根及莖是我國重要的南藥，具有清風(fēng)熱、降肝火、消腫解毒的作用，是降壓藥利血平的主要自然來源［6］。正交試驗結(jié)果說明，提取溶劑的pH條件對提取水溶性生物堿影響最大，提取時間次之，溶劑用量影響最小。在A3B1D1條件下，溶劑用量稍大，成本過高，應(yīng)選擇A2B1D1為最正確提取工藝條件。

本試驗旨在優(yōu)化水溶性生物堿的提取工藝，首次采納雷氏銨鹽沉淀法從催吐蘿芙木浸膏中獲得生物堿鹽酸鹽。由于蘿芙木生物堿的藥用形式多為水溶性鹽，因此以沉淀法得到的鹽酸鹽作為考察指標(biāo)，具有肯定的現(xiàn)實