血液細胞分離儀課件

血液細胞分離儀報告者：蘇俞綾報告日期：2004年8月12日指導者：易曼芬學姐、劉綠霜學姐、林炯熙大夫受訓日期：2004年6月1日~7月31日血液細胞分離儀-機型COBESpectra6.1PBSC（PeripheralBloodStemCell）COBESpectra7.0LRS（Leukocyte-ReducedApheresisPlatelet）COBE2991B.MFenwalCS-3000PlusFenwalCS-3000PlusCOBESPECTRA6.1，7.0COBE2991血液細胞分離儀-項目

WBC：1.MNC-DLI（DonorLymphocyteInfusion）2.PMN-TherapeuticLeukocytopheresis（p＇t）Granulocytapheresis（donor）3.AutoPBSC-PeripheralBloodStemCell4.BMP-BoneMarrowProcessing→COBE2991機型TPE：TherapeticPlasmaExchangeELP：TherapeticThrombocytapheresis（p＇t）ExtendedLifePlatelet（donor）LRS：Leukocyte-ReducedApheresisPlateletRBC：TherapeticPhlebotomy→目前不用，以放血方式治療＊PMN（PolymorphonuclearCell；多形核細胞）＊MNC（MononuclearCell；單核細胞）血液細胞分離儀-事前準備P＇t/donor同意書醫(yī)師聲明書P＇t/donor聲明書會診單抽血檢驗項目－血液常規(guī)檢查（BloodRoutine）、ABO血型、Rh血型、不規(guī)則抗體篩檢、肝功能（ALT）、梅毒血清反應（VDRL）、C型肝炎病毒抗體（anti-HCV）、B型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、愛滋病毒抗體（HIV-I、HIV-II）、人類嗜T淋巴球病毒抗體（HTLV-I、HTLV-II）、游離鈣（FreeCa）。執(zhí)行收集的前幾日，口服鈣片、喝溫牛奶以預防低血鈣反應。按時前往，務必進食，但勿吃太油膩的食物（如炸排骨、炸雞腿，包括豆?jié){）。禁煙、尼古丁、咖啡（因會增加血管收縮）。血液細胞分離儀-原理

藉由各種血液成分比重不同的不同及利用不同的離心速度將血液分離，并利用光學透視原理測細胞之密度，即由獻血人身上收集所需之血液成分或由病人身上收集或移除所需的血液成分，而將其余的血液成分經由血液分離機持續(xù)性的運轉回輸給病人或獻血者?！?％buffycoat（WBC、Lym、plt、stemcell）←55％plasma←45％RBC血液細胞分離儀-符合條件WBC>3000μlHB>9.0mg/dlPlt>30,000μl血液細胞分離儀-勿錯Kit圓盤步驟血液細胞分離-步驟↓裝圓盤↓裝Kit↓裝saline、ACD（AnticoagulantCitrateDextrose；抗凝劑）↓機器priming~排除空氣↓P＇t/donor攜帶病歷報到↓P＇t/donor躺于病床或獻血椅并蓋好被子↓量血壓、量體溫↓機器primingok↓扎針兩手臂（血管粗access、return）或一中央靜脈管（access）一手臂（return）↓確定扎針ok↓機器RUN↓設置預設值↓隨時注意access端之血量↓達到預設值↓量血壓↓移除access端↓機器Rineback~將其余血液成分回輸體內↓移除return端↓卸除kit↓處理collectproducts血液細胞分離儀-產物檢驗項目KitWBCTPEELPLRS項目DLI（DonorLymphocyteInfusion）TherapeuticLeukocytopheresis（p＇t）Granulocytapheresis（donor）PBSC（PeripheralBloodStemCell）TherapeticPlasmaExchangeTherapeticThrombocytapheresis（p＇t）ExtendedLifePlatelet（donor）Leukocyte-ReducedApheresisPlateletPreWBCWBCWBCWBCPlateletPlateletPlateletPostWBCWBCWBCWBCPlateletPlateletPlateletcollectproductsLym-SurfacemakerWBCCBC+DCCD34+CFU-CBloodculturePlateletPlateletPlateletWBC<1×106μlPRBCPriming對象→小小孩預防→因收集后導致Hb↓于RUN前用相同血型之2μPRBC先行Priming使kit中充滿RBC，使小小孩減少RBCloss＊Kit中大約130ml的血量殘留，會造成收集（移除）后Hb不變或降低

血液細胞分離-過程可能之反應血管損傷血腫血壓降低血量減少過敏溶血空氣栓塞呼吸窘迫淋巴球及血小板減少蛋白質及免疫球蛋白減少凝血因子減少最常見的為因抗凝劑（ACD）造成而有低血鈣的癥狀（如肢端、臉部麻感、肌肉震顫感、胸悶、心律不齊、休克）→需告知醫(yī)師并立即處理PBSC理想collectproducts＊通常收集2~3次達到MNC→4~8×108/kgCD34+→2.0×106/kg『MNC：MononuclearCellCD34+：CD34陽性細胞為StemCell之maker』collectbag中MNC=TotalWBC量×Totalcollect量×DC％÷P＇t體重（扣除seg及band）

CD34+以Flowcytometry檢測＊不可照光（照光-殺死Lymphocyte）PBSC冷凍自體移植異體移植→P＇t與donor時間無法配合時儀器：

Planerkyro560-16微電腦控制可程序冷凍儀

MVEXLC1200自動充填液態(tài)氮存貯系統(tǒng)PBSC冷凍

1.配制成10％DMSO：StemCell+Plasma+10mlDMSO（細胞冷凍保護劑）※StemCell+Plasma=90ml※Plasma加入DMSO前及加入Stemcell前均必須預冷（0℃）※無菌操作

可程序冷凍儀自動充填液態(tài)氮存貯PBSC解凍、回輸↓37℃水浴↓用15滴的IVset（靜脈輸注器）慢慢回輸5分鐘后再快速輸完一袋↓10分鐘輸完一袋＊快速輸完，避免細胞解凍后DMSO因高溫放出毒性毒殺細胞DMSO（細胞冷凍保護劑）

DMSO與Plasma（protein）混合會放熱而使Plasma變性，故Plasma在與DMSO混合前后均置于0℃冰水中降溫，以防混合后的放熱造成Plasma變性，因DMSO在0℃溫度以上會對細胞產生毒性，因而毒殺細胞。GVHD（graft-vs-hostdisease；移植物抗宿主疾病）最后終因感染或肝、腎功能衰竭或D