尿路惡性腫瘤尿液中的標記物

尿路惡性腫瘤尿液中的標記物第1頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一FDP：膀胱癌細胞產生血管內皮生長因子，增加外周血管的通透性，外滲的纖維蛋白原轉變?yōu)槔w維蛋白，在纖維蛋白酶作用下分解為FDP（纖維蛋白降解產物）。敏感性和特異性分別為68%、78%。端粒酶：在生殖細胞和腫瘤細胞中出現，體細胞中不表達，敏感性和特異性分別為74%、79%。第2頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一透明質酸和透明質酸酶：二者合用敏感性、特異性達92%、85%。FCM：敏感性、特異性分別為58%、83%（非整倍體細胞）。第3頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一BLCA-4：為核基蛋白的一種，對膀胱癌診斷的敏感性、特異性達96%、100%。其它標記物：細胞角蛋白、LewisX抗原、微衛(wèi)星及表面分子，如M344抗原、19A211、DD23、CD44等。第4頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一膀胱癌新的腫瘤標記物---NMP22

膀胱鏡檢+組織活檢：膀胱癌診斷的金標準缺點：侵入性，不適合大量人口普查，主觀影響因素大。尿細胞學檢查：診斷膀胱癌及術后監(jiān)測復發(fā)常用非侵入性檢查。缺點：假陰性高、敏感性差。第5頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一目前，迫切需要侵入性小，更敏感、更客觀的診斷技術。

NMPs(nuclearmatrixprotein,核基蛋白）是細胞核的動態(tài)骨架，決定細胞核的形態(tài)，維持DNA的三維結構，是細胞核的結構單位。

NMP22（NMPs的一種）是尿路上皮特異性腫瘤相關標記物。在BTCC中NMP22因腫瘤細胞凋亡由細胞核釋放進入尿中。第6頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一NMPs的生物學特性1974年Berezney和Caffy首次提出NMPs的概念。研究證明：NMPs主要由核纖層蛋白、核孔復合體、核糖蛋白網架結構構成，是細胞核內部框架結構的關鍵部分。決定胞核的形態(tài)，調控有絲分裂過程。在DNA復制，RNA合成，激素的連接，基因表達的調控中起重要作用。第7頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一NMPs與腫瘤的關系

NMPs在許多重要的生理活動中起關鍵作用，許多細胞癌變都伴隨著NMP的改變。許多腫瘤特異性NMPs被發(fā)現：Robert(1996)對癌變和正常膀胱組織進行比較后發(fā)現了6種存在于癌變組織中的蛋白，而正常組織中無表達，它們是NMPs,BLCA-1~BLCA6。第8頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一Mark(1996）對膀胱癌病人的尿液進行檢測后發(fā)現一種核基質蛋白NMP22的含量特別高，用NMP22值預測膀胱癌病人術后復發(fā)的危險性，有較高的敏感性和特異性。第9頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一NMP22的檢測

單抗的制備：膀胱癌細胞核------提純NMP22-----免疫小鼠-----獲取單抗（mAB302-22,Mab302-18)----制備酶聯(lián)免疫反應試劑盒（ELLIS）。第10頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一檢測：試劑盒（標準品、參照品、檢驗樣品）------與NMP22結合-----洗滌后與標有地高辛的單抗反應------與抗地高辛酶聯(lián)抗體反應------鄰苯二胺顯色-----與標準品吸收光度曲線比較。（抗原在尿液中的濃度直接反映于呈色強度）第11頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一臨界值的確定

David等用尿NMP22值診斷膀胱癌的研究中用6.4u/ml和10.0u/ml作臨界值，結果與膀胱鏡檢和活檢對比：敏感性特異性6.4u/ml68.2%79.8%10.0u/ml48.5%91.8%第12頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一Sinan等報道：敏感性特異性6.4u/ml88%69%10.0u/ml73%81%

美國FDA進行大量數據統(tǒng)計后，在兼顧敏感性和特異性的基礎上確定臨界值為10.0u/ml。第13頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一NMP22與其它方法的比較Craig對330名可疑病人進行尿NMP22測定、尿脫落細胞檢查與組織活檢對比：敏感性特異性P值NMP22100%85%（臨界值10u/ml)<0.001

尿脫落細胞33%100%第14頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一Albert按分期分級進行了比較：

敏感性（%)NMP22測定尿脫落細胞檢查Ta83.320.0T197.764.4G186.237.9G297.244.4G3

90.080.0第15頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一Landman等對47例證實為膀胱癌的病人，分別用NMP22、端粒酶、BTA、尿細胞學檢查進行比較（敏感性%）。NMP22和端粒酶比BTA、尿細胞學檢查具有更高的靈敏度。第16頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一

分期

分級

TaT1或更高CisG1G2G3NMP22818267698693端粒酶8091100657293BTA406433133679尿細胞學40266766379

第17頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一NMP22與膀胱癌分期分級的關系David等對臨床分期不同病人的尿NMP22值比較：例數平均值u/ml中位數u/mlP值Ta4431.18.42T16169.359.3<0.02第18頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一Miyanga等將病人分為表淺組（Tis,Ta,T1),浸潤組（T2、T3、T4）進行比較，陽性率前者為70%，后者為100%，兩組差異有統(tǒng)計學意義（P〈0.05)。第19頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一NMP22與膀胱癌分級的關系David等對分級不同病人的尿NMP22進行比較:

例數平均值u/ml中位數u/mlP值G11312.43.02<0.001(G1vsG2)G22724.29.14無顯著差異G32634.539.5<0.001(G1vsG3)第20頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一影響NMP22的因素年齡、性別、種族、吸煙等

Gennaro等報道：健康組樣本中〈50歲比〉50歲值要低，女性高于男性。與種族、吸煙無明顯相關性。不受非泌尿系良性疾病的影響：如糖尿病、心臟病、自身免疫病等。第21頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一泌尿系疾病對NMP22的影響：

Miyanaga等對面280位住院和門診病人、20位健康者進行比較：第22頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一

NMP22u/ml

陽性比陽性率中位數范圍TCC38/4780.9%40.10.0-6731.3有TCC史11/3234.4%6.10.5-555.7其它尿路癌11/2642.3%6.00.0-544.9尿結石13/2650.0%11.11.4-3207.7尿路感染19/19100%150.627.2-58228.4BPH5/3215.6%4.20.0-258.9其它疾病15/4334.9%5.00.0-206.6腎臟疾病11/4325.6%5.90.3-197.1健康者0/200.0%1.80.2-6.8第23頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一不同時段的尿液影響:Miyanaga等分別取6,12,18時,三個不同時段的尿液標本檢測,結果顯示不同時段的尿液標本值,無統(tǒng)計學差異.血尿的影響:Schacfer研究報道,尿標本中含有3.0X106/ml紅細胞時,相當于10個/HP,NMP22值很少超過10u/ml.第24頁，共27頁，2023年，2月20日，星期一血清NMP22與尿NMP22的關系:Miyanaga,Akaza等對血清,尿NMP22分別測定,結果兩者之間無顯著差異.第25頁，共27頁，2023年，2月2