生產(chǎn)、運(yùn)輸、存儲(chǔ)質(zhì)量管理

文件編號(hào)（規(guī)）-1001生殖發(fā)育與干細(xì)胞治療工程技術(shù)中心管理手冊(cè)頁號(hào)第1頁共2頁版次第一版第1次修改標(biāo)批準(zhǔn)人胡麗娜血液及生物組織質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)范2017年11月10日題頒布日期血液及生物組織質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)范一、用于細(xì)胞制劑生產(chǎn)的羊膜及臍帶所對(duì)應(yīng)的臍帶血、 骨髓及胚胎對(duì)應(yīng)的外周血必須由醫(yī)院出具合格的檢測(cè)報(bào)告。 血液檢測(cè)項(xiàng)目至少包括表一所列檢測(cè)項(xiàng)目。表一 血液全檢標(biāo)準(zhǔn)項(xiàng)目外周血臍帶血血型ABO血型需明確需明確RH血型需明確需明確乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）應(yīng)為陰性應(yīng)為陰性乙型肝炎病毒表面抗體（HBsAb）需明確需明確乙肝2對(duì)半乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）應(yīng)為陰性應(yīng)為陰性乙型肝炎病毒e抗體（HBeAb）應(yīng)為陰性應(yīng)為陰性乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb）應(yīng)為陰性應(yīng)為陰性丙型肝炎病毒抗體（HCV-Ab）應(yīng)為陰性應(yīng)為陰性※梅毒螺旋體抗體（TP-Ab）(1)應(yīng)為陰性應(yīng)為陰性人類免疫缺陷病毒抗體（HIV-Ab）應(yīng)為陰性應(yīng)為陰性巨細(xì)胞病毒抗體 IgM(CMV-IgM) 應(yīng)為陰性EB病毒衣殼抗原 IgM抗體（EBV-CAIgM） 應(yīng)為陰性EB病毒早期抗原 IgM抗體（EBV-EAIgM） 應(yīng)為陰性二、羊膜組織評(píng)估及運(yùn)輸精品文檔交流1）評(píng)估：無菌采集的羊膜組織，使用一次性無菌無熱原的塑料管盛放。盛放羊膜組織所用的塑料管必須管蓋旋緊、包裝完整，無破損，無液體泄漏；羊膜組織應(yīng)為透明或半透明狀態(tài)，略呈白色或粉紅色，應(yīng)無胎糞污染、顏色變化等異常情況。2）運(yùn)輸：膜組織采集后選擇合適的保溫箱 ,放冰袋，冷藏運(yùn)輸，盡快與質(zhì)量部進(jìn)行交接，時(shí)間控制在5小時(shí)之內(nèi)。3）初檢不合格的樣品按《不合格品的標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)程》管理。4.）血液檢測(cè)報(bào)告、羊膜合格后方可用于生產(chǎn)。質(zhì)量部負(fù)責(zé)統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)結(jié)果及整理報(bào)告，如遇結(jié)果不合格按《不合格品的標(biāo)準(zhǔn)管理規(guī)程》管理，及時(shí)通知相關(guān)部門。精品文檔交流文件編號(hào)（規(guī)）-1002生殖發(fā)育與干細(xì)胞治療工程技術(shù)中心管理手冊(cè)頁號(hào)第1頁共4頁版次第一版第1次修改標(biāo)批準(zhǔn)人胡麗娜羊膜上皮細(xì)胞采集管理規(guī)范題頒布日期2017年11月10日羊膜上皮細(xì)胞采集管理規(guī)范為規(guī)范羊膜上皮細(xì)胞采集技術(shù)的臨床應(yīng)用，保證醫(yī)療質(zhì)量和醫(yī)療安全，制定本規(guī)范。本規(guī)范適用于羊膜上皮細(xì)胞的采集、培養(yǎng)、存儲(chǔ)、運(yùn)輸。羊膜上皮細(xì)胞的采集（一）醫(yī)療機(jī)構(gòu)基本要求：采集羊膜上皮細(xì)胞的醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)保證羊膜上皮細(xì)胞來源合法，須為三級(jí)甲等醫(yī)院產(chǎn)科（二）采集環(huán)境：1）剖腹產(chǎn)手術(shù)室：有固定的羊膜采集工作區(qū)；有配備相應(yīng)的羊膜上皮采集器械及耗材。2）應(yīng)急處理區(qū)：有相應(yīng)的搶救設(shè)備，能夠進(jìn)行急癥處理。3）有資料保存與傳輸設(shè)備。（三）人員基本要求：精品文檔交流負(fù)責(zé)羊膜上皮細(xì)胞采集工作的醫(yī)師有副主任醫(yī)師以上專業(yè)技術(shù)職務(wù)任職資格，有醫(yī)院內(nèi)2名以上符合羊膜采集技術(shù)人員要求的護(hù)士， 并有滿足工作需要的其他相關(guān)專業(yè)技術(shù)人員。（四）羊膜組織的要求：1）羊膜供體的要求：產(chǎn)婦需為健康剖腹產(chǎn)者，如有傳染病史（乙肝、丙肝、梅毒、艾滋病等）則不予采集。2）羊膜的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)：要求提供與羊膜組織相對(duì)應(yīng)的臍帶血檢驗(yàn)報(bào)告，報(bào)告內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)包括：ABO血型、Rh血型需明確。②乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）應(yīng)為陰性③乙型肝炎病毒表面抗體（HBsAb）需明確④乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）應(yīng)為陰性⑤乙型肝炎病毒e抗體（HBeAb）應(yīng)為陰性⑥乙型肝炎病毒核心抗體（HBcAb）應(yīng)為陰性⑦丙型肝炎病毒抗體（HCV-Ab）應(yīng)為陰性⑧人類免疫缺陷病毒抗體（ HIV-Ab）應(yīng)為陰性⑨梅毒血清抗體檢測(cè)（TP-Ab）應(yīng)為陰性⑩EB病毒抗原IgM抗體應(yīng)為陰性精品文檔交流巨細(xì)胞病毒抗體IgM(CMV-IgM)應(yīng)為陰性（五）技術(shù)基本要求1）采集臍血：以肝素抗凝管采集臍血（5ml/支采集2支，或10ml/支采集1支），用于血型及傳染病學(xué)檢測(cè)。2）采集羊膜①戴上無菌手套，整個(gè)胎盤放置在無菌的區(qū)域。將整個(gè)胎盤的粗糙面朝下附有臍帶的光滑面朝上，使羊膜攤放在胎盤的表面上， 剪去臍帶，在胎盤表面切一個(gè)十字形切口，但不能損及胎盤組織。②從最貼近胎盤組織的底層絨毛層處， 由十字形切口中央（胎盤中部）開始剝離羊膜，將羊膜從胎盤上剝離開來。③將已剝離的羊膜放入包含羊膜組織存儲(chǔ)液的無菌 50ml離心管中，密封保存。④采集單位對(duì)羊膜組織來源信息進(jìn)行記錄。3）羊膜的存儲(chǔ)及運(yùn)輸①羊膜儲(chǔ)存實(shí)行專人管理，其他人員非經(jīng)許可不得打開專用存儲(chǔ)箱， 且箱內(nèi)不得存放無關(guān)的雜物。②采集好的羊膜時(shí)應(yīng)及時(shí)存儲(chǔ)在 2-8℃的專用箱中。箱內(nèi)應(yīng)當(dāng)安放溫度計(jì)，測(cè)量溫度范圍需符合要求。③羊膜液采集后到進(jìn)入生產(chǎn)工序前應(yīng)當(dāng)保持全程冷鏈（ 2-8℃）。精品文檔交流④羊膜運(yùn)回制備中心后，交接時(shí)應(yīng)當(dāng)檢查羊膜運(yùn)輸箱溫度是否符合要求， 儲(chǔ)存羊膜的離心管是否破損、標(biāo)簽是否完好，并填寫相應(yīng)記錄。（六）其他管理要求1）羊膜上皮細(xì)胞來源合法，建立捐獻(xiàn)者來源登記制度，保證羊膜上皮細(xì)胞來源可追溯。不得通過羊膜上皮細(xì)胞采集謀取不正當(dāng)利益， 不得泄漏羊膜上皮細(xì)胞捐獻(xiàn)者資料。2）采集羊膜上皮細(xì)胞前履行告知程序，由捐獻(xiàn)者簽署知情同意書。3）羊膜上皮細(xì)胞采集不應(yīng)當(dāng)因捐獻(xiàn)羊膜上皮細(xì)胞而損害捐贈(zèng)者相應(yīng)的正常生理功能。4）采集羊膜上皮細(xì)胞前對(duì)捐贈(zèng)者進(jìn)行必要的檢查，防止患者因羊膜上皮細(xì)胞移植感染其它疾病。艾滋病病毒感染者或者艾滋病患者、 肝炎病毒攜帶者、梅毒患者等患有經(jīng)血液傳播疾病者和惡性腫瘤、 遺傳性血液疾病患者等的羊膜上皮細(xì)胞不得用于羊膜上皮細(xì)胞移植。5）有完善的質(zhì)量保障體系。精品文檔交流文件編號(hào)（規(guī)）-1003生殖發(fā)育與干細(xì)胞治療工程技術(shù)中心管理手冊(cè)頁號(hào)第1頁共2頁版次第一版第1次修改標(biāo)批準(zhǔn)人胡麗娜羊膜上皮細(xì)胞存儲(chǔ)管理規(guī)范題頒布日期2017年11月10日羊膜上皮細(xì)胞存儲(chǔ)管理規(guī)范羊膜上皮細(xì)胞的存儲(chǔ)（一）羊膜上皮細(xì)胞的存儲(chǔ)要求1）用于保存羊膜上皮細(xì)胞標(biāo)本、羊膜上皮細(xì)胞和試劑的冰箱及冷凍箱不能用于其它用途。保存羊膜上皮細(xì)胞的設(shè)備必須放在安全的地方， 存放地點(diǎn)由專人負(fù)責(zé)。2）液氮庫應(yīng)設(shè)置在通風(fēng)良好的環(huán)境中，并有保證工作人員的安全防護(hù)措施。液氮庫應(yīng)有防止和處理液氮泄漏措施。3）在拿取羊膜上皮細(xì)胞時(shí)，必須盡量減少溫度的變化。4）發(fā)生意外事故導(dǎo)致羊膜上皮細(xì)胞轉(zhuǎn)移和變更存放地點(diǎn)時(shí)，必須有書面記載。（二）監(jiān)控和報(bào)警系統(tǒng)1）在氣相中保存羊膜上皮細(xì)胞的容器必須有溫度連續(xù)監(jiān)控系統(tǒng)，并且至少每 24小時(shí)記錄一次溫度。2）液氮罐必須有保證液氮水平面的系統(tǒng)。標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程中必須有明確規(guī)定。3）羊膜上皮細(xì)胞保存設(shè)備必須有連續(xù)報(bào)警系統(tǒng)。精品文檔交流4）報(bào)警系統(tǒng)應(yīng)以聲光電方式及時(shí)通知到相關(guān)管理人員。5）報(bào)警參數(shù)的設(shè)定必須能使工作人員有足夠的時(shí)間處理羊膜上皮細(xì)胞。6）必須定期檢查報(bào)警系統(tǒng)的功能。檢查記錄必須保存，并應(yīng)便于檢查。精品文檔交流文件編號(hào)（規(guī)）-1004生殖發(fā)育與干細(xì)胞治療工程技術(shù)中心管理手冊(cè)頁號(hào)第1頁共2頁版次第一版第1次修改標(biāo)批準(zhǔn)人胡麗娜羊膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)管理規(guī)范題頒布日期2017年11月10日羊膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)管理規(guī)范羊膜上皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及凍存（一）羊膜細(xì)胞的分離1）將羊膜組織以生理鹽水反復(fù)清洗，去除殘留血液及粘液。2）將羊膜置于胰酶中，37℃溫浴后震蕩，使羊膜細(xì)胞從組織上脫落。去除羊膜組織，收集羊膜細(xì)胞，經(jīng)過濾、清洗，將細(xì)胞重懸于培養(yǎng)基中。取樣計(jì)數(shù)，按照一定細(xì)胞密度接種于培養(yǎng)瓶，放入 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。(二)羊膜細(xì)胞的培養(yǎng)及傳代1）根據(jù)P0代細(xì)胞貼壁及增殖狀態(tài)，每 2-3天予以換液。2）當(dāng)細(xì)胞增殖貼壁擴(kuò)增基本完成時(shí)，細(xì)胞需傳代或凍存。傳代細(xì)胞經(jīng)過生理鹽水清洗及胰酶消化、培養(yǎng)基終止消化后，計(jì)數(shù)，再按照一定密度接種到新的培養(yǎng)瓶中，放入37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（三）羊膜細(xì)胞的凍存：1）細(xì)胞經(jīng)清洗、消化及終止消化后，計(jì)數(shù)，離心去上清。精品文檔交流2）采用冷凍保護(hù)液，按照一定的細(xì)胞密度將細(xì)胞重懸后轉(zhuǎn)入凍存管中，經(jīng)程序降溫后轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期保存。3）羊膜上皮細(xì)胞必須使用符合標(biāo)準(zhǔn)的程控降溫儀或 -80℃冰箱進(jìn)行冷凍降溫。4）冷凍的羊膜上皮細(xì)胞必須在專門的冷凍管中密封存儲(chǔ)，并保存于專門的液氮罐內(nèi)。以上所有操作均需操作者記錄相應(yīng)的信息，經(jīng)復(fù)核后將記錄歸檔保存。精品文檔交流文件編號(hào)（規(guī)）-1005生殖發(fā)育與干細(xì)胞治療工程技術(shù)中心管理手冊(cè)頁號(hào)第1頁共3頁版次第一版第1次修改標(biāo)批準(zhǔn)人胡麗娜羊膜上皮細(xì)胞運(yùn)輸管理規(guī)范題頒布日期2017年11月10日羊膜上皮細(xì)胞運(yùn)輸管理規(guī)范羊膜上皮細(xì)胞的運(yùn)輸（一）冷凍羊膜上皮細(xì)胞的運(yùn)輸：1）同一羊膜上皮細(xì)胞庫內(nèi)的運(yùn)輸：在同一羊膜上皮細(xì)胞庫內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)或使用冷凍的羊膜上皮細(xì)胞時(shí)，必須有安全轉(zhuǎn)運(yùn)規(guī)程以保證羊膜上皮細(xì)胞的完整性和運(yùn)送人的安全。2）羊膜上皮細(xì)胞庫與其他機(jī)構(gòu)間的運(yùn)輸①在運(yùn)輸冷凍羊膜上皮細(xì)胞的過程中， 必須有安全運(yùn)輸規(guī)程以保證羊膜上皮細(xì)胞的完整性和運(yùn)送人的安全。②必須盡量縮短羊膜上皮細(xì)胞在羊膜上皮細(xì)胞庫與其他機(jī)構(gòu)間的運(yùn)輸時(shí)間。 必須具有備用運(yùn)輸計(jì)劃，以防止羊膜上皮細(xì)胞運(yùn)輸中發(fā)生的緊急或意外情況。③保存在-135℃以下的低溫羊膜上皮細(xì)胞的運(yùn)輸必須使用裝有液氮的容器， 容器內(nèi)必須裝有足量的液氮。保證即使超過預(yù)定到達(dá)時(shí)間 48小時(shí)，容器內(nèi)溫度仍能保持在-135℃以下。④運(yùn)輸方式必須符合與運(yùn)輸此類物品相關(guān)的法規(guī)。精品文檔交流⑤運(yùn)輸容器的標(biāo)記必須符合與所使用的低溫材料和運(yùn)輸生物物質(zhì)有關(guān)的法規(guī)。⑥應(yīng)對(duì)運(yùn)輸信息進(jìn)行記錄，并歸檔保存。⑦羊膜上皮細(xì)胞離開羊膜上皮細(xì)胞庫后， 該份羊膜上皮細(xì)胞的有關(guān)資料應(yīng)在系統(tǒng)中消除。(二)羊膜細(xì)胞制劑的運(yùn)輸：1）制劑運(yùn)輸時(shí)所需設(shè)備及儀器①運(yùn)輸箱：采用經(jīng)過驗(yàn)證證明保溫性良好的運(yùn)輸箱。②無線監(jiān)控器（溫濕度、行蹤）。2）胞制劑運(yùn)輸要求細(xì)胞制劑長(zhǎng)途運(yùn)輸需低溫保存，短途可常溫保存。運(yùn)輸箱內(nèi)溫度不得低于2℃，高于30℃。每次運(yùn)輸過程的溫度需保持相對(duì)穩(wěn)定。須對(duì)細(xì)胞制劑運(yùn)輸過程的溫濕度及運(yùn)行路線進(jìn)行全程監(jiān)控。3）無線監(jiān)控器全程由電腦進(jìn)行監(jiān)控，由專人負(fù)責(zé)。若溫度出現(xiàn)異常監(jiān)控人員需立即通知運(yùn)輸人員采取緊急處理措施。4）運(yùn)輸結(jié)束細(xì)胞制劑交接前，運(yùn)輸人員需先確認(rèn)運(yùn)輸過程溫度是否在 2～30℃允許范圍。確認(rèn)無誤后方可進(jìn)行細(xì)胞交接。5）運(yùn)輸過程溫度監(jiān)控記錄，由專人定期歸檔保存。6）若出現(xiàn)溫度偏差，及時(shí)處理，并形成溫度偏差記錄，及時(shí)上報(bào)。精品文檔交流7）無線監(jiān)控器應(yīng)定期校驗(yàn)。生殖發(fā)育與干細(xì)胞治療工程技術(shù)中心管理手冊(cè) 文件編號(hào) （規(guī)）-1006精品文檔交流頁號(hào)第1頁共2頁版次第一版第1次修改標(biāo)批準(zhǔn)人胡麗娜羊膜上皮細(xì)胞制劑使用管理規(guī)范題頒布日期2017年11月10日羊膜上皮細(xì)胞制劑使用管理規(guī)范羊膜上皮細(xì)胞制劑屬于生物組織制品類， 為保障使用安全及患者利益，在臨床使用過程中需嚴(yán)格遵守本規(guī)范。1、每份羊膜上皮細(xì)胞制劑都應(yīng)附帶血液指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果（具體見表一），如果未附帶有血液指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果則視為不合格產(chǎn)品，不能使用。2、患者在使用羊膜上皮細(xì)胞制劑前，均需完善相關(guān)血液指標(biāo)檢測(cè)，內(nèi)容同表一。3、羊膜上皮細(xì)胞制劑應(yīng)用于患者前應(yīng)詳細(xì)告知患者可能的風(fēng)險(xiǎn)和獲益。4、羊膜上皮細(xì)胞制劑應(yīng)用于患者前需對(duì)雙人核對(duì)患者信息、醫(yī)囑等資料，嚴(yán)格執(zhí)行三查七對(duì)。5、羊膜上皮細(xì)胞制劑應(yīng)用于患者前需對(duì)提供的小樣進(jìn)行血液指標(biāo)檢測(cè)，結(jié)果無異常后方可使用。6、羊膜上皮細(xì)胞制劑應(yīng)用完畢后，應(yīng)再次對(duì)殘留羊膜上皮細(xì)胞制劑進(jìn)行血液指標(biāo)檢測(cè)并保存裝羊膜上皮細(xì)胞制劑的袋子。表一 血液指標(biāo)檢測(cè)項(xiàng)目項(xiàng)目ABO血型血型RH血型乙型肝炎病毒表面抗原（ HBsAg）乙型肝炎病毒表面抗體（ HBsAb）乙肝2對(duì)半乙型肝炎病毒 e抗原（HBeAg）乙型肝炎病毒 e抗體（HBeAb）精品文檔交流乙型肝炎病毒核心抗體（ HBcAb）丙型肝炎病毒抗體（ HCV-Ab）※梅毒螺旋體抗體（ TP-Ab）(1)人類免疫缺陷病毒抗體（ HIV-Ab）巨細(xì)胞病毒抗體 IgM(CMV-IgM)EB病毒衣殼抗原 IgM抗體（EBV-CAIgM ）EB病毒早期抗原 IgM抗體（EBV-EAIgM）精品文檔交流重醫(yī)附二醫(yī)院生殖發(fā)育與干細(xì)胞治療工程技術(shù)中心細(xì)胞制劑申請(qǐng)單申請(qǐng)單位申請(qǐng)人患者姓名性別年齡科室及病區(qū)住院號(hào)ID號(hào)用途□輔助治療□臨床研究申請(qǐng)日期組織來源□臍帶□骨髓□胚胎□羊膜細(xì)胞類型□UC-MSCs□BMSCs□hRPC□hRPE□hAECs制劑規(guī)格□50ml/袋□5ml/支□1ml/支□500μl/支細(xì)胞數(shù)量□_____X107，共____袋□_____X106，共____支使用途徑□靜脈滴注□局部注射□血管介入治療□其他備注轉(zhuǎn)換中心聯(lián)治療時(shí)間系人聯(lián)系電話品文檔交流重醫(yī)附二醫(yī)院生殖發(fā)育與干細(xì)胞治療工程技術(shù)中心品名： iCELLTM人羊膜上皮細(xì)胞（hAECs）