dd四次實(shí)驗(yàn)血鈣血磷測(cè)定

dd四次實(shí)驗(yàn)血鈣血磷測(cè)定第1頁(yè)/共19頁(yè)(一)實(shí)驗(yàn)原理

血清中鈣離子在堿性溶液中能與甲基麝香草酚藍(lán)染料結(jié)合，生成有色復(fù)合物。第2頁(yè)/共19頁(yè)(二)試劑顯色試劑堿性試劑標(biāo)準(zhǔn)液MTB8-羥基喹啉

乙醇胺

碳酸鈣

2.50mmol/L工作液：顯色試劑與堿性試劑等量混合第3頁(yè)/共19頁(yè)(三)操作1.檢測(cè)參數(shù)主波長(zhǎng)：612nm溫度：室溫。2.空白管標(biāo)準(zhǔn)管樣本管工作液2.0ml去離子水20ul）工作液2.0ml工作液2.0ml鈣標(biāo)準(zhǔn)液20ul血20ul第4頁(yè)/共19頁(yè)3.分別混勻各管，室溫放5分鐘，

以空白管校零，記錄各管吸光度。4.結(jié)果鈣(mmol/L)=樣本管吸光度標(biāo)準(zhǔn)管吸光度×標(biāo)準(zhǔn)液濃度第5頁(yè)/共19頁(yè)(四)臨床意義1.參考值：2.1—2.9mmol/L。生命危急值：1.7mmol/L，3.3mmol/L。2.增高：甲旁亢、多發(fā)性骨髓瘤、VitD增多癥、代酸等3.降低：甲旁減、尿毒癥、佝僂病等。第6頁(yè)/共19頁(yè)(五)方法評(píng)價(jià)1.重復(fù)性、準(zhǔn)確度較好、簡(jiǎn)便、易于自動(dòng)化。2.線性：在樣本濃度0-3.75mmol/L范圍內(nèi),

線性良好。3.精密度：批內(nèi)CV≤5％。批間相對(duì)誤差≤54.易受干擾。第7頁(yè)/共19頁(yè)

三、無(wú)機(jī)磷的測(cè)定磷鉬酸還原法臨檢中心推薦染料結(jié)合法氧化酶法同位素質(zhì)譜法決定性方法原子吸收光譜法第8頁(yè)/共19頁(yè)(一)實(shí)驗(yàn)原理：

血清中無(wú)機(jī)磷在酸性溶液中與鉬酸銨反應(yīng)生成在340nm處有吸收峰的磷鉬酸銨，其吸光度的變化與無(wú)機(jī)磷含量成正比。第9頁(yè)/共19頁(yè)(二)試劑磷試劑硫酸220mmol/L鉬酸銨1.0mmol/L表面活性劑適量校準(zhǔn)液：磷酸二氫鉀1.29mmol/L防腐劑適量第10頁(yè)/共19頁(yè)(三)測(cè)定步驟

混勻，以37℃10’在340nm波長(zhǎng)處比色。結(jié)果無(wú)機(jī)磷含量=A樣本/A校準(zhǔn)×C校準(zhǔn)

空白管校準(zhǔn)管標(biāo)本管磷試劑純化水校準(zhǔn)液標(biāo)本(ml)1.01.01.00.020.020.02第11頁(yè)/共19頁(yè)(四)臨床意義1.參考值：成人：0.97-1.62mmol/L兒童：1.45-2.10mmol/L2.增高：甲旁減、慢性腎炎晚期、多發(fā)性骨髓瘤、骨折愈合期等。3.減低：甲旁亢、腎小管變性病變時(shí)等。第12頁(yè)/共19頁(yè)(五)方法性能精密度:批內(nèi)變異CV≤5％。線性范圍:

0-4mmol/L。第13頁(yè)/共19頁(yè)三、試劑空白測(cè)定

1.定義：用蒸餾水調(diào)零測(cè)定僅僅未加樣品的試劑管，用以扣除試劑干擾對(duì)結(jié)果所造成的系統(tǒng)誤差。本次實(shí)驗(yàn)用鈣離子測(cè)定的方法進(jìn)行試劑空白實(shí)驗(yàn)。第14頁(yè)/共19頁(yè)2.操作試劑空白標(biāo)準(zhǔn)管測(cè)定管工作液2.0ml2.0ml2.0ml標(biāo)準(zhǔn)液-----0.02ml-----蒸餾水0.02ml----------標(biāo)本----------0.02ml室溫放5分鐘，以蒸餾水調(diào)零，612nm測(cè)定。第15頁(yè)/共19頁(yè)計(jì)算

空白值=空白OD/標(biāo)準(zhǔn)OD×標(biāo)準(zhǔn)濃度樣本值=×標(biāo)準(zhǔn)濃度樣本OD-空白OD標(biāo)準(zhǔn)OD-空白OD第16頁(yè)/共19頁(yè)3.試劑空白的選擇原則（1）試劑中某組分在測(cè)定波長(zhǎng)下對(duì)光有吸收；（2）被測(cè)試樣本身在測(cè)定波長(zhǎng)下沒(méi)有光吸收；（3）被測(cè)試樣中的其他成分與顯色劑作用后在測(cè)定波長(zhǎng)下沒(méi)有光吸收；（4