生物材料檢驗考試重點

.生物材料檢驗第一章緒論1、生物材（biologicalmaterial體體液（如血液泌物（唾液、乳汁、汗液泄（如呼出氣、尿液發(fā)、指甲以及組織（脂肪組織）等的總稱。2、生物材檢（Analysisofbiological生物材料中化學(xué)物質(zhì)及其代謝產(chǎn)物、或由化學(xué)物質(zhì)引起機體產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng)指標(biāo)變化的檢驗法的科學(xué)。3、物測biologicalmonitoring）系統(tǒng)收集人體生物材料樣品，定期檢測其中毒物或其代謝產(chǎn)物的含量或由它們所引起的效應(yīng)水，以評價人體接觸化學(xué)物質(zhì)的程度及對健康的影響。4、環(huán)境監(jiān)（environmentalmonitoring強調(diào)空氣等外環(huán)境中有害物質(zhì)的含量水平價是毒物的外量水平。5、物志（biomarker）一般指生物系統(tǒng)接觸外源性物質(zhì)后出現(xiàn)的一種改變，主要是化學(xué)物質(zhì)在生物體內(nèi)形成的代謝產(chǎn)，以及可測定的生化、生理、免疫、細胞或分子的變化，主要用于接觸評價、健康危害評價以及臨床診斷等?？煞譃榻佑|性生物標(biāo)志物、效應(yīng)性生物標(biāo)志物和敏感性生物標(biāo)志物。生標(biāo)物分①觸生標(biāo)物:測定組織、體液或排泄物中吸收的化學(xué)物、其代謝產(chǎn)物或內(nèi)源性物質(zhì)的反應(yīng)產(chǎn)物，作為吸收劑量或靶劑量的指標(biāo)，提供關(guān)于接觸外源性化學(xué)物的信息。②應(yīng)生標(biāo)物:同健康危害或疾病有關(guān)的可測定性的生化、生理、行為以及其它生物學(xué)變化。如接觸苯出現(xiàn)再生障礙性貧血時各項血液學(xué)檢查指標(biāo)，中毒性肝病和腎病患者各項肝腎功能檢查指標(biāo)等。③感生標(biāo)物:關(guān)于個體對外源性化學(xué)物的生物易感性的指標(biāo)。指機體先天固有或后天獲得的對外界有害因素所引起的有害效應(yīng)的反應(yīng)能力。敏感性的生物標(biāo)志物可用于篩檢易感人群，保護高危人群。6、物觸值biologicallimit,對生物材料中有害物質(zhì)或其代謝產(chǎn)物規(guī)定的最高容許濃度，或某些效應(yīng)指標(biāo)改變所容許的濃度圍，相當(dāng)于健康工人吸入或接觸車間空氣最高容許濃度的毒物時，生物材料中被測物的含量水平。美國稱生物接觸指數(shù)BEI)，國稱生物學(xué)耐受(。7、常考（normalreferencerange無明顯肝、腎及血液系統(tǒng)疾病和無職業(yè)有害因素接觸史的“健康正常人”的生物材料樣品中某成分的含量或生化指標(biāo)值。8、混合呼氣mixedexpiredgas力吸氣后用最大力量呼出氣至不能再呼出氣為止所呼出的全部氣體。終呼氣endexpired先盡力吸氣，在平和呼出氣后再盡力呼出氣至不能呼出氣為止的最后一段呼出氣。接觸毒物時混合呼出氣中毒物濃度高于終末呼出氣，停止接觸毒物后則相反9、驗標(biāo)擇本求1.特性：果特異性不好，可考慮選用兩個或兩個以上指標(biāo)行檢驗。如氯乙烯，檢測血、尿、呼出氣中的氯乙烯，也可檢測其代謝產(chǎn)物尿中亞硫基二乙酸。2.具有好劑效應(yīng)系：劑量與外接觸量，內(nèi)劑量與生物學(xué)效應(yīng)。如鉛、、與血鉛有良好的劑量關(guān)系，血鉛與環(huán)境中的鉛有良好的劑量反應(yīng)關(guān)系。3.穩(wěn)定好在定時間內(nèi)可以穩(wěn)定不變化.

.4.有準(zhǔn)可的驗法、生材檢指的類化物質(zhì)原形：檢測方法的特異性分：特異性指標(biāo)，鉛、汞；非異性指標(biāo)，苯、甲苯化物質(zhì)代謝產(chǎn)物

如、甲苯（馬尿酸乙烯（硫代二乙酸）生物效應(yīng)指標(biāo)：據(jù)化學(xué)物質(zhì)進入機體后，在體內(nèi)的某些生化、生理行為或其他方面的改變選擇適當(dāng)?shù)男?yīng)指標(biāo)。如鉛、有機磷、致癌物與靶分子的結(jié)合產(chǎn)物、降解產(chǎn)物。、生接限（指職業(yè)接觸毒物后，未產(chǎn)生有害效應(yīng)時，機體內(nèi)存在的毒物和毒物代謝的最高容許含量，或由們所致的無害性效應(yīng)指標(biāo)的最高容許水平。、基劑（benchmarkdose,BMD根據(jù)有毒物質(zhì)的某種接觸劑量可引發(fā)某種不良健康效應(yīng)的反應(yīng)率發(fā)生預(yù)期變增高范圍通常為1%~10%而推算出的一種劑量。、生物材料檢驗指標(biāo)的選擇原則：特異性好；具有良好的劑-效應(yīng)關(guān)系；穩(wěn)定性好；有準(zhǔn)確可靠的檢測方3.生物材檢指的類物材料檢驗指標(biāo)主要有以下三個方面：(1)生材料中化學(xué)物質(zhì)原形的檢驗：(2)生材料中化學(xué)物質(zhì)代謝產(chǎn)物的檢驗：(3)生物效應(yīng)指標(biāo)的檢驗：14.物樣品的選擇原則(1)選用的生物材料中被測物的濃度與環(huán)境接水平或與健康效應(yīng)有劑量相關(guān)關(guān)系；(2)樣品和待測成指標(biāo)足穩(wěn)定以便于運輸和保存；(3)采集生物樣品對人體無損害，能為受檢者接受。目用得最多的生物材料是尿液，其次是血液和呼出氣。①尿：集方便、無損傷、易被受檢者接受，能采集較大量樣品。②血液：特別是靜脈血，是最為理想的生物材料檢驗樣品。③頭發(fā)：樣品穩(wěn)定性好，易保存④呼出氣：可連續(xù)采樣，樣品中干擾物質(zhì)少。、尿??????.

尿樣可分為全日尿（小尿尿隨機尿和定時尿，如班前尿、班中尿、班末尿、班后尿等。隨機尿樣：收取方便，但由于尿中待測物濃度波動較大，分析結(jié)果往往不能反映實際情況小時尿：較好反及代產(chǎn)的泄和體內(nèi)量，得果受些分排無律影，不飲和汗影，收小時樣麻，夏尿易敗晨尿：收集受檢者早晨起床后的第一次尿樣進行分析，對多數(shù)測定能反映實際情況，收集方便應(yīng)用最多晨尿、隨機尿和定時尿收集比較容易，但因尿樣比重變化而引起測定結(jié)果偏差較大，故需用尿重或尿肌酐法校正被測物的濃度。對作業(yè)工人進行生物監(jiān)測時，可根據(jù)化學(xué)物質(zhì)的生物半減期、檢驗要求和生物標(biāo)志物的特點，擇班前、班中、班后尿或晨尿。

?

.班前：進入工作崗位前一小時；班中：開始工作后小時至下班前小時；班末：下班前小時之內(nèi)；班后：下班后1小之。尿測結(jié)的種正法校正方法有比校法肌酐正法種。(1)比重正：尿中被測物濃度校正為標(biāo)準(zhǔn)比我規(guī)定尿樣的標(biāo)準(zhǔn)比重為下的濃度，校正公式為：校C×（1.020-1.000）（）=CK式中C校經(jīng)正后尿中待測成分的濃(測的尿中待測成分的(為國采用的尿的標(biāo)準(zhǔn)比重；d--實測得的尿樣比重K--正尿比1.020系數(shù)。(2)肌酐正：在一般情況下飲食、飲水量和利尿劑對肌酐的排出率沒有太大影響，健康人一天排尿所排出的酐量變化很小，一般在1.8g左。因此，可用經(jīng)尿液排出1g肌酐所相應(yīng)的待測成分的量來表示尿中待測物濃或經(jīng)尿液排出肌所相應(yīng)的待測成分的量來代表全天尿中待測成分的含量。校正公式為：尿待成濃（mgg肌酐=實測度mg/L／酐度g/L)尿待成濃（mgd）實測度mg/L）／酐度(g/L)×例：取混勻尿樣25ml經(jīng)酸高酸消化后，用10ml雙硫腙三氯甲烷液萃取，測得萃取液中鉛濃度0.30mg/ml，同時測得該尿樣的肌酐濃度為1.5g/L試計算該尿樣的鉛含(以肌和表。、呼氣采方：???

塑料袋：可收集混合氣體和末端氣。注射器操作簡單，但不便保存，且只適合于高含量樣品的集。玻璃管：主要采集末端氣。采集呼出氣，應(yīng)先深吸一口清潔空氣，屏氣約10秒呼出，用密閉性良好的采氣管收集混氣或末端呼出氣。并記錄采樣點的氣溫和氣壓。、無物析樣處基要：①避免待測元素損失及污染；②盡可能減少化學(xué)試劑的用量；③操作簡便、省時；④待測組分回收率達到分析要求；⑤操作過程安全性高1、釋.名）???

有的樣品可不經(jīng)過復(fù)雜的預(yù)處理過程，可用水、稀酸溶液、含表面活性劑（—）或有機溶劑的水溶液簡單稀釋后進行。2、提法.

???

.用硝酸、鹽酸、三氯乙酸等酸溶液直接從樣品中提取待測成分，不需完全破壞有機物，只需將測成分定量轉(zhuǎn)移到溶液中，故所用實際量少，處理過程簡單，處理條件溫和，空白值低且造成待測成分損失或污的可能性小。例如：用1%的酸浸提糞便中的鋅；三氯乙酸溶液不僅可以沉淀血清蛋白還可以從中提取鐵等種金屬元素。1）硝提取，測定血鉛6mol/L硝離取上清液。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)被測成分的含量是已知的2，酸提取3，氯乙酸（固體（效）提+2價3、消解法名）絕大多數(shù)生物材料檢驗樣品都是以有機物為基體的，元素存在于有機物質(zhì)內(nèi)部，不僅不能對元進行測定，有機物還可能對測定產(chǎn)生干擾，最有效的方法就是將有機物徹底分解破壞，將生物材料樣品轉(zhuǎn)化為無機物消解。分為干灰化和濕消兩。???

干化是在供給能量的前提下接利用氧以氧化分解樣品中有機物的方法溫爐干灰化法最常用般步驟：干燥、碳化、灰化和溶解灰分）濕消又稱濕消解法，是利用氧化性酸和氧化劑對有機物進行分解破壞的一種方法。常用的氧化性酸和化劑有H2SO4HNO3、、解）4、波解利用微波作為加熱源進行消解。仍屬于濕法消化。5、分法利用酶分解蛋白質(zhì)而進行樣品處理的方法稱為酶分解法。、有物析品預(yù)理（一）頂空法：用于氣象色分析的樣品預(yù)處理技術(shù)，有靜態(tài)和動態(tài)頂空之分，靜態(tài)空使最多。即將樣品于一密閉系統(tǒng)中，在一定溫度下恒溫一定時間后，抽取樣品上層氣相進樣進行氣相色譜分析。動頂法將少樣品置于一個密閉的容器中，適當(dāng)加熱后并向液體連續(xù)吹入氮氣，將易揮發(fā)的成分吹入一個濃縮富集管中，然后熱解吸后進樣色譜分析。（二）水蒸氣蒸餾法：適于離純化揮發(fā)性化合物（三）溶劑萃取法是利用待測組分與樣品的干擾雜志在互不相溶的兩種溶劑中的分配系數(shù)不同而達到分離。（四）固相萃取法將樣品溶液導(dǎo)入預(yù)先經(jīng)活化過的固相萃取柱，待測組分通過吸附、分配或離子交換等唄固相萃柱保留，而其他雜質(zhì)組分不被保留，殘存在柱上的雜質(zhì)組分用適宜溶劑沖洗掉。（五）固相微萃取法（六）液相微萃取法（七）其他提取方法、鉛代過、物志鉛?.

理化性質(zhì)：（）藍色或銀灰色的軟金屬，四乙基鉛曾作為油防爆劑，是大氣鉛污染的主要來源之一。

?1)2)3)

.代謝和生物監(jiān)測指標(biāo)鉛及其化合物可通過呼吸道、消化道吸收，少數(shù)化合物可通過皮膚吸收。吸收的鉛很快進入血液并分布到各個軟組織，以肝、腎、肺的濃度最高，以后又重新分布，主進入礦化組織，如骨骼和牙齒。血鉛濃度常代表近期的環(huán)境暴露水平，進入血液的鉛約96%存在于紅細胞。鉛主要通過糞、尿排出另外也可通過乳汁、唾液、汗液排出。血和鉛鉛觸鉛荷主生監(jiān)指。鉛度被用衡鉛暴水。鉛度測體鉛負的好標(biāo)1、吸收1）呼吸道：鉛塵煙汽2)化道：鉛塵3）皮膚，無機物不吸收機鉛化合物可被吸收（四乙基鉛）2、分析：起始分布在血中有與紅細胞結(jié)合最終主要以磷酸鹽沉積于血管中，其次是肝腎腦等3、生物效應(yīng)：抑制血紅蛋白的成1）抑制5—氨基乙酰丙酸脫水，導(dǎo)致血尿中-ALA增加）抑制糞川啉元氧化酶3）抑制亞螯合酶4、排除：吸收的鉛主要經(jīng)尿排，尿鉛生物半減期較長。鉛觸生監(jiān)指1、血鉛：直接反映近期接觸鉛情況2、尿鉛：反應(yīng)機體中鉛的負荷，是鉛中毒的輔助診斷指標(biāo)3、生物效應(yīng)指標(biāo)：）尿中σ—ALA）血中鉛原卟啉?

樣品采集及保存1、樣收一次尿樣，測量比重，如不能立即分析，按1%的比例加入硝酸，在冰箱內(nèi)可保存2周2、樣采梢血常取于手指或耳垂，在皮膚上迅速針刺一定深度，讓血自然流出，不宜用力擠壓，免組織液稀釋血液影響結(jié)果。?

尿鉛和血鉛的測定1、硫腙比色法是定尿鉛和血鉛的經(jīng)典分析方法，只需一臺可見光分光光度計便可。但是接觸氰鉀和三氯甲烷等有害物質(zhì)。2、萃取火原子吸收光譜法3、墨爐原子吸收光譜法只需將尿樣和血樣稀釋后便可直接測定。（一）石墨爐原子吸收光譜法注意事項：（）體改進的作用：由于尿樣組分復(fù)雜不恒定，故常在尿樣中加入基體改進（磷酸二銨抗壞酸能有效地克服基體干擾。（）景吸收減免：裝有塞曼效應(yīng)或自吸效應(yīng)背景校正的儀器均能正確地扣除景。、尿的定一、接觸途徑：①鋅礦的開采及冶煉②工業(yè)上含鎘材料的生產(chǎn)③農(nóng)業(yè)上也有鎘化合物的應(yīng)用二、代謝和生物監(jiān)測指標(biāo)（一）代謝吸、呼吸道和消化道.

.生效應(yīng)：急性中毒靶器官：肺慢中毒靶器官：肺、腎、骨排少量由尿排出，屬于蓄積性元素（）物測標(biāo)1、鎘：反長接情血：反近接情血和尿中鎘的測定：（一）火焰原子吸收分光光度法（二）石墨爐原子吸收分光光度法（）微分電位溶出法基改劑2%磷氫二銨溶液（含1%酸同測鉛的體進：化膠溶采用氯化鈀與硝酸鎂做基體改進劑使灰化溫度提高，從而降低基體干擾、一化中含輕度一氧化碳中毒：血HbCO濃可達10%中度一氧化碳中毒：血HbCO濃可達30%重度一氧化碳中毒：血HbCO濃可達60%、血碳血蛋的定一)理血液中含有四種血紅蛋白成分,還原血紅蛋(、氧合血紅蛋HbO2氧血紅蛋白HbCO及微量高鐵血紅蛋白（MetHb用還原劑連二亞硫酸鈉將HbO2和MetHb還成Hb，此時血液中只含有Hb和兩成分。HbCO在420nm波下有最大吸收峰，Hb在430nm長下有最大吸收峰，測定受檢血樣在這兩個波長下的吸光度值，代入含和HbCO吸系數(shù)的公式中，即可求得HbCO的分濃度。檢出下限為2％氧血紅蛋白。測定范圍為％～7、二化代謝及生物監(jiān)測指標(biāo)（一）代謝1、收：呼吸道、皮膚2、物轉(zhuǎn)化

）吸收后約70~90%轉(zhuǎn)為多種代謝產(chǎn)物2）前接者尿已認的3種、基-2-噻唑酮-5，硫（中究少生半期為2h）3）出：a.謝產(chǎn)物隨尿排出

約20~30%以形從呼吸道排出

c.約以形從尿中排出（）物測標(biāo)1、中：末尿2、出氣中目前研究較少我國二硫化碳的生物接觸限值為工作末班尿1.5mmol/mol肌2.2mg/g肌酐國ACGIH的物接觸指數(shù)為末班尿0.5mg/g肌，德國為。、尿的定砷鈰化比色法測定尿碘．原:采用過硫酸銨溶液在100℃件將尿樣消化，利用碘對砷鈰氧化還原反應(yīng)的催化作用：.

.HAsOCe3

4

HAsOe234

3

H

反應(yīng)中黃色的Ce4+被還成無色的Ce3+，碘含量越高，反應(yīng)速度越快，剩余Ce4+越。制反應(yīng)溫度和時間，測定420nm波長下體系中剩余Ce4+的吸光度，即可求出碘含量。本方法最低檢測濃度為

3

g/

(尿樣0.25ml)；線性范圍0~300μg/L2.說明(1)碘對砷鈰應(yīng)的催化作用受度和反應(yīng)時間的影響較大，為使測定結(jié)果恒定，應(yīng)在恒溫水浴中進行，用秒表準(zhǔn)確計時，嚴格控制反應(yīng)時間。(2)加入馬錢子堿的作用是終止化反應(yīng)I催化劑。、尿的定氟子擇極?

原理：氟離子選擇電極（指示電極）與含氟離子的待測液和甘汞電極（參比電極）組成電池，該電池電動勢在—定條件下與溶液中氟離子活度的對數(shù)呈直線關(guān)系，可通過測定標(biāo)準(zhǔn)溶液和試液的電池電動勢，求出溶液中離子的濃度。、硫氰酸鹽的測定主要有氣色法離色法分光法、維素D血中25（）D的含更適合作為價人體維生素是缺乏的指標(biāo)血清中25（的量低于—維生素D缺血清中25（的量20--29ng/mL——生素D不血清中25（的量高于—保證維素D充分滿各項生理功能需要血清中25（的量超過—可能產(chǎn)毒性、負試評人維素C營養(yǎng)況具體法??

受試者口服維生素5mg收集服維生素后4小內(nèi)全部尿樣，測定其中維生素C含。評價標(biāo)準(zhǔn)為排出維生素C小為生素缺乏5-13mg為格，大于為充裕。、苯生監(jiān)指反，反黏酸）苯巰基尿酸S-PMA）苯在機體內(nèi)具有較強特異性和較高敏感性的代謝產(chǎn)物，是較理想的職業(yè)苯接觸生物標(biāo)志物。尿中苯酚、呼出氣的苯含量也可以作為苯接觸的另一個生物監(jiān)測指標(biāo)。、甲和甲代和物測標(biāo)1）謝(1)甲苯約原型呼出約從中排出②約代謝甲苯[O]苯甲酸→馬尿酸馬尿排出的半減期為2~3人。(2)二甲苯①原從肺中呼出②60%~80%物轉(zhuǎn)化主要終產(chǎn)物是甲基馬尿酸2）物監(jiān)測指標(biāo)(1)甲苯①尿馬酸特異性對群體判斷有一定的定義②呼出氣體甲苯為確認.

.(2)二甲苯：尿馬酸常人尿中無甲基馬尿酸特異性指標(biāo)、多芳??

人尿中羥芘是多環(huán)芳烴一個靈敏有效的生物監(jiān)測指標(biāo)，但是其不是苯并芘的直接謝產(chǎn)物，用-羥芘只能間接地監(jiān)測苯并芘的生物暴露水平。3-羥苯芘是苯芘的主要代謝產(chǎn)物，通過檢測尿液中的3-羥苯芘，可以更直接的反應(yīng)的露情況和致癌風(fēng)險。、苯中輕度中毒時，血液中高鐵血紅蛋白總量在左右。中度中毒時，血液中高鐵血紅蛋白總量達以中度中毒時，高鐵血紅蛋白達50%以。硝基苯中毒也可引起高鐵血紅蛋白含量增加。、氯烯生檢指??

終末呼出氣中氯乙烯濃度為其接觸的特異性指標(biāo)。尿中的硫代二乙酸刻作為氯乙烯生物接觸指