國(guó)內(nèi)原發(fā)性肝癌的中醫(yī)藥動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用的組方和方法

國(guó)內(nèi)原發(fā)性肝癌的中醫(yī)藥動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用的組方和方法第一頁(yè)，共22頁(yè)。教師提出的問題國(guó)內(nèi)原發(fā)性肝癌的中醫(yī)藥動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用了哪些組方或方法，與臨床報(bào)道異同，為什么？我們發(fā)現(xiàn)的問題

我們的分工

成高雅葛程金文玉—國(guó)內(nèi)原發(fā)性肝癌的中醫(yī)藥動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用了的組方或方法

顧婷婷司嘉琪奚善君許贇姣—這些實(shí)驗(yàn)中采用的方法與臨床報(bào)道異同2第二頁(yè)，共22頁(yè)。文獻(xiàn)檢索所采用的具體方法我們采用以下關(guān)鍵詞在CNKI以及VIP等數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行了大量文獻(xiàn)檢索原發(fā)性肝癌、辨證論治、證候

大鼠、小鼠、證候動(dòng)物模型、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)同時(shí)，我們還參閱了《中醫(yī)內(nèi)科學(xué)》等課本進(jìn)行參照進(jìn)一步分析討論

3第三頁(yè)，共22頁(yè)。中草藥中成藥國(guó)內(nèi)原發(fā)性肝癌的中醫(yī)藥動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用的組方和方法清熱解毒活血化瘀軟堅(jiān)散結(jié)收斂固澀健脾理氣補(bǔ)益氣血滋養(yǎng)肝陰活血化瘀健脾理氣清熱解毒消癥散結(jié)祛邪：扶正：4第四頁(yè)，共22頁(yè)。1.祛邪：清熱解毒：

半枝蓮、白花蛇舌草、蒲公英、冬凌草等

活血化瘀：

桃仁、丹參、赤芍、八月札、茵陳、郁金、柴胡、莪術(shù)等

軟堅(jiān)散結(jié)：鱉甲、牡蠣、山慈菇等

收斂固澀:椿皮、烏梅、山茱萸等

中草藥5第五頁(yè)，共22頁(yè)。2.扶正：健脾理氣：黃芪、白芍、白術(shù)、薏苡仁、神曲、法夏、云苓等；補(bǔ)益氣血：

黃芪、肉桂、紅參、茯苓、白術(shù)、甘草、熟地、白芍、川芎、當(dāng)歸滋養(yǎng)肝陰：生地、鱉甲、牡蠣、女貞子

6第六頁(yè)，共22頁(yè)。常用方劑：健脾理氣方

（黨參、白術(shù)、茯苓、八月札、甘草等）；

補(bǔ)脾益氣方（四君子湯加黃芪）；

十全大補(bǔ)湯

（黃芪、肉桂、紅參、茯苓、白術(shù)、甘草、熟地、白芍、川芎、當(dāng)歸）；

扶正抑瘤方

（黃芪、靈芝、女貞子、山藥）；

養(yǎng)陰柔肝方

（由北沙參、麥冬、鱉甲、當(dāng)歸等18味中藥組成）；

百合地黃湯

（百合、地黃）。2.扶正：7第七頁(yè)，共22頁(yè)。3.扶正祛邪合用：溫陽散結(jié)：

人參、附子、黃芪、白術(shù)、川椒、

莪術(shù)、青皮、白芍、甘草等解毒消癥飲:

白花蛇舌草、山慈姑、夏枯草、苦參復(fù)肝春六號(hào):

黃芪、女貞子、牡蠣、鱉甲、莪術(shù)、白花蛇舌草、薏苡仁、半枝蓮、桔梗等

8第八頁(yè)，共22頁(yè)。3.扶正祛邪合用：

扶正化瘀319方:

由蟲草菌絲、桃仁、丹參等6味中藥組成扶正抗癌方:

西洋參、白術(shù)、鰲甲、穿山甲、急性子、石見穿、龍葵、漏蘆、核桃樹枝等養(yǎng)陰解毒方:

北沙參、蟲草菌絲、七葉一枝花和莪術(shù)等9第九頁(yè)，共22頁(yè)。中成藥活血化瘀：大黃螫蟲丸、鱉甲煎丸健脾理氣：益氣免疫沖劑（四君子湯加減）清熱解毒，消癥散結(jié)：清肝消癥丹（成分：蟾蜍、蟑螂等）解毒散結(jié)、活血化瘀：鱉甲煎丸和大黃蟄蟲丸聯(lián)合蟾蜍制劑疏肝理氣，化瘀通絡(luò)，健脾和胃：肝康寧（成分：螺旋藻粉、菊花、陳皮、山楂）解毒，消腫，止痛：華蟾素（成分：干蟾皮提取物）10第十頁(yè)，共22頁(yè)。國(guó)內(nèi)原發(fā)性肝癌中醫(yī)藥動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用方法舉例不同治則對(duì)DEN誘發(fā)大鼠肝癌作用的比較研究動(dòng)物造模及分組：Wistar大鼠，雄性，體重100—120g，自由飲用60—80ppmDEN水溶液，直到24周末實(shí)驗(yàn)結(jié)束。將70只大鼠隨機(jī)分為7組，每組10只，分別為正常組、模型組、西藥組、全方組、清熱組、活血組、健脾組。西藥組加用西藥FT-207；全方組加用清熱解毒、活血健脾理氣中藥，全方由清熱、活血、健脾方合并而成；清熱組用清熱解毒中藥，清熱方由半枝蓮、白花蛇舌草等組成；活血組用活血化癖中藥，活血方由桃仁、丹參等組成；健脾組用健脾理氣中藥，健脾方由黃芪、白術(shù)等組成。中藥的制備與給藥方法：中藥水煎劑按2：3比例兌入乙醇，4°C靜置48h，過濾，濃縮至1ml含2g生藥，4°C存放。FT-207用雙蒸水溶解，4°C存放。各組藥物均于下午19時(shí)加入飲水中給藥。劑量均為成人單位體重的10倍量。不同治法對(duì)大鼠肝癌相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄作用的研究11第十一頁(yè)，共22頁(yè)。肝癌動(dòng)物模型二乙基亞硝胺（DEN）誘發(fā)大鼠肝癌：取體重250g左右的封閉群大白鼠，雌雄不拘。按性別分籠飼養(yǎng)。除給普通食物外，飼以致癌物，即用0.25轓水溶液灌胃，劑量為10mg/kg，每周一次，其余5天用0.025轓水溶液放入水瓶中，任其自由飲用。共約4個(gè)月可誘發(fā)成肝癌?；騿斡?.005%摻入飲水中口吸服8個(gè)月誘發(fā)肝癌。4-2甲基氨基氮苯（DBA）誘發(fā)大鼠肝癌：2-乙酰氨基酸（2AAF）誘發(fā)大鼠肝癌：亞胺基偶氮甲苯（OAAT）誘發(fā)小鼠肝癌：12第十二頁(yè)，共22頁(yè)。國(guó)內(nèi)原發(fā)性肝癌中醫(yī)藥動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用方法舉例大黃螫蟲丸對(duì)荷瘤小鼠免疫作用的研究藥物制備：取大黃螫蟲丸(上海雷允上藥業(yè)有限公司提供，生產(chǎn)批號(hào):040501)置煎煮容器內(nèi)，加適量的冷水浸泡1～2h，煮沸30min，過濾。藥渣加3～5倍量水繼續(xù)煎煮，煮沸20min，過濾。合并兩次濾液，于水浴上濃縮成相當(dāng)于原生藥材1g/mL的藥液，冷卻裝人滅菌藥瓶，置4℃冰箱備用。實(shí)驗(yàn)方法

造模方法：無菌條件下取生長(zhǎng)7～9d傳代接種的H22細(xì)胞株，將細(xì)胞5x106接種于每只小鼠右側(cè)腋窩皮下。

動(dòng)物分組及給藥方法：小鼠30只，10只作為正常組，其余均按上法造模。小鼠接種腫瘤5d后，隨機(jī)分成對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，每組10只，對(duì)照組予以生理鹽水處理，實(shí)驗(yàn)組給予大黃蟄蟲丸水煎液1g/mL該劑量通過LD50確定，均灌胃0.2mL/只，連續(xù)給藥15d。13第十三頁(yè)，共22頁(yè)。國(guó)內(nèi)原發(fā)性肝癌中醫(yī)藥動(dòng)物實(shí)驗(yàn)采用方法舉例清熱解毒和補(bǔ)益中藥對(duì)小鼠腹水肝癌H22細(xì)胞的作用及免疫學(xué)機(jī)制選擇冬凌草、半枝蓮為清熱解毒中藥代表藥，并與補(bǔ)益代表藥黃芪進(jìn)行比較將50只KM小鼠隨機(jī)分為模型組、冬凌草組、半枝蓮組、黃芪組和熱休克處理對(duì)照組(熱休克組)。在活體肝癌H22腹水細(xì)胞腹腔接種后當(dāng)天，冬凌草組、半枝蓮組和黃芪組分別以30、15、15g·kg-1·d-1的劑量灌胃給藥，連續(xù)12d；熱休克組小鼠以43℃熱處理20min，每4天1次，共3次；模型組不予任何處理。12d后處死小鼠．分別抽取腹水制片，光鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，并采用免疫組化法檢測(cè)腹水CD4+、CD8+T細(xì)胞表達(dá)。14第十四頁(yè)，共22頁(yè)。這些實(shí)驗(yàn)研究中存在的異同肝癌小鼠造模的不同給藥方式的不同抑癌扶正行氣活血方(半枝蓮、白花蛇舌草、桃仁、丹參、黃芪、白術(shù)等),清熱方(半枝蓮、白花蛇舌草等)、活血方(桃仁、丹參等)、健脾方(黃芪、白術(shù)等)。采用標(biāo)準(zhǔn)的水煎醇沉工藝制備的中藥及西藥加工混合于喂養(yǎng)大鼠的顆粒飼料中，作為一種治療方式。用清熱解毒、活血化安和健脾益氣方藥治療時(shí)，將中藥水煎劑提醉、過濾、濃縮后加入飲水中給藥。大黃螫蟲丸對(duì)荷瘤小鼠免疫作用的研究中，水煎液1g/mL該劑量通過LD50確定，均灌胃0.2mL/只，連續(xù)給藥15d。用清熱解毒、疏肝理氣、活血化瘀治法組方時(shí)，可以通過采用灌胃的給藥方式。肝康寧和華蟾素可用局部注射的給藥途徑。15第十五頁(yè)，共22頁(yè)。國(guó)內(nèi)原發(fā)性肝癌的中醫(yī)藥動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的治法與臨床異同動(dòng)物實(shí)驗(yàn)臨床試驗(yàn)同清熱解毒：半枝蓮、白花蛇舌草、蒲公英、冬凌草活血化瘀：大黃螫蟲丸，莪術(shù)、三棱、郁金、赤芍、桃仁健脾理氣：以四君子湯為基礎(chǔ)方，如益氣免疫沖劑（四君子湯加減），健脾理氣方（黨參、白術(shù)、茯苓、八月札、甘草等），補(bǔ)脾益氣方（四君子湯加黃芪）滋補(bǔ)肝陰肝血：生地、女貞子、鱉甲、當(dāng)歸所用的經(jīng)方：四君子湯、小柴胡湯、四君子湯加減選用華蟾素注射液異滋陰涼血、清熱潤(rùn)肺的百合地黃湯自擬方劑如扶正化瘀319方、扶正抑瘤方等收澀類中藥化濕以毒攻毒疏肝理氣滋補(bǔ)肝陰肝血選用的方劑范圍更大，使用的中藥更多更復(fù)雜16第十六頁(yè)，共22頁(yè)。臨床用藥與實(shí)驗(yàn)研究藥物的異同及其可能原因臨床上，治療原發(fā)性肝癌以經(jīng)方、名方偏多,出現(xiàn)頻次最多的前20種依次排列如下:一貫煎、逍遙散、茵陳蒿湯、四君子湯、龍膽瀉肝湯、膈下逐瘀湯、柴胡疏肝散、補(bǔ)中益氣湯、小柴胡湯、香砂六君子湯、參苓白術(shù)散、茵陳五苓散、六君子湯、血府逐瘀湯、知柏地黃湯。而在已有實(shí)驗(yàn)中，我們確實(shí)可以看到對(duì)于四君子湯、小柴胡湯等的實(shí)驗(yàn)研究，但是對(duì)于臨床上的常用方的研究并不全面。17第十七頁(yè)，共22頁(yè)。臨床用藥與實(shí)驗(yàn)研究藥物的異同及其可能原因而我們所查找到的文獻(xiàn)中，有相當(dāng)數(shù)量的文獻(xiàn)進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的是一些上市成藥如復(fù)肝春6號(hào)、木回春片、自制中藥復(fù)方等。我們小組討論認(rèn)為可能與以下原因有關(guān)：新藥的研發(fā)與推廣需要研究的難易度（實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的難度、結(jié)果獲取難易度、成效的預(yù)期等因素）科研的一些其他軟硬件問題（如經(jīng)費(fèi)、科研設(shè)施、研究人員等）18第十八頁(yè)，共22頁(yè)。在中醫(yī)藥動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中應(yīng)注意的問題中醫(yī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究應(yīng)以中醫(yī)理論為指導(dǎo)中醫(yī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究應(yīng)從中醫(yī)臨床出發(fā)中醫(yī)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究應(yīng)突出中醫(yī)治療原則中醫(yī)動(dòng)物模型不能照搬西醫(yī)動(dòng)物模型19第十九頁(yè)，共22頁(yè)。中醫(yī)藥動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究的發(fā)展趨勢(shì)隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，實(shí)驗(yàn)研究越來越受到人們的重視。經(jīng)過近幾十年的不懈努力，我國(guó)目前已建立中醫(yī)動(dòng)物模型150余種，這僅僅是初步的探索，還有待于進(jìn)一步研究。中醫(yī)藥只有通過大量實(shí)驗(yàn)研究，借用現(xiàn)代醫(yī)學(xué)先進(jìn)技術(shù)和方法，才能使中醫(yī)藥逐漸發(fā)揚(yáng)光大，逐步走向世界，為人類健康事業(yè)做出更大貢獻(xiàn)。20第二十頁(yè)，共22頁(yè)。參考文獻(xiàn)1.包素珍等.中國(guó)中醫(yī)藥科技[J].百合地黃湯對(duì)肝癌H22荷瘤小鼠抑瘤作用的實(shí)驗(yàn)研究.2006.13（5）:332.2.管冬元等.上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)[J].不同治法對(duì)大鼠肝癌相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄作用的究.2001.9（15）:41-46.3.王洪濤等.河北中醫(yī)[J].原發(fā)性肝癌中醫(yī)辨治體會(huì).2009，31（8）:1168-1169.張軍民，張會(huì)民，賈紅敬，現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生[J].中西醫(yī)結(jié)合治療原發(fā)性肝癌51例療效觀察.2007，23（10）:1524-1525.4.閆建國(guó)等.中西醫(yī)結(jié)合肝病雜志[J].中醫(yī)對(duì)原發(fā)性肝癌的辨證研究及治療.2010；20（3）:189-1905.李大鵬等.今日藥學(xué)[J].原發(fā)性肝癌的中醫(yī)藥治療研究新進(jìn)展臨床研究.2008，18（3）:13-15.6.劉慶等.中西醫(yī)結(jié)合學(xué)報(bào)[J].原發(fā)性肝癌的中醫(yī)治法與方藥.2005，3（4）:260-262.7.姜?jiǎng)倥?中醫(yī)雜志[J].原發(fā)性肝癌的中醫(yī)治則治法與方藥芻議.2010，（51）:93~94.8.王洪琦等.廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)[J].清熱解毒和補(bǔ)益中藥