HIV檢測及臨床意義

關(guān)于HIV檢測及臨床意義第1頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第2頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第3頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第4頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第5頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第6頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第7頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第8頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月中國每年新發(fā)現(xiàn)的HIV/AIDS

病例數(shù)（1985~2002）第9頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第10頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第11頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第12頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第13頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第14頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第15頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第16頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第17頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第18頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第19頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第20頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第21頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第22頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第23頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第24頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第25頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第26頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第27頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月HIV的檢測第28頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月HIV感染可通過兩種途徑檢測直接檢測病毒或其組成部分檢測人體HIV免疫反應(yīng)——HIV特異性抗體從感染到血清抗體陽轉(zhuǎn)有一段窗口期，平均為1-3個月，有一小部分HIV感染者出現(xiàn)延遲反應(yīng)第29頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月HIV感染后抗原和抗體的變化

及其與疾病關(guān)系HIV感染人體后出現(xiàn)一過性病毒血癥，6-8周后血清抗體陽轉(zhuǎn)，病毒滴度降低，在隨后的5-8年無癥狀帶毒期里HIV抗體一直存在，但病毒難查到。進入AIDS期后血漿中病毒再次出現(xiàn)。故診斷HIV感染多數(shù)時間用抗體檢測診斷，極早期（窗口期）用抗原檢測。第30頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月HIV抗體診斷 目前臨床上實際應(yīng)用的是測定特異性HIV抗體，包括初篩和確認實驗。第31頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月一、檢測試劑篩查試劑必須是HIV-1/2混合型、經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局注冊批準、批批檢合格、臨床評估質(zhì)量優(yōu)良、在有效期內(nèi)的試劑。目前常用的篩查試劑有酶聯(lián)免疫、顆粒凝集和其它快速診斷試劑。采供血機構(gòu)進行血液篩查應(yīng)采用酶聯(lián)免疫試劑。自采自供血的單位必須進行HIV抗體檢測，在尚未建立艾滋病篩查實驗室的偏遠地區(qū)可由經(jīng)過培訓的技術(shù)人員在規(guī)定的場所用快速試劑進行血液篩查。第32頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月2、確認試劑必須經(jīng)國家藥品監(jiān)督管理局注冊批準。確認試劑包括免疫印跡試驗、條帶免疫試驗及免疫熒光試驗試劑。目前以免疫印跡試劑最為常用。第33頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月ELISA方法： 目前最常用的初篩實驗，自1985年首次檢測HIV-1抗體的試劑盒供市以來，已從第一代的全病毒抗原間接法發(fā)展到第四代的以重組的多肽抗原及抗P24抗體包被的雙夾心法，使窗口期縮短了2-3周。第34頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月四代艾滋病酶聯(lián)免疫試劑比較solidphasespecificdetectionofconjugate第一代病毒裂解液HIV-1IgG抗體HIV-1-IgG抗體第二代病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1/-2IgG抗體HIV-1/-2IgG抗體第三代病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1/-2/-OIgM/IgG抗體HIV-1/-2/-O病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1/-2/-O第四代病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1/-2/-Oanti-p24AbIgM/IgG抗體HIV-1/-2/-Op24抗原病毒裂解液重組抗原合成肽HIV-1/-2/-Oanti-p24抗體第35頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月檢測結(jié)果的報告和處理陰性反應(yīng)出具HIV抗體陰性報告，如果近期有高危行為，如性亂、注射毒品等，或有急性流感樣癥狀等情況，為排除“窗口期”的可能，可以進行HIV-1P24抗原或HIV核酸檢測，或2－3個月以后再做抗體檢測。篩查實驗呈陽性發(fā)現(xiàn)反應(yīng)，可出具“HIV抗體待復查”的報告，不能出陽性報告。第36頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月樣本初篩檢測一陰一陽均陽性反應(yīng)陰性報告送確認重復檢測陰性報告均陰性反應(yīng)陽性反應(yīng)原有試劑＋另一種原理初篩試劑選用初篩試劑陰性反應(yīng)HIV抗體初篩檢測流程圖第37頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月快速診斷試劑：采用乳膠凝集、免疫斑點和免疫層析三種原理快速、不需特殊儀器敏感度、特異度低于ELISA，且價格貴適用于血站覆蓋不到的邊遠地區(qū)/城市大醫(yī)院急診手術(shù)前檢查快速診斷陽性結(jié)果還需經(jīng)ELISA方法驗證第38頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月HIV抗體確認常用的確認實驗方法是免疫印跡法（WB）。免疫印跡試劑有HIV-1/2混合型和單一型。一般先用HIV-1/2混合型試劑進行檢測第39頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月蛋白印跡實驗（WB）

——廣泛使用的確認實驗用聚丙烯酰胺凝膠電泳將純化的HIV蛋白抗原分開后轉(zhuǎn)移到硝酸纖維膜上。標本中存在的HIV抗體與條帶上的抗原結(jié)合，再加入酶偶聯(lián)的抗人IgG抗體和底物，在抗原抗體結(jié)合的部位會出現(xiàn)有色條帶其可檢測標本中針對HIV不同抗原的抗體，故被用做確認試劑。不同的研究機構(gòu)有不同的判定標準第40頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月

HIV抗體確認檢測流程圖免疫印跡法(HIV1/2混合型)HIV-1陽性反應(yīng)可疑反應(yīng)出現(xiàn)HIV-2指帶HIV-1陽性報告可疑反應(yīng)陽性反應(yīng)陰性反應(yīng)報告HIV-2血清學陽性反應(yīng)報告必要時測核酸陰性報告免疫印跡法（HIV-2）每3個月隨訪一次，共2次，仍屬可疑，則作陰性報告如隨訪期間出現(xiàn)陽性反應(yīng)則報告陽性陰性反應(yīng)陰性報告

第41頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月

P24抗原測定（一）適用范圍HIV-1抗體不確定或窗口期的輔助診斷。HIV-1陽性母親所生嬰兒的鑒別診斷。第四代HIV-1抗原/抗體ELISA試劑檢測呈陽性反應(yīng)，但HIV-1抗體確認陰性者的診斷。監(jiān)測病程進展和抗病毒治療效果。第42頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）結(jié)果報告和解釋

1、HIV-1P24抗原的陽性結(jié)果必須經(jīng)過中和試驗確認。2、HIV-1P24抗原陽性僅作為HIV感染的輔助診斷依據(jù)，不能依此確診。3、HIV-1P24抗原陰性結(jié)果只表示在本試驗中無反應(yīng)，不能排除HIV感染。第43頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月HIV核酸檢測

第44頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月第45頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月PCR對與縮短窗口期病毒抗體試驗PCR縮短HCV82天23天72﹪HBV59天34天41﹪HIV22天11天50﹪第46頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月1、輔助診斷某些非典型的抗體反應(yīng)，特別是不確定反應(yīng)時，RNA的測定可提供非常有用的證據(jù)。單純使用RNA測定不能完全確定感染與否，但當RNA測定出現(xiàn)較高拷貝數(shù)的陽性結(jié)果時（>1000）提示感染發(fā)生的可能性非常大。使用此指標應(yīng)綜合其他檢測數(shù)據(jù)和樣品背景情況進行綜合分析與判斷。第47頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月2、窗口期輔助診斷在窗口期抗原峰出現(xiàn)前后通常出現(xiàn)一個病毒載量的高峰，通常此高峰高于發(fā)病時的血漿病毒水平，早期病毒RNA測定具有特殊的意義。目前國際上正在嘗試使用這種檢測對采供血樣品進行多個樣品混合后的RNA檢測以降低窗口期傳播的殘余危險度。第48頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月3、病程監(jiān)控由于HIV感染發(fā)生后病毒載量的變化具有一定規(guī)律，并且這種變化與疾病的進程有著密切的相關(guān)性。通常在感染后無癥狀期內(nèi)發(fā)生的臨床癥狀很難與AIDS發(fā)病時的癥狀區(qū)別，病毒載量測定可以幫助醫(yī)生判斷一個剛發(fā)生的癥狀是否與HIV感染有關(guān)。第49頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月4、指導治療方案及療效測定并非在任何情況下感染者都應(yīng)該進行抗病毒治療，這不但是經(jīng)濟上的原因，更重要的是在于抗病毒藥物的副作用和療效。通常在病毒載量達到一定水平后（如>35000-50000拷貝/毫升）才具有良好的效果。只有通過治療后病毒水平的檢測才能確定治療是否有效，通常治療后病毒水平降低50%才被認為臨床有效。第50頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月艾滋病免疫指標的檢測

第51頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月隨著政府加速對國產(chǎn)抗艾滋病藥物上市的批準，我國艾滋病人的治療已經(jīng)出現(xiàn)了曙光。艾滋病臨床治療中各種免疫指標(CD4+、CD8+T細胞等)對于確定感染狀態(tài)、預(yù)測發(fā)病、評價藥物療效及新藥開發(fā)具有重要的作用。第52頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月CD4T淋巴細胞：（流式細胞術(shù)）

CD4T細胞是HIV的主要靶細胞,感染后隨著病程進展，CD4T細胞不斷下降

<500/mm3——有臨床診斷意義

<200/mm3——AIDS病程進展，AIDS診斷和療效觀察的指標第53頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月HIV感染幾周內(nèi)，出現(xiàn)類流感癥狀，也稱為血清陽轉(zhuǎn)期，CD4細胞的數(shù)量降低。隨之出現(xiàn)的免疫應(yīng)答可以控制急性癥狀，恢復CD4細胞的數(shù)量，但并不能清除病毒。隨著CD4細胞不斷下降，當降至500/ul左右時，開始出現(xiàn)機會性感染或其它疾病，進入癥狀期。當CD4低于200/ul時，即進入艾滋病期。第54頁，課件共61頁，創(chuàng)作于2023年2月CD4+T淋巴細胞小于350/ul（結(jié)合病毒載量，確定治療時機）有效治療8周后CD4+T淋巴細胞數(shù)量