抗體的人工制備抗

8.3抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用抗原抗體反應(yīng)及應(yīng)用抗體的人工制備8.3.1抗原抗體反應(yīng)的原理與特點8.3.2常用免疫分析方法8.3.3抗體的人工制備8.3.1隨著診斷治療等對抗體的大量需求，人工制備抗體已經(jīng)越來越重要。用抗原免疫動物，可獲得含特異性抗體的血清，即抗血清。其抗體由多個抗原決定簇刺激不同B細(xì)胞克隆產(chǎn)生，故稱多克隆抗體。單克隆抗體（MAb）是指由單一B細(xì)胞克隆合成并分泌的一種組成均一的免疫球蛋白分子，簡稱單抗。抗血清的人工制備動物的選擇抗原與免疫動物的種屬差異越遠(yuǎn)越好抗血清量的需要多則選大動物，少則選小動物免疫的方法一般采用多點注射，一只動物注射總數(shù)約為8~10點，抗原使用劑量應(yīng)考慮免疫原性性強弱、分子量大小和免疫時間等。小鼠皮下注射動物采血法：如抗血清鑒定合格，應(yīng)在末次免疫后5~7天及時采血。頸動脈放血法，最常用的方法；心臟采血法，適合于小動物；靜脈多次采血法，反復(fù)多次可大量采血?？寡宓蔫b定動物血采集后，立即分離出血清，此抗血清在保存或應(yīng)用前，必須作效價和特異性鑒定?？寡宓谋４?℃保存，除菌后加入0.1%~0.2%NaN3防腐，液體狀態(tài)保存于普通冰箱，可以存放3個月到半年。低溫保存，－20℃~－40℃，一般可保存5年，但應(yīng)防止反復(fù)凍融。降冰凍干燥，水分不應(yīng)高于0.2%，封裝后可以長期保存，一般在冰箱中5~10年內(nèi)效價不會明顯降低。單克隆抗體的制備技術(shù)雜交瘤技術(shù)原理MAb特異性是針對一個抗原決定簇的，它是B細(xì)胞克隆的標(biāo)志，但是B細(xì)胞并不是長壽命的細(xì)胞。將分泌抗體但不能長期培養(yǎng)的B細(xì)胞與能長期體外培養(yǎng)但不能分泌抗體的瘤細(xì)胞融合，篩選出既能分泌抗體又能長期體外培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，然后單克隆化，并擴大培養(yǎng)，從而進(jìn)行單抗生產(chǎn)。單抗制備技術(shù)流程單克隆抗體在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用單克隆抗體具有純度高、特異性強、效價高、等優(yōu)點，在生物、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域極具應(yīng)用價值。診斷各類病原體：這是單抗應(yīng)用最多的領(lǐng)域，已有大量商品化診斷試劑。腫瘤特異性抗原和腫瘤相關(guān)抗原的檢測：用于腫瘤的診斷、分型及定位。檢測淋巴細(xì)胞的表面標(biāo)志：用于區(qū)分細(xì)胞亞群和細(xì)胞分化階段。機體微量成分的測定。基因工程抗體迄今所獲單克隆抗體多為鼠源性，人體應(yīng)用后可導(dǎo)致人抗鼠抗體反應(yīng)，使其體內(nèi)的應(yīng)用受到嚴(yán)重限制。隨DNA重組技術(shù)發(fā)展，使得有可能制備部分或全人源化的基因工程抗體，如人-鼠嵌合抗體、改型抗體、雙特異性抗體、小分子抗體等?；蚬こ炭贵w人－鼠嵌合抗體鼠源V區(qū)或Fab＋人源C區(qū)或Fc

改型抗體或稱CDR移植抗體以鼠源CDR替換人源CDR雙特異性抗體異源性H2/L2小分子抗體Fab、Fv、單鏈抗體、單域抗體、最小識別單元（CDR）美羅華，利妥昔單抗注射液——一種針對CD20的人鼠嵌合抗體。雙特異性抗體抗腫瘤示意尼妥珠單抗，一種針對表皮生長因子受體（EGFR）的人源單抗。課后思考題名詞解釋：抗血清單克隆