人乳頭瘤病毒HPV核酸檢測對比分析

關(guān)于人乳頭瘤病毒HPV核酸檢測對比分析第1頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月宮頸癌婦科第二大癌癥每年約有20余萬婦女死于宮頸癌新發(fā)病:全球---50萬/年我國---13.2萬/年第2頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月姓名：哈拉爾德·楚爾·豪森國籍：德國民族：日耳曼課題：發(fā)現(xiàn)人乳頭瘤病毒（HPV）引發(fā)宮頸癌成績：獲得2008年度諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎HaraldzurHausen宮頸癌第3頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月什么是HPV？HumanPapillomavirus

人乳頭瘤病毒雙鏈DNA無包膜病毒廣泛分布于高等脊椎動物定向感染皮膚及粘膜的復(fù)層鱗狀上皮HPV病毒電鏡照片第4頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月Circular逆轉(zhuǎn)錄區(qū)域包括控制病毒基因組復(fù)制的基因序列E6、E7為兩種致癌蛋白編碼，它們是高危型HPV導(dǎo)致細(xì)胞變性的主要原因E1、E2、E4和E5負(fù)責(zé)病毒復(fù)制L1、L2為兩種病毒外殼蛋白編碼在預(yù)防HPV的疫苗中使用了L1第5頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月HPV的類型已經(jīng)鑒定的乳頭狀瘤病毒有200多種與人有關(guān)的約125種30-40種感染生殖道低危型：HPV6、11、42、43、44等中間型：HPV31、33、35、39、51、52、58、59、68高危型：HPV16、18、45、56等臨床最重要的型：6、11、16、18、31、33、35、38型8個亞型第6頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月HPV感染第7頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月HPV感染的途徑和危險因素性傳播直接皮膚接觸母嬰傳播性行為混亂免疫抑制吸煙其他STD協(xié)同感染口服避孕藥第8頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月HPV感染率與發(fā)病率HPV感染與宮頸癌發(fā)病率變化圖，IntJCancer1993,53:919第9頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月HPV感染的不同階段第10頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月宮頸癌的癌前病變(CIN)CIN=CervicalIntraepithelialNeoplasia宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變CIN宮頸不典型增生宮頸原位癌：宮頸上皮細(xì)胞發(fā)生癌變，但癌變未突破基底膜、間質(zhì)無浸潤。輕度（CINⅠ級）：病變局限在上皮層的1／3內(nèi)中度（CINⅡ級）：病變局限在上皮層的下2／3重度（CINⅢ級）：病變幾乎累及全部上皮層，僅剩1－2層表面的正常鱗狀上皮宮頸上皮細(xì)胞部分或大部分被不同程度異型細(xì)胞所替代定義第11頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月宮頸癌的癌前病變(CIN)第12頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月專家共識宮頸癌的“元兇”就是高危型HPV感染高危型HPV感染是宮頸癌的必要條件沒有HPV感染，就沒有宮頸癌防治HPV感染，就是防治宮頸癌1995年，國際癌癥研究協(xié)會認(rèn)為高危固定價HPV的持續(xù)性感染是宮頸癌的主要病因第13頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月宮頸癌感染HPV病毒CIN早期浸潤癌唯一知道病因的癌癥唯一可以通過早期干預(yù)阻斷的癌癥

5-15年第14頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月內(nèi)容HPV與宮頸癌宮頸癌檢測方法比較HPV核酸檢測方法學(xué)比較臨床使用第15頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月分子水平細(xì)胞水平組織水平宮頸癌檢測方法學(xué)發(fā)展過程第16頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月1982年醋酸、碘液肉眼檢測靈敏度為70.9%特異度為74.3%1996年新柏氏TCT靈敏度為80.8%特異度為

51-60%2000年HPV核酸檢測靈敏度為98.6%特異度為99%巴氏涂片靈敏度為50%以下特異度為？%1941年宮頸癌篩查發(fā)展史第17頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月組織學(xué)檢測肉眼觀察陰道鏡觀察組織檢查優(yōu)點：操作簡單，價格低廉，

適宜作初步篩查；缺點：準(zhǔn)確率低，人員素質(zhì)

要求高，病人痛苦程度大。第18頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞學(xué)檢測傳統(tǒng)巴氏涂片液基細(xì)胞學(xué)

傳統(tǒng)巴氏涂片（CV）液基薄層細(xì)胞學(xué)技術(shù)(TCT)自動細(xì)胞學(xué)檢測系統(tǒng)（LCT）計算機輔助細(xì)胞檢測系統(tǒng)（CCT）第19頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞學(xué)檢測的假陰性液基細(xì)胞學(xué)檢測假陰性結(jié)果高達(dá)20%水平差的地方更高原因分析：1、視野局限

2、人為因素

1）取標(biāo)本、片子制備

2）技術(shù)差異

3）耐心、責(zé)任心第20頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞學(xué)檢測的假陽性1、凹空細(xì)胞是HPV感染的主要形態(tài)學(xué)改變，但不是特異性改變2、HPV正在清除階段第21頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月細(xì)胞學(xué)檢測的性價比低TCT陰性要求每年做同樣的檢查HPV陰性可以把篩查時間延長到3-5年HPV檢測TCT檢查衛(wèi)生部《宮頸癌篩查及早診早治指南》第22頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月核酸檢測直接檢查導(dǎo)致宮頸癌的元兇---HPV病毒靈敏度高，特異性好操作簡便，可作為療效評估和監(jiān)測指標(biāo)第23頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月宮頸癌篩查三方案最佳方案：HPV核酸檢測+液基細(xì)胞基本方案：醋酸白實驗一般方案：HPV核酸檢測+傳統(tǒng)巴氏涂片中國癌癥研究協(xié)會推薦方法第24頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月第25頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月內(nèi)容HPV與宮頸癌宮頸癌檢測方法比較HPV核酸檢測方法學(xué)比較臨床使用第26頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月HPV第一代核酸檢測產(chǎn)品產(chǎn)品：HC2、港龍13型原理：雜交捕獲技術(shù)特點：檢測核酸、不分型、不能科學(xué)定量、檢測時間長計算機判讀15minDNA-RNA雜交60min抗體捕獲60min化學(xué)發(fā)光檢測30minDNA分解45min第27頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月HPV核酸第二代檢測產(chǎn)品產(chǎn)品：凱普21型、亞能23型、透景26型、達(dá)安19型、港龍29型原理：膜條雜交、液相雜交特點：可以分型，而且高低危都能做需要雜交、時間長。5-10個小時不等。開放式雜交、極易導(dǎo)致實驗室生物污染。結(jié)果需肉眼判讀，增加人為誤差。不能定量第28頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月HPV核酸第三代檢測方法產(chǎn)品：上海之江13型分型檢測試劑原理：分別采用HPV13種型別的特異性引物及熒光探針，應(yīng)用PCR+Taqman技術(shù)，對

HPV13種型的特異性核酸片段進(jìn)行分型定量檢測。特點：分型、定量、快捷、安全第29頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月優(yōu)勢一：分型HPV59IC高危13型：16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68第30頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月優(yōu)勢二：快捷

上機檢測

抽提DNA30min60min

標(biāo)本采集30min2小時！

加樣加試劑第31頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月優(yōu)勢三：安全之江：封閉式實時熒光PCR無需洗滌減少污染傳統(tǒng)膜條雜交：反復(fù)洗滌操作繁瑣污染幾率增加第32頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月優(yōu)勢四：定量（唯一）3、便于文章的發(fā)表。1、宮頸病毒載量和CIN分期呈正相關(guān)。2、用于對病程的觀察和療效的評估。第33頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月正常hpv正常HPV正常正常hpv正常HPV5萬IU1萬IU傳統(tǒng)方法為什么不能定量？正常hpv一、標(biāo)本量采集不準(zhǔn)確。二、上皮細(xì)胞過少，也會出現(xiàn)假陰性的結(jié)果第34頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月5萬IU/10個1萬IU/2個正常hpv之江的定量方法—科學(xué)1、MNBH是人單拷貝基因-----測MNBH基因的數(shù)量相當(dāng)于檢測取了多少個上皮細(xì)胞2、如果沒有檢測出MNBH基因，或MNBH量太少?？梢员苊饧訇幮越Y(jié)果正常hpv正常HPV正常正常hpv正常HPVHPV第35頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月第36頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月內(nèi)容HPV與宮頸癌宮頸癌檢測方法比較HPV核酸檢測方法學(xué)比較臨床使用第37頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月HPV檢測結(jié)果的用途篩查：與細(xì)胞學(xué)檢測配合確定篩查頻率和周期，確保早期發(fā)現(xiàn)，及時干預(yù)。分流：根據(jù)篩查結(jié)果，將高危人群和患者群進(jìn)行分流，制定不同的干預(yù)、治療方案。隨診：根據(jù)HPV結(jié)果的變化情況，判斷治療效果和病情轉(zhuǎn)歸。第38頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月HPV檢測送檢流程第39頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月宮頸刷、保存液及取樣示意圖第40頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月HPV檢測后處理HPV基因分型檢測常規(guī)篩查液基細(xì)胞學(xué)檢查根據(jù)最后結(jié)果按ASCCP指南處理陽性正常CINⅠCINⅡ、Ⅲ陰性1年后重復(fù)HPV檢測和細(xì)胞學(xué)檢查半年后重復(fù)HPV檢測和細(xì)胞學(xué)檢查或陰道鏡檢查陰道鏡檢查、多點活檢第41頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月HPV感染的治療通過治療HPV感染達(dá)到防治宮頸病變的目的是近年來研究的熱點，但目前仍缺乏公認(rèn)有效的治療手段。30歲之前的感染者，如果沒有宮頸細(xì)胞學(xué)改變，主要通過消除易感因素、提高機體免疫能力、輔助局部藥物治療，幫助感染者自我清除。30歲以后的感染者，以及無論年齡有細(xì)胞學(xué)改變者，治療包括：

抗HPV治療+宮頸病變治療其中抗HPV治療包括：

全身抗病毒藥物、免疫增強劑、生物學(xué)治療、中藥治療、局部藥物（抗病毒、改善內(nèi)環(huán)境、促進(jìn)上皮修復(fù)）治療；現(xiàn)有宮頸病變治療手段也能清除部分HPV病毒。HPV疫苗是最大希望第42頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月項目一：HPV16、18分型檢測

特點：1、可以分型檢測2、可以覆蓋70%-80%的病毒3、收費低，容易推廣

目標(biāo)：1、常規(guī)婦科體檢HPV兩個項目推薦第43頁，課件共45頁，創(chuàng)作于2023年2月HPV兩個項目推薦項目二：HPV16、18、31、33、35、39