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學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精PAGE1學(xué)必求其心得,業(yè)必貴于專精PAGE第一節(jié)基因工程的原理(時(shí)間:30分鐘滿分:50分)考查知識(shí)點(diǎn)及角度難度及題號(hào)基礎(chǔ)中檔稍難基因工程的基本工具1、2、47基因工程的一般程序3、56、89一、選擇題(共7小題,每小題4分,共28分)1.下列關(guān)于限制酶的說(shuō)法正確的是 ()。A.限制酶廣泛存在于各種生物中,微生物中很少分布B.一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列C.不同的限制酶切割DNA后都會(huì)形成黏性末端D.限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氫鍵解析此題主要考查限制酶的有關(guān)知識(shí).限制酶主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的,并不是廣泛存在于各種生物中;一種限制酶能識(shí)別雙鏈DNA的某種特定核苷酸序列,并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開,DNA分子經(jīng)限制酶切割后會(huì)形成黏性末端或平末端.答案B2.用基因工程技術(shù)可使大腸桿菌合成人的蛋白質(zhì).下列敘述不正確的是()。A.常用相同的限制性內(nèi)切酶處理目的基因和質(zhì)粒B.DNA連接酶和RNA聚合酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒必需的工具酶C.可用含抗生素的培養(yǎng)基檢測(cè)大腸桿菌中是否導(dǎo)入了重組質(zhì)粒D.導(dǎo)入大腸桿菌的目的基因不一定能成功表達(dá)解析基因工程中限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒必需的工具酶;質(zhì)粒作為載體必須具有標(biāo)記基因;導(dǎo)入的目的基因不一定能夠表達(dá)成功,還要進(jìn)行修飾或處理。答案B3.利用外源基因在受體細(xì)胞中表達(dá),可生產(chǎn)人類所需要的產(chǎn)品.下列選項(xiàng)中能說(shuō)明目的基因完成了在受體細(xì)胞中表達(dá)的是 ()。A.棉花二倍體細(xì)胞中檢測(cè)到細(xì)菌的抗蟲基因B.大腸桿菌中檢測(cè)到人胰島素基因及mRNAC.山羊乳腺細(xì)胞中檢測(cè)到人生長(zhǎng)激素DNA序列D.酵母菌細(xì)胞中提取到人干擾素蛋白解析在基因工程中,判斷外源基因是否“表達(dá)”常用的方法是看有無(wú)目的基因產(chǎn)物產(chǎn)生.答案D4.DNA連接酶的重要功能是 ().A.DNA復(fù)制時(shí)母鏈與子鏈之間形成氫鍵B.黏性末端互補(bǔ)堿基之間形成氫鍵C.將兩DNA片段之間的縫隙連接起來(lái)D.A、B、C都不正確解析DNA連接酶的作用是恢復(fù)被限制酶切開了的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵。答案C5.要檢測(cè)目的基因是否成功插入了受體DNA中,需要用基因探針,基因探針是指 ()。A.用于檢測(cè)疾病的醫(yī)療器械B.用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的DNA分子C.合成β。球蛋白的DNAD.合成苯丙羥化酶的DNA片段解析基因探針是指已知的DNA片段(實(shí)際上是單鏈),為便于對(duì)雜交的結(jié)果進(jìn)行檢測(cè),需要對(duì)其作放射性同位素或熒光分子標(biāo)記。答案B6.下列有關(guān)基因工程的敘述正確的是 ()。A.限制酶只在獲得目的基因時(shí)才用B.重組載體的構(gòu)建是在細(xì)胞內(nèi)完成的C.質(zhì)粒都可作為載體D.蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合成目的基因提供資料解析如果以質(zhì)粒為載體,首先要用一定的限制酶切割質(zhì)粒,使質(zhì)粒出現(xiàn)一個(gè)切口,露出黏性末端,然后用同一種限制酶切割目的基因,使其產(chǎn)生相同的黏性末端,所以載體的切割也要用到限制酶.重組質(zhì)粒的形成是在生物體外完成的。只有具備符合相關(guān)條件的質(zhì)粒才能作為載體。答案D7.關(guān)于DNA重組技術(shù)中基本工具的敘述,正確的是 ()。A.限制性內(nèi)切酶的作用部位是特定的兩個(gè)核苷酸之間的氫鍵B.目的基因經(jīng)限制性內(nèi)切酶切割后一定會(huì)形成黏性末端C.DNA連接酶用來(lái)連接兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵D.質(zhì)粒DNA分子上一定含有抗四環(huán)素基因解析限制酶的作用部位是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵,而不是氫鍵。被限制酶切開后的DNA可以形成黏性末端,也可能形成平末端。有的質(zhì)粒上可能含有一些其他抗性基因。答案C二、非選擇題(共2小題,共22分)8.(10分)為擴(kuò)大可耕地面積,增加糧食產(chǎn)量,黃河三角洲等鹽堿地的開發(fā)利用備受關(guān)注。我國(guó)科學(xué)家應(yīng)用耐鹽基因培育出了耐鹽水稻新品系。(1)獲得耐鹽基因后,構(gòu)建重組DNA分子所用的限制性內(nèi)切酶作用于圖中的________處,DNA連接酶作用于____________處(填a或b)。(2)將重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和________法。(3)為了確定耐鹽轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功,既要用放射性同位素標(biāo)記的____________作探針進(jìn)行分子雜交檢測(cè),又要用____________的方法從個(gè)體水平鑒定水稻植株的耐鹽性.解析本題綜合考查了基因工程的工具和基因工程的一般程序.限制性內(nèi)切酶的切點(diǎn)選擇很嚴(yán)格,只會(huì)切斷某段特定DNA序列中的某個(gè)特定位點(diǎn)——磷酸二酯鍵,而DNA連接酶可以將該鍵連接起來(lái)。重組DNA分子導(dǎo)入水稻受體細(xì)胞的常用方法除了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法外,還有基因槍法和花粉管通道法.轉(zhuǎn)基因是否成功,可測(cè)定是否有轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物產(chǎn)生,也可通過(guò)改變條件觀察植物性狀的變化來(lái)加以確定。答案(1)aa(2)基因槍(或花粉管通道)(3)耐鹽基因(目的基因)一定濃度鹽水澆灌(移栽到鹽堿地中)9.(12分)(實(shí)際應(yīng)用題)下圖為重組DNA分子構(gòu)建的示意圖,回答以下問(wèn)題:(1)圖中,數(shù)字1、2、3、4代表______________,過(guò)程A、B和C所需要的工具分別是______________、______________和____________。(2)寫出結(jié)構(gòu)5、6和7的名稱。5.________;6。________;7。________。(3)進(jìn)行A過(guò)程和B過(guò)程使用的工具必須是___________________________,它們均從________中分離和提純。(4)圖中整個(gè)操作環(huán)境是 ().A.細(xì)胞內(nèi)B.細(xì)胞外C.細(xì)胞內(nèi)和細(xì)胞外(5)結(jié)構(gòu)5主要來(lái)自于________(生物),在基因工程中所起的作用是____________________________________________________________________________.解析根據(jù)圖解可知,結(jié)構(gòu)5、6、7分別代表質(zhì)粒、含有目的基因的DNA片段和重組質(zhì)粒,過(guò)程A和B表示用同一種限制酶對(duì)質(zhì)粒和外源DNA片段進(jìn)行切割。在此判斷的基礎(chǔ)上,對(duì)三種基本工具的相關(guān)問(wèn)題做出解答。答案(1)限制酶的切割位點(diǎn)限制酶限制酶DNA連接酶(2)質(zhì)粒含有目的基因的外源DNA片段重組質(zhì)粒(3)同一種限制酶原核生
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