結(jié)締組織多色染色法

結(jié) 締 組 織 多 色 染 色 法QQX96QT-XQQB89Q8-NQQJ6Q8-MQM9N]結(jié)締組織 多色染色法、Mallory1. 試劑配制重鉻酸鉀液 重鉻酸鉀2.5g，醋酸5ml，蒸餾水95ml苯胺藍(lán)桔黃G0.5g，桔黃G2g1g100ml酸性復(fù)紅液 酸性復(fù)紅0.5g，蒸餾水100ml2.染色步驟中性甲醛液固定組織，石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水。10min。2min22min，蒸餾稍洗。20min，95%乙醇快速分化。直接用無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。3.結(jié)果膠原和網(wǎng)狀纖維呈藍(lán)色，軟骨、粘液、淀粉樣變物質(zhì)呈淡藍(lán)色，神經(jīng)膠質(zhì)纖維、肌纖維和酸性顆粒呈紅色，髓鞘和紅色呈桔紅色。4.95%、Masson法1.試劑配制Masson合1g麗春2gG2g%醋300ml。亮綠SF0.1g%醋100ml2.步驟中甲醛石蠟常規(guī)脫蠟至Masson合5min。%醋稍洗。355-10min。%醋2。亮綠5min%醋2。（6）無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹膠封固。3.結(jié)果膠原纖維呈綠色，肌纖維呈紅色，紅細(xì)胞呈桔紅色。4.注意事項(xiàng)（1）Masson復(fù)合染色液，經(jīng)磷鎢酸分化時(shí)須用顯微鏡控制肌纖維清晰為止。（2）亮綠染料可用苯胺藍(lán)替換，可用來作為對(duì)比觀察染色的效果。三 顯示膠原纖維、網(wǎng)狀纖維和彈力纖維的三聯(lián)染色法（1993年）1.試劑配制（1）高錳酸鉀硫酸液 %高錳酸鉀水溶液中加入5ml的硫酸。（2）維多利亞藍(lán)染色液 維多利亞藍(lán)2g，糊精0.5g，間苯二酚4g，蒸餾水 200ml。將上述物質(zhì)混合后加熱煮沸，邊煮邊攪拌，約5min。然后用另一容器取30%三氯化鐵水溶液25ml，另行加熱煮沸后慢慢入上述混合液中煮沸3min，攪拌溶液呈膠狀。，將上的60℃中。呈藍(lán)色細(xì)狀，溶400ml的 70%乙醇液中。然后加濃鹽酸4ml和苯酚5g置至成熟后使用。（3）麗春紅染色S染色液 %麗春紅S水溶液15ml，苦味酸飽和水溶液85ml。4Gomori5%5ml3%5ml。最后用蒸餾50ml盛試劑瓶中置于冰箱中備用較長間。染步驟中甲醛固定組織石蠟切片常規(guī)脫蠟至。高錳鉀硫3min自來浸洗后2%草2min。351min。Gomori1min。蒸餾215%甲醛1min。蒸餾2%氯30s蒸餾1770浸維多利亞藍(lán)30min-1h。8951min浸蒸餾1minS染2min。直接用無乙醇脫二甲苯透明中樹膠3.結(jié)果膠原纖維呈紅網(wǎng)狀纖維呈彈力纖維呈綠肌肉和紅細(xì)胞呈淡黃4.注意事項(xiàng)氨性銀液滴染時(shí)，要用干凈吸管，防止銀液污染而發(fā)生沉淀。氨性銀液作用后的切片不能傾倒，應(yīng)將蒸餾水沖洗切片上的銀液，這樣就不會(huì)使銀液表面揮發(fā)的銀顆粒而沉積在組織上。膠 原 纖 維一、膠原纖維的分布和組成成分膠原纖維是結(jié)締組織中的三種纖維之一，分布最為廣泛，含量最多。主要分布于真皮、鍵、韌帶、骨、透明軟骨、動(dòng)脈、腸壁、子宮和基底膜等，膠麻纖維具有韌性大，抗拉力強(qiáng)的特點(diǎn)。在弱酸或沸水中可慢慢溶化成膠水，稱白明膠。膠原纖維和網(wǎng)狀纖維的基本構(gòu)造相似，都以膠原(白為主的大分子)為基本。膠原和成網(wǎng)狀纖維;是1μm的分狀纖維，成組織的，在 HE染中不。面的一白，鍍銀法可以地顯示出來，故又稱為嗜銀纖維。α肽鏈更長前α肽鏈經(jīng)高爾基體分泌出在外液切肽酶作用下切去前α肽鏈附加肽段而；再經(jīng)外液賴氨酰氧化酶作用使兩條肽鏈通過醛醇或醛胺縮共價(jià)交聯(lián)這樣分子之間就了穩(wěn)定聯(lián)系微然后再聚而二、染色應(yīng)用染色在病理診斷上用鑒定梭、腫瘤組織來源：常常在、和神經(jīng)三者之中作出選擇使用下化心在HE切中在和染作色而作染色組織和組織分來化用染色使之間突出示出來干是一種蛋白成分常常酸性染料染色。l.VanGieson苦味酸酸性復(fù)(1889[](l)VanGiesonl%酸性品水溶10m苦味酸飽和水溶約%)90m。(2)Weigert液：蘇木素lg,95%或100ml；液：29%三化鐵水溶4m蒸餾水95m鹽酸lm。用液和液樣后染色色化而作染液染液分別配制、分別應(yīng)用或臨時(shí)混應(yīng)用。[](1)10%(2)(3)Weigert5~l0min。(4)(5)%(6)(7)VanGieson1~5min。(8)95%(9)[]、胞質(zhì)及細(xì)胞黃胞核黑[注意事項(xiàng)]目前以苦味、復(fù)VanGieson此一種溶即Weigert鐵、兩應(yīng)臨前將兩等量混合使而不宜預(yù)先混合否則易氧沉淀而逐漸失其能力。VanGieson別在臨時(shí)混合防止放置時(shí)間長則品不易著Siriured。[試劑配制]Siriusred%Siriuredl0m90m。(2B1251.25250m。溶解煮沸待冷過濾后30m5m。[]10%甲醛液常規(guī)脫水包埋。(2)切片脫蠟至水。(35~10mi，(4)蒸餾水洗多次。(5)Siriured15~30min。(6)無水乙醇直接分化與脫水。(7)二甲苯透明中性樹封固。呈鮮紅細(xì)胞核綠其他為黃。LillieVanGieson(1965[]1%%FCF3%S(WoolgreenS)。%%(Violamine%~%S(ponceauS)[]Harris3min。(3)(4)(5)A4min(6)1%2(7)Bl0~l5min(8)1%2min。(9)[、胞質(zhì)灰細(xì)胞核黑ClarkVanGieson(1971、包括非常細(xì)的，以及肌肉角化上皮的染色[固定] 甲醛固定液。[試劑配制](l)A0.3gS（naphtholyellow100mI0.2g100ml(3)C0.2g100ml40AB2C40A石蠟切片，脫蠟至水Weigert5ml。(3)自來水洗。在染色液中染l0min。50%、7095%乙醇，無水乙醇兩次。(6)二甲苯透明，中性樹封固。-粗紅色，細(xì)藍(lán)色。[說明]本法中的Weigert16h。5.BiebricLilli1965[、網(wǎng)狀、肌肉、胞質(zhì)。[Orth[試劑配制](l)AWeigert見苦味酸酸性復(fù)。(2)B100ml1%醋酸。(3)C0.1g100ml方]常規(guī)脫蠟至水。A5min(3)自來水沖洗。(4B液中4min(5)自來水洗。C液中5min。13min。無水乙醇脫水二甲苯透明中性樹封固。[]Li1li1965年[]、、膜、。[試劑配制](l)AR(BrilliantpurpurinR)0.6g；偶氮復(fù)G(azo-fuchsinG)0.4g；冰醋1m蒸餾水加100m上述兩種116﹕4(2)B105~100m；飽和水溶100m同樣濃度苯胺或甲均可用來代替(又稱蔡酚)可得到較好[方]切片常規(guī)脫蠟水。Weigert6min。(3)自來水洗。(4A中5min(5)流水中洗。(6)B1~5min。(7)1%2min(8)[]、網(wǎng)狀和基膜深綠；粘深綠上皮細(xì)胞胞質(zhì)棕肌肉淺綠紅細(xì)胞紅Petersen茜藍(lán)改良法與網(wǎng)狀組織、骨鉻肌、心肌橫紋、心肌間板。[ZenkerHellyBouin或醛[試劑配制]A即緩沖的茜藍(lán)溶20.25；硫5；蒸餾50m煮沸5min冷卻過濾再補(bǔ)足到來的體積20mlSorensen鹽溶(檸檬21lNNaO200m加蒸餾1000ml30mlpH。B即G0.5g;G2；蒸餾100m冰8ml煮沸冷卻過濾。[方法](1)常規(guī)石蠟切片蠟至(2)A3min。25%2~3min。(5)B2~3min1、2或3倍體積略先95%乙醇后無乙醇脫(9)二甲苯透明性樹膠封固[締組織藍(lán)質(zhì)磚紅肌組織根據(jù)所不同品種固定劑從品紅至亮橙紅細(xì)胞橙紅粘淡藍(lán)神節(jié)細(xì)胞淡品紅腺細(xì)飽根據(jù)其組成從淺藍(lán)至品紅顯示膠原纖維、細(xì)胞和肌肉新性甲醛石蠟切片。[試劑配制]Ponceau's%Pohceau'sS溶l0~15m苦味酸飽和溶85~90ml。Victoriablue'BVictoriablue'BB0.5g70100m。[]。70%乙醇稍洗后，入Victoriablue'Bl5min。(3)95%乙醇中分化數(shù)秒鐘。用蒸餾2Ponceau's液滴2min。(6)直接用無乙醇分化與。(7)二甲苯透明，中性樹膠封固。[結(jié)果]膠原纖維呈鮮紅，細(xì)胞核和血細(xì)胞呈綠，肌肉呈黃。。相關(guān)回復(fù)：作者:appo 發(fā)布日期:2005-12-12網(wǎng)狀纖維網(wǎng)狀纖維是網(wǎng)狀結(jié)締內(nèi)的一種纖維。它由網(wǎng)狀細(xì)胞所產(chǎn)生。網(wǎng)狀細(xì)胞是一種星狀多突的細(xì)胞，核大，著較淺，核仁明顯，胞質(zhì)較豐富，胞突彼此連接形成細(xì)胞網(wǎng)架。網(wǎng)狀纖HE、應(yīng)用1.顯示鑒別腫瘤質(zhì)來源顯示區(qū)癌肉瘤顯示區(qū)血管內(nèi)皮瘤與血管外皮瘤以鑒別淋巴肉瘤與肉瘤區(qū)骨尤文氏肉瘤與骨肉瘤顯示與鑒別骨異質(zhì)增生與骨瘤區(qū)軟骨粘瘤與粘肉瘤鑒別腦膜瘤與星形2.某些腫瘤診斷平滑肌肉瘤肉瘤滑膜肉瘤、展及其程度。顯示與基底膜變化。識(shí)別壞死結(jié)構(gòu)及類型凝固壞死肺結(jié)核干酪樣壞死顯示肝二、網(wǎng)狀纖維染色原理氧化感應(yīng)浸銀還原三、網(wǎng)狀纖維染色方法染色法固定 甲醛液或其他固定液試劑配制 氧化銀溶液：40%氫氧化鈉 1滴半10%40%10%28%320ml。染序1組織切片脫蠟至。210%磷鉬2-5min。3沖洗5min。41%鈾5s。沖洗10s。5-10min。795%酒精速洗1-2s。還原還原1-2s。沖洗2min。%氯金調(diào)2-20s。沖洗5min。125%亞硫2min。2min。5-10min。、二甲苯透明、中性樹膠封色結(jié)果網(wǎng)狀纖維呈黑色、呈色。維、的形態(tài)特點(diǎn)和組成成分由糖蛋白構(gòu)成，富含親水性的極性氨基酸。性蛋白提供的性，它是種不溶性蛋白質(zhì)，當(dāng)用弱堿處理結(jié)締組織時(shí)，其仍然存在。三分之11%95%屬于非極性疏水氨基酸，鎖鏈賴氨酸(Desmosine)和異鎖鏈賴氨素(lsodesmosine)是性蛋白所特有，它們起著共價(jià)交聯(lián)的作用。近年來，電鏡下看到組織培養(yǎng)的平滑肌細(xì)胞可以合成肌細(xì)胞存在時(shí)，可能由母細(xì)胞形成。血管、壁、韌帶、氣管、支氣管、肺泡、耳廓和腺體的導(dǎo)管處為富。種成分組成，合的(由糖蛋白形成)和質(zhì)的蛋白。在中以別于其，有用特，能來。近來為，系統(tǒng)是由、前和耐酸三種構(gòu)成，三種的分布、走行和組織不同。酸用的其著很淡，著不夠深，但如經(jīng)強(qiáng)氧化后醛品紅或間苯二酚品紅可把系統(tǒng)中的三種同時(shí)來。二、的應(yīng)用()皮膚組織中的變化在皮膚組織中，特別是皮的，時(shí)，、、性、，形成成的、①彈力纖維；②彈力纖維增多癥；③彈力過度性皮膚；④皮膚疏松；⑤皮膚環(huán)肉芽腫；⑥肢端角化的彈力纖維性；⑦硬皮(二)顯示與判定心血管疾彈力纖維是心臟和血管的主要成公之一。顯示鑒別心內(nèi)膜彈力纖維增生癥與心內(nèi)膜心肌纖維化這兩種時(shí)心內(nèi)膜中的HE-染色中兩者的理化甚為相似因此，顯示與鑒別。(3)顯示與觀察梅毒性主動(dòng)脈炎時(shí)動(dòng)脈中層彈力纖維發(fā)生灶性破壞的程度。(4)顯示高血時(shí)動(dòng)脈彈力纖維顯增生成多層的特。脈癥，顯示在動(dòng)脈血管層彈力纖維，彈力層增。(6)顯示動(dòng)脈性動(dòng)脈的彈力板性增斷裂崩解現(xiàn)。察中的彈纖維是性管炎肺氣腫原發(fā)性或繼發(fā)性腎固縮，均可導(dǎo)致彈力纖維縱行散亂斷裂破壞和增生，成碎片或顆粒。(四)顯示與鑒別腫瘤組織彈力纖維瘤 在彈力纖維瘤體的纖維組織中，有許多球或顆粒化的彈力纖維在HE染色中容易忽略，但彈力纖維染色，能清晰到瘤體內(nèi)豐富的彈力纖維球。lVerhoeffVerhoeff“料分散度組織結(jié)構(gòu)密度”以達(dá)到分辨不同組織目結(jié)構(gòu)密度都比較致密粒子比較容易地分散到狹孔的或間隙中粒子狹孔中比較密集所以比較深；而分散到寬孔間隙中較稀疏所似比較淺。105或固定[]120m10%8mLugol8mlLugol2結(jié)l100m。[]切片脫至。15~30mi至顏呈深黑自來洗。2分10~20至清晰為止果分度返回第2步重(4)分。(5)95%2~Smin(6)VG5min。95%[]2、Weigert酚法三烷系堿料與雷鎖辛和三氯鐵組成一種帶有弱正電荷的料與構(gòu)致密的、富于內(nèi)表面的通過非極吸著而完成非極吸著是料不具有強(qiáng)電荷時(shí)和組織成間的合就是說雷鎖辛液對(duì)的間酚液實(shí)際上是由堿品的鐵間酚淀（Lake)形成的一種復(fù)合物這種合物與合并著其合的理不楚可能是彈某些部與間酚的基團(tuán)形成氫鍵。[10%醛液其定液。[]間酚液堿品1間2200m30化鐵2ml。一300ml堿品、間酚和再30%三氯鐵液3~5min過液和沉淀物一同內(nèi)置于干燥箱內(nèi)烘干出后95100m鍋內(nèi)加并不淀物完過的至100m最后2ml混合后即可[](1)(2)95%2min1~2h。95%%(5)2min。(6)VanGiesonlmin。(7)95%(8)[3、Hart此Weigert經(jīng)過改良后發(fā)展而特點(diǎn)是將Weigert1%溶配制成稀釋溶進(jìn)行過夜顯示出細(xì)的[定]醛定和其他定[試劑配制]高錳鉀溶溶50m3溶2.5m此別配制，臨時(shí)按比例混合使WeigertWeigertl0m1%90ml[]5min(3)2~3min。(4)1%(5)2min。70%Weigert1%95%(9)5~l0min。(l0)VanGieson、1%紅HE(11)95財(cái)及二甲苯透明樹膠封固。[結(jié)果] 彈力纖維呈藍(lán)黑其他組織呈復(fù)的顏4、Gomori醛復(fù)紅GomoriSchiff和實(shí)驗(yàn)期偶然發(fā)現(xiàn)的醛復(fù)紅是堿品紅加三聚醛和配制而成作為種催劑使三聚醛逐漸解聚產(chǎn)生醛醛有較的活出后與堿品紅料外露的氨基起反、脂褐素、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、胃主、胰島腦垂體嗜也能好著但以理鹽水固定效果最佳。[試劑配制]性0.5濃鹽1m70100m三聚乙1m將性復(fù)70%乙醇然后加入濃鹽三聚乙輕輕搖動(dòng)使混均勻于室溫1~2于。GG2100m5。[]至水。Lugol5min。(3)稍水洗。5%5min(5)水沖洗5min。70%乙醇稍洗。入l0min。70%230s(9)(10)G1s(11)1~2min。(12)95%[][]G、Masson、VanGieson等但宜過5、Pinkus地衣紅-姬姆薩法[定] 10%醛、Helly或Zenker均[試劑配制]地衣紅170100m0.6m地衣紅溶于內(nèi)然后加入濃鹽酸。姬姆薩取姬姆薩原5加100ml。伊紅Y5995100m混合后停攪拌溶解后即使[方法]蠟70%30~60min。(4)95%(5)1%2~5min(6)5~l0min。2h~95%(95%)[) 6、Uana法[定] 醛或其他定[試劑配]Uana：lg,7099m濃1m1將溶于內(nèi)然后加入濃放置冰箱保存?zhèn)鋄方法]切片蠟70%2min。Uana15~30min()。(4)70%VanGieson95%、水水二甲苯透明性樹膠封固。[結(jié)果] 彈力纖維呈棕紅暗棕其他組織呈的顏7、Gomori改良醛紅-阿爾辛籃法[固定] 各種固定但以或Bouin固定固定效果最佳。[試劑配] 醛-阿爾辛藍(lán)：鹽基性紅0.5阿爾辛藍(lán)0.67098m1濃鹽酸1m三聚醛1m將紅和阿爾辛藍(lán)依次溶于然后加入鹽酸和三聚醛充混合搖勻放24使其自然成熟后即使該后須貯存于冰保存2~3個(gè)月。[方法]石蠟切片蠟水。醛紅-阿爾辛藍(lán)1~2h。(3)70%23~5min(4)蒸餾水稍洗。B10~l5min。[]8、Darrow改良法(1952[Zenker、Bouin、10%醛均可。[試劑配制]A0.4g100m11%濃鹽酸70%BMallory貯存原1g1g100m1時(shí)將此原lml9ml。[方法](1)按常規(guī)將切片蠟。(2)A30min。(3)70%2(4)蒸餾2。在稀釋B5min(6)蒸餾洗。%(Colophonyrosin95%2min[] 9、Fraenkel(Lilli1965[顯示目] 硬蛋白、原、肌肉和[