生物化學檢驗的基本知識

職業(yè)教育醫(yī)學檢驗技術(shù)專業(yè)教學資源庫生物化學檢驗技術(shù)生物化學檢驗的基本知識BASICCLINICALLABORATORYMEDICINE2學習目標血液標本的采集方法真空采血管的種類和用途；常用抗凝劑及抗凝原理尿液標本的采集方法；標本收檢、分離、儲存和轉(zhuǎn)運生物化學檢驗項目類型危急值、危急值報告的概念檢驗報告單的發(fā)放方式生物化學檢驗的項目

與檢驗報告單的發(fā)放第一節(jié)臨床實驗室及生化室病人臨床醫(yī)師查體病人進行檢查生理學檢查實驗室檢查門診化驗室血液體液室臨床生化室臨床免疫室臨床微生物室分子生物學實驗室配血室病理學檢查影像學檢查醫(yī)生填寫檢驗申請單患者留取標本傳送標本至檢驗科標本分發(fā)至各個專業(yè)組樣品編號按檢驗項目要求處理標本全自動生化7180的開機前檢查開機后的檢查及準備校準的安排及實施（定標）質(zhì)控操作下達常規(guī)操作指令常規(guī)標本實施急診登記及操作結(jié)果查詢及傳輸關(guān)機生化檢驗流程

1.普通生化檢驗如肝功能試驗、腎功能試驗、心臟標志物測定、血脂測定、血糖測定、電解質(zhì)分析等。

2.特殊生化檢驗如毒物分析、治療藥物監(jiān)測、激素測定、DNA分析等。

3.急診生化檢驗為臨床緊急需要開展的能迅速回報結(jié)果的試驗。如血糖、尿素、電解質(zhì)、淀粉酶、血氣分析等。

4.床旁生化檢驗在病人床旁或醫(yī)療現(xiàn)場開展的生化檢驗項目1生物化學檢驗的項目2生物化學檢驗報告單的發(fā)放常規(guī)生化檢驗的報告時間：一般不超過2天。急診生化檢驗的報告時間：不超過2小時。急診標本要優(yōu)先。2生物化學檢驗報告單的發(fā)放危急值：指某些檢測結(jié)果出現(xiàn)了可能會危及到患者生命的極限值。危急值報告：指當檢測結(jié)果出現(xiàn)“危急值”后，檢驗者要立即通過電話向臨床醫(yī)生或當班護士報告，并要求接、打電話雙方都要有通話記錄，通話記錄最少包括危急值的項目、危急值和接電話人姓名等內(nèi)容。危急值報告2生物化學檢驗報告單的發(fā)放檢驗報告單的發(fā)放要求條碼號、門診號（住院號），病人的姓名、性別、出生日期、申請科室、病室及床號、臨床診斷、檢查項目、標本類型、是否急診、采樣時間、標本接收時間、申請醫(yī)生。必要時應(yīng)注明治療情況(用藥情況)等。報告單的格式應(yīng)規(guī)范、整齊，字跡清晰，內(nèi)容全面有標本的采集時間、收檢時間和出報告時間。內(nèi)容：報告單發(fā)放時間與辦法、檢驗數(shù)據(jù)管理、結(jié)果保密措施、報告單唯一性標志等。2生物化學檢驗報告單的發(fā)放1．再一次對檢驗報告單內(nèi)容進行認真復(fù)審。2．對門診患者，未經(jīng)本人同意，不準將檢驗報告單交給他人。3．報告單發(fā)放時間應(yīng)向社會公布，特殊原因不能按時發(fā)報告時，應(yīng)及時告知服務(wù)對象。4．送至臨床各科室的檢驗報告單，送收雙方應(yīng)履行交接簽字手續(xù)，避免報告單丟失或信息外泄。注意事項生物化學檢驗的標本第二節(jié)標本標本采集時應(yīng)盡可能避免一切干擾因素，選擇最佳的采集時間；減少飲食和藥物影響，減少晝夜節(jié)律帶來的干擾；對于有創(chuàng)傷性的操作，操作前應(yīng)先與患者溝通建立互信，消除患者的恐懼和緊張情緒。標本采集后應(yīng)標識清楚，正確采集標本是獲得準確、可靠檢驗結(jié)果的關(guān)鍵。1標本的采集血液標本（一）血液標本的類型全血：靜脈全血、動脈全血和末梢全血血漿：全血標本經(jīng)抗凝、離心去除血細胞后的淺黃色半透明液體血清：血液離體后自然凝固分離出來的淡黃色透明液體。在凝血過程中，纖維蛋白原轉(zhuǎn)變成纖維蛋白，所以血清中無纖維蛋白原，這一點是與血漿最大的區(qū)別。某些凝血因子也發(fā)生了變化。1標本的采集采集方法核對容器準備病人準備體位前臂肘窩正中靜脈采血

取針頭將血液沿管壁緩慢注入容器。（1）毛細血管采血法（略）（2）靜脈采血法（普通采血法）1標本的采集采集方法1標本的采集注意事項臨床最常用的采血方法，最好是在上午7~9時采集，受檢者處于空腹狀態(tài)，門診患者提倡靜坐15分鐘后再采血。根據(jù)檢驗項目、所需采血量選擇注射器；嚴格執(zhí)行無菌操作；采血時切忌將針栓往回推，以免注射器中的空氣進入血液循環(huán)而形成氣栓；采血時不宜過度用力，以免血液產(chǎn)生泡沫而造成溶血；避免充血和血液濃縮；注意膳食對標本的影響。1標本的采集靜脈采血主要器材：雙向采血針和真空采血管采血前要核對患者姓名、檢驗項目，根據(jù)需要選擇相應(yīng)的真空采血管，將條形碼貼到相應(yīng)的試管上，但前提是露出采血管的刻度；再次核對患者名字、檢驗項目，避免有漏貼、漏抽的情況發(fā)生。真空采血法1標本的采集真空采血管的種類與用途1標本的采集步驟多管血液標本采集順序注意抗凝劑與血量的比例！采血量為:1.8ml+0.2抗凝劑=2ml凝血功能檢測1標本的采集真空采血法1標本的采集動脈采血主要用途：血氣分析大多采用橈動脈采血，肱動脈、股動脈和足背動脈都可以進行采血。A.1ml～5ml注射器，用肝素濕潤B.針進入血管后，動脈血自動進入注射器，取1～2ml血液。C.注射器不能回吸，排出第一滴血立即用橡皮帽封住針頭。D.注射器放在手掌中雙手來回搓動20秒，立即送檢。1標本的采集動脈采血注意事項：因動脈血的壓力較高，血液會自動注入注射器針筒內(nèi)，至2ml后拔出針頭，用消毒干棉簽按壓采血處（穿刺點）止血10~15分鐘，防止血腫。立即用軟木塞或橡皮塞封閉針頭（針頭斜面埋入橡皮中即可），以隔絕空氣，切忌漏氣，搓動注射器使血液與肝素混合，并立即送檢，否則將標本置于2~6℃冰箱保存，但不應(yīng)超過2小時。1標本的采集常用抗凝劑抗凝：采用物理或化學方法去除或抑制某種凝血因子的活性，以阻止血液凝固?？鼓齽耗軌蜃柚寡耗痰奈镔|(zhì)，也稱為抗凝物質(zhì)。常用抗凝劑：肝素、氟化鈉－草酸鉀、乙二胺四乙酸鹽（EDTA鹽)、枸櫞酸鹽等。1標本的采集1）肝素：血液化學成分檢測的首選抗凝劑，常用于血氣分析和部分生化項目的測定，使用1.0g／L的肝素溶液0.5ml可抗凝5ml血液?？鼓硗ㄟ^與抗凝血酶Ⅲ結(jié)合，引起抗凝血酶Ⅲ構(gòu)型發(fā)生變化，加速抗凝血酶-凝血酶復(fù)合體形成而產(chǎn)生抗凝作用。此外，肝素還能抑制凝血酶。最好的肝素抗凝劑是肝素鋰，但其價格較貴。肝素抗凝血適用于急診時快速分離進行測定，否則放置過久血液又可凝固。肝素對ALT、AST、LDH、ACP無影響，但是對CK等酶有輕微的抑制作用。1標本的采集2）氟化鈉－草酸鉀：抗凝原理草酸鉀可與血液中的Ca2+（凝血因子Ⅳ）生成草酸鈣沉淀，從而阻止血液凝固。草酸鉀溶解度大，抗凝作用強于氟離子。氟離子能抑制糖酵解中的烯醇化酶，防止糖酵解。在氟化鈉的存在下，血糖濃度在25℃可穩(wěn)定24小時，4℃可穩(wěn)定48小時。因此，氟化鈉－草酸鉀是血糖測定標本常使用的抗凝劑。此外草酸鉀可與乳酸、丙酮酸發(fā)生競爭性抑制，又能與LDH、NADH或NAD+形成復(fù)合物，因此用氟化鈉－草酸鉀抗凝劑分離的血漿一般不適用于酶活性的測定。3）枸櫞酸鹽、EDTA：抗凝原理

與血液中的Ca2+結(jié)合形成螯合物，使Ca2+失去凝血功能，凝血過程被阻斷，而阻止血液凝固。1標本的采集抗凝血漿一般不適用酶活性的測定！1標本的采集（一）尿液標本的類型晨尿標本1隨機尿標本2計時尿標本3特殊尿標本4中段尿：開始1/3量的尿液棄掉，留取中間1/3處的尿液送檢，可較少尿液污染，較真實反映實際情況1標本的采集特別提醒提供的尿液采集容器要潔靜、干燥、無污染！在尿液采集容器上要準確標記患者姓名、性別、年齡、留尿日期和時間、尿量、標本種類等信息！張冠李戴可萬萬使不得啊！1標本的采集晨尿標本1早晨起床后第一次排出的尿液特點：濃縮優(yōu)勢：有形成分陽性檢出率較高適用范圍：人絨毛膜促性腺激素（hCG）測定。細胞有形成分檢查。1標本的采集2隨機尿標本無需任何準備、不受時間限制、隨時排出的尿液標本特點：易受飲食、藥物的影響，可能導(dǎo)致漏檢優(yōu)勢：尿標本新鮮、易得適用范圍：適合于門診、急診患者的尿液篩檢。1標本的采集3計時尿標本用于化學成分的定量測定、內(nèi)生肌酐清除率試驗和細胞學檢查1標本的采集計時尿標本的采集與評價1標本的采集24小時尿標本的采集步驟與要求1標本的采集4計時尿標本尿三杯試驗：分別采集前段尿、中段尿、末段尿，分裝于3個尿杯中。培養(yǎng)用尿：留尿前先清洗外陰，再用清潔液消毒尿道口，以無菌容器留取中段尿送檢。1標本的采集晨尿隨機尿3小時尿12小時尿24小時尿特殊尿細胞有形成分檢查門診、急診患者的尿液篩檢用于尿液有形成分檢查和計數(shù)尿液有形成份計數(shù)，及尿微量蛋白分析機體代謝物的定量檢測特殊病理情況的分析尿液標本采集后要盡快送檢哦!1標本的采集濃鹽酸：酸性防腐甲苯：形成薄末防腐，適用于糖、蛋白質(zhì)、鉀、鈉項目的測定冰醋酸：酸性，適用于24小時尿醛固酮測定麝香草酚：抑菌防腐，麝香草酚可引起蛋白假陽性，故不適合尿蛋白測定尿液常用防腐劑1標本的采集腦脊液標本采集腦脊液由臨床醫(yī)師進行腰椎穿刺采集必要時也可以從小腦延髓池或側(cè)腦室穿刺采集穿刺成功后首先進行壓力測定。待測定壓力后根據(jù)檢查目的將腦脊液分別收集于三個無菌容器中第1管用于細菌學檢查，第2管用于臨床化學或免疫學檢查第3管用于常規(guī)檢查。如疑為惡性腫瘤，再采集1管進行脫落細胞學檢查標本采集后檢驗申請單上注明標本采集的時間。1標本的采集漿膜腔積液標本采集人體胸膜腔、腹膜腔和心包膜腔統(tǒng)稱為漿膜腔，正常情況下，漿膜腔內(nèi)僅含有少量液體起潤滑作用，如胸膜腔液<20ml，腹膜腔液<50ml，心包膜腔液約為10~30ml。漿膜發(fā)生病變時，漿膜腔內(nèi)有大量的液體潴留而形成漿膜腔積液，因部位不同，漿膜腔積液可分為胸膜腔積液、腹膜腔積液和心包膜腔積液。根據(jù)產(chǎn)生的原因及性質(zhì)不同，漿膜腔積液可分為漏出液和滲出液。檢測漿膜腔積液的某些化學成分如蛋白質(zhì)、葡萄糖、酶及腫瘤標志物等，有助于了解漿膜腔積液的性質(zhì)和病因。1標本的采集漿膜腔積液標本采集漿膜腔積液標本由臨床醫(yī)師行漿膜腔穿刺術(shù)采集，采集中段液體于消毒試管內(nèi)，且根據(jù)需要采用適當?shù)目鼓齽┯枰钥鼓?。另外，采集一管不加抗凝劑的標本，用于觀察積液有無凝固現(xiàn)象。2標本的收檢血液標本收檢血液標本拒收的常見原因：①溶血、抗凝標本出現(xiàn)凝固；②血液采集容器使用錯誤，容器破損無法補救；③采血量不足或錯誤；④轉(zhuǎn)運條件不當；⑤標識脫落、不清楚或者申請單和標本標識不一致；⑥標本污染、標本量不符合要求、標本與抗凝劑比例不正確；⑦要求與空氣隔絕的標本與空氣接觸；⑧標本的采集與送檢之間的時間過長；⑨嚴重違犯標本采集規(guī)程等。注：特殊情況下，對可能會影響到檢測結(jié)果的標本進行檢測時，應(yīng)在檢驗報告單上對不合格的標本進行詳細描述，提醒該標本可能會對檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。2標本的收檢尿液標本收檢尿液標本拒收的情況：標本標識內(nèi)容與檢驗申請單內(nèi)容不一致、申請單的項目不全、尿標本類型錯誤、尿量不足、可見糞便或雜物污染、防腐劑使用不當、容器破損、標本流失等。對不合格標本要重新核實或重新收集標本對難以得到的尿標本或再次采集確有困難的尿標本，必須在檢驗報告上注明標本不合格的原因及“檢驗結(jié)果僅作參考”的說明。3標本的處理尿液標本收檢1．標本的分離血液標本采集后應(yīng)及時采用離心法分離血清或血漿。加有抗凝劑的血液標本應(yīng)立即離心分離血漿；無抗凝劑的血液標本分離血清時，可先將標本置于室溫或37℃水浴箱里，待血塊部分收縮，出現(xiàn)少許血清時再離心分離。分離不及時的血液標本可發(fā)生紅細胞與血清之間成分的相互轉(zhuǎn)移，或細胞中的某些酶分解待測物等，從而影響一些項目的檢驗結(jié)果。分離血清前血液水浴溫度不可過高，對不是因操作不當引起的溶血、脂血或膽紅素血，應(yīng)在檢驗報告上注明，供醫(yī)生參考。尿液、腦脊液、漿膜腔積液和羊水等特殊標本常需立即離心，取上清液進行分析。3標本的處理尿液標本收檢2．標本的儲存分離后的標本如果不能及時檢測，一般應(yīng)放置于4℃冰箱內(nèi)保存，某些檢測項目的標本存放于－20℃冰箱更穩(wěn)定。標本存放時需加塞，以防止水分揮發(fā)而使標本濃縮。檢驗后的標本應(yīng)根據(jù)不同檢驗項目進行標本保存，并保證所存標本的信息如患者姓名、標本種類、標本編號等與原始標本完全一致。一般標本在2℃～8℃保存一周，特殊標本置低溫保存兩年或長期保存。保存標本的目的主要是為了滿足標本復(fù)檢、差錯核對以及出現(xiàn)醫(yī)患糾紛時實驗室證據(jù)保全的需要。3標本的處理尿液標本收檢3．標本的轉(zhuǎn)運

標本采集后應(yīng)盡快轉(zhuǎn)運到實驗室進行檢測分析，標本運送人員要保證標本送達實驗室的及時性和安全性，標本在轉(zhuǎn)運途中要避光、避高溫、避冷凍，避免劇烈震蕩,避免標本外溢或污染環(huán)境，保證標本質(zhì)量不受影響；如果發(fā)生外溢等意外情況時能采取合理措施。外送的標本或送往委托實驗室的標本應(yīng)有相應(yīng)的標本轉(zhuǎn)運設(shè)備。應(yīng)盡量減少標本的轉(zhuǎn)運環(huán)節(jié)，以縮短儲存時間，標本轉(zhuǎn)運應(yīng)做到專人、專業(yè)且有制度約束，才能避免標本轉(zhuǎn)運過程中因客觀、主觀因素造成檢測結(jié)果的不準確。標本管道傳遞系統(tǒng)可加快標本傳遞速度和避免標本的錯誤傳遞。3標本的處理廢棄標本的處理要求包裝：醫(yī)療廢物專用包裝物有顯著的警示標識和警示說明；運送：由專人送到指定的消毒地點集中處理；處理：一般由專門機構(gòu)采用焚燒的方法處理。實驗室廢棄物管理的目的：①將操作、收集、運輸及處理廢棄物的危險降至最?。虎趯⑵鋵Νh(huán)境的有害作用減至最小。因此，生物化學檢測后廢棄的標本、器具應(yīng)由專人負責處理。視所有標本為傳染品，“高?！睒吮?，要注明標識；急癥或危重病人標本要特別注明。嚴禁標本直接用口吸取、接觸皮膚或污染器皿的外部和實驗臺。標本用后均要做消毒處理，盛標本的器皿要消毒處理或毀型、焚燒。標本因素對檢驗結(jié)果的影響第三節(jié)1生理因素的影響年齡應(yīng)針對項目在不同的年齡段制定相應(yīng)的參考范圍性別需要針對不同的性別制定相應(yīng)的參考范圍運動一般需在安靜狀態(tài)下采集標本一般主張在清晨抽血，住院病人可在起床前抽血，匆忙起床到門診的病人應(yīng)至少休息15分鐘后采血。1生理因素的影響情緒情緒激動、緊張可影響神經(jīng)-內(nèi)分泌系統(tǒng)功能妊娠妊娠是特殊的生理過程參考范圍與普通人不同體位生化血液標本的抽采體位應(yīng)以坐姿為宜采集時間生化檢驗血液標本的采集原則上必須是在清晨（7~9點）早餐前或進食12小時后采集。2飲食和藥物的影響1.飲食和嗜好不同食物對檢驗的結(jié)果影響不同；飲酒、嗜煙、過度饑餓、進食等都會影響檢驗的準確性，因此臨床生化血樣原則上必須堅持空腹采血，采血前禁食、煙、酒和各種飲料。2.藥物影響不同藥物對檢驗結(jié)果可造成不同程度的影響，藥物對檢驗的影響非常復(fù)雜，在采樣檢查之前，以暫停各種藥物為宜，如某種藥物不可停用，則應(yīng)了解可能對檢驗結(jié)果產(chǎn)生