腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移

腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移第一頁，共55頁。一、腫瘤生長的生物學(xué)（一）腫瘤生長的動力學(xué)（二）腫瘤的血管形成（三）腫瘤的演進(jìn)與異質(zhì)化二、惡性腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的機制（一）局部浸潤的過程（二）轉(zhuǎn)移的步驟（三）腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移的機制腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/172第二頁，共55頁。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移腫瘤是常見病、多發(fā)病，其中惡性腫瘤是威脅人類健康最嚴(yán)重的疾病之一。具有局部浸潤和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的能力是惡性腫瘤最主要的生物學(xué)特性，并且是導(dǎo)致患者死亡的主要原因。什么是腫瘤？腫瘤的生物學(xué)特征有哪些？惡性腫瘤是為何發(fā)生浸潤和轉(zhuǎn)移？惡性腫瘤的浸潤與轉(zhuǎn)移能否及時發(fā)現(xiàn)和預(yù)防？惡性腫瘤的浸潤過程中是否有特異性標(biāo)記物？

……2023/5/173第三頁，共55頁。一、腫瘤生長的生物學(xué)1.

腫瘤是轉(zhuǎn)化細(xì)胞單克隆增生的結(jié)果。2.惡性腫瘤的自然史：特定靶細(xì)胞的轉(zhuǎn)化→轉(zhuǎn)化細(xì)胞的生長→局部浸潤→遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移3.問題解答最終將是從腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機制中尋找。瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的過程是瘤細(xì)胞與宿主細(xì)胞之間相互作用的動態(tài)連續(xù)過程，這個過程是復(fù)雜的、多步驟的。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/174第四頁，共55頁。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移（一）腫瘤生長的動力學(xué)1.腫瘤細(xì)胞倍增時間（doublingtime)：與正常細(xì)胞相似或更長。2.生長分?jǐn)?shù)（growthfraction):指腫瘤細(xì)胞群體中處于增殖階段的細(xì)胞比例。3.腫瘤細(xì)胞的生成與丟失：決定腫瘤能否不斷生長及其長大速度。4.腫瘤干細(xì)胞（tumorstemcell):占腫瘤細(xì)胞總數(shù)的很少部分。如乳腺癌少于2%，急性粒細(xì)胞性白血病在0.1%~1%之間。2023/5/175第五頁，共55頁。（二）腫瘤的血管形成

誘導(dǎo)腫瘤血管生產(chǎn)的能力是惡性腫瘤能生長、浸潤與轉(zhuǎn)移的前提之一。新生血管對腫瘤生長具有雙重意義：一是獲得營養(yǎng)和氧的供應(yīng)，二是新生血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌多肽生長因子（如胰島素樣生長因子和PDGF等），刺激腫瘤細(xì)胞生長。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/176第六頁，共55頁。（三）腫瘤的演進(jìn)與異質(zhì)化1.腫瘤的演進(jìn)（progression)：惡性腫瘤在生長過程中變得越來越富有侵襲性和獲得更大惡性潛能的現(xiàn)象，包括生長加快、浸潤周圍組織和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等。2.腫瘤的異質(zhì)化(heterogeneity)：指由一個克隆來源的腫瘤細(xì)胞群在生長過程中形成在侵襲力、生長速度、對激素的反應(yīng)、對抗癌藥物的敏感性等方面有所不同的亞克隆的過程。腫瘤異質(zhì)化是演進(jìn)的基礎(chǔ)！腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/177第七頁，共55頁。二、惡性腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移的機制（一）局部浸潤的過程第一步：腫瘤細(xì)胞之間的粘附力減弱:cadherin↓、Fn↓→細(xì)胞間連接↓；第二步：腫瘤細(xì)胞與基底膜和細(xì)胞外基質(zhì)粘附力增強：Ln受體↑,Fn受體↑；第三步：腫瘤細(xì)胞降解基底膜與細(xì)胞外基質(zhì)，

Cathepsin-D,u-PA溶解Ln、Fn

；第四步：腫瘤細(xì)胞的移出：阿米巴運動→游出

。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/178第八頁，共55頁。局部浸潤的機制示意圖2023/5/179第九頁，共55頁。（二）轉(zhuǎn)移的步驟①腫瘤細(xì)胞同質(zhì)型粘附降低，從原發(fā)灶脫離；②腫瘤細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）發(fā)生異質(zhì)型粘附增加；③ECM降解；腫瘤細(xì)胞與ECM中大分子作用，分泌蛋白降解酶類降解ECM成分，形成腫瘤細(xì)胞移動的通道，并以此為誘導(dǎo)血管生成的基礎(chǔ)；④腫瘤細(xì)胞運動性增強在粘附降解的過程中移動，穿透ECM，并穿透血管壁的基底膜進(jìn)入循環(huán)；⑤在循環(huán)中運行逃避免疫系統(tǒng)識別與破壞；⑥到達(dá)繼發(fā)部位后，在有新生血管形成的前提下增殖，形成轉(zhuǎn)移灶。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1710第十頁，共55頁。轉(zhuǎn)移的機制示意圖2023/5/1711第十一頁，共55頁。（三）腫瘤侵襲與轉(zhuǎn)移的機制1.瘤細(xì)胞同質(zhì)型粘附下降

同質(zhì)型（homotypic）粘附：是指同種細(xì)胞間的粘附，主要由存在于細(xì)胞表面的粘附分子（celladhesionmoleculeCAM）所介導(dǎo)。同質(zhì)型粘附下降，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞從瘤體上脫落，所以CAM在腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移中起重要作用。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1712第十二頁，共55頁。（1）鈣粘蛋白（Cadherin）

鈣粘蛋白是鈣依賴性跨膜糖蛋白，是一組依賴細(xì)胞外Ca2+的CAM，介導(dǎo)Ca2+依賴性細(xì)胞間粘附，通過同類或同分子親和反應(yīng)相結(jié)合。鈣粘蛋白參與建立和維持細(xì)胞間連接，可能是最重要的形成細(xì)胞間聯(lián)系的細(xì)胞粘附因子之一。已克隆了4種鈣粘蛋白，一級結(jié)構(gòu)相似，由723-748個氨基酸組成，每個鈣粘蛋白分子包含一個信號肽，一個含三個重復(fù)結(jié)構(gòu)的細(xì)胞外區(qū)，一個跨膜錨定作用的高疏水區(qū)，還有一個較長的胞內(nèi)尾部。不同組織不同種族之間鈣粘蛋白的同源性為50%-60%。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1713第十三頁，共55頁。根據(jù)基因克隆免疫學(xué)特征及分布組織不同，將鈣粘蛋白家族分為三個亞類:①E-Cad：見于成熟上皮細(xì)胞;②N-Cad：成熟神經(jīng)組織及肌肉組織;③P-Cad：起初在胎盤及上皮基底層發(fā)現(xiàn)，后來發(fā)現(xiàn)發(fā)育過程中在其它組織也有短暫表達(dá)。近來又發(fā)現(xiàn)新的亞類，如內(nèi)皮細(xì)胞鈣粘蛋白和橋連粘附蛋白（desmoglein），以及V-Cad，M-Cad，B-Cad，R-Cad，T-Cad等。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1714第十四頁，共55頁。鈣粘蛋白選擇性地與同種分子親和性結(jié)合，這種粘附反應(yīng)是利用其細(xì)胞外結(jié)構(gòu)中“組-丙-頡”（HAV）序列來識別和介導(dǎo)的，鈣粘蛋白的功能依賴于胞漿內(nèi)結(jié)構(gòu)與細(xì)胞骨架元件之間的作用。但這種作用是間接的與三種胞漿連鎖蛋白（catenin）α、β、γ結(jié)合，這些分子與鈣粘蛋白一起位于細(xì)胞的粘附小帶(zonuleadherin)上，參與連接的形成與穩(wěn)定。鈣粘蛋白也是重要的形態(tài)分子，E-Cad作用于形成完整的上皮層，P-Cad則在基底層起作用，這些鈣粘蛋白的存在對于保持上皮和內(nèi)皮結(jié)構(gòu)很重要，其表達(dá)改變將導(dǎo)致細(xì)胞-細(xì)胞間正常連接完整性的喪失。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1715第十五頁，共55頁。

目前認(rèn)為與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移關(guān)系最密切的是E-Cad。許多研究證實E-Cad與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，可能由于E-Cad能促進(jìn)瘤細(xì)胞的同質(zhì)型粘附不易使瘤細(xì)胞從瘤體上脫落。體外試驗表明，有E-Cad表達(dá)的腫瘤細(xì)胞株無浸潤性，而浸潤型表型的腫瘤細(xì)胞株則無E-Cad表達(dá)。E-Cad表達(dá)與腫瘤細(xì)胞分化之間有密切關(guān)系，分化好的細(xì)胞E-Cad正常，分化差的細(xì)胞E-Cad不表達(dá)。編碼E-Cad的基因是腫瘤抑制基因，此基因突變或缺失導(dǎo)致細(xì)胞過度增生，細(xì)胞形態(tài)及分化異常。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1716第十六頁，共55頁。

轉(zhuǎn)染E-CadcDNA可抑制腫瘤細(xì)胞的浸潤轉(zhuǎn)移。Vleminchix等給高浸潤性細(xì)胞株轉(zhuǎn)染E-CadcDNA，使其浸潤性降低，體內(nèi)形成腫瘤后分化亦較未轉(zhuǎn)染的細(xì)胞好。轉(zhuǎn)染E-Cad反義RNA到E-Cad高表達(dá)的細(xì)胞株中，使E-Cad表達(dá)下調(diào)，并促使浸潤。Biawy報道67%舌鱗癌E-Cad表達(dá)下降。E-Cad（-）者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移發(fā)生率遠(yuǎn)高于E-Cad（+）者。以攜帶E-CadmRNA的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染高侵襲性的癌細(xì)胞，可使其侵襲性消失。因此認(rèn)為E-Cad是一種抑制侵襲轉(zhuǎn)移的因子。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1717第十七頁，共55頁。（2）瘤細(xì)胞表面電荷增加

瘤細(xì)胞表面電荷增加時瘤細(xì)胞間的排斥力增大，促使瘤細(xì)胞從瘤體上脫落。瘤細(xì)胞表面電荷大小可以通過電泳速度表現(xiàn)出來。細(xì)胞電泳率的大小與轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)。所以細(xì)胞電泳速度被認(rèn)為是篩選不同浸潤和轉(zhuǎn)移潛能瘤細(xì)胞的初篩標(biāo)記。

此外溶解性酶的釋放，細(xì)胞間隙壓力的增加，也有利于瘤細(xì)胞從瘤體上脫落下來。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1718第十八頁，共55頁。2.瘤細(xì)胞異質(zhì)型粘附的增加

異質(zhì)型（heterotypic）粘附是指瘤細(xì)胞與宿主細(xì)胞、或宿主基質(zhì)的粘附。瘤細(xì)胞脫離瘤體，浸潤到基底膜或穿過基底膜遭遇宿主基質(zhì)和宿主細(xì)胞，這一過程就是異質(zhì)型粘附的過程。這一過程有利于瘤細(xì)胞穿過基質(zhì)、血管壁的基底膜，有利于瘤細(xì)胞在血管內(nèi)聚積。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1719第十九頁，共55頁。（1）整合素（Integrin）是一組介導(dǎo)異質(zhì)粘附的細(xì)胞粘附分子。整合素：由α/β亞單位通過非共價鍵相連的異二聚體，是一類細(xì)胞表面糖蛋白，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)18種α亞單位和11種β亞單位，可形成20多種整合素。整合素配體：Ⅰ型、Ⅳ型膠原、LN、FN、Vitronectin、endotoxin、ICAM-1、VCAM-1。

整合素與相鄰細(xì)胞上或ECM中相應(yīng)配體相結(jié)合，參與細(xì)胞信號傳導(dǎo)及細(xì)胞骨架改變。在細(xì)胞生長、分化、形成連接和維持極性等方面起重要作用。

腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1720第二十頁，共55頁。根據(jù)作用方式分三類：介導(dǎo)細(xì)胞與ECM的粘附反應(yīng)：介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞間粘附反應(yīng)：既介導(dǎo)細(xì)胞-細(xì)胞又介導(dǎo)細(xì)胞-ECM的粘附反應(yīng)：

在整合素配體中多含有RGD（精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸）序列，這一序列是整合素的結(jié)合位點。含有RGD序列的多肽具有抑制細(xì)胞-細(xì)胞外蛋白（如FN、LN）的粘附反應(yīng)，并具有抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的作用。

整合素分子結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的改變與腫瘤細(xì)胞浸潤轉(zhuǎn)移行為密切相關(guān)。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1721第二十一頁，共55頁。（2）LN受體（LN-R）

瘤細(xì)胞只有通過基底膜才能產(chǎn)生浸潤與轉(zhuǎn)移。LN是基底膜的重要組成部分，瘤細(xì)胞通過其表面的LN-R與基底膜中的LN結(jié)合而穿過基底膜。80年代初就發(fā)現(xiàn)了LN的67KD受體能識別LN分子的β2鏈，研究證實了LN-R能促進(jìn)瘤細(xì)胞的粘連性和移動性，其高表達(dá)與乳癌，肺癌，結(jié)腸癌等許多腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移能力呈正相關(guān)。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1722第二十二頁，共55頁。（3）CD44及其變體

也稱為Hermes抗原，H-CAM、Pag-1抗原，細(xì)胞外基質(zhì)受體Ⅲ（ECM-Ⅲ）。CD44V1-10，分子量約85-160KD，目前研究較多的是CD44v6。

CD44是一種淋巴細(xì)胞表面的歸巢（homing）受體，在多種高轉(zhuǎn)移性癌中高表達(dá)。CD44原為淋巴細(xì)胞和小靜脈內(nèi)皮細(xì)胞有關(guān)的分子，CD44陽性的瘤細(xì)胞也可能因此獲得淋巴細(xì)胞的偽裝，更易進(jìn)入淋巴結(jié)形成轉(zhuǎn)移。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1723第二十三頁，共55頁。

CD44的功能：1）作為透明質(zhì)酸受體（C-C,C–ECM間的黏附）；2）為淋巴細(xì)胞歸巢分子；3）賦予腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移潛能；4）參與正常免疫應(yīng)答(Tc活動和炎癥反應(yīng)）。

腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1724第二十四頁，共55頁。腫瘤細(xì)胞表達(dá)的CD44刺激腫瘤生長的途徑：1）固定腫瘤細(xì)胞，為克隆形成提供場所；2）腫瘤細(xì)胞與基質(zhì)細(xì)胞相互作用產(chǎn)生生長因子及血管生成因子，促進(jìn)腫瘤生長；3）腫瘤細(xì)胞通過ECM的蛋白聚糖獲得隱蔽的生長因子，逃避免疫監(jiān)視；4）CD44還可識別宿主組織的額外配體，直接刺激腫瘤細(xì)胞增殖；5）CD44的胞漿內(nèi)部分與細(xì)胞骨架蛋白作用，傳導(dǎo)細(xì)胞分裂信號。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1725第二十五頁，共55頁。

Culty等進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)實驗表明，乳癌細(xì)胞CD44表達(dá)與其浸潤能力呈正相關(guān)，只有CD44高表達(dá)的細(xì)胞株才有結(jié)合降解透明質(zhì)酸鹽的能力，[H3]標(biāo)記的透明質(zhì)酸鹽降解率與CD44含量和細(xì)胞浸潤生物學(xué)潛能密切相關(guān)，CD44結(jié)合降解透明質(zhì)酸鹽能力可被抗CD44抗體Hermes-1阻斷。介導(dǎo)降解透明質(zhì)酸鹽是CD44在腫瘤細(xì)胞浸潤過程中主要功能之一。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1726第二十六頁，共55頁。Washington等免疫組化分析表明，CD44表達(dá)與胃癌浸潤表型及生存期有關(guān)，認(rèn)為CD44高表達(dá)是浸潤表型及預(yù)后差的指標(biāo)。Castella等用免疫組化方法檢測14例早期胃癌，37例晚期胃癌，18例胃周圍轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)。結(jié)果表明浸潤程度與CD44表達(dá)沒有明顯關(guān)系，但腸型胃癌轉(zhuǎn)移灶CD44V6陽性率比彌漫型胃癌轉(zhuǎn)移灶中CD44V6陽性率顯著增高，說明CD44V6表達(dá)可能與腸型胃癌，而不是彌漫型胃癌的轉(zhuǎn)移有關(guān)。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1727第二十七頁，共55頁。（4）路易斯寡糖（SLEX）

SLEX在正常成人分布于粒細(xì)胞，單核細(xì)胞表面。在腫瘤分布于上皮性腫瘤細(xì)胞表面如肺癌，胃癌，結(jié)腸癌等。SLEX可分泌入血，腫瘤病人血清中可查到SLEX。最近研究指出，腫瘤細(xì)胞表面唾液酸化的SLEX作為血管內(nèi)皮細(xì)胞上的E-選擇素的配體，是結(jié)腸癌早期診斷、癌浸潤、預(yù)后不良的一個指標(biāo)。結(jié)腸癌細(xì)胞表面SLEX抗原結(jié)構(gòu)和數(shù)量的變化是導(dǎo)致轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵因素。所以檢測血清或腫瘤組織中SLEX可以有效監(jiān)測腫瘤，尤其是結(jié)腸癌轉(zhuǎn)移。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1728第二十八頁，共55頁。1.開始黏附選擇素與糖蛋白E\Pselectin---Ec---CD34SLEX----腫瘤細(xì)胞--Lselectin2.腫瘤細(xì)胞通過selectin的結(jié)合或介導(dǎo)selectin間的相互作用3.受體間相互作用出現(xiàn)牢固黏附4.腫瘤細(xì)胞與Ec表面同形分子（CD31）相互作用介導(dǎo)細(xì)胞間的移出。

2023/5/1729第二十九頁，共55頁。（5）免疫球蛋白超家族（Ig-SF）

Ig-SF包括許多有共同結(jié)構(gòu)特征的分子，這一結(jié)構(gòu)包含170-210氨基酸組成7-9個β折疊，每個單位在兩條β鏈之間由二硫鍵形成穩(wěn)定復(fù)合物。Ig-SF大部分成員參與細(xì)胞間識別（包括那些有免疫功能的分子，如MHA、CD4、CD8和T細(xì)胞受體，參與N發(fā)育（N-CAM，L1）、白細(xì)胞交流（ICAM-1，VCAM-1，PECAM-1）和信息傳遞（CSF-1受體，血小板源性生長因子受體）。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1730第三十頁，共55頁。CEA

CEA是一種高度糖基化的細(xì)胞表面糖蛋白，分子量為180KD。近年來對CEA基因及蛋白結(jié)構(gòu)分析表明，CEA是Ig-SF的成員之一，是一種重要的細(xì)胞粘附分子，可能有細(xì)胞識別和相互作用的功能，作為粘附分子，CEA可增強腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞間的結(jié)合。Hostetter等給予外源性的CEA后，促進(jìn)結(jié)、直腸癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移潛能。Benchimol等觀察到產(chǎn)生CEA多的細(xì)胞株比產(chǎn)生CEA少的細(xì)胞株聚集得快，這種聚集可被CEA抗體完全抑制。將CEA的cDNA轉(zhuǎn)染結(jié)腸癌細(xì)胞株，測定細(xì)胞株CEA表達(dá)水平，再將表達(dá)CEA不同的細(xì)胞株注射入裸鼠脾臟，結(jié)果表明，CEA高表達(dá)的細(xì)胞株肝臟轉(zhuǎn)移明顯高于CEA低表達(dá)者，并且有肝轉(zhuǎn)移的裸鼠血清CEA亦明顯升高。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1731第三十一頁，共55頁。N-CAM

N-CAM是一種同種親和性鈣依賴性細(xì)胞-細(xì)胞粘附分子，起初表達(dá)于N系統(tǒng)。N-CAM的表達(dá)隨發(fā)育而改變，N-CAM可降低細(xì)胞的粘附性，使細(xì)胞呈“漂浮”狀態(tài)。N-CAM在惡性發(fā)展過程中可能的機制是：涉及細(xì)胞生長的接觸抑制。轉(zhuǎn)化N-CAM的細(xì)胞株喪失接觸抑制，用抗N-CAM抗體則可抑制腫瘤的生長。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1732第三十二頁，共55頁。V-CAM-1（INCAM10）VCAM（vascularcelladhesionmolecule-1）或INCAM（induciblecelladhesionmolecule）是血管內(nèi)皮細(xì)胞中細(xì)胞因子誘導(dǎo)的粘附分子，屬Ig-SF成員，是VLA-4（α4/β1）的受體。V-CAM-1的功能是介導(dǎo)白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞之間的粘附反應(yīng)，許多惡性細(xì)胞中也有VLA-4表達(dá)，因此V-CAM-1在這些有VLA-4表達(dá)的腫瘤中作為腫瘤細(xì)胞粘附受體。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1733第三十三頁，共55頁。ICAM-1

是相對分子質(zhì)量為9000的糖蛋白，是免疫球蛋白粘附因子家族成員，可與整合素αL/β2和Mac-l連接，主要參與細(xì)胞與細(xì)胞之間的連接，與腫瘤轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。除介導(dǎo)粘附外，實驗證實ICAM-1可從腫瘤細(xì)胞表面脫落，進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)形成可溶性分子，可助腫瘤細(xì)胞逃逸CTL和NK細(xì)胞的免疫監(jiān)視效應(yīng)，促進(jìn)腫瘤的發(fā)生與轉(zhuǎn)移。裸鼠人肝癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移模型LDI-20D中，轉(zhuǎn)移形成前后，癌組織ICAM表達(dá)水平差別顯著，轉(zhuǎn)移建立后ICAM表達(dá)明顯上調(diào)。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1734第三十四頁，共55頁。3.細(xì)胞外基質(zhì)降解

細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）主要由膠原，糖蛋白，蛋白多糖和氨基葡萄糖組成。ECM以基底膜和間質(zhì)結(jié)締組織的形式存在，膠原是ECM的主要成分，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型膠原主要存在于間質(zhì)結(jié)締組織中，Ⅳ型膠原則主要存在于基底膜。ECM中的糖蛋白包括LN，F(xiàn)N和ND（接觸蛋白）等。ECM是腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移的天然屏障，腫瘤從原位增殖到浸潤轉(zhuǎn)移的演進(jìn)過程中必須具備降解ECM的能力。能溶解ECM的酶主要是蛋白水解酶，它們的活性均與腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1735第三十五頁，共55頁。2023/5/1736第三十六頁，共55頁。四類蛋白水解酶基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）絲氨酸蛋白酶半胱氨酸蛋白酶（Caspases家族）天門冬氨酸蛋白酶

他們幾乎能降解ECM中的所有成分，是近年腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移研究中的熱點

腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1737第三十七頁，共55頁。（1）基質(zhì)金屬蛋白酶（MatrixmetalloprotinaseMMP）

是一組鋅離子依賴性內(nèi)肽酶（①間質(zhì)膠原酶②明膠酶③間充質(zhì)溶解素），大小各異底物不盡相同，但至少都含有信號肽，前肽，催化區(qū)3個結(jié)構(gòu)區(qū)。酶催化區(qū)和前肽區(qū)具有高度保守性。經(jīng)典型MMP以水溶性酶原形式分泌至細(xì)胞外，需要在激活劑作用下，脫去前肽才具酶活性。新型MMP則不同，間質(zhì)溶解素可直接以活性酶形式分泌至細(xì)胞外。膜型MMP（membranetypeMMPMT-MMP）則結(jié)合于胞膜上，它們的共同特征是在前肽區(qū)和催化區(qū)間有一含RXKR序列的插入?yún)^(qū)，可能與其活化有關(guān)。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1738第三十八頁，共55頁。MMP的調(diào)節(jié)三個水平調(diào)控MMP的表達(dá)和活性1.酶原合成：生長因子和細(xì)胞因子等活性介質(zhì)(EGF,TGF-β等是酶原合成階段最主要的調(diào)節(jié)因子)，它們不僅能促進(jìn)或抑制MMPmRNA的轉(zhuǎn)錄，而且能影響其半衰期。2.酶原活化：組織金屬蛋白酶抑制劑（tissueinhibitorofmetalloproteinaseTIMP）可以通過抑制MMP內(nèi)源性物質(zhì)而抑止MMP的活性。3.抑制劑抑制：腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1739第三十九頁，共55頁。

各種MMP之間具有一定的底物特異性，但不是絕對的。同一種MMP可降解多種ECM成分，而某一種ECM成分又可以被多種MMP降解。但不同酶的降解效率可有不同。

MMP的眾多調(diào)控因素構(gòu)成微妙的調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)，正是這種精確的調(diào)控機制保證了機體內(nèi)生理狀態(tài)下細(xì)胞遷移的ECM重構(gòu)；反之就成為腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移等病理過程發(fā)生的原因。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1740第四十頁，共55頁。MMP與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)系

MMP與腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的關(guān)系正被MMP基因轉(zhuǎn)染技術(shù)所證實，將基質(zhì)溶素和MT1-MMP完整cDNA導(dǎo)入無轉(zhuǎn)移潛能的或轉(zhuǎn)移潛能較弱的細(xì)胞后，受染細(xì)胞的侵襲、轉(zhuǎn)移率大大提高。反之將MMP的反義核酸序列導(dǎo)入高侵襲轉(zhuǎn)移潛能的細(xì)胞后，可使其侵襲轉(zhuǎn)移表型減弱。通過調(diào)節(jié)MMP抑制劑的水平，也證實了MMP在腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1741第四十一頁，共55頁。

MMP在人體腫瘤中表達(dá)較復(fù)雜，不同的研究結(jié)果也不盡相同，腫瘤細(xì)胞及其附近間質(zhì)細(xì)胞中均有表達(dá)的報道。間質(zhì)細(xì)胞主要是指（成）纖維細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞，巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等。腫瘤周邊的間質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生MMP，提示腫瘤細(xì)胞可以通過可溶性介質(zhì)或膜結(jié)合分子與間質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行信息交換，協(xié)同產(chǎn)生和調(diào)節(jié)MMP，這在腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移機制中具有重要意義。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1742第四十二頁，共55頁。（2）胱氨酸蛋白酶

胱氨酸蛋白酶包括CathepsinB、D、H等，CathepsinD能降解基底膜、間質(zhì)Ⅰ、Ⅲ型膠原、蛋白聚糖、肌動蛋白、肌球蛋白、FN，從而促進(jìn)許多腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。組織蛋白酶β基因表達(dá)與腫瘤惡性程度平行。

腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1743第四十三頁，共55頁。（3）半胱氨酸蛋白酶Caspase家族

至今已發(fā)現(xiàn)有14種Caspase，分為3組。1.Caspase-2，-8，-9，是細(xì)胞凋亡的起始Caspase（啟動者），2.Caspase-3，-6，-7，執(zhí)行細(xì)胞凋亡，是效應(yīng)Caspase（執(zhí)行者）。(這兩組Caspase在細(xì)胞凋亡中缺一不可)3.Caspase-1，-4，-5，與細(xì)胞凋亡的關(guān)系不是很密切，可能與多種炎癥因子的成熟有關(guān)。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1744第四十四頁，共55頁。（4）絲氨酸蛋白酶（纖溶酶原激活劑，As）

包括白細(xì)胞彈性蛋白酶和組織蛋白酶G，As可使纖溶酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槔w溶酶，纖溶酶的底物較為廣泛，可降解ECM的許多成分，包括FN、LN蛋白聚糖的蛋白質(zhì)核心。纖溶酶還可激活一些前金屬蛋白酶及潛伏彈性蛋白酶。已證明As在許多腫瘤，尤其是肝癌、乳腺癌、卵巢癌、肺癌中高度表達(dá)，它參與降解基質(zhì)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1745第四十五頁，共55頁。4.腫瘤運動性增強

（1）移動素（Motogen）

可以刺激腫瘤細(xì)胞移動性的不同方面，包括：遷移、趨化性、化學(xué)激動作用、吞噬動力學(xué)等。移動素分為三大類：①刺激腫瘤細(xì)胞移動與浸潤的因子:如移動刺激因子、單核細(xì)胞源性分散因子、膠原性移動因子和自分泌移動因子（AMF）。②刺激生長與移動的因子:如肝細(xì)胞生長因子（HGF）、分散因子、內(nèi)皮生長因子（EGF）和IL-1，3，6。③刺激移動但抑制生長的因子:如轉(zhuǎn)化生長因子（TGF）和干擾素（INF）。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1746第四十六頁，共55頁。自分泌移動因子（AMFs）

AMFs是一類由多種腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白因子，各自有特異的糖蛋白受體，信號傳導(dǎo)受G蛋白調(diào)節(jié)，最近發(fā)現(xiàn)AMFs還可以旁分泌方式作用，此時稱之為旁分泌移動因子（PMF），調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長及移動。肝細(xì)胞生長因子（HGF）

于1984年由Nakamura首先識別，可刺激肝細(xì)胞合成DNA，后來發(fā)現(xiàn)HGF是由成纖維細(xì)胞產(chǎn)生的一種蛋白因子，也稱之為播散因子（scatterfacter）。HGF可與細(xì)胞膜上HGF受體結(jié)合刺激細(xì)胞移動和增殖。HGF是一跨膜蛋白因子，含有一個酪氨酸激酶的結(jié)構(gòu)功能區(qū)，這一結(jié)構(gòu)功能區(qū)由原癌基因c-met編碼。腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1747第四十七頁，共55頁。5.腫瘤新生血管是轉(zhuǎn)移阻力最小的通道

腫瘤長到1-2mm3時，為保證快速增殖必須新生血管支持。由腫瘤誘導(dǎo)產(chǎn)生的血管，其基底膜薄而且易斷裂，腫瘤細(xì)胞很容易進(jìn)入這種血管。所以新生血管的形成十分有利于腫瘤的轉(zhuǎn)移，而一切有利于腫瘤新生血管形成的細(xì)胞因子也均有利于腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。這些細(xì)胞因子包括酸性或堿性纖維母細(xì)胞生長因子（aFGF、bFGF）、血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）又叫血管通透因子（VPF）、表皮生長因子/轉(zhuǎn)化生長因子（EGF/TGF）。除此之外IL-8、GM/M-GSF、IGF-1、IFN2、促血管素（angiotropin）、P物質(zhì)等能促進(jìn)腫瘤新生血管形成。

腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移2023/5/1748第四十八頁，共55頁。UchidaS等研究顯示VEGF表達(dá)與食管癌的浸潤程度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移高度相關(guān)。VEGF促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移的機制除了與它參與腫瘤新生血管形成，使血管通透性增加外，還與它能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞金屬蛋白酶和間質(zhì)膠原酶的產(chǎn)生有關(guān)。研究表明腫瘤微血管數(shù)目和微血管密度直接與腫瘤浸潤和轉(zhuǎn)移有關(guān)，誘發(fā)腫瘤血管生成是具有轉(zhuǎn)移潛能的腫瘤細(xì)胞特性之一，長期以來病理學(xué)家注意到一個事實，這也許正如淋巴