高校液相色譜分析方法

中藥制劑分析技術(shù)

精品課程配套電子教案點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本一、高效液相色譜法分析方法（一）定性分析方法HPLC定性方法分為色譜鑒定法和非色譜鑒定法，后者又分為化學(xué)鑒定法和兩譜聯(lián)用鑒定法。1．色譜鑒定法

此法利用色譜定性參數(shù)保留時(shí)間（或保留體積）和相對(duì)保留值或用已知物對(duì)照法對(duì)組分進(jìn)行鑒別。點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本一、高效液相色譜法分析方法2．化學(xué)鑒定法收集色譜餾分，利用專屬性化學(xué)反應(yīng)對(duì)組分進(jìn)行定性鑒定。3．兩譜聯(lián)用鑒定法當(dāng)組分分離度足夠大時(shí)，以制備高效液相色譜獲得純組分，用UV、IR、MS或NMR等手段進(jìn)行定性鑒定。點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本一、高效液相色譜法分析方法（二）定量分析方法HPLC定量方法與GC相似，但較少用歸一化法，常用外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法。1．外標(biāo)法以組分的標(biāo)準(zhǔn)品作對(duì)照物質(zhì)，求算試樣的含量。（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線法點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本一、高效液相色譜法分析方法

將待測(cè)組分的標(biāo)準(zhǔn)品配制成不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液（cs），準(zhǔn)確稱取試樣，配成試樣溶液，相同條件下，分別進(jìn)樣，記錄各標(biāo)準(zhǔn)系列溶液和試樣溶液的峰面積（As）或峰高（hs），以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的峰面積或峰高對(duì)cs作標(biāo)準(zhǔn)曲線，利用此曲線或相應(yīng)的回歸方程，計(jì)算試樣含量。點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本一、高效液相色譜法分析方法（2）外標(biāo)一點(diǎn)法

用一種濃度的對(duì)照品溶液對(duì)比，求試樣含量。2．內(nèi)標(biāo)法用待測(cè)組分對(duì)內(nèi)標(biāo)物的峰面積比或峰高比，求算試樣含量。（1）標(biāo)準(zhǔn)曲線法點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本一、高效液相色譜法分析方法

在各種濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液中，加入相同量的內(nèi)標(biāo)物，分別進(jìn)樣，測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)物與內(nèi)標(biāo)物的峰面積或峰高，以其峰面積比或峰高比對(duì)cs作標(biāo)準(zhǔn)曲線，求出回歸方程。試樣用相同方法試驗(yàn)，以其峰面積比或峰高比在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出或用回歸方程計(jì)算出試樣中被測(cè)組分含量。點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本點(diǎn)擊添加文本一、高效液相色譜法分析方法（2）內(nèi)標(biāo)對(duì)比法（內(nèi)標(biāo)一點(diǎn)法）

只配制一個(gè)濃度的對(duì)照品溶液，然后在試樣和對(duì)照品溶液中，分別加入相同量（濃度）