牛乳中氯霉素的檢測(cè)

關(guān)于牛乳中氯霉素的檢測(cè)第1頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月氯霉素（CAP）氯霉素是一種廣譜抗生素，它能夠?qū)θ祟愒斐芍旅难杭膊?。如抑制人體骨髓造血功能而引起再生障礙性貧血癥和粒狀白細(xì)胞缺乏癥等疾病。因此當(dāng)沒有其他替代品可用的時(shí)候，才會(huì)被應(yīng)用作為治療嚴(yán)重感染。第2頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月氯霉素（CAP）通常情況下，氯霉素僅僅作為外用制劑使用，比如氯霉素滴眼液。第3頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月氯霉素曾經(jīng)作為獸藥使用氯霉素在動(dòng)物中的應(yīng)用是很有吸引力的，因?yàn)閯?dòng)物對(duì)它有良好的耐受性，而且氯霉素在組織和體液中有良好的分布，半衰期長(zhǎng)，而且價(jià)格便宜。第4頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月禁令

美國(guó)規(guī)定在動(dòng)物性食品中不得檢出氯霉素。

歐盟已明文規(guī)定氯霉素不再作為獸藥使用。

香港衛(wèi)生署也提出輸港生牛奶中不能有抗生素殘留不含有抗生素殘留的牛奶已成為國(guó)際市場(chǎng)原料奶收購標(biāo)準(zhǔn)。第5頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)2001年9月我國(guó)農(nóng)業(yè)部發(fā)布了《無公害食品生鮮牛奶》行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)生鮮牛乳的衛(wèi)生指標(biāo)明確不得檢出抗生素。2002年起國(guó)家禁止將氯霉素用于所有食品動(dòng)物。第6頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月牛奶中殘留氯霉素的檢測(cè)方法競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫法(ELISA)氣相色譜&質(zhì)譜聯(lián)用(GS-MS)高效液相色譜&質(zhì)譜聯(lián)用(HPLC-MS)高效液相色譜&熒光檢測(cè)法(HPLC-FL)其中，美國(guó)FDA推薦使用的確證方法是氣-質(zhì)聯(lián)用(GS-MS)和液-質(zhì)聯(lián)用(HPLC-MS)第7頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫法(ELISA)利用抗體抗原反應(yīng)。微孔板包有氯霉素抗體，加入氯霉素標(biāo)記物、標(biāo)準(zhǔn)和樣品溶液。游離氯霉素與氯霉素酶標(biāo)記物競(jìng)爭(zhēng)氯霉素抗體。沒有連接的酶標(biāo)記物在洗滌步驟中被洗去。將酶基質(zhì)（過氧化尿素）和發(fā)色劑（四甲基聯(lián)苯胺）加入到孔中并孵育；結(jié)合的酶標(biāo)記物將無色的發(fā)色劑轉(zhuǎn)化成藍(lán)色的產(chǎn)物。加入反應(yīng)停止液后使顏色由藍(lán)變?yōu)辄S，在450nm處測(cè)量，吸光度與樣品的氯霉素濃度成反比。第8頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月ELISA檢測(cè)CAP的特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：最低檢測(cè)可達(dá)到0.02ug/kg左右，方法靈敏度較高,特異性強(qiáng),試樣預(yù)處理簡(jiǎn)單,分析時(shí)間短,也不需要復(fù)雜的儀器設(shè)備,使用方便。缺點(diǎn)：由于抗體的批次不同,測(cè)定結(jié)果可能出現(xiàn)微小差異。第9頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月液相色譜法（LC）根據(jù)檢測(cè)器的不同，分為三種方法高效液相色譜-二極管陣列法(HPLC-PDA)高效液相色譜-熒光法(HPLC-FLU)高效液相色譜-紫外法(HPLC-UV)第10頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月液相LC原理系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相)內(nèi),由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù),被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出,通過檢測(cè)器時(shí),樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀,數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。第11頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月LC檢測(cè)CAP的特點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)：CAP都有很強(qiáng)的紫外吸收,可以直接用HPLC/UVD測(cè)定,用C18柱,樣品制備不需要衍生化過程,操作簡(jiǎn)單。缺點(diǎn)：UVD選擇性較差,具有紫外吸收的雜質(zhì)都會(huì)產(chǎn)生干擾,故此方法的檢測(cè)限不夠理想。措施：采用FIU檢測(cè)器，其檢測(cè)限可達(dá)0.1Ug/L。第12頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月氣相GC原理氣相色譜系統(tǒng)由惰性固體上涂著液體的固定相和不斷通過管柱的氣體的流動(dòng)相組成。利用固定相對(duì)樣品中各組分吸附或溶解能力不同，即各組分在固定相和流動(dòng)相分配系數(shù)的差別，從而達(dá)到分離的目的。第13頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月GC檢測(cè)CAP的特點(diǎn)采用樣品提取后衍生化,再用氮吹干、定容的方法進(jìn)行氣相色譜檢測(cè)。優(yōu)點(diǎn)：高分離效能、高選擇性、高靈敏度、快速、應(yīng)用廣。缺點(diǎn)：氯霉素分子中含有硝基、羥基,分子極性大,需繁瑣的衍生化步驟。第14頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月氣-質(zhì)聯(lián)用GC-MS和液-質(zhì)聯(lián)用LC-MSGC/MS法和LC/MS法集高效分離和結(jié)構(gòu)鑒定于一體,成為復(fù)雜混合物中痕量組分定性和定量的有力工具。GC/MS技術(shù)能夠非常準(zhǔn)確地確證食品中殘留的氯霉素,但樣品處理過程中必須進(jìn)行衍生化反應(yīng),使該方法的應(yīng)用受到了限制。近年來LC/MS儀器的普及率逐年提高,LC/MS有逐漸取代GC/MS,成為確證氯霉素殘留分析方法的趨勢(shì)。第15頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月展望我國(guó)是產(chǎn)奶大國(guó)，但奶品質(zhì)量問題不斷，奶牛養(yǎng)殖過程中濫用CAP,成為一個(gè)嚴(yán)重的安全問題。由于我國(guó)尚未有成本較低、療效較好的能夠完全替代氯霉素的藥物產(chǎn)品,氯霉素依然會(huì)在部分地區(qū)被非法使用。第16頁，課件共18頁，創(chuàng)作于2023年2月解決方案加快新藥開發(fā),提高養(yǎng)殖戶的食品安全意識(shí),合理用藥。