液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的原理及應(yīng)用

關(guān)于液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀的原理及應(yīng)用1第1頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀色譜的分離能力質(zhì)譜的定性功能實(shí)現(xiàn)對(duì)復(fù)雜混合物更準(zhǔn)確的定量和定性分析。而且也簡(jiǎn)化了樣品的前處理過(guò)程，使樣品分析更簡(jiǎn)便。第2頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3色譜質(zhì)譜聯(lián)用的接口接口：是將色譜儀與質(zhì)譜儀直接聯(lián)接起來(lái)的裝置。作用：將通過(guò)色譜儀分離開(kāi)的各種組分逐一送入質(zhì)譜儀中進(jìn) 行分析。接口要協(xié)調(diào)前后兩種儀器的輸出和輸入間的 矛盾。將兩種儀器的分析方法結(jié)合起來(lái)，協(xié)同作用， 取長(zhǎng)補(bǔ)短，獲得單獨(dú)使用時(shí)所不具備的功能。因此，接口是色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)中的關(guān)鍵裝置。第3頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月4色譜質(zhì)譜聯(lián)用的分類(lèi)

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用：開(kāi)發(fā)最早的色譜聯(lián)用儀器，適宜分析小分子、易揮發(fā)、熱穩(wěn)定、能氣化的化合物。

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用：液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用的接口問(wèn)題得到解決，近年有了飛速發(fā)展。適宜分析大分子（包括蛋白、多肽多聚物等）、不揮發(fā)、熱不穩(wěn)定、極性的化合物。

毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜聯(lián)用：近年發(fā)展迅速，特別對(duì)生物大分子的分類(lèi)分析十分有用。第4頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月5質(zhì)譜儀包括真空系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、離子源、質(zhì)量分析器、檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。真空系統(tǒng)VacuumSystem進(jìn)樣系統(tǒng)SampleInlet檢測(cè)器Detector數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)DataSystem質(zhì)量分析器MassAnalyser離子源IonizationSource質(zhì)譜儀第5頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月6質(zhì)譜儀的離子源、質(zhì)量分析器和檢測(cè)器必須處于高真空狀態(tài)。若真空度過(guò)低，則會(huì)造成離子源燈絲損壞、本底增高、圖譜復(fù)雜化、干擾離子源的調(diào)節(jié)、加速極放電等問(wèn)題。一般質(zhì)譜儀都采用機(jī)械真空泵（前級(jí)低真空泵）預(yù)抽真空，再用高效率油擴(kuò)散泵或分子渦輪泵（高真空泵）連續(xù)地運(yùn)行以保持真空。只有在足夠高的真空下，離子才能從離子源到達(dá)檢測(cè)器，真空度不夠則靈敏度低。真空系統(tǒng)第6頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月7進(jìn)樣系統(tǒng)是將分析樣品引入到離子源的裝置。進(jìn)樣方式：1直接進(jìn)樣2儀器聯(lián)用的進(jìn)樣（GC、LC、CE）

進(jìn)樣系統(tǒng)第7頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月8色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀的接口和色譜儀組成了質(zhì)譜的進(jìn)樣系統(tǒng)。接口應(yīng)滿足：1.接口的存在既不破壞離子源的高真空，也不 影響色譜柱的分離柱效；2.接口應(yīng)能使色譜分離后的各組分盡可能多的進(jìn)入質(zhì)譜儀的離子源，同時(shí)使色譜流動(dòng)相盡可能的不進(jìn)入質(zhì)譜的離子源；3.接口的存在不改變色譜分離后各組分的組成和結(jié)構(gòu)。儀器聯(lián)用的進(jìn)樣第8頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月9

離子源將欲分析樣品的原子或分子電離，得到帶電離子，并對(duì)離子進(jìn)行加速使其進(jìn)入質(zhì)量分析器。根據(jù)電離方式的不同，常用的有:離子源電子轟擊電離源electronimpactionizationsource,EI化學(xué)電離源chemicalionizationsource,CI快原子轟擊電離源fastatombombardmentsource,FAB電噴霧電離源electrosprayionizationsource,ESI大氣壓化學(xué)電離源atmosphericpressurechemicalionizationsource,APCI基質(zhì)輔助激光解析電離源Matrix-AssistedLaserDesorptionIonization,MALDI第9頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月10EI源應(yīng)用最為廣泛，特別是氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中應(yīng)用最多的離子源，它主要用于揮發(fā)性樣品的電離。原理：由進(jìn)樣系統(tǒng)進(jìn)入的氣體樣品到達(dá)離子源，與燈絲發(fā)出的電子發(fā)生碰撞使樣品分子電離。電子轟擊電離源EI電子轟擊電離源示意圖第10頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月11特點(diǎn)：譜圖簡(jiǎn)單，最強(qiáng)峰為分子離子峰和準(zhǔn)分子離子峰，碎片離子峰很少?？捎糜谪?fù)離子質(zhì)譜，多數(shù)有機(jī)化合物的負(fù)離子CI質(zhì)譜圖靈敏度要比其正離子的CI質(zhì)譜圖高2-3個(gè)數(shù)量級(jí)。不適用難揮發(fā)試樣。++氣體分子試樣分子+準(zhǔn)分子離子電子化學(xué)電離源CICI源原理：利用反應(yīng)氣體的離子和樣品分子發(fā)生分子-離子反應(yīng)而生成樣品分子離子?；瘜W(xué)電離源示意圖第11頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月12快原子轟擊電離源FABFAB源原理：氬氣被電子轟擊而電離，生成的氬離子被電子透鏡聚焦并加速生成動(dòng)能可控的離子束，經(jīng)過(guò)中和器中和掉離子束所帶的電荷，成為高速定向運(yùn)動(dòng)的中性原子束，用此原子束轟擊樣品使其電離。特點(diǎn)：適用于分析大分子量、難氣化、熱穩(wěn)定性差的樣品。快原子轟擊電離源示意圖第12頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月13特點(diǎn)： 1.是一種軟電離方式，適于分析極性強(qiáng)的有機(jī)化合物。

2.容易形成多電荷離子，可以測(cè)量大分子量的蛋白質(zhì)。

3.主要應(yīng)用于液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。電噴霧電離源ESIESI源原理：流出液在高電場(chǎng)下形成帶電噴霧，在電場(chǎng)力作用下穿過(guò)氣簾；從而霧化、蒸發(fā)溶劑、阻止中性溶劑分子進(jìn)入后端檢測(cè)。電噴霧電離源示意圖第13頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月14大氣壓化學(xué)電離源APCICoronaNebulizer

APCIHPLCinlet+++++APCI源原理：噴嘴下游放置一個(gè)針狀放電電極，進(jìn)行高壓放電，使空氣中某些中性分子電離，產(chǎn)生H3O+，N2+，O2+

和O+

等離子，溶劑分子也會(huì)被電離，這些離子與樣品分子進(jìn)行離子-分子反應(yīng)，使樣品分子離子化。特點(diǎn)：

屬于“軟”電離方式，適于分析質(zhì)量數(shù)小于2000u的弱極性小分子化合物。只產(chǎn)生單電荷離子，主要是準(zhǔn)分子離子，很少有碎片離子。主要應(yīng)用于液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。大氣壓化學(xué)電離源示意圖第14頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月15

MALDI適用于生物大分子，如肽類(lèi)，核酸類(lèi)化合物。可得到準(zhǔn)分子離子峰，碎片離子和多電荷離子較少.基質(zhì)輔助激光解析電離源MALDIMALDI源原理：待測(cè)物質(zhì)的溶液與基質(zhì)的溶液混合后蒸發(fā)，使分析物與基質(zhì)成為晶體或半晶體，用一定波長(zhǎng)的脈沖式激光進(jìn)行照射時(shí)，基質(zhì)分子能有效的吸收激光的能量，使基質(zhì)分子和樣品分子進(jìn)入氣相并得到電離。基質(zhì)輔助激光解析電離源示意圖第15頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月16質(zhì)量分析器是質(zhì)譜儀的核心,質(zhì)量分析器的作用是將離子源產(chǎn)生的離子按m/z順序進(jìn)行分離并排列。

常用的質(zhì)量分析器有：磁質(zhì)量分析器（MagneticSectorAnalyzer）

四極桿質(zhì)量分析器（quadrupolemassanalyzer）飛行時(shí)間質(zhì)量分析器（timeofflight,TOF）離子阱質(zhì)量分析器（iontrap）質(zhì)量分析器第16頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月17磁質(zhì)量分析器是根據(jù)離子束在一定場(chǎng)強(qiáng)的磁場(chǎng)中運(yùn)動(dòng)時(shí)，其運(yùn)動(dòng)的曲率半徑與離子的質(zhì)荷比和加速電壓有關(guān)。是質(zhì)譜儀中最早使用的質(zhì)量分析器。分為單聚焦磁質(zhì)量分析器和雙聚焦磁質(zhì)量分析器。磁質(zhì)量分析器單聚焦磁質(zhì)量分析器示意圖雙聚焦磁質(zhì)量分析器示意圖特點(diǎn)：?jiǎn)尉劢勾刨|(zhì)量分析器分辨率低，雙聚焦磁質(zhì)量分析器分辨率很高。第17頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月18傳統(tǒng)的四極桿質(zhì)量分析器是由四根筆直的棒狀電極與軸線平行并等距離的置懸著構(gòu)成，棒的理想表面為雙曲面。在一定DC/VC作用下，只有m/z滿足一定要求的離子才能通過(guò)四極桿到達(dá)檢測(cè)器，其他離子被濾掉。四極桿質(zhì)量分析器四極桿質(zhì)量分析器具有重量輕、體積小、造價(jià)低廉等優(yōu)點(diǎn)。++++四極桿質(zhì)量分析器示意圖第18頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月19用一個(gè)脈沖將離子源中的離子瞬間引出，經(jīng)加速電壓加速，它們具有相同的動(dòng)能進(jìn)入漂移管，質(zhì)荷比小的離子具有最快的速度因而首先到達(dá)檢測(cè)器，質(zhì)荷比大的離子則最后到達(dá)檢測(cè)器。配離子反射鏡的飛行時(shí)間質(zhì)譜示意圖飛行時(shí)間質(zhì)量分析器特點(diǎn)： 1）檢測(cè)離子的質(zhì)荷比范圍非常寬； 2）靈敏度高，適合于作串聯(lián)質(zhì)譜的第二級(jí)； 3）掃描速度快，適合研究極快過(guò)程。第19頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月20離子阱與四極質(zhì)量分析器的原理類(lèi)似，當(dāng)高頻電壓幅值和高頻電壓頻率固定為某一值時(shí)，只能使某一質(zhì)荷比的離子在阱內(nèi)一定軌道上穩(wěn)定旋轉(zhuǎn)，改變端電極電壓，不同m/z離子飛出阱到達(dá)檢測(cè)器。離子阱質(zhì)量分析器特點(diǎn)：?jiǎn)我坏碾x子阱可實(shí)現(xiàn)多極“時(shí)間上”的串聯(lián)質(zhì)譜；結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、價(jià)格便宜，性?xún)r(jià)比高；靈敏度高；質(zhì)量范圍大。第20頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月21檢測(cè)器質(zhì)譜儀常用的檢測(cè)器有直接電檢測(cè)器、電子倍增器、閃爍檢測(cè)器和微通道板等。電子倍增器運(yùn)用質(zhì)量分析器出來(lái)的離子轟擊電子倍增管的陰極表面，使其發(fā)射出二次電子，再用二次電子依次轟擊一系列電極，使二次電子獲得不斷倍增，最后由陽(yáng)極接受電子流，使離子束信號(hào)得到放大。電子倍增器示意圖第21頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月22數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)質(zhì)譜儀都配有完善的計(jì)算機(jī)系統(tǒng)，不僅能快速準(zhǔn)確的采集數(shù)據(jù)和處理數(shù)據(jù)，而且能監(jiān)控質(zhì)譜儀各單元的工作狀態(tài)，實(shí)現(xiàn)質(zhì)譜儀的全自動(dòng)操作，并能代替人工進(jìn)行化合物的定性和定量分析。第22頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月23質(zhì)譜譜圖質(zhì)譜圖： 以檢測(cè)器檢測(cè)到的離子信號(hào)強(qiáng)度為縱坐標(biāo)，離子 質(zhì)荷比為橫坐標(biāo)所作的圖就是質(zhì)譜圖。質(zhì)荷比：

離子質(zhì)量（以相對(duì)原子量單位計(jì)）與它所帶電荷 （以電子電量為單位計(jì)）的比值，寫(xiě)作m/z

。峰：

質(zhì)譜圖中的離子信號(hào)通常稱(chēng)為離子峰或簡(jiǎn)稱(chēng)峰。離子豐度：

檢測(cè)器檢測(cè)到的離子信號(hào)強(qiáng)度?；澹?/p>

在質(zhì)譜圖中，指定質(zhì)荷比范圍內(nèi)強(qiáng)度最大的離子 峰稱(chēng)作基峰。第23頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月24質(zhì)譜譜圖m/z豐度基峰:譜圖中最強(qiáng)的離子[M+H]+假分子離子或準(zhǔn)分子離子A+1A+2

來(lái)源于自然界中同位素{第24頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月25分子離子：

樣品分子失去一個(gè)電子而形成的單電荷離子，它 代表樣品的分子量。準(zhǔn)分子離子： 指與分子存在簡(jiǎn)單關(guān)系的離子，通過(guò)它也可以確 定分子量。液質(zhì)中最常見(jiàn)的準(zhǔn)分子離子峰是 [M+H]+，[M-H]–，[M+Na]+等。碎片離子： 分子離子或準(zhǔn)分子離子裂解生成碎片離子，碎 片離子還可能進(jìn)一步裂解成質(zhì)量更小的碎片離 子，碎片離子是解析質(zhì)譜圖，推斷分子結(jié)構(gòu)的 重要信息。質(zhì)譜中的離子第25頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月26

質(zhì)譜中的離子母離子與子離子：任何一個(gè)離子進(jìn)一步裂解為質(zhì)荷比較小的離 子，前者是后者的母離子或前體離子，后者是 前者的子離子。同位素離子： 由元素的重同位素構(gòu)成的離子。各種元素的同 位素基本上按照其在自然界的豐度比出現(xiàn)在質(zhì) 譜中，有利于確定化合物及碎片的元素組成。亞穩(wěn)離子： 由離子源到檢測(cè)器的飛行途中裂解的離子?？? 以指示離子產(chǎn)生的途徑，對(duì)結(jié)構(gòu)判斷很有用。第26頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月27

質(zhì)譜中的離子單電荷離子： 帶有1個(gè)電荷的離子，z=1。多電荷離子： 帶有2個(gè)或更多電荷的離子，如z≥2。奇電子離子（OE）：帶未成對(duì)電子的離子，以符號(hào)“+·”表示。偶電子離子（EE）：外層電子完全成對(duì)的離子，以符號(hào)“+”表示。第27頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月28液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用液相色譜-質(zhì)譜（LC-MS）聯(lián)用技術(shù)的研究開(kāi)始于20世紀(jì)70年代，直到90年代才出現(xiàn)被廣泛接受的商品接口及成套儀器。液相色譜一般在常壓下工作除了真空匹配之外，液質(zhì)聯(lián)機(jī)技術(shù)發(fā)展可以說(shuō)就是接口技術(shù)的發(fā)展。質(zhì)譜的工作要求高真空系統(tǒng)LC-MS聯(lián)用首先要解決的問(wèn)題是真空的匹配。第28頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月29液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用接口的發(fā)展20世紀(jì)70年代 直接液體導(dǎo)入接口（DLI） 移動(dòng)帶技術(shù)（MB）20世紀(jì)80年代 熱噴霧接口（TS） 粒子束接口（PB） 快原子轟擊接口（FAB）20世紀(jì)90年代 基質(zhì)輔助激光解析接口（MALDI）

電噴霧電離接口（ESI） 大氣壓化學(xué)電離接口（APCI）第29頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月30DLI： 是在真空泵的承載范圍內(nèi)，以細(xì)小的液流直接 導(dǎo)入質(zhì)譜。優(yōu)點(diǎn)：是液質(zhì)方法的最簡(jiǎn)單的接口，造價(jià)低廉。缺點(diǎn)：無(wú)法在大流量下工作； 噴口易堵塞。直接液體導(dǎo)入接口DLI此方法始終停留在實(shí)驗(yàn)室使用階段，沒(méi)有真正形成商品化儀器。第30頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月31MB： 是在LC柱后增加一個(gè)傳送帶，柱后流出物滴落 在傳送帶上，經(jīng)紅外線加熱除去大部分溶劑后進(jìn) 入真空室，傳送帶依據(jù)流動(dòng)相的組成調(diào)整移動(dòng)速 度。優(yōu)點(diǎn)：基于溶劑和樣品的沸點(diǎn)差別進(jìn)行分離，可被用于 大部分有機(jī)物的質(zhì)譜分析。缺點(diǎn)：不適于分析高沸點(diǎn)、難揮發(fā)的化合物； 離子化效率低； 靈敏度低； 移動(dòng)帶上殘存的難揮發(fā)物質(zhì)易造成記憶效應(yīng)而干 擾分析。移動(dòng)帶技術(shù)MB第31頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月32TS： 噴霧探針取代直接進(jìn)樣桿，流動(dòng)相經(jīng)過(guò)噴霧針 時(shí)被加熱到低于完全蒸發(fā)點(diǎn)5-10℃，體積膨脹 后以超聲速?lài)姵鎏结樞纬伸F狀混合物。優(yōu)點(diǎn)：可適應(yīng)較大流速和含水較多的液相流動(dòng)相。缺點(diǎn)：分子量局限于200-1000u的化合物； 對(duì)熱穩(wěn)定性較差的化合物有比較明顯的分解作 用。熱噴霧接口TS第32頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月33FB： 又稱(chēng)動(dòng)量分離器。流動(dòng)相及樣品被噴霧成氣 溶膠，脫去溶劑后在動(dòng)量分離器內(nèi)產(chǎn)生動(dòng)量 分離，而后經(jīng)一根加熱的轉(zhuǎn)移管進(jìn)入質(zhì)譜。優(yōu)點(diǎn)：離子化由質(zhì)譜的EI或CI方式進(jìn)行，可以獲得 經(jīng)典的質(zhì)譜圖。缺點(diǎn)：由于離子化手段仍為電子轟擊，不是軟離子 化方式，因此不適于分析熱不穩(wěn)定化合物； 主要用于分析非極性或中等極性的、分子量 小于1000u的化合物。粒子束接口FB第33頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月34FAB：快原子轟擊電離源優(yōu)點(diǎn)：是“冷”離子源，適于分析熱不穩(wěn)定、難氣化 的化合物，尤其是對(duì)肽類(lèi)和蛋白質(zhì)分析的有 效性在電噴霧接口出現(xiàn)前是其它接口無(wú)法相 比的。缺點(diǎn)：混合物樣品中共存物質(zhì)干擾抑制樣品分子的 離子化，造成靈敏度下降； 只能在低流量下工作，嚴(yán)重限制了液相柱的 分離效果?？煸愚Z擊FAB第34頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月35基質(zhì)輔助激光解析MALDIMALDI：基質(zhì)輔助激光解析電離源優(yōu)點(diǎn)：特別適合與飛行時(shí)間質(zhì)譜聯(lián)用，可測(cè)分子量 范圍高達(dá)上百萬(wàn)u，并且具有很高的靈敏 度。缺點(diǎn)：與FAB相同，混合物樣品中共存物質(zhì)的干擾 也很明顯，造成質(zhì)譜信號(hào)很弱或根本沒(méi)有， 靈敏度下降。第35頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月36電噴霧電離ESIESI：電噴霧電離源特點(diǎn)：應(yīng)用范圍廣泛；離子化效率高，對(duì)蛋白質(zhì)而言接近100%；多種離子化模式供選擇：ESI（+）、ESI（-）；可產(chǎn)生多電荷離子，適于測(cè)量大分子量的蛋白質(zhì)；屬于“軟”離子化模式，可分析熱不穩(wěn)定化合物。第36頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月37大氣壓化學(xué)電離APCIAPCI：大氣壓化學(xué)電離源特點(diǎn)：屬于“軟”電離方式，適于分析質(zhì)量數(shù)小于2000u的弱極性小分子化合物；多種離子化模式供選擇：APCI（+）、APCI（-）；只產(chǎn)生單電荷離子，主要是準(zhǔn)分子離子，很少有碎片離子。第37頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月38實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有的液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀類(lèi)型：液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（1100LC-MSDTrapXCT，Agilent，科學(xué)樓7樓）三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀（TSQQuantumAccessMAX

，ThermoFisher，科學(xué)樓8樓）微流控芯片液相質(zhì)譜串聯(lián)儀（1260LC,1200NanoHPLC-Chipcube-QTOF6520，Agilent，科學(xué)樓8樓）液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀第38頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月39在線真空脫氣機(jī)

二元或四元梯度液相泵

自動(dòng)進(jìn)樣器

柱溫箱二極管陣列檢測(cè)器液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（1100LC-MSDTrapXCT）離子阱質(zhì)譜儀第39頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月40ESI電離源APCI電離源離子源：ESI和APCI第40頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月41什么是MSn?

該方式是表明多級(jí)離子分離和碎裂步驟可產(chǎn)生離子質(zhì)譜圖。n=分離和碎裂步驟數(shù)目，最小是1（最后一步是全掃描).e.g.MS3

意義

1)一個(gè)母離子的分離和碎裂2)由前級(jí)碎裂得到的子離子的分離和碎裂3)全掃描質(zhì)譜分析質(zhì)量分析器：離子阱（iontrap）第41頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月42

累積第一級(jí)離子分離第一級(jí)離子碎裂第二級(jí)離子分離第二級(jí)離子碎裂第三級(jí)質(zhì)譜分析MassA+A1+A2+A3+A4+A2+A11+A21+A31+A41+A11+A21+A31+A41+MS1MS2MS3MS3的圖解第42頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月43易懂、易用、圖型化的控制及分析軟件第43頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月441.天然產(chǎn)物鑒定；2.生物制藥及藥物代謝分析；3.食品成分分析；4.蛋白質(zhì)及多肽分析；5.農(nóng)藥及獸藥殘留分析。應(yīng)用范圍第44頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月45樣品要力求干凈，不含顯著量的雜質(zhì)，尤其是與分析無(wú)關(guān)的蛋白質(zhì)和肽類(lèi)；2.不含有高濃度的難揮發(fā)酸（硫酸、磷酸等）及其鹽；3.樣品粘度不能過(guò)大，防止堵塞柱子、噴口及毛細(xì)管入口。送樣要求第45頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月46檢測(cè)器

自動(dòng)進(jìn)樣器

柱溫箱四元梯度液相泵三重四極桿質(zhì)譜儀三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀（TSQQuantumAccessMAX）第46頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月47離子源：HESI-II和APCI加熱電噴霧離子源（HESI-II）是采用電噴霧電離與加熱輔助氣相結(jié)合的方法，將溶液中的離子轉(zhuǎn)換成氣相中的離子。可分析所有在溶液中能預(yù)形成離子的極性化合物。HESI-II電離源探針離子源室APCI電離源探針第47頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月48進(jìn)樣方式直接進(jìn)樣： （使用注射泵）LC液流不經(jīng)過(guò)色譜分離：自動(dòng)定量環(huán)進(jìn)樣至LC液流（使用注 射泵）； 手動(dòng)定量環(huán)進(jìn)樣至LC液流； 進(jìn)樣至LC液流（使用注射泵）； 自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣至LC液流LC流路經(jīng)過(guò)色譜分離： 自動(dòng)進(jìn)樣器經(jīng)LC液流進(jìn)樣到色譜柱第48頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月49Q1和Q3Q2質(zhì)量分析器：三重四極桿（TSQ）質(zhì)量分析儀、離子探測(cè)系統(tǒng)和離子光學(xué)組件TSQ上的質(zhì)量分析儀包含三個(gè)四級(jí)桿組件（Q1、Q2和Q3）以及三個(gè)透鏡組。第49頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月50掃描模式一、子離子掃描第50頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月51掃描模式二、母離子掃描第51頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月52掃描模式三、中性丟失掃描第52頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月53掃描類(lèi)型一、全掃描在指定的掃描時(shí)間內(nèi)，質(zhì)量分析儀不間斷地從第一個(gè)質(zhì)量數(shù)掃到最后一個(gè)質(zhì)量數(shù)，提供分析物的完整質(zhì)譜，用于確認(rèn)未知化合物。二、選擇的離子監(jiān)控（SIM）可監(jiān)控某個(gè)離子或一組離子，適用于已知目標(biāo)化合物分析，探測(cè)復(fù)雜混合物中的微量目標(biāo)化合物時(shí)很有用。三、選擇反應(yīng)監(jiān)控（SRM）可監(jiān)控某個(gè)反應(yīng)或幾組反應(yīng)，如離子的裂解或中性基團(tuán)丟失。四、自動(dòng)SIM質(zhì)譜儀會(huì)在預(yù)掃描中自動(dòng)選擇最強(qiáng)烈的m/z值，為它們建立一個(gè)SIM掃描列表，然后采集和記錄這些選定質(zhì)量的離子?？稍谌魏文Ｊ街械娜珤呙枭蠄?zhí)行。第53頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月54控制及分析軟件Xcalibur第54頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月55控制及分析軟件LCquan第55頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月56應(yīng)用范圍可同時(shí)對(duì)復(fù)雜基質(zhì)樣品進(jìn)行多殘留和定量實(shí)驗(yàn)，提供無(wú)與倫比的低濃度定量表現(xiàn)，并佐以快速，高特異性的全二級(jí)譜圖掃描進(jìn)行確認(rèn)。該儀器主要應(yīng)用于制藥、環(huán)保、食品安全、臨床和法醫(yī)學(xué)等多種領(lǐng)域。第56頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月57送樣要求樣品必須是澄清溶液，不能有顯著的雜質(zhì)，需過(guò)濾(0.45μm濾膜)；2.樣品不能含有難揮發(fā)酸，強(qiáng)酸、強(qiáng)堿，鹽，表面活性劑及ContaminationPeak表上的物質(zhì)；3.所用溶劑一般為水、乙腈和甲醇，且溶劑需過(guò)濾(0.45μm濾膜)。

4.優(yōu)化時(shí)標(biāo)準(zhǔn)品濃度一般為1-5ppm；測(cè)樣時(shí)樣品濃度一般為10-3ppm，不要超過(guò)0.1ppm。第57頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月58微流控芯片液相質(zhì)譜串聯(lián)儀（1260LC,1200NanoHPLC-Chipcube-QTOF）飛行時(shí)間質(zhì)譜儀微流控芯片1260LC1200NanoHPLCChipCubeonQTOF第58頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月59進(jìn)樣方式直接進(jìn)樣1260LC進(jìn)樣1200NanoHPLC進(jìn)樣Chipcube進(jìn)樣第59頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月60離子源：ESIAgilent離子源是氣動(dòng)輔助源，可以處理高液體流量。QTOF使用的是雙噴霧電噴霧源。ESI電離源示意圖分析霧化器參比霧化器第60頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月61質(zhì)量分析器：QTOFQTOF真空系統(tǒng)第61頁(yè)，課件共72頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月62掃描方式一級(jí)質(zhì)譜 TOF模式 獲