經(jīng)典液相色譜分析技術(shù)-紙色譜分離分析技術(shù)（儀器分析技術(shù)）

儀器分析技術(shù)紙色譜分離分析技術(shù)

——紙色譜操作技術(shù)3、展開2、點樣1、色譜濾紙準備4、斑點定位紙色譜操作技術(shù)主要包括四個步驟儀器分析技術(shù)一、色譜濾紙準備

儀器分析技術(shù)1、用于下行法的色譜濾紙取色譜濾紙切成適當大小的紙條；離紙條上端適當?shù)木嚯x用鉛筆劃點樣基線，必要時可在濾紙下端切成鋸齒形便于展開劑向下移動。2、用于上行法的色譜濾紙色譜濾紙長約25cm，寬度按需確定，點樣基線距離底邊約2.5cm。每次點樣后，使其自然干燥或?qū)⑵浯蹈?，只有干后，才能第二次點樣。二、點樣儀器分析技術(shù)將樣品溶解于適宜溶劑中，用定量毛細管或微量注射器吸取溶液，點樣于基線上。要求：點樣量：＜10μl點樣直徑：2-4mm點間距離：1.5cm-2cm點樣形狀：圓形、條形劃線點樣三、展開1、下行展開法：1）先飽和展開缸；2）將色譜濾紙點樣端放在展開劑槽中用玻璃棒壓住，濾紙一端自然下垂；3）小心添加展開劑在展開槽中，使濾紙上端浸沒在展開劑中，展開劑沿濾紙進行移動；4）展開至規(guī)定的距離，取出濾紙，標明展開劑前沿，待展開劑揮去后檢視。儀器分析技術(shù)紙色譜下行展開示意圖2、上行展開法：1）先飽和展開缸；2）將色譜濾紙浸入展開劑約1cm，展開劑沿色譜濾紙上升；3）展開至規(guī)定的距離，取出濾紙，標明展開劑前沿，待展開劑揮去后檢視。儀器分析技術(shù)四、斑點定位儀器分析技術(shù)紙色譜法斑點的定位基本和薄層色譜法相似，但

紙色譜法不能使用腐蝕性顯色劑，也不能在高溫

下顯色。運用紙色譜進行藥物的鑒別、檢查和含量測定的

方法、要求與薄層色譜法一致。謝謝觀看！儀器分析技術(shù)紙色譜分離分析技術(shù)

——紙色譜基礎(chǔ)知識介紹儀器分析技術(shù)主要內(nèi)容紙色譜定義12分離原理儀器分析技術(shù)常用儀器與材料3一、紙色譜（PC）定義

以濾紙作為載體，以紙纖維上吸附的水作為固定相，以不與水相混溶的有機溶劑為流動相來對樣品進行分離分析的方法。載體濾紙的紙纖維固定相濾紙上吸附的水流動相與水不相混溶的有機溶劑儀器分析技術(shù)二、分離原理

利用樣品中不同組分在兩相溶劑中溶解性（或分配系數(shù)）不同，當流動相攜帶樣品流經(jīng)固定相（被吸附或固定在惰性材料上的液體）時，各組分在兩相間不斷進行溶解、萃取、再溶解、再萃取，……，樣品經(jīng)過多次反復(fù)分配后，造成分配系數(shù)稍有差異的組分移行的距離不同面實現(xiàn)分離。Rf與組分性質(zhì)、流動相及溶解度有關(guān)。儀器分析技術(shù)三、常用儀器與材料1、色譜濾紙濾紙質(zhì)地均勻、平整無折痕邊緣整齊，雜

質(zhì)含量少；

濾紙的纖維松緊適宜；對Rf值相差很小的化合物，宜采用慢速濾紙對Rf值相差較大的化合物，則可用快速濾紙常用國產(chǎn)（新華色譜濾紙）和進口（Whatman）濾紙色譜濾紙儀器分析技術(shù)2、展開劑紙色譜的固定相一般為紙纖維上吸附的水，所用展開劑的選擇主要考慮待測組分在兩相中溶解度和展開劑的極性。常用的展開劑是含水的有機溶劑，如水飽和的正丁醇、正戊醇、酚等，也可加入少量的酸或堿，如甲酸、醋酸、吡啶等，防止弱酸弱堿的解離。展開劑中溶解度較大的組分Rf值較大；對極性物質(zhì)，增加展開劑中極性的組分的比例，Rf值增大；增加展開劑中非極性的組分的比例，Rf值減小。儀器分析技術(shù)3、展開容器通常為圓形或長方形玻璃缸，缸上具有磨口玻璃蓋且能密閉。紙色譜上行展開示