天然藥物化學(xué)黃酮類

天然藥物化學(xué)黃酮類第一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

僅截止到1974年為止，國(guó)內(nèi)外已發(fā)表的黃酮類化合物共1674個(gè)（主要是天然黃酮類，也有少部分為合成品，其中苷元902個(gè)，苷722個(gè)），并以黃酮醇類最為常見，約占總數(shù)的三分之一，

其次為黃酮類，占總數(shù)的四分之一以上，

其余則較少見。至于雙黃酮類多局限分布于裸子植物，尤其松柏綱，銀杏綱和鳳尾綱等植物中。

至1980年，黃酮類化合物總數(shù)已達(dá)到2721個(gè)。

至1993年，黃酮類化合物總數(shù)已達(dá)到4000個(gè)。

在20世紀(jì)30年代中期匈牙利科學(xué)家艾伯特?聖喬其

(Albert

SzentGyorgy)首次分離出類黃酮混合物拓展提高黃酮化合物的現(xiàn)狀維生素C第二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

色原酮2-苯基色原酮（黃酮）一、基本結(jié)構(gòu)和分類（一）基本結(jié)構(gòu)

1952年以前，黃酮類化合物主要是指基本母核為2-苯基色原酮的一系列化合物。第一節(jié)

概述第三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六C6-C3-C6

現(xiàn)在的黃酮類化合物則泛指兩個(gè)苯環(huán)（A與B環(huán)）通過(guò)中央三碳鏈相互連接而成的一類化合物。ABC第四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六三碳鏈氧化程度B環(huán)（苯基）連接位置（2-位或3-位）以及三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán)狀BAC黃酮類化合物的苷元的結(jié)構(gòu)類型根據(jù):分為下列類型：12種第五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

木犀草素（luteolin），存在于忍冬藤、菊花、浮萍中，具有抗菌作用。

1.黃酮類（flavones）第六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六抗菌成分主要有:黃芩為清熱解毒類中藥，黃芩苷(baicalin)次黃芩素(wogonin)等第七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六第八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六槐米中含有:2.黃酮醇類（flavonols）蘆丁槲皮素

槐米為豆科植物槐樹(Sophorajdponica

L.)的花蕾。在二千年前我國(guó)即作藥用，《神農(nóng)本草經(jīng)》將愧實(shí)列為上品。其中，蘆丁是有效成分，可用于治療毛細(xì)血管脆性引起的出血癥，并用于高血壓的輔助治療劑。第九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六槲皮素(quercetin)具有抗炎、止咳祛痰等作用。槲皮素片用于治療支氣管炎。此外還有降低血壓、增強(qiáng)毛細(xì)血管抵抗力、減少毛細(xì)血管脆性、降血脂、擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈、增加冠脈血流量等作用。蘆丁(rutin)是槲皮素的3－O蕓香糖苷。用于治療毛細(xì)管脆弱引起的出血病，并用作高血壓的輔助治療劑。第十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六3.二氫黃酮類(flavanones)第十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六第十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

柚皮素（Naringenin）：來(lái)源于蕓香科植物柚(CitrusparadisiMacfadyen)的果實(shí)；分子式C15H12O5；分子量272.25結(jié)構(gòu)式：

柚皮苷第十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六4．二氫黃酮醇類(flavanonols)

水飛薊素是二氫黃酮醇與苯丙素衍生物縮合成的黃酮木脂素類成分。具有保肝作用，用于治療急、慢性肝炎及肝硬化，代謝中毒性肝損傷。第十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六5．查爾酮類（chalcones）查爾酮為苯甲醛縮苯乙酮類化合物。第十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

二氫黃酮的吡酮環(huán)芳香性低，在堿的作用下易開環(huán)生成6’-羥基查耳酮，由無(wú)色轉(zhuǎn)為深黃色，后者經(jīng)酸化又能轉(zhuǎn)化為原來(lái)的二氫黃酮。其鄰羥基衍生物可視為二氫黃酮的異構(gòu)體，二者可相互轉(zhuǎn)化。第十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六菊科植物紅花。紅花所含的色素-紅花苷。是第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的查耳酮類植物成分。第十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

紅花在開花初期，花冠呈淡黃色；

開花中期，花冠呈深黃色；

開花后期或采收干燥過(guò)程中由于酶的作用，氧化成紅色。第十八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

主要存在于豆科、鳶(yuan)尾科等植物中。如葛根主要含有下列幾種異黃酮類成分。6．異黃酮類(isoflavones)第十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六葛根素

葛根總黃酮具有擴(kuò)冠、增加冠脈流量及降低心肌耗氧量等作用。第二十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

大豆素具有類似罌粟堿的解痙作用。大豆苷、葛根素及大豆素均能緩解高血壓患者的頭痛等癥狀。大豆素第二十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六7．二氫異黃酮類豆科植物紫檀tan第二十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六8．雙黃酮類

由二分子黃酮衍生物聚合生成的二聚物，多分布于裸子植物中。

其主要的活性成分為兩類：黃酮類和萜類。德國(guó)的銀杏專利提取物EGb761（黃酮24%，萜內(nèi)酯6%）

銀杏中含有多種雙黃酮，如銀杏素。

第二十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六9．花色苷類(anthocyanidins)

是使花、葉、果、莖等呈現(xiàn)藍(lán)、紫、紅等顏色的色素。以苷的形式存在于細(xì)胞液中，經(jīng)水解可生成苷元——花色素及糖。第二十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六10．黃烷-3-醇(flavan-3-ols)及黃烷-3，4-二醇(flavan-3,4-diols)類兒茶第二十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

水龍骨科植物石韋中的異芒果素具有止咳祛痰的功效。

11．苯駢色酮(xanthanes)第二十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六黃花波斯菊花中含有硫磺菊素(sulphuretin)12．橙酮類化合物第二十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六天然黃酮類化合物多和糖形成苷而存在，并且由于糖的種類、數(shù)量、連接位置及連接方式不同，組成了各種各樣的黃酮苷類。組成黃酮苷的糖類主要有:

單糖雙糖類三糖類?；穷惖诙隧?yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六單糖類：

D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖、L-鼠李糖、L-阿拉伯糖及D-葡萄糖醛酸等。雙糖類：槐糖（glc1→2glc）、龍膽二糖(glc1→6glc)、蕓香糖(rh1→6glc)、新橙皮糖（rh1→2glc）、刺槐二糖（rh1→6gal）等。三糖類：龍膽三糖(glc1→6glc1→2fru)、槐三糖(glc1→2glc1→2glc)等。?；穷悾?/p>

2-乙酰葡萄糖、咖啡酰基葡萄糖(caffeoylglucose)等。第二十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

黃酮苷中糖的連接位置與苷元的結(jié)構(gòu)類型有關(guān),如黃酮醇類常形成3-，7-，3’-，4‘-單糖苷，或3，7-，3，4’-及7，4’-雙糖鏈苷等。除氧苷外，天然黃酮類化合物中還發(fā)現(xiàn)有C-鍵苷，如：葛根黃素木糖苷。和葛根素共同構(gòu)成了中藥葛根擴(kuò)張冠狀動(dòng)脈的有效成分。葛根黃素木糖苷葛根素第三十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六二、黃酮類化合物的生物合成途徑

A環(huán)來(lái)自三個(gè)丙二酰輔酶AB環(huán)來(lái)自桂皮酰輔酶A第三十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六三、黃酮類化合物的生物活性1.對(duì)心血管系統(tǒng)的作用

Vp樣作用：蘆丁、橙皮苷等有Vp樣作用，能降低血管脆性及異常通透性，可用作防治高血壓及動(dòng)脈硬化的輔助治療劑。擴(kuò)冠作用：蘆丁、槲皮素、葛根素、人工全合成的力可定(乙氧黃酮

)。降血脂及膽固醇：木樨草素第三十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

蘆丁是從中國(guó)所獨(dú)有的國(guó)槐的花蕾中提取的植物藥，也稱維生素P，具有降低毛細(xì)血管的異常通透性和脆性的作用，是心腦血管保護(hù)藥，國(guó)內(nèi)用于心腦血管藥品制劑的主要成分，國(guó)外還大量用于食品添加劑和化妝品。鑒別：

(1)取本品的細(xì)粉少許，加氫氧化鈉試液5mL，溶液顯橘黃色。

(2)取本品的細(xì)粉少許，加乙醇15mL，微熱使蘆丁溶解，溶液分成二份：一份中加鹽酸1mL與金屬鎂或金屬鋅數(shù)小粒，漸顯紅色；另一份中加三氯化鐵試液1滴，顯棕綠色。蘆丁片第三十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2.

抗肝臟毒作用從水飛薊種子中得到的水飛薊素具有保肝作用，用于治療急、慢性肝炎、肝硬化及多種中毒性肝損傷。（+）-兒茶素(catergen)也可抗肝臟毒作用，治療脂肪肝及因半乳糖胺或四氯化碳等引起的中毒性肝損傷。第三十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

本品為菊科植物水飛薊（紫花）[Silybummarianum(L)Gacntm的果實(shí)，經(jīng)提取精制所得的淡黃色粉末，或結(jié)晶性粉末。無(wú)味、無(wú)臭、易溶于丙酮、醋酸乙酯、乙醇及由醇、難溶于氯仿，不溶于水，主要化學(xué)成份為水飛薊賓（Silybin)C25H22O10及其異物等黃酮類物質(zhì)。

功能與主治：本品具有保肝及降血脂作用，用于治療慢性肝炎，早期肝硬變、代謝中毒性肝損傷及高血脂癥。水飛薊片第三十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六3.抗炎蘆丁及其衍生物羥乙基蘆丁、二氫槲皮素等具抗炎作用。4.抗菌及抗病毒作用如木樨草素、黃芩苷、黃芩素5.解痙作用異甘草素、大豆素：解除平滑肌痙攣；大豆苷、葛根素及葛根總黃酮可緩解高血壓患者的頭痛等癥狀；杜鵑素、川陳皮素、槲皮素、山奈酚、芫花素、羥基芫花素：止咳祛痰。第三十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六6.雌性激素樣作用大豆素(daidzein)等異黃酮具有雌性激素樣作用，可能與它們與己烯雌酚結(jié)構(gòu)類似。

第三十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六7.清除人體自由基作用

黃酮類化合物多具有酚羥基，易氧化成醌類而提供氫離子，故有顯著的抗氧特點(diǎn)。另外還有降血脂、血糖，抗動(dòng)脈粥樣硬化及抗癌抗突變等作用。第三十八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六8.抗腫瘤作用

抗癌新藥Flavopiridol的發(fā)現(xiàn)與研制

Flavopiridol是一種源于植物（CDYSOXYLUMBINECTARIFERUM）的黃酮類化合物。目前正被用于十幾項(xiàng)一期和二期的癌癥臨床試驗(yàn)。它的早期發(fā)現(xiàn)得益于工業(yè)界對(duì)自然產(chǎn)物的研究興趣。在從樹皮中提取出純化合物后，前HOECHST公司又進(jìn)行了結(jié)構(gòu)與人工合成的研究。由此建立了一系列同型物，包括Flavopiridol的專利。

最新的研究采用基因芯片的技術(shù)發(fā)現(xiàn)藥物flavopiridol殺傷癌細(xì)胞的令人驚訝的機(jī)理。這項(xiàng)研究是由美國(guó)國(guó)家衛(wèi)生院、美國(guó)國(guó)家癌癥研究院和EMMES公司聯(lián)合完成的，是把最新的基因工程技術(shù)用于醫(yī)藥研究的典范。它是從印度植物中提煉的植物堿，植物的葉和根是印度應(yīng)用的草藥。第三十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

在NIH大規(guī)?？拱┪锖Y選中，F(xiàn)lavopiridol脫穎而出，成為一種新的低毒性的研究藥物。它的治癌機(jī)理被認(rèn)為是作用于激酶，從而阻斷細(xì)胞循環(huán)。這一解釋間接地為CDK2-Flavopiridol的復(fù)合晶體結(jié)構(gòu)所證實(shí)?？鐚W(xué)科外向的合作以及現(xiàn)代技術(shù)的應(yīng)用是加速Flavopiridol和其他后續(xù)藥物的研究與開發(fā)所不可缺少的。

cyclindependentkinase(CDK)細(xì)胞周期蛋白依賴激酶最近，不同的研究者證實(shí)其對(duì)艾滋病也有異于其他藥物的療效。第四十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六第二節(jié)

黃酮類化合物的理化性質(zhì)及顏色反應(yīng)一、性狀1.多為結(jié)晶性固體，少為（如黃酮苷類）無(wú)定形粉末。2.旋光性：游離苷元中，除二氫黃酮、二氫黃酮醇、黃烷、黃烷醇及雙黃酮有旋光外，其余無(wú)旋光性。苷類由于結(jié)構(gòu)中引入糖的分子，均有旋光性，且多為左旋。第四十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六3.顏色：與①分子中是否存在交叉共軛體系

②助色團(tuán)的數(shù)目

③取代基的位置有關(guān)色原酮部分原本無(wú)色，但在2位引入苯環(huán)后，即形成交叉共軛體系，且通過(guò)電子的轉(zhuǎn)移，重排，使共軛鏈延長(zhǎng)，而表現(xiàn)出顏色。第四十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六黃酮、黃酮醇及苷類灰黃-黃色

查耳酮黃-橙黃色

二氫黃酮、二氫黃酮醇無(wú)色異黃酮微黃色

其中，黃酮、黃酮醇及苷類、查耳酮等因分子中存在交叉共軛體系，在7,4’位引入-OH,OCH3等供電子基團(tuán)則促進(jìn)電子移位、重排，使化合物顏色加深?；ㄉ占捌滠赵念伾SpH的不同而改變：呈現(xiàn)紅（pH<7），紫（pH8.5）、蘭（pH>8.5）第四十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六二、溶解度1.游離苷元難溶或不溶于水，易溶于MeOH,EtOH,EtOAc,Et2O

黃酮、黃酮醇及查耳酮是平面型分子，分子堆砌緊密，分子間引力較大，更難溶于水。二氫黃酮、二氫黃酮醇是非平面型分子，分子排列不緊密，分子間引力降低，對(duì)水的溶解度較大。第四十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

花色苷元（花青素）類雖系平面型分子，但因以離子形式存在，具有鹽的通性，故親水性較強(qiáng)，水溶度較大。第四十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

黃酮苷元引入羥基越多，水溶性越強(qiáng)，羥基甲基化后，則增加在有機(jī)溶劑中的溶解度。如一般黃酮類化合物不溶于石油醚中，可與脂溶性雜質(zhì)分開，但川陳皮素（5,6,7,8,3’,4’-六甲氧基黃酮）卻可溶于石油醚。第四十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2.黃酮類化合物的羥基苷化后，水溶性相應(yīng)增大，而在有機(jī)溶劑中的溶解度相應(yīng)減小黃酮苷一般易溶于H2O,MeOH,EtOH等，難溶或不溶于苯，氯仿等。第四十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六三、酸堿性1.酸性黃酮類化合物多具有酚羥基而呈酸性，可溶于堿性水液，吡啶，甲酰胺及二甲基甲酰胺。酸性強(qiáng)弱順序：7,4’-二羥基>7,或4’羥基>一般酚羥基>5-羥基

此性質(zhì)可用于提取、分離及鑒定工作。第四十八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

黃酮類化合物溶于濃硫酸中生成的烊鹽常表現(xiàn)特殊的顏色，可用于鑒別。2.堿性

-吡喃酮上的1-位氧原子上有未共用電子對(duì)，表性微弱的堿性，可與強(qiáng)無(wú)機(jī)酸如濃硫酸，鹽酸生成烊鹽，但極不穩(wěn)定，加水即可分解。第四十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六四、顯色反應(yīng)

(一)還原反應(yīng)1.鹽酸-鎂粉（鹽酸-鋅粉）反應(yīng)黃酮、黃酮醇及二氫黃酮、二氫黃酮醇類在鹽酸-鎂粉作用下，易被氫化還原，迅速生成紅-紫紅（個(gè)別有綠-蘭色）。將樣品溶于甲醇或乙醇，加少量鎂粉振搖，滴加幾滴濃鹽酸，1-2分鐘內(nèi)（必要時(shí)微熱）即可出現(xiàn)顏色。多顯橙紅-紫紅色，少數(shù)蘭-紫色，B環(huán)有-OH或OCH3取代時(shí)，顏色隨之加深，查耳酮、橙酮、兒茶素類則不反應(yīng)。

花色素及部分查耳酮、橙酮等在濃鹽酸酸性條件下也會(huì)發(fā)生色變，故須先做一對(duì)照。

第五十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2.四氫硼鈉反應(yīng)與二氫黃酮類化合物產(chǎn)生紅-紫色。(其它黃酮類化合物均不顯色，可與之區(qū)別)

取樣品10mg溶于甲醇，加NaBH410mg，再滴加1%濃鹽酸或濃硫酸，呈紅-紫色。第五十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六（二）金屬鹽類試劑的絡(luò)合反應(yīng)

?？膳c鋁鹽、鉛鹽、鋯鹽、鎂鹽等試劑生成有色絡(luò)合物。鋁鹽1%AlCl3或Al(NO3)3：生成絡(luò)合物為黃色(max=415nm)，并有熒光。

黃酮類化合物分子結(jié)構(gòu)中多有:3-OH,4=O5-OH,4=O鄰二酚羥基第五十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2.鉛鹽1%PbAc2或堿式醋酸鉛水液。生成黃-紅色沉淀。醋酸鉛可沉淀具有鄰二酚羥基或兼有3-OH,4=O或5-OH,4=O者。

堿式醋酸鉛可沉淀具有一般酚類化合物。第五十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六3.鋯鹽:2%氯氧化鋯甲醇液第五十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六4.鎂鹽醋酸鎂甲醇液作顯色劑，可在紙上進(jìn)行。二氫黃酮（醇）類顯天藍(lán)色熒光，若具有C5-OH，色澤更明顯。而黃酮、黃酮醇及異黃酮類則顯黃-橙黃-褐色。5.氯化鍶(SrCl2)

使具有鄰二酚羥基的黃酮顯綠-棕色-黑色沉淀。第五十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六6.氯化鐵(FeCl3)

檢查酚羥基。多數(shù)黃酮類化合物具有酚羥基，可產(chǎn)生正反應(yīng)，生成綠、藍(lán)、黑、紫等顏色。第五十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2.有無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸存在在草酸存在下，顯黃色并帶綠色熒光。在枸櫞酸丙酮存在條件下，只顯黃色而無(wú)熒光。（三）硼酸顯色反應(yīng)條件：1.具有下列結(jié)構(gòu)（5-羥基黃酮，2’-羥基查耳酮）第五十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六（四）堿性試劑顯色反應(yīng)

日光及紫外光下，通過(guò)紙斑反應(yīng)，觀察樣品用堿性試劑處理后的色變情況。

1.二氫黃酮類易在堿液中開環(huán)，轉(zhuǎn)變成相應(yīng)異構(gòu)體——查耳酮類化合物，顯橙-紅色。第五十八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2.黃酮醇類在堿液中先呈黃色，通入空氣后變?yōu)樽厣瑩?jù)此可與黃酮類區(qū)別。3.黃酮類化合物當(dāng)分子中有鄰二酚羥基取代或3,4’-二羥基取代時(shí)，在堿液中不安定，很快氧化，由黃色深紅色綠棕色沉淀。第五十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六(五)與五氯化銻的反應(yīng)

查耳酮的無(wú)水(!)CCl4溶液與五氯化銻作用生成紅或紫紅沉淀,黃酮、黃酮醇、二氫黃酮類顯黃-橙黃色。

方法：樣品5-10mg溶于5ml無(wú)水CCl4中，加1ml2%的五氯化銻的CCl4溶液。

反應(yīng)必須無(wú)水，否則生成沉淀不穩(wěn)定。第六十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六（六）Gibbs反應(yīng)檢查5-OH對(duì)位未被取代的黃酮。將樣品溶于吡啶中，加入Gibbs試劑顯藍(lán)或藍(lán)綠色。Gibbs試劑:甲液：0.5%2,6-二氯苯醌-4氯亞胺的乙醇溶液。乙液：硼酸-氯化鉀-氫氧化鉀緩沖液(pH9.4)第六十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六五、Wessely-Moser重排P181α-L-arabinopyranosylβ-D-glucopyranosylα-L-arabinopyranosylβ-D-glucopyranosyl6%HCl100℃/7hrschaftosideisoschaftoside因此在鑒定該類苷的結(jié)構(gòu)時(shí)盡量不能用酸處理，而要用2D-NMR技術(shù)來(lái)確定其結(jié)構(gòu)。第六十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六第三節(jié)

黃酮類化合物的提取分離一、提取黃酮類化合物在花、液、果等組織中，多以苷的形式存在；在木部堅(jiān)硬組織中，多以游離苷元形式存在；根據(jù)化合物極性不同，溶解性不同，采用不同溶劑提取。第六十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六1.苷元

多用CHCl3、Et2O、EtOAc等極性較小溶劑提取；對(duì)于多OCH3化的成分，用苯、石油醚提?。粚?duì)于極性大的成分，如查耳酮、橙酮、雙黃酮、羥基黃酮等，用EtOAc、EtOH、Me2CO、MeOH:H2O(1:1)等溶劑提取。第六十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2.苷類水或熱水提取，（多糖苷在熱水中溶解度較大，在冷水中溶解度較小）；也可用EtOH、MeOH、EtOAc提取。3.含羥基的苷或苷元，可用堿水提取。4.提取花青素類可加入少量酸，但一般黃酮類化合物則應(yīng)避免。第六十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六二、粗提物的精制處理1．溶劑萃取法去雜

石油醚：除去葉綠素、胡籮卜素等脂溶性色素水溶醇沉：除去蛋白質(zhì)、多糖、大分子水溶性物質(zhì)逆流分配：水-乙酸乙酯，正丁醇-石油醚在萃取除雜的同時(shí)，可使不同極性或極性相差較大者分離，如極性不同的苷和苷元，極性苷元和非極性苷元。第六十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2．堿水提酸沉淀法

適用于含酚羥基的化合物，如槐米中蘆丁的提取。注意事項(xiàng)：

①酸堿度不宜過(guò)大②鄰二酚羥基的保護(hù)：堿性條件下，鄰二酚羥基易被氧化，加硼砂保護(hù)③石灰乳的加入可除去果膠、粘液等水溶性酸性雜質(zhì)第六十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六3．炭粉吸附法適用于苷類的精制工作。植物的甲醇提取液加活性炭至吸附完全，過(guò)濾得吸附苷的活性炭粉末。依次用沸甲醇、沸水、7%酚/水、15%酚/醇洗脫，分步收集、檢查、合并。大部分苷類可用7%酚/水洗下，經(jīng)減壓濃縮至小體積，乙醚除酚，余下水層經(jīng)減壓濃縮得較純黃酮苷。第六十八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六4．離子交換法用陽(yáng)離子交換樹脂從水提液中吸附黃酮類化合物，與不被吸附的雜質(zhì)分離，再用甲醇將黃酮類化合物洗脫。

RSO3-H+

+ArOH（黃酮）無(wú)法交換，故實(shí)際上樹脂僅起到吸附作用。第六十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六三、分離極性大小不同

利用吸附或分配原理進(jìn)行分離常用吸附劑有聚酰胺、硅膠、纖維素粉１）聚酰胺層析主要有三種:

聚己內(nèi)酰胺型(Perlon)

六次甲基二胺已二酸鹽型(Nylon)

聚乙烯吡咯烷酮型(Polyclar)

第七十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

其原理是酰胺羰基與黃酮酚羥基形成氫鍵締合而吸附，吸附能力與酚羥基多少、位置及氫鍵締合力大小有關(guān)。各種溶劑在聚酰胺柱上洗脫能力由弱至強(qiáng)依次為：水，甲醇，丙酮，氫氧化鈉水溶液，甲酰胺，二甲基甲酰胺，脲素水溶液第七十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六水甲醇丙酮?dú)溲趸c溶液甲酰胺二甲基甲酰胺尿素水溶液弱強(qiáng)濃度小大破壞氫鍵締合都含有酰胺基與待分離的物質(zhì)競(jìng)爭(zhēng)與聚酰胺形成氫鍵締合第七十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六黃酮類化合物從聚酰胺柱洗脫時(shí)有下列規(guī)律：①苷元相同，洗脫先后順序一般為：三糖苷雙糖苷單糖苷苷元?

②母核上增加羥基，洗脫速度相應(yīng)減慢羥基位置的影響：具有鄰位羥基黃酮具有對(duì)位（或間位）羥基黃酮?③不同類型的黃酮類化合物，先后流出順序一般是：異黃酮二氫黃酮醇黃酮黃酮醇④分子中芳香核、共軛雙鍵多者吸附力強(qiáng)，故查耳酮往往較相應(yīng)的二氫黃酮難于洗脫。第七十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六２）硅膠層析①對(duì)酚羥基多的黃酮類，如多羥基黃酮及其苷類，硅膠減活性(含水量高)使用②對(duì)酚羥基少的黃酮類，如甲基化、乙?；S酮及二氫黃酮、異黃酮，則無(wú)須減活性。第七十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2.利用分子大小不同，用葡聚糖凝膠分子篩分離

主要用兩種型號(hào)的凝膠Sephadex-G型和Sephadex-LH-20型分離游離黃酮主要是吸附作用，極性小大洗脫。分離黃酮苷類，主要是分子篩作用，分子大小洗脫?？偟南疵擁樞颍禾嵌嗟能仗巧俚能沼坞x苷元（極性小大）常用洗脫劑：①堿性水溶液，含鹽水溶液②醇及含水醇③含水丙酮，甲醇－氯仿第七十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六3.利用酸性強(qiáng)弱，采用pH梯度萃取法

混合物溶于有機(jī)溶劑，依次用:5%NaHCO3、5%Na2CO3、0.2%NaOH、4%NaOH萃取

相應(yīng)的黃酮類化合物洗脫順序：7,4’－二羥基7或4’羥基一般酚羥基5－羥基黃酮第七十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六4.根據(jù)分子中某些特定官能團(tuán)進(jìn)行分離醋酸鉛沉淀法硼酸絡(luò)合法：根據(jù)具有鄰二酚羥基的黃酮與硼酸絡(luò)合，生成物易溶于水的性質(zhì)與其它類型黃酮分離。

通常在不與水混溶的有機(jī)溶劑如乙醚中，用硼酸液萃取，水相即為鄰二酚羥基類黃酮。第七十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六舉例：從芹菜［ApiumgraveolensL.］種子中分離graveobiodideA及B第七十八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六堿式醋酸鉛可沉淀具有一般酚類化合物有鄰二酚羥基無(wú)鄰二酚羥基第七十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六第四節(jié)

黃酮類化合物的檢識(shí)與結(jié)構(gòu)測(cè)定

目前主要采用的方法有：①與標(biāo)準(zhǔn)品或與文獻(xiàn)對(duì)照PPC或TLC得到的

Rf或hRf值（Rf100）②分析對(duì)比樣品,在甲醇溶液中,加入酸、堿或金屬鹽類試劑后得到的UV光譜③1H-NMR④13C-NMR⑤MS第八十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六一、層析在黃酮類鑒定中的作用1.紙層析(PPC)

苷類成分可采用雙向展開，第一相展開采用醇性溶劑，如BAW系統(tǒng)（正丁醇：醋酸：水4：1：5上層）；第二相展開用水性溶劑，如氯仿：醋酸：水（3：6：1）苷元?jiǎng)t多采用醇性溶劑。花色苷及其苷元，可用含鹽酸或醋酸的溶劑。第八十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2.薄層層析(TLC)１）硅膠薄層用于弱極性黃酮較好。常用甲苯：甲酸甲酯：甲酸（5：4：1）；苯：甲醇（95：5）或苯：甲醇：冰醋酸（35：5：5）等。２）聚酰胺層析

適用范圍廣，可分離含游離酚羥基或其苷類。常用展開系統(tǒng)：乙醇：水（3：2）；丙酮：水（1：1）等。顯色劑：紫外光；2%三氯化鋁甲醇液；1%FeCl3/1%K3Fe(CN)6(1:1)混合液。第八十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六蘆丁R槲皮素Q蘆丁R槲皮素QRfR>RfQRfR>RfQ醇性展開劑HAc:H2O(85:15)分配原理吸附原理PC聚酰胺層析第八十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六二、紫外光譜在黃酮類鑒定中的應(yīng)用

可用于確定黃酮母核類型及確定某些位置是否含有羥基。一般程序：①測(cè)定樣品在甲醇中的UV譜以了解母核類型；②在甲醇溶液中分別加入各種診斷試劑后測(cè)UV譜和可見光譜以了解3,5,7,3’,4’有無(wú)羥基及鄰二酚羥基；③苷類可水解后（或先甲基化再水解），再用上法測(cè)苷元的UV譜以了解糖的連接位置。第八十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六（一）黃酮類化合物在甲醇溶液中的紫外光譜

多數(shù)黃酮類化合物由兩個(gè)主要吸收帶組成：帶I在300-400nm區(qū)間，由B環(huán)桂皮酰系統(tǒng)的電子躍遷所引起第八十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

帶II在240-285nm區(qū)間，由A環(huán)苯甲酰系統(tǒng)的電子躍遷所引起第八十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

帶II(240-285nm)（苯甲酰系統(tǒng)）帶I(300-400nm)桂皮酰系統(tǒng)類型說(shuō)明

250-285304-350黃酮類-OH越多，帶I帶II越紅移

B環(huán)3’,4’有-OH基，帶II為雙峰（主峰伴肩峰）

328-357黃酮醇類(3-OR)352-385黃酮醇類(3-OH)

245-270270-295300-400異黃酮類二氫黃酮（醇）

B環(huán)上有-OH,OCH3對(duì)帶I影響不大

220-270340-390或340-390(Ia)300-320(Ib)查耳酮類

查耳酮2’-OH使帶I向紅移影響大370-430(3-4個(gè)小峰)

橙酮類

第八十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六不同類型黃酮類化合物的紫外光譜第八十八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2．加入診斷試劑后引起的位移及結(jié)構(gòu)測(cè)定第八十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六加入試劑帶II

帶I

說(shuō)明樣品+MeOH250-285304-385兩峰強(qiáng)度基本相同，具體位置與母核上電負(fù)性取代基(-OH,-OCH3)有關(guān)，-OH,-OCH3越多，越長(zhǎng)移

甲醇鈉

+NaOMe或+NaOHA環(huán)有-OH，紅移小，無(wú)意義40-60nm（不變或增強(qiáng)）50-60nm（下降）有4’-OH，無(wú)3-OH

有3-OH，無(wú)4’-OH有3,4’-OH或3,3’,4’-OH（衰減更快）

7-OH帶I，II隨加NaOMe時(shí)間延長(zhǎng)，逐漸衰減

320-330nm有小峰+NaOAc(未熔溶)

醋酸鈉5-20有3-OH,4’OH也發(fā)生紅移，但意義不大7-OH

第九十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六加入試劑帶II帶I說(shuō)明+NaOAc/H3BO35-1012-30B環(huán)有鄰二酚羥基A環(huán)有鄰二酚羥基(不包括5,6-OH)AlCl3/HCl6050-6035-5517-200有3-OH有3,5-二OH有5-OH，無(wú)3-OH有6-OR無(wú)3-OH,5-OH或6-OR存在AlCl3光譜-AlCl3/HCl光譜30-4050-650B環(huán)有鄰二酚羥基A,B環(huán)皆有鄰二酚羥基A,B環(huán)皆無(wú)鄰二酚羥基第九十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

另有3,4’-OH或3,3’,4’-OH時(shí)，在NaOMe作用下易氧化破壞，故峰有衰減。2）NaOAc為弱堿，僅使酸性較強(qiáng)者，如

7,4’-OH解離。說(shuō)明：1）+NaOMe,OHOMe，紅移back第九十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六3）形成絡(luò)合物的能力：黃酮醇3-OH>黃酮5-OH>二氫黃酮5-OH>鄰二酚羥基>二氫黃酮醇3-OH

鄰二酚羥基和二氫黃酮醇3-OH在酸性條件下不與AlCl3絡(luò)合；但不在酸性條件下，五者皆與Al3+絡(luò)合；形成絡(luò)合物越穩(wěn)定，紅移越多。4）二者相減可檢測(cè)鄰二酚羥基。back第九十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

從中藥柴胡中得到山奈苷，酸水解PPC檢查出鼠李糖，該苷及苷元的UV[λmax(nm)]譜如下，解析結(jié)構(gòu)。第九十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六山奈苷

帶II帶IMeOH265345NaOMe265388Δ43，4’-OHAlCl3275399Δ54，5-OH

AlCl3/HCl275399AlCl3=AlCl3/HCl：無(wú)鄰二酚羥基NaOAc265399

帶II無(wú)紅移，無(wú)7-OHNaOAc/H3BO3265386Δ41?

Kaempferitrin

第九十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六山奈苷元

帶II帶IMeOH265367NaOMe276424（分解）

帶I紅移Δ57，且分解，3，4’-OHAlCl3270424Δ54，5-OH

AlCl3/HCl269424AlCl3=AlCl3/HCl：無(wú)鄰二酚羥基NaOAc276387

帶II紅移20，7-OHNaOAc/H3BO3267387Δ40?Kaempferitrin

第九十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六三、1H-NMR常用溶劑：氘代氯仿（CDDl3），氘代二甲基亞砜（DMSO-d6），氘代吡啶（C5D5N）。也可將黃酮類化合物作成三甲基硅醚衍生物溶于四氯化碳中進(jìn)行測(cè)定。第九十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六優(yōu)點(diǎn)：①無(wú)干擾信號(hào)，勿須昂貴的氘代試劑；②供試后的樣品用含水甲醇處理可回收；③三甲基硅醚衍生物可很方便的轉(zhuǎn)變成乙酰衍生物或甲醚衍生物。第九十八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六（一）A環(huán)質(zhì)子1．5,7-二OH黃酮第九十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六H-6信號(hào)比H-8信號(hào)位于高場(chǎng)第一百頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六7-OH成苷后，H-6信號(hào)、H-8信號(hào)均向低場(chǎng)位移第一百零一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

H-5較H-6、H-8低場(chǎng)，是由于羰基的負(fù)屏蔽效應(yīng)的影響。

7-OH黃酮中H-6、H-8較5,7-二OH黃酮中H-6、H-8低場(chǎng)，且相互位置可能顛倒。2．7-OH黃酮第一百零二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六H-5較H-6、H-8低場(chǎng)第一百零三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

由于C環(huán)對(duì)H-2’,6’的負(fù)屏蔽作用大于對(duì)H-3’,5’，且H-3’,5’受4’-OR的屏蔽作用，故前者較低場(chǎng)；

C環(huán)氧化程度越高，H-2’,6’處于越低場(chǎng)的位置。（二）

B環(huán)質(zhì)子δ6.5-8.01．4’-氧取代黃酮類化合物H-3’,5’6.5-7.1,d,J=8.5HzH-2’,6’7.1-8.1,d,J=8.5Hz第一百零四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六H-2’,6’較H-3’,5’低場(chǎng)第一百零五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六H-2’受C環(huán)負(fù)屏蔽和3’-OR屏蔽作用，H-6’也受C環(huán)負(fù)屏蔽作用，而H-5’則僅4’-OR屏蔽作用。

故由低場(chǎng)到高場(chǎng)的順序?yàn)椋篐-6’H-2’H-5’。但有時(shí)也會(huì)發(fā)生H-2’和H-6’重疊的現(xiàn)象。H-5’6.7-7.1d,J=8.5HzH-2’7.2d,J=2.5HzH-6’7.9dd,J=2.5,8.5Hz2．3’,4’-二氧取代黃酮類化合物（1）3’,4’-二氧取代黃酮及黃酮醇第一百零六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六H-6’H-2’H-5’第一百零七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六（2）3’,4’-二氧取代異黃酮、二氫黃酮及二氫黃酮醇

H-2’,5’,6’常作為一個(gè)復(fù)雜多重峰（通常為兩組峰）

6.7-7.1第一百零八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六第一百零九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六若R1=R2=R3=H，則H-2’,6’為單峰，

6.7-7.5若上述條件不成立，則H-2’,6’分別為二重峰（J=2Hz）3．3’,4’,5’-三氧取代黃酮類化合物H-2’,6’對(duì)稱第一百一十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六第一百一十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六（三）

C環(huán)質(zhì)子1.黃酮類S第一百一十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六第一百一十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六H-2位于羰基位，同時(shí)受羰基和苯環(huán)的負(fù)屏蔽作用，且通過(guò)碳與氧相連，故較一般芳香質(zhì)子低場(chǎng)，δ7.6-7.8。若用DMSO-d6作溶劑，則δ8.5-8.7。2.異黃酮類第一百一十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

兩個(gè)H-3,分別為dd峰，中心位于δ2.8，J=17Hz（偕偶），5Hz（順偶）及J=17Hz（偕偶），11Hz（反偶）H-2,dd,δ5.2,Jtrans=11Hz（反偶）,Jcis=5Hz（順偶）3.二氫黃酮和二氫黃酮醇1)二氫黃酮第一百一十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六兩個(gè)H-3,分別為dd峰，中心位于δ2.8第一百一十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

3-OR苷化，供電子能力下降，兩個(gè)氫的δ值升高（向低場(chǎng)位移），可用于判斷二氫黃酮醇苷中糖的位置。H-2與H-3為反式雙直立鍵，J=11HzH-2δ4.9H-3δ4.3（2）二氫黃酮醇第一百一十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六H-2δ4.9H-3δ4.3第一百一十八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六4.查耳酮第一百一十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六5.橙酮第一百二十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六（四）糖上的質(zhì)子1.單糖苷類糖與苷元相連時(shí)，糖上1?-H與其它H比較，一般位于較低磁場(chǎng)區(qū)。

因-OR(R=苷元)不表現(xiàn)供電子，僅表現(xiàn)吸電子的誘導(dǎo)作用，端基H受兩個(gè)O的誘導(dǎo)，處于低場(chǎng)（4.0-6.0）第一百二十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六1）葡萄糖位于不同位置時(shí)端基H化學(xué)位移的區(qū)別：

C3-OR1?-H的值約為5.8C-5,C-6,C-7,C-4’-OR1?-H的值約為4.8-5.2第一百二十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2)葡萄糖苷與鼠李糖苷的區(qū)別黃酮醇3-O-葡萄糖苷5.8,d,J=7Hz（二直立鍵偶合系統(tǒng)）黃酮醇3-O-鼠李糖苷5.0-5.1,d,J=2Hz（二平伏鍵偶合系統(tǒng)）另外鼠李糖上的C-CH3

0.8-1.2,d,J=6.5Hz第一百二十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六第一百二十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2.雙糖苷類末端糖上的H-1’’’因離黃酮母核較遠(yuǎn)，受到的負(fù)屏蔽作用較小，因而叫H-1’’處于較高場(chǎng)的位置。（五）其它質(zhì)子如6-及8-C-CH3，乙酰氧基質(zhì)子，甲氧基質(zhì)子。第一百二十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六四、13C-NMR

方法：

1）對(duì)比法：與簡(jiǎn)單的模型化合物如苯乙酮、桂皮酸及它們的衍生物光譜的比較；

2）計(jì)算法：用經(jīng)驗(yàn)的簡(jiǎn)單芳香化合物的取代位移加和規(guī)律進(jìn)行計(jì)算；

3）選用各種一維和二維NMR技術(shù)。第一百二十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六（一）骨架類型的判斷

根據(jù)中央三碳鏈的碳信號(hào)，即先根據(jù)羰基碳的δ值，再結(jié)合C2、C3的裂分和δ值判斷。第一百二十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六C=OC-2（或C-β）C-3（或C-α）歸屬168.6~169.8(s)137.8~140.7(d)122.1~122.3(s)異橙酮類

174.5~184.0(s)160.5~163.2(s)104.7~111.8(d)黃酮類149.8~155.4(d)122.3~125.9(s)異黃酮類147.9(s)136.0(d)黃酮醇類182.5~182.7(s)146.1~147.7(s)111.6~111.9(d)(=CH-)橙酮類

188.0~197.0(s)

136.9~145.4(d)116.6~128.1(d)查耳酮類75.0~80.3(d)42.8~44.6(t)二氫黃酮類82.7(d)71.2(d)二氫黃酮醇類第一百二十八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六（二）黃酮類化合物取代圖式的確定方法

黃酮類化合物中芳香碳原子的信號(hào)特征可以用來(lái)確定取代基的取代圖式。以黃酮為例，其13C-NMR信號(hào)如下所示：第一百二十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六XZiZo

Zm

Zp

OH26.6-12.81.6

-7.1OCH3

31.4

-14.41.0

-7.8-OH及-OCH3的引人將使直接相連碳原子(α-碳)信號(hào)大幅度地向低場(chǎng)位移，鄰位碳原子(β-碳)及對(duì)位碳則向高場(chǎng)位移。間位碳雖也向低場(chǎng)位移，但幅度很小。

1．B環(huán)引人取代基位移的影響第一百三十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

A-環(huán)上引入取代基時(shí)，位移效應(yīng)只影響到A環(huán);

而B-環(huán)上引入取代基時(shí)，位移效應(yīng)只影響到B環(huán);

若是一個(gè)環(huán)上同時(shí)引入幾個(gè)取代基時(shí)，其位移效應(yīng)將具有某種程度的加和性。第一百三十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

黃酮母核上引入5-OH時(shí)，不僅影響A環(huán)碳原子的化學(xué)位移，還因C5-OH與C4=O形成分子內(nèi)氫鍵締合，故可使C4，C2信號(hào)向低場(chǎng)移動(dòng)(分別為+4.5及+0.9)，而C-3信號(hào)向高場(chǎng)移動(dòng)(–2.0)。

C5-OH如果被甲基化或苷化(氫鍵締合遭到破壞)，則上述信號(hào)將分別向高場(chǎng)位移。第一百三十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2．5，7-二羥基黃酮類中C-6及C-8信號(hào)的特征對(duì)大多數(shù)5，7—二羥基黃酮類化合物來(lái)說(shuō)，C-6(d)及C-8(d)信號(hào)在δ90.0～100.0的范圍內(nèi)出現(xiàn)，且C-6信號(hào)總是比C-8信號(hào)出現(xiàn)在較低的磁場(chǎng)。在二氫黃酮中兩者差別較小，約差0.9個(gè)化學(xué)位移單位，但在黃酮及黃酮醇中差別較大，約為4.8。C-6或C-8有無(wú)烷基或者芳香基取代可通過(guò)觀察13C-NMR上C-6，C-8信號(hào)是否發(fā)生位移而加以認(rèn)定。第一百三十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

生松素(pinocembrin)及其6-C-甲基及8-C-甲基衍生物的C-6，C-8化合物C-6C-85,7-dihydroxyflavanone(pinocembrin)96.195.16-C-methylpinocembrin102.194.78-C-methylpinocembrin95.7101.9C-6信號(hào)總是比C-8信號(hào)出現(xiàn)在較低的磁場(chǎng)第一百三十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六化合物C-6C-83',4',5,7-tetrahydroxyflavanone(luteolin)99.294.28-C-benzylluteolin98.6103.86-C-hydroxyluteolin140.4

93.6

木犀草素(luteolin)，即使因其C-6上聯(lián)接的H被-OH取代而向低場(chǎng)大幅度的位移，C-8信號(hào)也未因此而發(fā)生大的改變。第一百三十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

芹菜素(apigenin)、肥皂黃素(saponarin)及apigenin-6,8-di-C-glucosideC-6,C-8數(shù)據(jù)

化合物C-6C-84',5,7-trihydroxyflavanone(apigenin)98.894.0apigenin-6-C-β-D-glucopyranosyl-7-O-β-D-glucopyranoside(saponarin)110.693.8apigenin-6,8-di-C-glucoside108.0104.0第一百三十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六(三)黃酮類化合物O-糖苷中糖的連接位置1．糖的苷化位移及端基碳的信號(hào)酚性苷中，糖上端基碳的苷化位移約為+4.0～+6.0。黃酮苷類化合物當(dāng)苷化位置在苷元的7或2’、3’、4’時(shí)，糖的C-1信號(hào)將位于約δ100.0～102.5范圍內(nèi)。

5-O-葡萄糖苷及7-O-鼠李糖苷相應(yīng)的C-1信號(hào)分別出現(xiàn)δ104.3及99.0處.。第一百三十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

黃酮類雙糖苷或低聚糖苷的13C-NMR中，糖的端基碳信號(hào)出現(xiàn)在δ98.0～109.0區(qū)域內(nèi)，常與C-6，C-8，C-3及C-10混在一起而不易區(qū)別?？刹捎肏MQC(1H-detectedheteronuclearmultiple-quantumcoherence)等二維核磁共振技術(shù)鑒別。109第一百三十八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2．苷元的苷化位移苷元糖苷化后與糖直接相連碳原子向低場(chǎng)位移，其鄰位及對(duì)位碳原子則向高場(chǎng)位移，且對(duì)位碳原子的位移幅度大而且恒定。C-5-OH糖苷化后，除上述苷化位移效應(yīng)外，還因C5-OH與C4＝O的氫鍵締合受到破壞，故對(duì)C環(huán)碳原子也將發(fā)生巨大的影響。C-2，C-4信號(hào)明顯地向高場(chǎng)位移，而C-3信號(hào)則移向低場(chǎng)。第一百三十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六(四)雙糖苷及低聚糖苷中分子內(nèi)苷鍵及糖的聯(lián)接順序1）當(dāng)糖上的羥基被苷化時(shí)將使該-OH所在碳原子產(chǎn)生一個(gè)相當(dāng)大的低場(chǎng)位移。例如在黃酮類化合物蘆丁[苷元-O-β-D-glucosyl-(6→1)-α-L-rhamnoside)中，葡萄糖的C-6信號(hào)將向低場(chǎng)位移5.8，但C-5則向高場(chǎng)位移約1.4。2）黃酮類雙糖苷及低聚糖苷中糖的聯(lián)結(jié)順序常采用HMBC(1H-detectedheteronuclermultiple-bond-coherence)二維核磁共振技術(shù)進(jìn)行確定。第一百四十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六五、質(zhì)譜在黃酮類結(jié)構(gòu)測(cè)定中的應(yīng)用多數(shù)黃酮類化合物苷元在電子轟擊質(zhì)譜(El-MS)中因分子離子峰較強(qiáng)，往往成為基峰，故一般無(wú)須作成衍生物即可進(jìn)行測(cè)定。但是當(dāng)測(cè)定極性強(qiáng)、難氣化以及對(duì)熱不穩(wěn)定的黃酮苷類化合物時(shí)，則采用FD-MS和FAB-MS、ESI-MS等軟電離質(zhì)譜技術(shù)獲得強(qiáng)的分子離子峰[M]+及具有偶數(shù)電子的準(zhǔn)分子離子峰(quasi-molecularionpeak)[M+H]+。第一百四十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六(一)黃酮類化合物苷元的電子轟擊質(zhì)譜

(El-MS)黃酮類化合物苷元的El-MS中，除分子離子峰[M]+外，也常常生成[M-1]+即(M-H)基峰。如為甲基化衍生物，則可以得到[M-15]+即(M-CH3)離子。第一百四十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六120102黃酮類化合物主要有下列兩種基本裂解途徑：

途徑-I（RDA裂解）：第一百四十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

此外，還有分子離子M+.生成[M-1]+=(M-H)及[M-28]+.=(M-CO)；由A1生成[M-28]+.=(A1-CO)及B2生成[B2-28]+.=(B2-CO)等碎片離子。途徑-II第一百四十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六1．黃酮類裂解基本規(guī)律：第一百四十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六化合物A1+.B1+.黃酮1201025，7-二氫黃酮1521025，7，4'-三羥基黃酮（芹菜素）1521185，7-二羥基，4'-甲氧基黃酮（刺槐素）152132

A-環(huán)的取代圖式可通過(guò)測(cè)定A1+.的m/z的值進(jìn)行確定

。一些黃酮類化合物的質(zhì)譜數(shù)據(jù)同樣，根據(jù)B-環(huán)碎片離子的m/z值，也可精確測(cè)定B環(huán)的取代情況。Back第一百四十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

黃酮在有四個(gè)以上氧取代基時(shí)，常常給出中等強(qiáng)度的A1及B1碎片，它具有重要的鑒定意義；但是黃酮醇則不然，當(dāng)氧取代超過(guò)四個(gè)以上時(shí)，只能產(chǎn)生微弱的Al+.及Bl+.碎片離子。第一百四十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六在3，6及8-位含有C異戊烯基的黃酮類，除一般黃酮裂解途徑外，還產(chǎn)生一些新的碎片離子。如：化合物(I)中A環(huán)上的，-二甲烯丙基在裂解過(guò)程中脫去C4H7·碎片，并重排成穩(wěn)定的卓甕離子(Ⅱ)。第一百四十八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六在6-及8-位含有甲氧基的黃酮可失去CH3·，得到[M—15]+強(qiáng)峰(常為基峰)，隨后又失去CO，生成[M-43]離子：第一百四十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六2．黃酮醇類質(zhì)譜

多數(shù)黃酮醇苷元，分子離子峰是基峰，在裂解時(shí)主要按途徑-Ⅱ進(jìn)行，得到B2+離子，繼續(xù)失去CO形成的[B2-28]+.離子。與途徑Ⅱ相比，途徑I通常不太主要。其中，[A+H]+是來(lái)自A-環(huán)的主要離子，其上轉(zhuǎn)移的H來(lái)自3-OR基團(tuán)。第一百五十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

在黃酮醇全甲基化衍生物的質(zhì)譜圖上，B2+離子應(yīng)當(dāng)出現(xiàn)在m/z105(B環(huán)無(wú)羥基取代)，或135(-OCH3，示B環(huán)有一個(gè)羥基)，或165(有兩個(gè)-OCH3，示B環(huán)有兩個(gè)羥基)或195(有三個(gè)-OCH3，示B環(huán)有三個(gè)羥基)等處，其中最強(qiáng)的峰即為B2+離子。第一百五十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六

具有2'-OH或2'-OCH3的黃酮醇類在裂解時(shí)有個(gè)重要特點(diǎn)，即可以通過(guò)失去OH·或OCH3·，形成一個(gè)新的穩(wěn)定的五元雜環(huán)。第一百五十二頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六(二)黃酮苷類化合物的FD-MS黃酮苷類化合物在El-MS上既不顯示分子離子峰，也不顯示糖基的碎片，故不宜用El-MS測(cè)定。

?

而FD-MS譜可給出強(qiáng)烈的M+及[M+H]+。還給出葡萄糖基的某些碎片，為化合物的結(jié)構(gòu)鑒定提供了重要的信息。?P45

在FD-MS中，因?yàn)?M+23Na)離子的強(qiáng)度隨著溶劑極性及發(fā)射絲電流強(qiáng)度的改變而變化，可用以幫助區(qū)別分子離子峰(M)+及偽分子離子峰[M+1]+。P45頁(yè)第一百五十三頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六結(jié)構(gòu)研究舉例

某化合物分子式為C15H10O5，Mg-HCl反應(yīng)陽(yáng)性，根據(jù)UV、1H-NMR和MS數(shù)據(jù)寫出化合物結(jié)構(gòu)，說(shuō)明數(shù)據(jù)分析結(jié)果，MS裂解過(guò)程，1H-NMR數(shù)據(jù)歸屬。第一百五十四頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六MeOH267,296sh,336NaOMe275,324,392

帶II紅移275-267=7,7-OHNaOAc276,301,376

帶I紅移376-336=40,4’-OHAlCl3276,301,348,384AlCl3/HCl276,302,340,381AlCl3=AlCl3/HCl，結(jié)構(gòu)中無(wú)鄰二酚羥基NaOAc/H3BO3268,302sh,338

與MeOH基本相同，結(jié)構(gòu)中無(wú)鄰二酚羥基UVλmax(nm)第一百五十五頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六6.15(1H,J=2.5Hz)A環(huán)氫，間偶(6-H)6.3(1H,s)黃酮3-OH6.5(1H,d,J=2.5Hz)A環(huán)氫，間偶(8-H)6.85(2H,d,J=8.5Hz)B環(huán)氫，鄰偶(3,5-H)7.75(2H,d,J=8.5Hz)B環(huán)氫，鄰偶(2,6-H)1H-NMR（四甲基硅醚衍生物，CCl4）第一百五十六頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六270(M+),242,152,124,121,118,93152證明A環(huán)有兩個(gè)酚羥基；118證明B環(huán)有一個(gè)酚羥基。MS.m/e第一百五十七頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六例二

某化合物為黃色結(jié)晶，HCl-Mg反應(yīng)(+)，元素分析為C16H12O6，測(cè)波譜數(shù)據(jù)如下，確定其結(jié)構(gòu)。第一百五十八頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六MeOH252,267,344NaOMe270,303(sh),386

帶I紅移386-344=42nm,4’-OHNaOAc275,322,367

帶II紅移275-252=23nm,7-OHAlCl3273,296,362,390AlCl3/HCl276,295,351,383

AlCl3與AlCl3/HCl基本相同，結(jié)構(gòu)中無(wú)鄰二酚羥基

NaOAc/H3BO3253(sh),268,348

與MeOH相同，結(jié)構(gòu)中無(wú)鄰二酚羥基

UVλmax(nm)第一百五十九頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六7.4(1H,dd,J=8.0,2.0Hz)B環(huán)氫(6’-H)6.8(1H,J=8.0Hz)B環(huán)氫(5’-H)6.3(1H,s)黃酮3-H3.8(3H,s)B環(huán)-OCH37.3(1H,d,J=2.0Hz)B環(huán)氫(2’-H)6.5(1H,d,J=2.5Hz)A環(huán)上間位氫(8-H)6.2(1H,d,J=2.5Hz)A環(huán)上間位氫(6-H)1H-NMR第一百六十頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六300,299,285,272,153,152,151,148152證明A環(huán)有兩個(gè)酚羥基；148證明B環(huán)有一個(gè)酚羥基和一個(gè)甲氧基。EI-MS第一百六十一頁(yè)，共一百八十六頁(yè)，編輯于2023年，星期六181.8,164.4,163.6,161.7,157.9,151.2