分解纖維素的微生物的分離2

專題二微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題3分解纖維素的微生物的分離2.請(qǐng)寫出纖維素酶分解纖維素的過程？纖維素纖維二糖葡萄糖C1酶Cx酶葡萄糖苷酶一、纖維素酶1.纖維素酶是一種

，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即______、______和_____________。復(fù)合酶葡萄糖苷酶C1酶Cx酶3.纖維素酶來源？微生物（細(xì)菌、真菌等）二、篩選過程與步驟（P28）土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基挑選菌落思考與討論：1.本實(shí)驗(yàn)流程與課題2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同？2.分析比較P29“纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基配方”和“鑒別纖維素分離菌的培養(yǎng)基”配方，你發(fā)現(xiàn)了什么？1.本實(shí)驗(yàn)流程與課題2中的實(shí)驗(yàn)流程有哪些異同？課題2是將土樣制成菌懸液直接涂布在以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。本課題是先選擇培養(yǎng)（可不做）增加纖維素分解菌的濃度，再做鑒別培養(yǎng)。土壤取樣選擇培養(yǎng)梯度稀釋將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基挑選菌落土壤取樣梯度稀釋將樣品涂布到選擇培養(yǎng)基上挑選菌落酚紅指示劑鑒定2.分析比較P29“纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基配方”和“鑒別纖維素分離菌的培養(yǎng)基”配方，你發(fā)現(xiàn)了什么？3.該培養(yǎng)基對(duì)微生物________（、具有，不具有）選擇作用。如果具有，其選擇機(jī)制是__________________________________________________。以纖維素粉為唯一碳源，能分解纖維素的微生物可以大量繁殖

具有4.為什么選擇培養(yǎng)后還需鑒別培養(yǎng)呢？實(shí)驗(yàn)流程中“選擇培養(yǎng)”的目的是什么？4.實(shí)驗(yàn)流程中“選擇培養(yǎng)”的目的是什么？

其目的是增加纖維素分解菌的濃度，以確保能夠從樣品中分離到所需要的微生物。若設(shè)置一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)說明選擇培養(yǎng)的作用，應(yīng)將配方中的__________改為_________。5、你能否設(shè)計(jì)一個(gè)對(duì)照實(shí)驗(yàn)，說明選擇培養(yǎng)基的作用？葡萄糖纖維素粉

纖維素粉

葡萄糖6.剛果紅染色法的原理是什么？兩種染色方法各有哪些優(yōu)點(diǎn)與不足？葡萄糖纖維素粉剛果紅+纖維素→紅色復(fù)合物剛果紅+纖維素→紅色復(fù)合物纖維素酶X纖維二糖或葡萄糖→不產(chǎn)生紅色復(fù)合物菌落特征：具有透明圈思考：兩種染色方法的步驟有什么不同，這兩種方法分別哪些優(yōu)點(diǎn)與不足？染色法方法一方法二實(shí)驗(yàn)方法優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)在倒平板時(shí)就加入剛果紅顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用，準(zhǔn)確率高。操作簡便，不存在菌落混雜問題

操作繁瑣，剛果紅會(huì)使菌落之間發(fā)生混雜

產(chǎn)生淀粉酶或能降解色素的微生物也會(huì)形成透明圈，出現(xiàn)假陽性現(xiàn)象。分解纖維素的微生物的分離纖維素酶種類、作用、催化活力剛果紅染色篩選原理實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)土壤取樣選擇培養(yǎng)鑒別培養(yǎng)梯度稀釋前置染色法后置染色法富含纖維素土壤增大分解菌含量剛果紅染色鑒別課堂總結(jié)選擇合適的濃度挑選具有明顯透明圈的菌落

1.經(jīng)過剛果紅鑒別培養(yǎng)基篩選出來的菌，如何進(jìn)一步鑒定是否確實(shí)能產(chǎn)生纖維素酶？請(qǐng)寫出簡單的實(shí)驗(yàn)思路。挑取有透明圈的菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)幾天，過濾得培養(yǎng)液，放入濾紙條，在適宜溫度下振蕩反應(yīng)1h，觀察濾紙條是否被分解。并與等量蒸餾水組做對(duì)照。拓展思考

2.請(qǐng)說出選擇培養(yǎng)、富集培養(yǎng)、擴(kuò)大培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)的對(duì)象與目的。挑取有透明圈的菌落進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)幾天，過濾得培養(yǎng)液，放入濾紙條，在適宜溫度下震蕩反應(yīng)1h，觀察濾紙條是否被分解。并與等量蒸餾水組做對(duì)照。拓展思考

3.纖維素酶能在微生物細(xì)胞內(nèi)分解纖維素嗎？纖維素是一種大分子化合物，細(xì)胞無法吸收，因此微生物分泌纖維素酶到細(xì)胞外分解纖維素，從而利用。拓展思考練一練：1.下列關(guān)于纖維素酶的說法，錯(cuò)誤的是A.纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括三種B.纖維素酶可把纖維素分解成葡萄糖C.纖維素酶可用于去掉植物的細(xì)胞壁D.葡萄糖苷酶可把纖維素分解成葡萄糖2.利用剛果紅法可以篩選出纖維素分解菌，下列說法錯(cuò)誤的是A.剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物B.剛果紅能與纖維二糖形成紅色復(fù)合物C.剛果紅不能與葡萄糖形成紅色復(fù)合物D.若培養(yǎng)基上產(chǎn)生了透明圈，則說明已篩

選出了纖維素分解菌3.在分離纖維素分解菌過程中往往需要振蕩，其作用不包括（）A、使細(xì)菌能與培養(yǎng)基混合均勻B、使細(xì)菌能充分吸收氧氣C、使細(xì)菌能快速繁殖D、防止細(xì)菌失水D

1.現(xiàn)在大力提倡無紙化辦公，但是仍然不可避免的每年要產(chǎn)生大量的廢紙，其主要成分是木質(zhì)纖維，人類正努力將其轉(zhuǎn)化為一種新的資源—乙醇。下圖是工業(yè)上利用微生物由纖維素生產(chǎn)乙醇的基本工藝流程，請(qǐng)回答相關(guān)問題：(1)自然界中①環(huán)節(jié)需要的微生物大多分布在__________________的環(huán)境中。將從土壤中獲得的微生物培養(yǎng)在以_________為碳源、并加入_______的培養(yǎng)基上篩選周圍有_________的菌落。(2)如上所述的篩選中獲得了三個(gè)菌落，對(duì)它們分別培養(yǎng)，并完成環(huán)節(jié)②，且三種等量酶液中酶蛋白濃度相同，則你認(rèn)為三種酶液的活性_______(填“一定相同”“不一定相同”或“一定不同”)，可以通過_______進(jìn)行定量測定。(3)根據(jù)測定結(jié)果，①環(huán)節(jié)常選擇木霉，則②中獲得的酶是________酶。該酶至少包括______________________________三個(gè)組分。現(xiàn)在大力提倡無紙化辦公，但是仍然不可避免的每年要產(chǎn)生大量的廢紙，其主要成分是木質(zhì)纖維，人類正努力將其轉(zhuǎn)化為一種新的資源—乙醇。下圖是工業(yè)上利用微生物由纖維素生產(chǎn)乙醇的基本工藝流程，請(qǐng)回答相關(guān)問題：(2)如上所述的篩選中獲得了三個(gè)菌落，對(duì)它們分別培養(yǎng)，并完成環(huán)節(jié)②，且三種等量酶液中酶蛋白濃度相同，則你認(rèn)為三種酶液的活性_______(填“一定相同”“不一定相同”或“一定不同”)，可以通過_______進(jìn)行定量測定。(4)生產(chǎn)中可以滿足④環(huán)節(jié)的常見菌種是_________，為了確保獲得產(chǎn)物乙醇，⑤環(huán)節(jié)要注意_________，④過程要注意避免___________。答案：(1)富含纖維素(其他答案合理給分，如落葉較多等)纖維素剛果紅透明圈(2)不一定相同對(duì)纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖(3)纖維素C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶(4)酵母菌發(fā)酵裝置密閉(或保證無氧條件等)

污染雜菌11年39.【生物選修1：生物技術(shù)實(shí)踐（15分）有些細(xì)菌可分解原油，從而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同學(xué)欲從污染的土壤中篩選出高效降解原油的菌株?；卮饐栴}：⑴在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以

為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于

培養(yǎng)基。⑵純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即________________

和

。

石油選擇平板劃線法稀釋涂布平板法⑶為了篩選出高效菌株，可比