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分子生物學重點第七章什么是染色體?染色體功能?DNA的一段給定區(qū)域及與之結合的蛋白質(zhì)稱為染色質(zhì)(chromatin)DNA包裝為染色體的重要性?基因大小、基因數(shù)量、基因密度的概念不參與基因的表達的染色體元件在真核細胞中,影響基因密度大小的因素DNA重復序列的特點和分布細胞周期概念?真核染色體在細胞周期中的復制和分裂過程端粒酶的功能核小體組成核小體是由8個組蛋白所形成的核心組成,DNA纏繞在組蛋白核心上。每個核小體之間的DNA叫做連接DNA。與核小體連接最緊密的DNA叫做核心DNA,在所有的真核細胞中長度約147bp的核心DNA是核小體一個不變的特征。相反核小體之間的連接DNA的長度是可變的。細胞周期檢查點的作用組蛋白結構特點組蛋白是帶正電的小分子蛋白質(zhì),其H2A、H2B、H3、H4是核心組蛋白。兩個拷貝的這幾種蛋白形成核小體的蛋白核,核小體DNA纏繞其上。組蛋白中帶正電荷的氨基酸含量很高所以能與帶負電的DNA分子緊密結合。染色體1,2,3,4級結構染色體結構的調(diào)節(jié)因素第八章名詞解釋:半保留復制半不連續(xù)復制前導鏈后隨鏈岡崎片段復制子復制叉解旋酶引物酶拓撲異構酶DNA聚合酶端粒端粒酶DNA復制過程及過程中涉及的原料及其功能原核真核DNA聚合酶結構、功能異同大腸桿菌DNA復制過程端粒的復制與衰老的關系第九章DNA突變、損傷原因(環(huán)境、復制過程)一、環(huán)境因素(物理化學)1、自發(fā)損傷水解:N-糖苷鍵水解發(fā)生去嘌呤化,形成脫堿基的AP位點。脫氨基作用:C→U、5-mC→T(產(chǎn)生天然存在的甲基)、A→次黃嘌呤(與C配對)、G→黃嘌呤(與C配對)。2、DNA損傷烷基化:G甲基化生成O6-甲基鳥嘌呤與T配對,導致G:C→A:T。氧化反應:活性氧簇攻擊生成oxoG與A配對,導致G:C→T:A。紫外線:相臨嘧啶之間發(fā)生光化學聚合生成嘧啶二聚體。3、堿基類似物和嵌入劑引起的突變堿基類似物:5-BrU(T的類似物);通過烯醇互變異構體與G錯配;導致T:A→G:C。嵌入劑:(多環(huán)扁平分子)如EB,吖啶;與堿基相互結合或堆積,使模板扭曲或堿基距離加倍,導致一個或者幾個堿基的缺失或插入。二、內(nèi)因:復制過程中的錯誤1、?。孩俎D(zhuǎn)換(如T→A,C→G)②顛換(如T→G或A,A→C或T)③點突變(改變單個核苷酸的突變)④微衛(wèi)星DNA(打滑導致重復序列的拷貝數(shù)增多或減少)。2、大:①插入②刪除(缺失)③大片段重組。機體對突變、損傷的修復機制(相關蛋白及其功能)(環(huán)境6種+自身復制過程1種)1.錯配修復(MutS,MutL,MutH)MutS:掃描DNA,通過錯配引起的DNA骨架扭曲來識別。MutL:與MutS組成復合體通過直接接觸激活MutH。MutH:在錯配位點附近的一條鏈上產(chǎn)生一個切口。(通過半甲基化標記要被修復的鏈)錯配修復過程中同樣涉及到解旋酶、核酸外切酶、DNA聚合酶等。2.直接逆轉(zhuǎn)修復光修復:DNA光解酶;光激活作用直接逆轉(zhuǎn)紫外輻射造成的嘧啶二聚體結構。烷基轉(zhuǎn)移:甲基轉(zhuǎn)移酶;去除甲基化堿基O6-甲基G上的甲基。3.堿基切除修復利用糖基化酶識別并通過AP內(nèi)切酶(切5留3)、外切酶(切3留5)水解糖苷鍵去除受損堿基。堿基彈出機制:DNA具有很強的柔韌性。4.核苷酸切除修復(轉(zhuǎn)錄中起作用)核苷酸切除修復酶識別雙螺旋形狀上的扭曲。UvrA:檢測扭曲;UvrB:產(chǎn)生一單鏈凸起;UvrC:產(chǎn)生兩個切口;UvrD:解旋。5.雙鏈斷裂修復(DSB,同源重組修復)6.直接連接修復NHEJ:非同源末端連接;通過斷裂末端突出的單鏈之間錯排配對,斷裂DNA的兩個末端直接相互連接。7.移損合成修復防故障機制使復制機器繞過損傷部位直接合成DNA;DNA聚合酶的Y家族(如UmuD2’C)。第十章同源重組的功能同源重組兩種模型、兩種過程及其異同大腸桿菌同源重組機器及機制大腸桿菌和真核生物同源重組過程中涉及的關鍵蛋白及其作用第十一章名詞解釋:特異性重組轉(zhuǎn)座特異性重組微點特點重組及特異性重組酶家族異同轉(zhuǎn)座類型、轉(zhuǎn)座插入目的序列不同的后果三種基本轉(zhuǎn)座因子及結構特征轉(zhuǎn)座的兩種機制剪切、粘貼的機制第十二章DNA復制與轉(zhuǎn)錄的異同原核生物、真核生物RNA聚合酶種類及功能轉(zhuǎn)錄的三個基本階段每個階段的主要事件細菌啟動子的結構特征(序列、位置、結構)因子結構,識別啟動子拿個部位體內(nèi)外真核生物轉(zhuǎn)錄起始過程異同(主要蛋白質(zhì)功能)真核原核mRNA區(qū)別(頭尾、真核有前體)第十三章名詞解釋:RNA剪接可變剪接剪接體套馬索結構核酶RNA剪接化學基礎(結構特征)剪接過程(PPT29-38)第十四章名詞解釋:翻譯多順反子單順反子核糖體結合位點翻譯機器的組成、翻譯過程的階段、每階段的主要事件真核原核翻譯起始的異同tRNA1,2,3級結構及特點氨基酸附加到tRNA的過程氨基酸與氨酰tRNA合成酶及tRNA數(shù)量對應關系氨酰tRNA合成酶識別位點(氨基酸接受臂和反酶大小環(huán))原核生物與真核生物的核糖體組成(大小亞基的活性中心是什么、核糖體大小亞基循環(huán)肽鍵的形成翻譯延伸的過程(主要因子、及其作用)(原核)翻譯矯正過程機制蛋白合成過程中能量消耗(起始(原核真核)、延伸(原核))第十五章密碼子的簡并性反密碼子的擺動性密碼子的3個規(guī)律終止密碼子有哪些同義錯義無義突變的意思、遵循的規(guī)律第十六章原核生物調(diào)控原則(3)調(diào)控蛋白的類型(2正負)乳糖操縱子生理作用、組成、調(diào)控機制色氨酸調(diào)控子生理作用、組成、調(diào)控機制λ噬菌體裂解和融原調(diào)控轉(zhuǎn)換機制第十七章名詞解釋:順式作用原件反式作用因子激活蛋白DNA結合結構域4類型兩個實驗(酵母雙雜交、)過程、作用、概念、意義組蛋白的化學修飾有哪些,有哪些生理功能(影響核小體結構、損傷時子母鏈、基因表達調(diào)控)第十八章名詞解釋:DNA干擾技術SiRNA第十九章微陣列技術發(fā)育調(diào)控的三種策略(mRNA定位、相互作用、)5個例子酵母交配型轉(zhuǎn)換及機制如何調(diào)控、激活、抑制果蠅胚胎發(fā)育中前后軸背腹軸形成過程中設計的

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