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文檔簡(jiǎn)介
放射自顯影技術(shù)
Autoradiography鼠腦35S-NMDAR1反義mRNA自顯影
鼠腎125I-心鈉素自顯影一、慨念利用感光材料記錄和測(cè)量放射性示蹤劑的位置與數(shù)量的方法二、放射自顯影術(shù)的特點(diǎn)靈敏度高定位準(zhǔn)確分辯率高操作簡(jiǎn)便結(jié)果能準(zhǔn)確顯示形態(tài)與功能的關(guān)系三、放射自顯影術(shù)的必備材料感光材料示蹤劑顯影劑與定影劑感光材料結(jié)構(gòu):銀鹽+明膠銀鹽:對(duì)各種射線敏感明膠:防止銀鹽顆粒聚集、銀鹽敏化劑種類(lèi):液體核乳膠、氚片、X線片、電影正片或幻燈片保存:避光、防潮、防熱、防放射、低溫常用核乳膠中國(guó)原子能科學(xué)研究院物理所生產(chǎn)的核乳膠乳膠型號(hào)銀晶直徑μm
適用范圍核-20.17α粒子、11Mev以下的質(zhì)子核-40.24所有帶電粒子HW-30.10~0.11所有帶電粒子HW-40.14電鏡自顯影
放射性示蹤劑擴(kuò)散性示蹤劑:示蹤劑進(jìn)入機(jī)體后與某些成分結(jié)合,在標(biāo)本制備過(guò)程中遇水或有機(jī)溶劑會(huì)流失、擴(kuò)散移位。非擴(kuò)散性示蹤劑:不流失擴(kuò)散移位放射自顯影常用核素核素名稱(chēng)射線類(lèi)型半衰期βmax(Mev)核乳膠中射程μ3Hβ-12.35年0.01863(0.5)14Cβ-5692年0.1112(18.2)32Pβ-14.26天1.717500(1049)35Sβ-87.44天0.167137(21)45Caβ-163天0.25252(58.3)59Feβ-44.53天0.46586(78.5)89Srβ-50.55天1.46----(768)125IEC60.14天0.02710(---)131Iβ-、γ8.04天0.606861(178)各種射線在乳膠中的徑跡放射自顯影潛影的形成示蹤劑引入:體內(nèi)注入離體培養(yǎng)標(biāo)本制備:宏觀(20um)自顯影光鏡自顯影(5um)電鏡(50nm)自顯影四、放射自顯影的基本方法自顯影制備:接觸法裱帖法接觸-裱帖法液體乳膠法揭膜乳膠法融裱法曝射:曝光量-示蹤劑量曝光時(shí)間顯像處理:顯影、定影、水洗、干燥、染色、封固五、放射自顯影分類(lèi)
宏觀自顯影、光鏡自顯影、電鏡自顯影
三種自顯影的比較宏觀自顯影光鏡自顯影電鏡自顯影標(biāo)本整體切片6μ組織切片50nm超薄切片感光材料X片、核乳膠干板液體核乳膠單層核乳膠制作方法接觸法浸膜法、濕貼法接觸法(銅網(wǎng)法)分辨力低高極高優(yōu)點(diǎn)宏觀圖像、大體分布細(xì)胞水平定位超微結(jié)構(gòu)分布光鏡放射自顯影浸膜法的主要實(shí)驗(yàn)步驟.上半部為標(biāo)準(zhǔn)浸膜法,下半部為涂布法六、放射自顯影的影響因素自顯影的分辨率自顯影的效率曝光(射)條件自顯影的本底
放射自顯影的分辨率組織樣品中兩點(diǎn)放射源之間在乳膠層中產(chǎn)生各自放射自顯影像的最小距離。放射自顯影的分辨率的影響因素銀粒大小乳膠厚度標(biāo)本厚度標(biāo)本與乳膠間的距離射線類(lèi)型及能量顯影時(shí)間
放射自顯影的效率放射自顯影曝射期間乳膠中的顯影顆粒數(shù)與標(biāo)本內(nèi)放射性核素的衰變數(shù)之比影響因素:乳膠敏感度、乳膠厚度、射線能量、標(biāo)本厚度、曝光時(shí)間
放射自顯影的曝光條件低溫干燥無(wú)氧時(shí)間
放射自顯影的本底標(biāo)本以外放射源引起的銀粒(影象)顯影暗室紅燈周?chē)派湫詼囟葔毫皬埩θ槟z有效期化學(xué)物質(zhì)七、放射自顯影的應(yīng)用藥理學(xué)中的應(yīng)用藥物吸收、分布、代謝、排泄細(xì)胞與亞細(xì)胞水平的劑量分布受體放射自顯影技術(shù)神經(jīng)科學(xué)中的應(yīng)用順行性放射自顯影神經(jīng)解剖示蹤術(shù)2-DG自顯影術(shù)細(xì)胞生物學(xué)中的應(yīng)用細(xì)胞動(dòng)力學(xué)參數(shù)、干細(xì)胞示蹤研究宏觀自顯影腦垂體孕鼠靜脈注射58Co-VitB124hr.整體切片第四腦室肝臟胎鼠脂肪腎上腺鼠腦冰凍切片,3H-AMP
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