消毒與滅菌的效果監(jiān)測(cè)

消毒與滅菌的效果監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)科邵春紅——《醫(yī)療機(jī)構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范》解讀當(dāng)前第1頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)醫(yī)療機(jī)構(gòu)消毒技術(shù)規(guī)范1.消毒與滅菌的基本原則；2.清洗與清潔，消毒與滅菌方法；3.清潔、消毒與滅菌的效果監(jiān)測(cè)。當(dāng)前第2頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)院感相關(guān)標(biāo)本壓力蒸汽滅菌當(dāng)前第3頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)空氣樣本的采集采樣要求提出選擇室內(nèi)消毒后或醫(yī)療活動(dòng)之間進(jìn)行空氣標(biāo)本的采樣，或懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時(shí)采樣，使用普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板采樣。（注意：采樣前，關(guān)閉門(mén)、窗，在無(wú)人走動(dòng)的情況下，靜止10min后采樣。）采樣高度（沉降法）平板置距地面垂直高度0.8m～1.5m處。當(dāng)前第4頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)空氣樣本的采集布點(diǎn)方法室內(nèi)面積≥30㎡，設(shè)一條對(duì)角線(xiàn)上取3點(diǎn)采樣，即中心一點(diǎn)，兩端各距離墻1m處各取一點(diǎn)；室內(nèi)面積＞30㎡，設(shè)東、南、西、北、中5點(diǎn)采樣，其中東、南、西、北點(diǎn)距離墻1m。采樣方法將直徑9cm普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板放置各采樣點(diǎn)，將平皿蓋打開(kāi)，扣放于平皿旁，暴露5min后蓋上平皿蓋及時(shí)送檢。當(dāng)前第5頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)空氣樣本的檢測(cè)與報(bào)告檢測(cè)培養(yǎng)將送檢平皿置36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)，若懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時(shí)，進(jìn)行目標(biāo)微生物的鑒定。結(jié)果處理計(jì)算所有平板菌落數(shù)，按公式換算結(jié)果。如臨床科室要求培養(yǎng)致病菌，則挑取可疑菌落進(jìn)行鑒定。計(jì)算公式：每個(gè)房間所有平板菌落總數(shù)/采樣點(diǎn)/（皿．暴露時(shí)間）報(bào)告:沉降法按平均每皿的菌落數(shù)報(bào)告：cfu/（皿．暴露時(shí)間）例如：2cfu/(5min·直徑9cm平皿)。當(dāng)前第6頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)空氣樣本的結(jié)果判定

１.潔凈手術(shù)部（室）和其他潔凈場(chǎng)所，空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)要求應(yīng)遵循ＧＢ50333．當(dāng)前第7頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)２.非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)≤４cfu／（１５ｍｉｎ·直徑９ｃｍ平皿）。３.兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應(yīng)中心、血液透析中心（室）、急診室、化驗(yàn)室、各類(lèi)普通病室、感染疾病科門(mén)診及其病房空氣中的細(xì)菌菌落總數(shù)≤

4cfu/(5min·直徑9cm平皿)。當(dāng)前第8頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)物體表面標(biāo)本的采集采樣時(shí)間在消毒處理后或懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時(shí)進(jìn)行采樣。當(dāng)前第9頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)物體表面標(biāo)本的采集采樣方法用5cmx5cm滅菌規(guī)格板放在被檢物體表面，用浸有無(wú)菌生理鹽水的棉拭子1支，在規(guī)格板內(nèi)橫豎往返各涂抹5次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)棉拭子，連續(xù)采樣4個(gè)規(guī)格板面積，被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2。剪去手接觸部分，將拭子放入裝有10ml物表采樣液試管中送檢。門(mén)把手等小型物體則利用棉拭子直接涂抹物體表面采樣。采樣物體表面有消毒劑殘留時(shí)，采樣液應(yīng)含相應(yīng)中和劑。當(dāng)前第10頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)物體表面標(biāo)本的檢測(cè)與報(bào)告檢測(cè)方法：充分震蕩采樣管后，取洗脫液1.0ml接種平皿，將冷至40℃-45℃的熔化營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基每皿傾注15ml-20ml，37℃恒溫箱培養(yǎng)48h,計(jì)數(shù)菌落數(shù)，懷疑與醫(yī)院感染暴發(fā)有關(guān)時(shí)，進(jìn)行目標(biāo)微生物的檢測(cè)。計(jì)算公式：物體表面細(xì)菌菌落數(shù)總數(shù)（cfu/cm2）=平板上菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)/采樣面積。報(bào)告方式：菌落數(shù)cfu/cm2

小型物體表面的結(jié)果用cfu/件表示當(dāng)前第11頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)物體表面標(biāo)本的結(jié)果判定1.潔凈手術(shù)部、其他潔凈場(chǎng)所，非潔凈手術(shù)部（室）、非潔凈骨髓移植病房、產(chǎn)房、導(dǎo)管室、新生兒室、器官移植病房、燒傷病房、重癥監(jiān)護(hù)病房、血液病病區(qū)等；物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)≤5cfu/cm2。2.兒科病房、母嬰同室、婦產(chǎn)科檢查室、人流室、治療室、注射室、換藥室、輸血科、消毒供應(yīng)室、血液透析中心（室）、急診室、化驗(yàn)室、各類(lèi)普通病室、感染疾病科門(mén)診及其病房等，物體表面細(xì)菌菌落總數(shù)≥10cfu/cm2當(dāng)前第12頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)標(biāo)準(zhǔn)指示菌株：嗜熱脂肪桿菌芽孢采樣方法：將指示劑放置于標(biāo)準(zhǔn)試驗(yàn)包中，置于壓力蒸汽滅菌器內(nèi)最難滅菌的位置處，執(zhí)行正常滅菌過(guò)程，完畢后將指示劑送檢。當(dāng)前第13頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)壓力蒸汽滅菌效果的監(jiān)測(cè)檢測(cè)方法：將指示菌片捏碎，放入56℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h，觀察結(jié)果。如指示菌片顏色為紫色，說(shuō)明無(wú)嗜熱脂肪桿菌生長(zhǎng)；如指示劑顏色為黃色則說(shuō)明有嗜熱脂肪桿菌生長(zhǎng)。報(bào)告方式：“檢出/未檢出嗜熱脂肪桿菌”。結(jié)果判定：陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陰性，判定為滅菌合格。陽(yáng)性對(duì)照組培養(yǎng)陽(yáng)性，試驗(yàn)組培養(yǎng)陽(yáng)性，則滅菌不合格；同時(shí)應(yīng)進(jìn)一步鑒定試驗(yàn)組陽(yáng)性的細(xì)菌是否為指示菌或是污染所致。當(dāng)前第14頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)皮膚表面標(biāo)本的采集采樣時(shí)間按照產(chǎn)品使用說(shuō)明規(guī)定的作用時(shí)間，達(dá)到消毒效果后及時(shí)采樣。采樣方法同物體表面標(biāo)本，不規(guī)則的皮膚可用棉拭子直接涂擦采樣。當(dāng)前第15頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)醫(yī)護(hù)人員手表面標(biāo)本的采樣采樣時(shí)間在接觸病人或從事醫(yī)療活動(dòng)前進(jìn)行采樣。當(dāng)前第16頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)醫(yī)護(hù)人員手表面標(biāo)本的采樣采樣面積及方法被檢人五指并攏，用浸有無(wú)菌生理鹽水的無(wú)菌拭子在雙手指曲面從指根到指端來(lái)回涂擦各兩次，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣棉拭子（一只手涂抹面積30cm2），剪去手接觸部位，將拭子放入裝有10ml物表采樣液的試管中送檢。當(dāng)前第17頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)皮膚表面標(biāo)本檢測(cè)方法計(jì)算公式同物體表面報(bào)告方式計(jì)算公式：物體表面細(xì)菌菌落數(shù)總數(shù)（cfu/cm2）=平板上菌落數(shù)×采樣液稀釋倍數(shù)/采樣面積。

當(dāng)前第18頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)皮膚表面標(biāo)本的結(jié)果判斷結(jié)果判定：皮膚消毒效果的判定標(biāo)準(zhǔn)遵循WS/T313中外科手消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。a)衛(wèi)生手消毒，監(jiān)測(cè)的細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤10cfu/cm2。b)外科手消毒，監(jiān)測(cè)的細(xì)菌菌落總數(shù)應(yīng)≤5cfu/cm2。當(dāng)前第19頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)消毒液的送檢采樣要求采集使用中的消毒劑。采集方法用無(wú)菌注射器抽取1ml被檢樣液，加入9ml消毒中和液，混勻。當(dāng)前第20頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)消毒液的培養(yǎng)與報(bào)告培養(yǎng)方法：同物體表面標(biāo)本計(jì)算公式：消毒液染菌量（CFU/mL）=平均每皿菌落數(shù)×10×稀釋倍數(shù)報(bào)告方式：菌落數(shù)CFU/mL。結(jié)果判斷：

使用中滅菌用消毒液：無(wú)菌生長(zhǎng)；

使用中皮膚黏膜消毒液染菌量≤10CFU/mL；

其他使用中消毒液染菌量≤

100CFU/mL。當(dāng)前第21頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)清潔用品的采樣采樣時(shí)間

消毒后、使用前進(jìn)行采樣。采樣方法

布巾、地巾等物品可用無(wú)菌的方法剪取1cm×3cm，直接投入10ml含相應(yīng)中和劑的無(wú)菌生理鹽水中，及時(shí)送檢。當(dāng)前第22頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)清潔用品的報(bào)告與結(jié)果判斷檢測(cè)方法：將采樣管在混勻器上振蕩20s或用力振打80次，取采樣液檢測(cè)致病菌。報(bào)告方式：檢出/未檢出細(xì)菌或真菌，報(bào)告為“檢出××菌”。結(jié)果判定：

未檢出致病菌為消毒合格。當(dāng)前第23頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)其他標(biāo)本內(nèi)鏡樣本的采樣用10ml中和液反復(fù)沖洗鏡后取回收液于試管中送檢。透析液的采樣用滅菌試管無(wú)菌操作采集透析液5ml送檢。當(dāng)前第24頁(yè)\共有27頁(yè)\編于星期四\8點(diǎn)內(nèi)鏡標(biāo)本的檢測(cè)與報(bào)告培養(yǎng)方法：同物體表面標(biāo)本，若臨床要求培養(yǎng)致病菌，則收到標(biāo)本后，取0.1ml均勻接種于普通瓊脂培養(yǎng)基表面，放入35℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)48h