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實(shí)驗(yàn)一光學(xué)顯微鏡技術(shù)第一頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二實(shí)驗(yàn)報(bào)告六、作業(yè)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?shí)驗(yàn)原理三、實(shí)驗(yàn)材料五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析四、實(shí)驗(yàn)步驟第二頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二實(shí)驗(yàn)一光學(xué)顯微鏡技術(shù)第三頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私馄胀ü鈱W(xué)顯微鏡、暗視野顯微鏡、相差顯微鏡和微分干涉顯微鏡的構(gòu)造、工作原理和使用方法。學(xué)習(xí)測(cè)微尺的用法并測(cè)量細(xì)胞的大小。第四頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二顯微鏡,目鏡測(cè)微尺(eyepiecesorocularmicrometer),鏡臺(tái)測(cè)微尺(stagemicrometer),載玻片,蓋玻片等。實(shí)驗(yàn)用品第五頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二夾竹桃葉片橫切片實(shí)驗(yàn)材料小腸切片雞紅細(xì)胞洋蔥
采雞血(阿氏液:血2:1)(阿氏液紅細(xì)胞保存液:葡萄糖2.05g
檸檬酸鈉0.88g
氯化鈉0.42g
加蒸餾水至100ml,過(guò)濾分裝,滅菌后在0-4℃冰箱中可保存兩周。)第六頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二普通光學(xué)顯微鏡光鏡主要由三部分組成:(1)光學(xué)放大系統(tǒng):目鏡與物鏡(2)照明系統(tǒng)(3)機(jī)械和支架系統(tǒng)第七頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第八頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二調(diào)節(jié)光瞳間距,使左、右兩個(gè)視場(chǎng)像合二為一;調(diào)節(jié)屈光度以適應(yīng)觀察者的視力,調(diào)節(jié)方法隨鏡的不同而不同.第九頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二物鏡標(biāo)示
第十頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二將孔徑光闌縮至物鏡數(shù)值孔徑的60%~80%或合適的范圍。注意:當(dāng)物鏡或標(biāo)本更換時(shí),需重新調(diào)節(jié)視場(chǎng)光闌和孔徑光闌。第十一頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二注意事項(xiàng)移動(dòng)顯微鏡,一手托鏡座,一手拿鏡臂!更換物鏡時(shí),轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換盤(pán)!使用油鏡后,用鏡頭液清洗鏡頭。只有100倍物鏡為油鏡,在低倍鏡下調(diào)焦清晰后,再轉(zhuǎn)到油鏡!固定切片不要使用油鏡!第十二頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二暗視野顯微鏡原理:利用暗視野聚光器使入射光束從聚光器斜向照明樣品,使之發(fā)出反射和散射光。由樣品發(fā)出的散射光和反射光形成了明亮的物體影象。背景是黑暗的。第十三頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第十四頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二相差顯微鏡原理:利用相差裝置將透過(guò)細(xì)胞標(biāo)本不同區(qū)域(密度不同)的光的光程差變成振幅差,從而使細(xì)胞內(nèi)的各種結(jié)構(gòu)之間呈現(xiàn)出清晰可見(jiàn)的明暗差異的顯微鏡。第十五頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二在構(gòu)造上,相差顯微鏡有不同于普通光學(xué)顯微鏡兩個(gè)特殊之處:
1.環(huán)形光闌(annulardiaphragm)位于光源與聚光器之間,作用是使透過(guò)聚光器的光線形成空心光錐,焦聚到標(biāo)本上。2.相位板(annularphaseplate)在物鏡中加了涂有氟化鎂的相位板,可將直射光或衍射光的相位推遲1/4λ。分為兩種:A+相板:將直射光推遲1/4λ,兩組光波合軸后光波相加,振幅加大,標(biāo)本結(jié)構(gòu)比周?chē)橘|(zhì)更加變亮,形成亮反差(或稱(chēng)負(fù)反差)。B+相板:將衍射光推遲1/4λ,兩組光線合軸后光波相減,振幅變小,形成暗反差(或稱(chēng)正反差),結(jié)構(gòu)比周?chē)橘|(zhì)更加變暗。第十六頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第十七頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二微分干涉顯微鏡DIC利用的是偏振光,有四個(gè)特殊的光學(xué)組件:偏振器(polarizer)、DIC棱鏡、DIC滑行器和檢偏器(analyzer)。偏振器直接裝在聚光系統(tǒng)的前面,使光線發(fā)生線性偏振。優(yōu)點(diǎn)是能顯示結(jié)構(gòu)的三維立體投影影像。第十八頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第十九頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二
四種不同顯微鏡顯微鏡所拍攝的體外培養(yǎng)成纖維細(xì)胞圖像比較(A)普通明視場(chǎng)顯微鏡(B)相差顯微鏡(C)微分干涉顯微鏡(D)暗場(chǎng)顯微鏡第二十頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二實(shí)驗(yàn)內(nèi)容和方法細(xì)胞形態(tài)的觀察細(xì)胞大小的測(cè)量第二十一頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二不同形狀的動(dòng)植物細(xì)胞第二十二頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二一、細(xì)胞觀察動(dòng)物細(xì)胞的觀察
植物細(xì)胞的觀察
小腸切片:細(xì)胞的形狀,細(xì)胞核,核仁,細(xì)胞質(zhì)
雞血紅細(xì)胞:紅細(xì)胞的特點(diǎn)夾竹桃葉橫切片:表皮細(xì)胞和葉肉細(xì)胞洋蔥表皮細(xì)胞:內(nèi)表皮細(xì)胞第二十三頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第二十四頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第二十五頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第二十六頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第二十七頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二1、紅細(xì)胞2、中性粒細(xì)胞3、嗜酸性粒細(xì)胞4、嗜堿性粒細(xì)胞5、單核細(xì)胞6、淋巴細(xì)胞7、異嗜性粒細(xì)胞8、凝血細(xì)胞第二十八頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第二十九頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第三十頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二Onionepidermalcells第三十一頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二二、細(xì)胞測(cè)量如何使用測(cè)微尺?如何測(cè)量細(xì)胞的大小?如何計(jì)算細(xì)胞的大小?第三十二頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二如何使用測(cè)微尺?目鏡測(cè)微尺(Eyepiecemicrometer)鏡臺(tái)測(cè)微尺(Stagemicrometer)第三十三頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二目鏡測(cè)微尺鏡臺(tái)測(cè)微尺第三十四頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二
鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)目鏡測(cè)微尺每格的微米數(shù)=------------------------------10
目鏡測(cè)微尺的格數(shù)
第三十五頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二如何測(cè)量細(xì)胞的大小?測(cè)量一個(gè)洋蔥表皮細(xì)胞的大小第三十六頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二如何計(jì)算細(xì)胞的體積?橢球形V=4πab2/3圓球形V=4/3πr3圓柱形V=πr2h*a:長(zhǎng)半徑;b:短半徑;r:半徑;h:高第三十七頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二作業(yè)物鏡目鏡測(cè)微尺的格數(shù)鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)目鏡測(cè)微尺每格的微米數(shù)4X10X40X計(jì)算不同倍數(shù)物鏡下,一格目鏡測(cè)微尺所代表的長(zhǎng)度。第三十八頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二暗視野、相差、微分干涉顯微鏡與普通光學(xué)顯微鏡相比在結(jié)構(gòu)上有何特點(diǎn)及用途。繪洋蔥表皮細(xì)胞的模式圖,計(jì)算細(xì)胞的面積,注明物鏡的倍數(shù);說(shuō)明動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞的異同點(diǎn)
。12345平均長(zhǎng)寬第三十九頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二鏡油瓶的使用方法(1)(2)(3)(4)第四十頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二(5)(6)(7)鏡油瓶的使用方法第四十一頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第四十二頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第四十三頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第四十四頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二第四十五頁(yè),共四十六頁(yè),編輯于2023年,星期二細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)繪圖方法與要求
二、用鉛筆繪圖,線條要明確清晰,圖的深淺明暗一律以點(diǎn)的疏密來(lái)表示,點(diǎn)要圓而一致,不
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