消毒滅菌和病原微生物實驗室生物安全

消毒滅菌常用術(shù)語消毒(disinfection)：殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物的方法。滅菌(sterilization)：殺滅物體上所有微生物的方法。防腐(antisepsis)：防止或抑制皮膚表面細(xì)菌生長繁殖的方法。清潔(cleaning)：是指通過除去塵埃和一切污穢以減少微生物數(shù)量的過程。

無菌(asepsis)和無菌操作：無菌是無活菌的意思，多是滅菌的結(jié)果。防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其它物品的操作技術(shù)，稱為無菌操作。

第一節(jié)消毒滅菌的方法熱力滅菌法輻射殺菌法濾過除菌法干燥與低溫抑菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法物理消毒滅菌法化學(xué)消毒滅菌法高效消毒劑中效消毒劑低效消毒劑（一）熱力滅菌法1.干熱滅菌法2.濕熱滅菌法在同一溫度下，濕熱效力比干熱大。

原因：（1）濕熱中細(xì)菌菌體蛋白較易凝固；（2）濕熱的穿透力比干熱大；（3）濕熱的蒸汽有潛熱存在。1.干熱滅菌法焚燒燒灼干烤(160℃2h或171℃1h或121℃16h)

紅外線干烤箱燒灼滅菌法2.濕熱滅菌法煮沸法

巴氏消毒法(牛乳、酒類）

低溫維持巴氏消毒法61.1～62.8℃30min

高溫瞬時巴氏消毒法71.7℃15s

超高溫巴氏消毒法132℃1～2s

流動蒸汽消毒法

間歇蒸汽滅菌法（反復(fù)多次流動蒸汽）

100℃維持30min→37℃溫箱過夜→100℃維持30min→37℃溫箱過夜→

100℃維持30min→37℃溫箱過夜→100℃維持30min。

高壓蒸汽滅菌法

在103.4kPa蒸氣壓下，溫度達(dá)到121.3℃，維持15~20min高壓蒸汽滅菌器用于普通培養(yǎng)基、生理鹽水、耐熱藥品、手術(shù)敷料等。（二）輻射滅菌法非電離輻射:紫外線電離輻射:、、γ、χ射線以及高能質(zhì)子、中子等紫外線(ultravioletray,UV)

作用于DNA，使相鄰的胸腺嘧啶共價結(jié)合形成二聚體，干擾DNA復(fù)制?？諝庀?、表面消毒。UV的殺菌機(jī)制電離輻射射線:電離輻射強(qiáng)，穿透力差（缺乏穿透力，不實用）射線:電離輻射強(qiáng)，穿透力強(qiáng)射線:電離輻射弱，穿透力強(qiáng)x射線：殺菌力不如紫外線，穿透力強(qiáng)殺菌機(jī)制：射線使水電離為H+和OH-，這些游離基是強(qiáng)烈的還原劑和氧化劑，可直接作用于細(xì)菌本身。用途：忌熱物品的滅菌消毒、食品保藏和育種等方面。

微波(microwave)----熱效應(yīng)滅菌。（三）濾過除菌法濾菌器(filter)----液體除菌薄膜濾菌器玻璃濾菌器石棉濾菌器素陶瓷濾菌器薄膜濾菌器微孔濾膜上的細(xì)菌生物潔凈技術(shù)----空氣除菌

初級分子空氣過濾器塑料泡沫海綿中級分子空氣過濾器無紡布高級分子空氣過濾器超細(xì)玻璃濾紙層流室無菌手術(shù)室（四）干燥與低溫抑菌法

干燥：細(xì)菌在干燥的環(huán)境中失去大量水分，新陳代謝便會發(fā)生障礙，甚至引起菌體蛋白質(zhì)變性和由于鹽類濃度的增高而逐漸導(dǎo)致死亡。

低溫：低溫下，細(xì)菌代謝活動降低到最低水平，生長繁殖停止，但仍可長時間保持活力。

常用作保存細(xì)菌菌種，冷凍真空干燥法可避免解凍時對細(xì)菌的損傷，是目前保存菌種的最好方法。菌種保存管（五）化學(xué)消毒滅菌法殺菌機(jī)制促進(jìn)菌體蛋白質(zhì)變性或凝固。干擾細(xì)菌的酶系統(tǒng)和代謝。損傷細(xì)菌的細(xì)胞膜，使細(xì)胞膜通透性增加，胞外液內(nèi)滲，細(xì)菌裂解。化學(xué)消毒劑的種類（一）高效消毒劑

1.含氯消毒劑（次氯酸鈉、漂白粉）2.過氧化物消毒劑（過氧化氫、過氧乙酸）

3.醛類消毒劑（戊二醛、甲醛）4.環(huán)氧乙烷（二）中效消毒劑

1.含碘消毒劑（碘酊、碘伏）2.醇類消毒劑（乙醇、異丙醇）（三）低效消毒劑

1.季銨鹽類消毒劑（苯扎溴銨）2.氯已定3.高錳酸鉀第二節(jié)消毒滅菌的運用

醫(yī)療器械物品的消毒滅菌室內(nèi)空氣消毒滅菌手和皮膚的消毒

黏膜的消毒

病人排泄物與分泌物的消毒滅菌

病人污染物品的消毒

飲水的消毒

環(huán)境的消毒第三節(jié)影響消毒滅菌效果的因素

微生物的種類

微生物的物理狀態(tài)

微生物的數(shù)量

消毒劑性質(zhì)、濃度與作用時間

溫度

酸堿度

有機(jī)物第四節(jié)病原微生物實驗室生物安全生物安全（biosafety）是生物技術(shù)安全（safetyofbiotechnology）的簡稱。生物安全是指對由現(xiàn)代生物技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用可能產(chǎn)生的負(fù)面影響所采取的有效預(yù)防和控制措施。目的是保護(hù)生物多樣性、生態(tài)環(huán)境和人體健康。一、病原微生物的分類第一類是指能夠引起人類或者動物非常嚴(yán)重疾病的微生物，以及我國尚未發(fā)現(xiàn)或者已經(jīng)宣布消滅的微生物。第二類是指能夠引起人類或者動物嚴(yán)重疾病，比較容易直接或者間接在人與人、動物與人、動物與動物間傳播的微生物。第三類是指能夠引起人或動物疾病，但一般情況下對人、動物或環(huán)境不構(gòu)成嚴(yán)重危害，傳播風(fēng)險有限，實驗室感染后很少引起嚴(yán)重疾病，并且具備有效治療和預(yù)防措施的微生物。第四類是指在通常情況下不會引起人或動物疾病的微生物。如小鼠白血病病毒等。

第一類、第二類統(tǒng)稱為高致病性病原微生物。二、病原微生物實驗室的分級級別處理對象一級對人體、動植物或環(huán)境危害較低，不具有對健康成人、動植物致病的致病因子。二級對人體、動植物或環(huán)境具有中等危害或具有潛在危險的致病因子，對健康成人、動植物和環(huán)境不會造成嚴(yán)重危害，具有有效的預(yù)防和治療措施。三級對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，主要通過氣溶膠使人類傳染上嚴(yán)重的甚至是致命的疾病，或?qū)又参锖铜h(huán)境具有高度危害的致病因子。通常有預(yù)防治療措施。四級對人體、動植物或環(huán)境具有高度危險性，通過氣溶膠途徑傳播或傳播途徑不明或未知的危險的致病因子。沒有預(yù)防治療措施