動物實驗基本操作技術(shù)

動物實驗基本操作技術(shù)第一頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日實驗動物的捉拿和固定方法實驗動物的給藥方法實驗動物的麻醉方法實驗動物的編號方法實驗動物的去毛方法實驗動物的取血方法實驗動物的處死方法第二頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日一、實驗動物的捉拿和固定方法

1.小鼠捉拿時先用右手將鼠尾抓住提起，放在較粗糙的臺面或鼠籠上，在其向前爬行時，右手向后拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠的兩耳和頭頸部皮膚，將其固定于左手手心中，拉直四肢并用左手無名指壓緊尾和后肢，右手即可作注射或其他實驗操作。取尾血及尾靜脈注射時，可將小鼠固定在金屬或木制的固定器上。第三頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日第四頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日2.家兔一手抓住兔頸部的被毛與皮膚，另一手托其臀部或腹部，使其軀干的重量大部分集中在手上。第五頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日第六頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日兔手術(shù)固定臺第七頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日第八頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日二、實驗動物的給藥方法1.注射法給藥：家兔耳緣靜脈注射大、小鼠尾靜脈注射2.攝入法給藥：家兔、大鼠、小鼠灌胃法3.涂布法給藥第九頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日攝入法給藥自動口服給藥強制灌胃給藥：大鼠小鼠家兔經(jīng)直腸給藥第十頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日小鼠、大鼠灌胃法器械：灌胃器由注射器和特殊的灌胃針構(gòu)成。小鼠灌胃針長4～5cm直徑1mm大鼠灌胃針長6～8cm直徑1.2mm第十一頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日小鼠灌胃法按正確方法用左手抓取和固定動物。使腹部朝上，頸部拉直。固定后，右手持持接灌胃針的注射器吸取藥液（或事先將藥液吸好），將針頭從口角插入口腔內(nèi)，然后用灌胃針頭壓其頭部，使口腔與食管成一直線，再將灌胃針頭沿上腭壁輕輕進入，轉(zhuǎn)動針頭刺激動物吞咽，然后沿咽后壁慢慢插入食道。若動物掙扎厲害，應退出后灌胃針，待動物安靜后重新插入。切不可強行插入，以免損傷食道或誤入氣管導致動物死亡。當感覺有落空感時表明灌胃針可能進入胃內(nèi)，向外抽動注射器活塞，感覺有負壓說明灌胃針未插入氣管，此時可將藥液灌入。第十二頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日成年小鼠插管深度一般是：3cm小鼠灌胃量：0.1～0.25ml/10g體重第十三頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日大鼠灌胃法成年大鼠插管深度一般是：5cm大鼠灌胃量：1～2ml/100g體重第十四頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日兔灌胃法器械：灌胃管（特制胃管或?qū)蚬埽╅_口器（木質(zhì)紡錘狀）第十五頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日兔灌胃法操作方法：1.固定：動物取直立或平臥體位，固定動物頭部。直立位需2人合作，一人取坐位，將兔的軀體和下肢夾在兩腿之間，左手緊握雙耳固定頭部，右手抓住前肢，將兔固定于豎立體位。另一人將開口器橫放于兔口中，讓動物咬住開口器，即可開始插入灌胃管。第十六頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日第十七頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日兔灌胃法操作方法：2.插管：將灌胃管由開口器的中央孔插入，沿上顎壁推進約15cm。

插管過程中可將灌胃管的另一端放于一杯清水中，若連續(xù)有氣泡，說明插入呼吸道，應立即拔出灌胃管，重新操作；若無氣泡，說明沒有插入氣管，即可開始注藥。第十八頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日沿上顎壁推進約15cm檢查插入部位第十九頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日兔灌胃法操作方法：3.給藥：灌注藥后可用少量清水將灌胃管里的藥全部沖入胃內(nèi)，以保證灌入藥的劑量準確。灌胃完畢后，先退出胃管，后退出開口器。第二十頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日兔灌胃法關(guān)鍵詞：固定，插入（沿上顎壁），檢查第二十一頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日家兔耳緣靜脈注射將動物固定于實驗臺上，剪去耳緣部位的被毛，用乙醇輕輕擦拭，耳緣靜脈即清晰可見。用左手食指和中指夾住靜脈近心端，拇指和小指夾住耳緣部分，以左手無名指和小指放在耳下作墊，待靜脈充盈后，右手持注射器使針頭盡量由靜脈遠心端刺入，順血管方向平行、向心端刺入約1cm。注射完畢抽出針頭，用棉球壓迫注射部位數(shù)分鐘，以免出血。第二十二頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日三、實驗動物的麻醉方法全身麻醉法：吸入法，注射法局部麻醉法：浸潤麻醉，表面麻醉第二十三頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日（一）全身麻醉法1、吸入法麻醉藥：乙醚氯仿三氟乙烷第二十四頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日2、注射法麻醉藥：巴比妥類藥物氯胺酮烏拉坦水合氯醛（一）全身麻醉法第二十五頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日（二）局部麻醉法

1%鹽酸普魯卡因局部浸潤麻醉

0.02～2％鹽酸可卡因表面麻醉第二十六頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日麻醉藥物應用原則：依據(jù)動物體重計算麻醉藥物的劑量；依據(jù)動物生命體征變化控制給藥速度；掌握寧少勿多、分階段給藥的方式。針對不同的動物，選擇不同的麻醉藥物、實施不同的麻醉方法。第二十七頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日麻醉具體操作：家兔全身麻醉麻醉劑：1.5%戊巴比妥鈉，2ml/kg前1/2快速推入，使動物能順利、快速地渡過興奮期；后1/2速度宜慢，且邊注射邊注意觀察動物的生命體征變化，當確定已達到麻醉效果時，即停止給藥，不必急于將剩余的麻醉藥物全部推入。給藥方法：耳緣靜脈注射第二十八頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日麻醉成功標志角膜反射遲鈍或消失肢體肌肉松弛疼痛反射消失呼吸變深變慢

第二十九頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日機能實驗學常用手術(shù)方法一、常用手術(shù)器械二、常用手術(shù)插管技術(shù)

氣管插管術(shù)頸動脈插管術(shù)頸靜脈插管術(shù)第三十頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日動物實驗常用手術(shù)器械第三十一頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日

粗剪用于蛙類實驗中的剪骨、肌肉和皮膚等粗硬組織以及家兔等實驗動物的剪毛。剪毛時，剪毛剪自然落下逆毛方向一次次將毛剪下即可，加力下壓或一手提起被毛，均易剪破皮膚。剪下的毛應集中放入加有清水的污物盒內(nèi)，避免到處飛揚。第三十二頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日手術(shù)剪用于剪線和剪開、分離組織。有直、彎、尖頭、圓頭、大、小之分，根據(jù)不同用途選用。手術(shù)操作中用于沿組織間隙進行分離和剪斷組織者稱組織剪，一般為彎形，尖端較鈍圓；用于剪斷縫扎線、引流物或敷料等用品者稱剪線剪，為直形。第三十三頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日眼科剪主要用于剪血管或神經(jīng)等柔軟組織，眼科剪也有直頭與彎頭之分，正確的執(zhí)剪姿勢與手術(shù)剪相同，即用拇指與無名指持剪，食指置于手術(shù)剪上方。第三十四頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日手術(shù)刀由刀片和刀柄組成，可分為大、中、小號不同類型。大號——切開皮膚；中號——切割臟器組織；小號——切割特殊部位。安裝：先用持針器（或直型止血鉗）夾住刀片，左手握住刀柄，按刀片上的空隙對準刀柄上的槽隙，順勢推入即可。第三十五頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日手術(shù)刀握持方法第三十六頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日執(zhí)筆式：即以持筆的手法握住刀柄，適用于小范圍內(nèi)的組織切開，隨意性強，可作垂直或水平切割。持弓式：右手中指、無名指按壓在手術(shù)刀柄的外側(cè)緣，拇指放在刀柄內(nèi)側(cè)緣，食指按壓在刀片后1／3處。適用于切開皮膚。第三十七頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日組織鑷組織鑷和眼科鑷。組織鑷—鉗夾組織，分離組織和筋膜。眼科鑷—分離血管。使用手法：以食指、中指放于器械的外側(cè)緣，拇指放于內(nèi)側(cè)緣，集3指的力量實施操作動作，而且適用于左右手的同時操作。第三十八頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日止血鉗止血和分離組織。使用方法：以拇指、中指（或無名指）分別套人止血鉗的套扣內(nèi)，控制止血鉗展開的力度，以食指放在止血鉗的關(guān)節(jié)部位，控制止血鉗的方向和鉗夾組織部位的準確性。切忌左右手分別抓住止血鉗的套扣部位，用兩手的合力進行止血或分離組織。第三十九頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日縫合針有圓針和角針兩種，圓針用于縫合組織結(jié)構(gòu)；角針邊緣鋒利，除具有穿刺功能外，還具有切割的作用；縫合針需配合持針器同時使用。第四十頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日探針包括金屬探針和玻璃分針；用于對精細部位的分離和游離等操作。有時，在實施血管插管技術(shù)時，切開血管壁后往往借助于探針先將切口挑起，然后插入導管。第四十一頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日支架用于蛙類及哺乳類手術(shù)中換能器及刺激電極等的固定與位置調(diào)節(jié)。由底座及支架桿構(gòu)成，支架上附有萬向節(jié)，可在各個方向上調(diào)節(jié)。第四十二頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日哺乳類手術(shù)器械氣管插管

急性動物實驗時插入氣管，以保證呼吸道暢通，一端接氣鼓或呼吸換能器可記錄呼吸運動。分為金屬插管和玻璃插管。第四十三頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日哺乳類手術(shù)器械動脈夾動脈夾分大、中、小三種型號及直、彎兩種，用于夾持動脈，暫時阻斷動脈血流。使用時動脈夾的尖端套有塑料管，以防止夾持動脈時對血管造成損傷。第四十四頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日哺乳類手術(shù)器械動脈插管

用于在急性動物實驗時插入動脈?？捎媒饘?、玻璃以及塑料等不同材料制成，常用細塑料管自行拉制而成。在哺乳類動物實驗中，插管一端插入動脈，另一端接壓力換能器以記錄血壓，插管內(nèi)充滿肝素以防止插管內(nèi)血液凝固，插管腔內(nèi)不可有氣泡，以免影響結(jié)果。第四十五頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日哺乳類手術(shù)器械三通管用于改變實驗中液體流動方向，以便輸液、給藥或描記血壓。可隨意將三個通道中的任何兩個通道口相通，另一個不通；也可使三個通道同時都通或都不通。第四十六頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日哺乳動物手術(shù)器材清單金屬用品玻璃用品消耗品手術(shù)剪1把氣管插管1個紗布眼科剪1把動脈插管1根棉簽血管鉗4把尿道插管1根絲線手術(shù)鑷1把玻璃分針1根動脈夾1個注射器1支（1ml/5ml）手術(shù)刀1把三通管一個第四十七頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日動物實驗常用插管技術(shù)

氣管插管術(shù)頸動脈插管術(shù)頸靜脈插管術(shù)導尿管插管術(shù)第四十八頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日插管技術(shù)的基本步驟1.動物稱重、麻醉、固定。2.插管部位皮膚去毛、備皮。3.皮膚切開。4.皮下組織結(jié)構(gòu)的分離。5.目標器官或組織結(jié)構(gòu)的游離。6.導管的插入或固定。第四十九頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日家兔頸部神經(jīng)和血管的解剖位置第五十頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日第五十一頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日迷走神經(jīng)交感神經(jīng)第五十二頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日減壓神經(jīng)第五十三頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日氣管插管術(shù)第五十四頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日1、麻醉固定、頸部皮膚去毛、備皮2、在頸前區(qū)正中作一約5-7cm的切口第五十五頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日3、鈍性分離皮下組織、肌肉，游離出氣管，穿線備用。第五十六頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日4、在甲狀軟骨下方第3-4個環(huán)狀軟骨上作一倒“T”形切口，插入“Y”形氣管插管，并用線固定好。第五十七頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日頸動脈插管技術(shù)1、頸正中作一約5-7cm的切口2、鈍性分離皮下筋膜第五十八頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日3、分離一側(cè)頸總動脈，穿雙線備用。第五十九頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日4、結(jié)扎遠心端，在距結(jié)扎線約2-3cm處用動脈夾夾閉頸總動脈近心端。第六十頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日5、在靠近結(jié)扎線處用眼科剪剪一“v”形切口，切口大小約為動脈口徑的1/3~1/2。第六十一頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日6、將壓力換能器與動脈插管連接好并充滿肝素，向近心端插入動脈插管，用線結(jié)扎牢固。第六十二頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日三通的使用：第六十三頁，共六十七頁，編輯于2023年，星期日進入BL－410/420系統(tǒng)。選擇“實驗項目”→選擇“循環(huán)實驗”→“兔動脈血壓調(diào)節(jié)”實驗模塊；7、打開換能器開關(guān)，觀察并記錄動脈血壓?；蜻x擇“輸入信號”→選擇“通道”→“壓力”