食品中農(nóng)殘的檢測(cè)技術(shù)

銀川能源學(xué)院論文(設(shè)計(jì))銀川能源學(xué)院論文(設(shè)計(jì))題目食品中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)技術(shù)指導(dǎo)老師專業(yè)班級(jí)精細(xì)化工（1401）班姓名周晶學(xué)號(hào)12201500662016年5月2日 摘要：最初農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)僅限于化學(xué)法、比色法和生物測(cè)定法，檢測(cè)方法缺乏專一性，靈敏度也不高。20世紀(jì)60年代氣相色譜應(yīng)用于農(nóng)藥和藥物殘留分析，大大提高了農(nóng)藥和藥物殘留量的檢測(cè)水平。20世紀(jì)80年代以來，高效液相色譜法開始廣泛應(yīng)用于對(duì)熱不穩(wěn)定和離子型農(nóng)藥及其代謝物的分析。色譜法雖然定量準(zhǔn)確、靈敏度高，但所需設(shè)備昂貴，需要專業(yè)人員操作，且分析時(shí)間長(zhǎng)不利于現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)。本文就當(dāng)前農(nóng)藥和藥物殘留快速檢測(cè)分析技術(shù)研究進(jìn)展做一綜述。關(guān)鍵詞:農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)目錄引言 31.農(nóng)藥的殘留 31.1危害 31.2主要成份 32.農(nóng)藥檢測(cè)的必要性 42.1農(nóng)藥檢測(cè) 43.檢測(cè)方法與發(fā)展 43.1氣象色譜-質(zhì)譜 43.2快速檢測(cè)技術(shù) 4農(nóng)藥殘留速測(cè)儀 54.1概述 54.2原理 55.測(cè)試儀的使用方法 65.1使用方法 66.農(nóng)藥殘留導(dǎo)致的急性中毒事件 76.1農(nóng)藥殘留的危害及事件 7結(jié)論 7參考文獻(xiàn) 8引言農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展使農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)越來越依賴于農(nóng)藥、抗生素和激素等外源物質(zhì)。我國(guó)農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品的用量居高不下，而這些物質(zhì)的不合理使用必將導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留超標(biāo)，影響消費(fèi)者食用安全，嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成消費(fèi)者致病、發(fā)育不正常，甚至直接導(dǎo)致中毒死亡。農(nóng)藥殘留超標(biāo)也會(huì)影響農(nóng)產(chǎn)品的貿(mào)易，世界各國(guó)對(duì)農(nóng)藥殘留問題高度重視，對(duì)各種農(nóng)副產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留都規(guī)定了越來越嚴(yán)格的限量標(biāo)準(zhǔn)，使中國(guó)農(nóng)產(chǎn)品出口面臨嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。目前農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方法種類繁多，究其原理來說主要分為兩大類：生化測(cè)定法和色譜檢測(cè)法。其中生化測(cè)定法中的酶抑制率法由于具有快速、靈敏、操作簡(jiǎn)便、成本低廉等特點(diǎn)，被列為國(guó)家推薦標(biāo)準(zhǔn)方法（GB/T5009.199-2003），已成為對(duì)果蔬中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)快速定性初篩檢測(cè)的主流技術(shù)之一，得到了越來越廣泛的應(yīng)用農(nóng)藥的殘留1.1 危害農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥使用后殘存于環(huán)境、生物體和食品中的農(nóng)藥母體、衍生物、代謝物、降解物和雜質(zhì)的總稱。造成蔬菜農(nóng)藥殘留量超標(biāo)的主要是一些國(guó)家禁止在蔬菜生產(chǎn)農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥使用后殘存于環(huán)境、生物體和食品中的農(nóng)藥母體、衍生物、代謝物、降解物和雜質(zhì)的總稱。造成蔬菜農(nóng)藥殘留量超標(biāo)的主要是一些國(guó)家禁止在蔬菜生產(chǎn)中使用的有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥，如甲胺磷、氧化樂果、甲拌磷、對(duì)硫磷中使用的有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯類農(nóng)藥，如甲胺磷、氧化樂果、甲拌磷、對(duì)硫磷、甲基對(duì)硫磷等。食用含有大量高毒、劇毒農(nóng)藥殘留引起的食物會(huì)導(dǎo)致人、畜急性中毒事故。長(zhǎng)期食用農(nóng)藥殘留超標(biāo)的農(nóng)副產(chǎn)品，雖然不會(huì)導(dǎo)致急性中毒，但可能引起人和動(dòng)物的慢性中毒，導(dǎo)致疾病的發(fā)生，誘發(fā)癌癥，甚至影響到下一代。1.2主要成份有機(jī)磷、氨基甲酸酯和擬除蟲菊酯是目前市場(chǎng)上最主要的3類殺蟲劑,特別是有機(jī)磷類殺蟲劑仍在生產(chǎn)上起主導(dǎo)作用,更是菜農(nóng)首選使用的一類殺蟲劑。針對(duì)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥,科學(xué)工作者在農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)方面做了大量的研究,并取得了較大的進(jìn)步。農(nóng)藥檢測(cè)的必要性2.1農(nóng)藥檢測(cè)隨著農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展，農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)越來越依賴于農(nóng)藥、抗生素和激素等外源物質(zhì)。我國(guó)農(nóng)藥在糧食、蔬菜、水果、茶葉上的用量居高不下，而這些物質(zhì)的不合理使用必將導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留超標(biāo)，影響消費(fèi)者食用安全，嚴(yán)重時(shí)會(huì)造成消費(fèi)者致病、發(fā)育不正常，甚至直接導(dǎo)致中毒死亡。農(nóng)藥殘留超標(biāo)也會(huì)影響農(nóng)產(chǎn)品的貿(mào)易。檢測(cè)方法與發(fā)展3.1氣象色譜-質(zhì)譜控制農(nóng)藥殘留對(duì)人體的危害，最為有效的方法之一是加強(qiáng)對(duì)食品中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的力度。當(dāng)今世界農(nóng)殘的檢測(cè)分析向多殘留、快速分析發(fā)展，要保證高通量的檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性，需要有嚴(yán)格的農(nóng)藥殘留確證技術(shù)。GC/MS是農(nóng)藥殘留分析最廣泛使用的方法，使用GC/MS進(jìn)行農(nóng)殘分析，為了追求更高靈敏度和準(zhǔn)確度，往往使用選擇離子模式（SIM），依據(jù)保留時(shí)間和特征離子及離子比例關(guān)系對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行確證。在美國(guó)，一般要求樣品中目標(biāo)物保留時(shí)間和標(biāo)準(zhǔn)品相比偏差小于0.05分鐘;每個(gè)目標(biāo)物至少有3個(gè)特征離子，其相對(duì)離子比例與標(biāo)準(zhǔn)品相比絕對(duì)值在10%以內(nèi);同時(shí)還要考慮基質(zhì)對(duì)目標(biāo)物帶來的其他影響;實(shí)驗(yàn)回收率一般在70%—120%之間。在歐盟，使用SIM模式要求每個(gè)目標(biāo)物至少有2個(gè)大于m/z200或3個(gè)大于m/z100的特征離子;目標(biāo)物特征離子比例與標(biāo)準(zhǔn)品相比處于70%—130%即可;日常檢測(cè)回收率控制在60%—140%，確證分析則需要在70%—110%之間。3.2快速檢測(cè)技術(shù)但是傳統(tǒng)的GC/MS等農(nóng)殘分析技術(shù)檢測(cè)成本高、時(shí)間長(zhǎng)，這就給食品安全監(jiān)管部門對(duì)農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)前、產(chǎn)中、產(chǎn)后的監(jiān)督工作帶來了許多不便，因此也催生出大量的快速農(nóng)藥殘留的檢測(cè)技術(shù)，常見的有化學(xué)速測(cè)法、免疫分析法、酶抑制法和活體檢測(cè)法等。（1）化學(xué)速測(cè)法，主要根據(jù)氧化還原反應(yīng)，水解產(chǎn)物與檢測(cè)液作用變色，用于有機(jī)磷農(nóng)藥的快速檢測(cè)，但是靈敏度低，使用局限性，且易受還原性物質(zhì)干擾。（2）免疫分析法，主要有放射免疫分析和酶免疫分析，最常用的是酶聯(lián)免疫分析（ELISA），基于抗原和抗體的特異性識(shí)別和結(jié)合反應(yīng)，對(duì)于小分子量農(nóng)藥需要制備人工抗原，才能進(jìn)行免疫分析。（3）酶抑制法，是研究最成熟、應(yīng)用最廣泛的快速農(nóng)殘檢測(cè)技術(shù)，主要根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酶的特異性抑制反應(yīng)。（4）活體檢測(cè)法，主要利用活體生物對(duì)農(nóng)藥殘留的敏感反應(yīng)，例如給家蠅喂食樣品，觀察死亡率來判定農(nóng)殘量。該方法操作簡(jiǎn)單，但定性粗糙、準(zhǔn)確度低，對(duì)農(nóng)藥的適用范圍窄。4.農(nóng)藥殘留速測(cè)儀4.1概述農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀是根據(jù)我國(guó)國(guó)情和市場(chǎng)需要而研制開的專用儀器?？梢詫?shí)現(xiàn)有機(jī)磷及氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。它可以廣泛適用于各級(jí)食品安全監(jiān)督部門、各級(jí)食品安全監(jiān)測(cè)部門、蔬菜生產(chǎn)基地、蔬菜批發(fā)基地、農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)、食品超市、食品安全檢測(cè)流動(dòng)車、衛(wèi)生防疫、環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域的蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留檢測(cè)。4.2原理農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀是根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（GB/T5009.199-2003）和農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法（NY/T448-2001）中的酶抑制率法，結(jié)合快速檢測(cè)方法研制的全新食品安全檢測(cè)設(shè)備，能準(zhǔn)確、快速檢測(cè)出蔬菜、水果中有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量。在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。正常情況下，酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)測(cè)定412nm下吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留。測(cè)試儀的使用方法5.1使用方法1、開機(jī)

插上電源，打開儀器背面綠色電源開關(guān)，儀器顯示開機(jī)畫面，按畫面提示操作，按下回車鍵，儀器開始自檢，時(shí)間約1min。自檢完畢后，儀器進(jìn)入待機(jī)檢測(cè)狀態(tài)。

2、試劑配制（配套試劑：LS農(nóng)殘速測(cè)試劑）2.1、緩沖液：取1包緩沖劑加入500mL蒸餾水或純凈水中，攪拌溶解制成磷酸緩沖液（pH7.6）,常溫保存。

2.2、顯色劑：取1瓶顯色劑加25mL緩沖液溶解，使用時(shí)取100μL，4℃冰箱保存。

2.3、底物：取1瓶底物加12.5mL蒸餾水或純凈水溶解，使用時(shí)取100μL，4℃冰箱保存；

或取1瓶底物加2.5mL蒸餾水或純凈水溶解，使用時(shí)取20μL，4℃冰箱保存。

2.4、膽堿酯酶：酶制劑無需配制，可直接取用，使用時(shí)取100μL，4℃冰箱保存。

3、樣品提取

取2g果蔬樣品（塊莖類取4g)，葉菜剪成25px左右見方的碎片，塊莖類取橫截面樣品或取其表皮，放入三角瓶中，加入10mL緩沖液，振蕩1～2min，倒出提取液，靜置2min，待測(cè)。若提取液混濁或雜質(zhì)太多可過濾后再測(cè)。測(cè)試

4.1、對(duì)照測(cè)試：于反應(yīng)瓶中加入2.5mL緩沖液，再分別加入100μL酶液和顯色劑，混勻，靜置反應(yīng)10min后加入100μL（或20μL）底物，搖勻并立即倒入比色杯中，及時(shí)放入儀器的測(cè)量室第1通道，合上蓋。按〈B〉鍵，顯示屏下方延遲10s后，測(cè)量時(shí)間開始倒計(jì)時(shí)，計(jì)時(shí)完畢，顯示屏顯示吸光度增量(ΔΑ0)及抑制率。在進(jìn)行對(duì)照測(cè)試時(shí)，2～8通道可同時(shí)進(jìn)行樣品測(cè)試。

4.2、樣品測(cè)試：于反應(yīng)瓶中加入2.5mL待測(cè)液，再分別加入100μL酶液和顯色劑，混勻，靜置反應(yīng)10min后加入100μL（或20μL）底物，搖勻并立即倒入比色杯中，及時(shí)放入儀器的測(cè)量室通道，合上蓋。按〈M〉鍵，顯示屏下方延遲10s后，測(cè)量時(shí)間開始倒計(jì)時(shí)，計(jì)時(shí)完畢，顯示屏顯示吸光度增量（ΔΑt)及抑制率。數(shù)據(jù)自動(dòng)保存，如有需要按〈P〉鍵打印。6.農(nóng)藥殘留導(dǎo)致的急性中毒事件6.1農(nóng)藥殘留的危害及事件農(nóng)殘不僅導(dǎo)致急性中毒，更嚴(yán)重的是慢性中毒；菜該吃還得吃；千萬別相信蟲眼菜；如果暫時(shí)還吃不上綠色蔬菜和無公害蔬菜，那么菜買回家后該洗的好好洗，該削皮的削皮；2003年5月23日，福州一幼兒園38名幼兒園幼兒因食用含有甲胺磷的空心菜而中毒。1999年4月，福建安溪60名小學(xué)生因誤食帶農(nóng)殘的李子而中毒，另2名未上學(xué)女幼童在就醫(yī)途中死亡。這僅僅是每年農(nóng)殘中毒事件中的兩例，這僅僅是"看得見"的急性中毒。其實(shí)，