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文檔簡介

實驗九、細菌的莢膜染色法實驗的目的要求學(xué)習(xí)并掌握莢膜染色法莢膜染色的基本原理莢膜是包圍在細菌細胞外的一層粘液狀或膠質(zhì)狀物質(zhì)，其成分為多糖、糖蛋白或多肽。由于莢膜與染料的親和力弱、不易著色，而且可溶于水，易在用水沖洗時被洗去。所以通常用襯托法染色,使菌體和背景著色，而莢膜不著色，在菌體周圍形成一透明圈。實驗材料細菌培養(yǎng)物膠質(zhì)芽孢菌2天無氮培養(yǎng)基瓊脂斜面培養(yǎng)物。試劑繪圖墨水1%甲基紫水溶液6%葡萄糖水溶液20%硫酸銅水溶液甲醇香柏油二甲苯儀器和用具載玻片蓋玻片濾紙顯微鏡鏡頭紙方法濕墨水法干墨水法Anthony氏法濕墨水法制備細菌墨水混合液加蓋玻片鏡檢制備細菌墨水混合液1、滴繪圖墨水

2、制備混合液繪圖墨水滴1滴繪圖墨水在載玻片中央挑取少量菌苔與生理鹽水混合均勻涂布加蓋玻片在蓋玻片上放一張濾紙，輕輕按壓吸干多余混合液1、加蓋玻片將蓋玻片一端浸泡在細菌墨水混合液中緩緩蓋上蓋玻片2、吸去多余液體鏡檢1、鏡檢用低倍鏡高倍鏡觀察制片置顯微鏡載物臺上2、結(jié)果：

背景灰色，菌體較暗，菌體周圍莢膜呈現(xiàn)明亮透明圈。干墨水法制備細菌墨水混合液涂片固定染色鏡檢制備細菌墨水混合液1、滴生理鹽水

2、涂片6%葡萄糖在載玻片一端

滴一滴6%葡萄糖水挑取少量菌苔混合均勻涂片1、先將推片一端放在混合液上

2、將推片向另一端平行滑動

3、使混合液均勻鋪成薄層

4、干燥室溫自然晾干固定1、滴甲醇

甲醇滴甲醇浸沒涂片1分鐘2、固定

傾去甲醇在酒精燈上方文火固定染色1、滴甲基紫染液2、水洗不要直接沖菌膜可從玻片反面沖洗甲基紫染液甲基紫染液染色1-2分鐘鏡檢1、鏡檢用低倍鏡高倍鏡觀察制片置顯微鏡載物臺上2、結(jié)果：

背景灰色，菌體紫色，菌體周圍莢膜呈現(xiàn)明亮透明圈。Anthony氏法制片固定染色鏡檢制片、固定1、滴生理鹽水

2、涂片3、干燥固定生理鹽水滴半滴生理鹽水在載玻片中央

挑取少量菌苔與生理鹽水混合均勻涂布室溫自然晾干染色1、滴孔結(jié)晶紫染液3、脫色結(jié)晶紫染液滴結(jié)晶紫染色2分鐘20%CuSO4滴加20%CuSO4洗片鏡檢1、鏡檢用低倍

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