分解纖維素的微生物的分離

落紅不是無情物化作春泥更護(hù)花課題3分解纖維素的微生物的分離綏中利偉高級中學(xué)生物組郭立榮

纖維素酶是一種

復(fù)合

酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即

C1酶、

Cx酶和葡萄糖苷酶。纖維二糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶葡萄糖纖維素一、基礎(chǔ)知識1.纖維素2.纖維素酶2.纖維素分解菌的篩選（1）篩選纖維素分解菌的方法:剛果紅染色法紅色復(fù)合物纖維素酶

出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈是否產(chǎn)生透明圈（2）其原理是：剛果紅+纖維素

可以通過_______________來篩選菌種1243土壤取樣選擇培養(yǎng)

梯度稀釋將樣品涂布到鑒別培養(yǎng)基挑選菌落二、實驗流程P281.纖維素分解菌選擇培養(yǎng)基屬于固體還是液體培養(yǎng)基？【資料二】選擇培養(yǎng)2.該培養(yǎng)基對微生物是否具有選擇作用？如果有，其選擇機(jī)制是?以纖維素粉為唯一碳源，能分解纖維素的微生物可以大量繁殖；3、你能否設(shè)計一個對照實驗，說明選擇培養(yǎng)基的作用液體培養(yǎng)基培養(yǎng)基組成提供的主要營養(yǎng)物質(zhì)CMC-Na5~10g碳源酵母膏1g碳源、氮源、生長因子KH2PO40.25g無機(jī)鹽土豆汁100mL碳源、生長因子瓊脂15g凝固劑上述物質(zhì)溶解后，加蒸餾水定容至1000mL氫元素、氧元素鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基(水溶性羧甲基纖維素鈉)該鑒別培養(yǎng)基具有什么特點？【資料三】剛果紅染色法方法一：先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)方法二：在倒平板時就加入剛果紅1243

三、課題延伸

1.為確定得到的透明圈中的菌落是纖維素分解菌，需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)

的實驗，纖維素酶的發(fā)酵方法有

和

兩種。

2.纖維素酶的測定方法，一般是采用對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的

進(jìn)行定量測定。

纖維素酶

液體發(fā)酵固體發(fā)酵葡萄糖學(xué)完這個專題后，你能否總結(jié)出分離培養(yǎng)微生物的一般方法？挑選單菌落發(fā)酵培養(yǎng)選擇培養(yǎng)涂布到有特定選擇作用的培養(yǎng)基梯度稀釋土壤取樣※小小秸稈用處多增收致富又環(huán)保分解纖維素的微生物的分離纖維素酶種類、作用剛果紅染色篩選原理實驗設(shè)計土壤取樣選擇培養(yǎng)挑選菌落涂布到鑒別培養(yǎng)基課堂小結(jié)實驗原理梯度稀釋練一練：1.

利用農(nóng)作物秸稈為原料可生產(chǎn)乙醇，生產(chǎn)過程中可采用微生物將秸稈水解或用酶水解，其主要技術(shù)流程如下圖所示，下列相關(guān)說法錯誤的是()A.酒精發(fā)酵前需對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌B.過程①加入的是葡萄糖苷酶C.酒精發(fā)酵接種的酵母菌需在無氧條件下發(fā)酵D.可用剛果紅染色法篩選過程①所需的纖維素分解菌B2.下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，請回答：（1）依用途劃分，該培養(yǎng)基屬于

培養(yǎng)基，能在此培養(yǎng)基繁殖的微生物具有的特點是

選擇

對青霉素有抗性

。成分含量成分含量NaNO33gFeSO40．01gK2HPO41gC6H12O630g瓊脂15gH2O1000mlMgSO4·7H2O0．5g青霉素0．1萬單位成分含量成分含量NaNO33gFeSO40．01gK2HPO41gC6H12O630g瓊脂15gH2O1000mlMgSO4·7H2O0．5g青霉素0．1萬單位（2）若用該培養(yǎng)液培養(yǎng)纖維素分解菌，除了要去除一些成分外，還應(yīng)加入的物質(zhì)是

，在篩選纖維素分解菌過程中常用

法。纖維素剛果紅染色3.馬、牛羊的食物主要是草莖類，其中還有大量的纖維素。它們胃內(nèi)的微生物，在幫助消化和利用植物纖維素方面起了決定性的作用，土壤中也存在著分解纖維素的微生物。請根據(jù)所學(xué)的知識，回答下列問題：（1）纖維素酶是一種復(fù)合酶，主要包括_______、_______、__________。（2）剛果色的復(fù)紅染液可以與纖維素結(jié)合形成紅合物，纖維素分解菌產(chǎn)生的纖維素酶能夠?qū)⒗w維素分解而使其菌落周圍出現(xiàn)透明圈。

C1酶CX酶葡萄糖苷酶在培養(yǎng)基中加入剛果紅染液可以鑒別纖維素分解菌，其原因是（3）分離土壤中纖維素分解菌用到的方法是___。①稀釋倒平板法②涂布平板法③單細(xì)胞挑取法④選擇培養(yǎng)分離A.①②B.②③④C.②③D.①③④（4）在微生物的分離與培養(yǎng)的過程中，為了防止雜菌的污染，需要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作，如接種環(huán)和接種針需要

，培養(yǎng)基需要______________等。而接種針或接種環(huán)操作時經(jīng)火焰滅菌后需要在培養(yǎng)基上接觸冷卻后才能挑取菌落。B高壓蒸汽滅菌灼燒滅菌鏈接高考(全國卷Ⅰ)植物秸稈中的纖維素可被某些微生物分解?；卮鹣铝袉栴}：(1)分解秸稈中纖維素的微生物能分泌纖維素酶，該酶是由3種組分組成的復(fù)合酶，其中的葡萄糖苷酶可將________分解成________。(2)在含纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅(CR)時，CR可與纖維素形成____色復(fù)合物。用含有CR的該種培養(yǎng)基培養(yǎng)纖維素分解菌時，培養(yǎng)基上會出現(xiàn)以該菌的菌落為中心的________。纖維二糖葡萄糖紅透明圈(3)為從富含纖維素的土壤中分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計了甲、乙兩種培養(yǎng)基(成分見下表)：注：“＋”表示有，“－”表示無。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲________(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是__________________；培養(yǎng)基乙_____(填“能”或“不能”)用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因

酵母膏無機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲＋＋＋＋－＋＋培養(yǎng)基乙＋＋＋－＋＋＋不能

液體培養(yǎng)基不能用于分離單菌落不能