還原糖的鑒定

還原糖的鑒定第一頁，共十四頁，編輯于2023年，星期五顯微鏡的使用1、安放；2、對光；3、調(diào)焦；4、觀察。第二頁，共十四頁，編輯于2023年，星期五實驗一:生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定

一、實驗原理：某些化學試劑能夠使生物組織中的有關有機化合物，產(chǎn)生特定的顏色反應。、可溶性還原糖＋斐林試劑磚紅色沉淀、脂肪＋蘇丹III橘黃色脂肪＋蘇丹IV紅色3、蛋白質＋雙縮脲試劑紫色反應第三頁，共十四頁，編輯于2023年，星期五二、實驗材料：鑒定的有機物適宜材料選用的材料可溶性還原糖脂肪蛋白質含糖量較高、顏色為白色或近于白色的植物組織富含脂肪的種子富含蛋白質的生物組織蘋果汁花生種子豆?jié){第四頁，共十四頁，編輯于2023年，星期五深入原理

1.可溶性還原糖的鑒定原理：

生物組織中常見的可溶性糖有葡萄糖、果糖、麥芽糖、蔗糖。前三種糖分子中都含有游離的具有還原性的半縮醛羥基，因此叫還原性糖，而蔗糖的分子中沒有，因此叫非還原性糖。

斐林試劑與可溶性還原糖在加熱的條件下，生成磚紅色的Cu2O沉淀。如用沸水浴加熱，Cu2O沉淀顆粒較大，呈現(xiàn)磚紅色；如用酒精燈直接加熱，Cu2O沉淀顆粒較小，呈現(xiàn)黃色。第五頁，共十四頁，編輯于2023年，星期五深入原理

2.蛋白質的鑒定原理：

在堿性溶液（NaOH）中，雙縮脲（H2NCO－NH－CONH2）能與Cu2＋作用，可形成紫色或紫紅色的絡合物，這一反應稱雙縮脲反應。凡在本身結構中具有雙縮脲基的化合物，都能進行雙縮脲反應，這是特定的顏色反應。蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵(兩個相鄰的肽鍵與雙縮脲結構相似)，因此又稱為肽鍵反應。第六頁，共十四頁，編輯于2023年，星期五深入原理

3.脂肪的鑒定原理：蘇丹染料在脂肪中的溶解度大于酒精中的溶解度，用蘇丹染料的酒精溶液處理含有脂肪的生物組織時，酒精中的蘇丹進入脂肪中，在脂肪中溶解、積累，并吸附在脂肪顆粒結構上，呈現(xiàn)出橘黃色（蘇丹III

）或紅色（蘇丹IV）。第七頁，共十四頁，編輯于2023年，星期五脂肪細胞＋蘇丹III第八頁，共十四頁，編輯于2023年，星期五

三、試劑：

1、斐林試劑

A液質量濃度為0.1g/mL的NaOH溶液B液質量濃度為0.05g/mL的CuSO4溶液

2、雙縮脲試劑A液質量濃度0.1g/mL的NaOH溶液B液質量濃度0.01g/mL的CuSO4溶液

3、蘇丹III

0.1g蘇丹III干粉，溶于100mL體積分數(shù)為95%的酒精中，待全部溶解后再使用。

第九頁，共十四頁，編輯于2023年，星期五四、實驗步驟1、可溶性還原糖的鑒定制備生物組織樣液取材、研磨、過濾取樣取2ml組織樣液注入試管注入試劑向試管中加入2ml剛配制的斐林試劑加熱（煮沸2min），觀察第十頁，共十四頁，編輯于2023年，星期五2、蛋白質的鑒定制備生物組織樣液取材、研磨、過濾預備組織樣液注入組織樣液取一支試管注入黃豆組織樣液2ml注入試劑A加入2ml雙縮脲試劑B，搖勻觀察顏色變化注入試劑B試劑A滴入3~4滴雙縮脲第十一頁，共十四頁，編輯于2023年，星期五3、脂肪的鑒定制備生物組織實驗材料去種皮、削平面、切片染色滴2～3滴蘇丹III染液染色2～3分鐘去浮色在玻片上滴1～2滴體積分數(shù)為50％酒精溶液，洗去浮色制作臨時裝片放在顯微鏡下觀察（先低倍鏡后高倍鏡）第十二頁，共十四頁，編輯于2023年，星期五

五、注意事項：

1、合理安排，注意安全

2、蘋果組織液必須臨時制備，保存時間不能過長

3、雙縮脲試劑B（CuSO4）不能多加

第十三頁，共十四頁，編輯于2023年，星期五

六、討論與探究：

1、你能否用鑒定可溶性還原糖的方法，對青菜葉、韭菜葉和甘蔗莖做相應的鑒定？