臨床感染癥病原體檢驗(yàn)

關(guān)于臨床感染癥病原體檢驗(yàn)第1頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三1.常見病原菌種類病原菌G+球菌金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌、草綠色鏈球菌、腸球菌G+桿菌結(jié)核分枝桿菌、產(chǎn)單核李斯特菌、陰道加特納菌G-球菌腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌，卡他布蘭漢菌G-桿菌大腸埃希菌、銅綠假單胞苗、克雷伯桿菌、腸桿菌、變形桿菌、沙雷菌、沙門菌、不動(dòng)桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌、嗜血桿菌真菌念珠菌、曲霉菌、隱球菌、球孢子菌厭氧菌擬桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌第2頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三2.血液標(biāo)本的病原菌的檢驗(yàn)第3頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三3.病原菌的檢驗(yàn)程序1.標(biāo)本采集2.標(biāo)本直接檢查

(1)直接顯微鏡檢查;(2)抗原檢測(cè);(3)核酸檢測(cè);3.分離培養(yǎng)與鑒定

(1)培養(yǎng)基選擇;(2)分離培養(yǎng)與鑒定;4.抗體檢測(cè)常用ELISA、間接免疫熒光技術(shù)等方法;5.藥物敏感性試驗(yàn)第4頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三4.臨床意義1.葡萄球菌菌血癥由耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)及凝固酶陰性葡萄球菌引起的逐年增多，占10％～15％。2.腸球菌菌血癥約占10％,常見泌尿生殖道、消化道和腹腔感染的病人。3.G-桿菌菌血癥主要侵犯免疫功能低下的病人。第5頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三4.L型菌感染菌血癥使用抑制細(xì)胞壁的抗生素，由缺損細(xì)胞壁的細(xì)菌感染所致。5．厭氧菌菌血癥常合并需氧菌感染，癥狀重而復(fù)雜。6．真菌血癥常由條件致病性真菌引起，有念珠菌、曲霉和毛霉等。7．醫(yī)院感染菌血癥近年來明顯增多，占

30％—60％。第6頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三第二節(jié)中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染1.常見病原體G+菌葡萄球菌，肺炎鏈球菌，B群、A群鏈球菌，消化鏈球菌，結(jié)核分枝桿菌，產(chǎn)單核細(xì)胞李斯特菌、炭疽芽胞桿菌;G-菌腦膜炎奈瑟菌，大腸埃希菌，銅綠假單胞菌，卡他布蘭漢菌，類桿菌，不動(dòng)桿菌，肺炎克雷白桿菌;第7頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三病毒乙型腦炎病毒,柯薩奇病毒A、B,脊髓灰質(zhì)炎病毒,新腸道病毒68～71,狂犬病毒;真菌及其他新生隱球菌,白假絲酵母菌,鉤端螺旋體;第8頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三2.微生物檢驗(yàn)程序

見第一節(jié)血液感染或有關(guān)章節(jié)。對(duì)嬰幼兒不能腰穿時(shí)，用PCR技術(shù)檢測(cè)外周血，對(duì)腦膜炎條瑟菌感染者的陽性率為100％，且不受抗生素藥物治療的影響；涂片和結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)陽性率有限，且時(shí)間長(zhǎng)，用PCR技術(shù)檢測(cè)腦脊液中結(jié)核分枝桿菌DNA，檢出率高，快速靈敏和特異，但要嚴(yán)格操作規(guī)程，避免假陽性。第9頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三3.抗體檢測(cè)為病毒檢測(cè)的快速診斷方法，較常用。(1)中和試驗(yàn)：主要檢測(cè)中和抗體lgG，此抗體持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)有診斷意義，陽性率和特異性均高。雙份血清效價(jià)4倍增高。(2)特異性IgM抗體測(cè)定：此抗體在病后4天即可出現(xiàn)，2周可達(dá)高峰，常用于早期診斷。用ELISA、間接免疫熒光法等檢測(cè)，敏感性和特異性較高。第10頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(3)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)：補(bǔ)體結(jié)合抗體為lgG

抗體，常在病后第二周出現(xiàn)，5—6周達(dá)高峰，單份血清1：4為陽性，雙份血清效價(jià)增高4倍為陽性，用于回顧性診斷或流行病學(xué)調(diào)查。第11頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(4)血凝抑制試驗(yàn)：可用于臨床診斷及流行病學(xué)調(diào)查。血凝抑制抗體在病后5天出現(xiàn)，2周時(shí)達(dá)高峰，雙份血清抗體效價(jià)增高4倍以上有診斷價(jià)值，陽性率高于補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)，但可出現(xiàn)假陽性。第12頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三4.臨床意義

1．細(xì)菌性腦膜炎是常見類型，其中以流行性腦脊髓膜炎為常見，結(jié)核性腦膜炎呈回升趨勢(shì)，為防治重點(diǎn)。肺炎球菌、鏈球菌腦膜炎仍常見，流感嗜血桿菌腦膜炎以及其他G-桿菌性腦膜炎有增多趨勢(shì)。第13頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三2．真菌性腦膜炎最常見是隱球菌腦膜炎，其他真菌性腦膜炎如白假絲酵母菌、球孢子菌漸增多，免疫功能低下患者易并發(fā)。第14頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三3．流行性乙型腦炎是人獸共患的自然疫源性疾病。4．腸道病毒對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的危害性已逐漸引起人們的關(guān)注和重視。還不斷發(fā)現(xiàn)新腸道病毒68-71型引起的腦膜炎及腦炎。第15頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三第三節(jié)創(chuàng)傷和外科感染

1.常見病原菌種類革蘭陽性革蘭陰性球菌金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、化膿鏈球菌、肺炎鏈球菌、腸球菌、消化鏈球菌腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布蘭漢菌桿菌結(jié)核分枝桿菌、非結(jié)核分枝桿菌、破傷風(fēng)桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、炭疽芽胞桿菌大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌、擬桿菌、梭桿菌、肺炎克雷白桿菌、變形桿菌其他衣氏放線菌、諾卡菌第16頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三2.微生物檢驗(yàn)程序

見第一節(jié)血液感染或有關(guān)章節(jié)。取創(chuàng)傷分泌物和膿液作標(biāo)本；放線菌首先要檢出標(biāo)本中的硫磺顆粒；檢測(cè)結(jié)核分枝桿菌作抗酸染色鏡檢；檢測(cè)厭氧菌要作厭氧培養(yǎng)。由創(chuàng)傷、手術(shù)、侵人性器械操作等外科治療引起的感染最為常見，并日漸增多。第17頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三第四節(jié)上呼吸道感染(一)常見病原體

1.革蘭陽性金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、化膿鏈球菌、肺炎鏈球菌、結(jié)核分枝桿菌、白喉棒狀桿菌、厭氧菌、炭疽芽胞桿菌、白假絲酵母菌、放線菌、奮森螺旋體;2.革蘭陰性腦膜炎奈瑟菌、大腸埃希菌、肺炎克雷白桿菌、

銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌、腸桿菌、不動(dòng)桿菌、百日咳桿菌、軍團(tuán)菌、肺炎支原體

第18頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(二)細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)程序1.細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)見第一節(jié)血液感染及有關(guān)章節(jié)。2.病原體檢測(cè)只對(duì)某些疾病診斷具有意義。由于菌群復(fù)雜，正常寄生菌和種類繁多，一份咽拭子分離出來的細(xì)菌不一定與疾病有關(guān)，另外由于接受藥物治療，使某些細(xì)菌受到抑制，可影響陽性檢出率。因此，在分析結(jié)果時(shí)應(yīng)緊密結(jié)合臨床。第19頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三3.鼻咽拭子標(biāo)本的檢測(cè)有助于猩紅熱、風(fēng)濕熱、急性腎小球腎炎病人的臨床診斷；還可檢出化膿鏈球菌、奮森螺旋體、腦膜炎奈瑟菌、麻風(fēng)桿菌等以協(xié)助診斷；對(duì)白喉、百日咳或口腔念珠菌感染的診斷有意義，應(yīng)結(jié)合臨床。第20頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三4.呼吸道還可見病毒感染，常見普通感冒或流行性感冒，咽炎和扁桃腺炎等，均應(yīng)結(jié)合臨床進(jìn)行診斷。第21頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三第五節(jié)下呼吸道感染(一)常見病原體1.革蘭陽性金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、

肺炎鏈球菌、A群鏈球菌、腸球菌、結(jié)核分枝桿菌、白喉棒狀桿菌、炭疽芽胞桿菌、白假絲酵母菌、毛霉、曲霉;

第22頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三2.革蘭陰性腦膜炎奈瑟菌、黃色球菌、大腸埃希菌、克雷白桿菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌、百日咳桿菌、軍團(tuán)菌、支原體第23頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三3.病毒腺病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、巨細(xì)胞病毒、純皰疹病毒、麻疹病毒等

第24頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(二)細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)程序一般要求下呼吸道感染培養(yǎng)的細(xì)菌濃度應(yīng)≥107CFU／ml，可視為病原菌，104CFU／ml視為污染菌。介于兩者之間時(shí)，要連續(xù)分離培養(yǎng)兩次以上。第25頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三痰培養(yǎng)標(biāo)本的前處理：用無菌鹽水將洗滌3次，洗去痰中的常居菌，然后加入等量的(pH7．6)1％胰酶溶液，放置37℃90min即可使痰液均質(zhì)化。第26頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三支氣管分泌物等要離心沉淀，以生理鹽水適當(dāng)稀釋后,直接涂片染色鏡檢:1)正染色法：適用于多種標(biāo)本及培養(yǎng)物，將標(biāo)本固定于潔凈玻片上直接染色。常用革蘭染色，蘇本索一伊紅染色(HE)，乳酸酚棉藍(lán)染色，過碘酸錫夫染色(PAS)，嗜銀染色(GMS)

等;第27頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三2)負(fù)染色法：用真菌不著色而使背景著色,檢查新型隱球菌，如用墨汁負(fù)染色鏡檢找隱球菌。第28頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(三)臨床意義1.下呼吸道感染指肺實(shí)質(zhì)性炎癥的肺炎和支氣管粘膜炎癥的支氣管炎，是病死率高的疾病。近幾年來呈上升趨勢(shì)。第29頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三2.細(xì)菌學(xué)檢查對(duì)診斷有重要意義，采集痰要來自于下呼吸道合格的標(biāo)本，提高檢出率和陽性的正確率。第30頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三3.細(xì)菌性肺炎為最常見的類型，肺炎鏈球菌所致仍為常見，由流感嗜血桿菌，金黃色葡萄球菌、MRSA

和G-桿菌所致肺炎比例明顯上升，軍團(tuán)菌肺炎引起了重視。在醫(yī)院感染中，條件致病菌和耐藥菌的G-桿菌占50％以上，成為醫(yī)院內(nèi)肺炎的主要致病菌。第31頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三4.支原體肺炎常以不典型肺炎表現(xiàn)，近年發(fā)生率上升,約80％的慢性氣管炎病人合并有支原體感染。約占肺炎的10％-20％。第32頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三5.真菌性肺炎是致病性真菌和條件致病性真菌所引起。目前以條件致病性真菌感染致病為主，并呈上升趨勢(shì)，以白假絲酵母菌為主，毛霉、曲霉和隱球菌也常見。常合并多種細(xì)菌感染。第33頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三第六節(jié)消化道感染(—)常見的病原體

1.腸毒素為主的病原菌霍亂弧菌、志賀菌(福氏、宋內(nèi))、大腸埃希菌(ETEC、EHEC、EAggEC)、金黃色葡萄球菌、難梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌。第34頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三2.侵襲性為主的病原菌沙門菌、大腸埃希菌(EPEC、EIEC)、志賀菌(鮑氏、志賀)、彎曲菌、副溶血弧菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌、結(jié)核分枝桿菌、白假絲酵母菌。第35頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三3.病毒輪狀病毒、?？刹《?、Norwolk病毒、甲型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、腺病毒。第36頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三病原學(xué)檢驗(yàn)程序采集膿血或糊狀新鮮糞便，應(yīng)在急性期，使用抗生素前進(jìn)行腸道細(xì)菌多為G-桿菌，形態(tài)區(qū)分困難，不做涂片鏡檢。檢驗(yàn)程序見第一節(jié)血液感染。第37頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三1.臨床意義1．感染性腹瀉最為常見，為胃腸炎的癥狀，由多種病原體感染所致。2．細(xì)菌性痢疾是指由志賀菌屬(福氏和宋內(nèi)氏)引起的腸道傳染病。常有里急后重和膿血樣便，中毒性痢疾見于小兒。發(fā)病率呈下降趨勢(shì)。糞培養(yǎng)對(duì)診斷有價(jià)值。第38頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三3．細(xì)菌性食物中毒常見于沙門菌、副溶血弧菌、致病性大腸埃希菌、葡萄球菌、肉毒棱菌、臘樣芽胞桿菌食物中毒。多發(fā)生在夏秋季，以暴發(fā)和集體發(fā)病為特征。第39頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三4．致病性大腸埃希菌的腸道感染分為5類。即ETEC可致霍亂樣腸毒素水瀉，常見于兒童和旅行者腹瀉；

EPEC可引起嬰幼兒腹瀉；EIEC可引起志賀菌樣粘液膿血便；EHEC

的0157：H7血清型可引起出血性腸炎和溶血性尿毒綜合征；EAggEC

是新近報(bào)道可引起慢性腹瀉的大腸埃希菌。

第40頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三5．消化性潰瘍幽門螺桿菌感染主要部位是胃及十二指腸球部。大量研究及臨床證明胃炎、消化性潰瘍主要是HP所引起，HP可能還參與了胃癌的形成。從此消化性潰瘍經(jīng)抗感染的治療而成為一個(gè)新的概念，并取得好的療效。

第41頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三6．近年來胃腸炎的病毒感染呈上升的趨勢(shì)

(1)輪狀病毒常引起幼兒腹瀉；

(2)腺病毒是引起兒童腹瀉的主要病原，還可引起成人腹瀉；

(3)Norwolk病毒常感染成人和大齡兒童，引起水樣便或黃稀便的腹瀉；

(4)?？刹《境Ｒ饗胗變焊篂a。第42頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三第七節(jié)尿路感染(一)常見病原菌

80％為G-桿菌，大腸埃希菌占70％以上，其次為變形桿菌、銅綠假單胞菌、克雷伯桿菌、腸桿菌、沙雷菌、產(chǎn)氣桿菌、沙門菌等；20％為G+菌，其中以腸球菌為多見，次為葡萄球菌、糞鏈球菌、結(jié)核分枝桿菌，少數(shù)為厭氧菌等；支原體、衣原體、真菌感染呈上升趨勢(shì)；急性感染多見于大腸埃希菌，慢性感染多見于變形桿菌和銅綠假單胞菌。第43頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(二)病原學(xué)檢驗(yàn)程序(1)要嚴(yán)格無菌操作,收集晨起第一次清潔中段尿標(biāo)本，其結(jié)果才可靠。(2)標(biāo)本直接顯微鏡檢查可用1滴尿涂片作染色鏡檢是有意義的方法。如平均每個(gè)視野≥1個(gè)細(xì)菌(表示細(xì)菌定量培養(yǎng)≥105／ml)率達(dá)90％以上。(3)尿細(xì)菌定量培養(yǎng)診斷標(biāo)準(zhǔn)是以細(xì)菌數(shù)≥

105／ml為真性細(xì)菌尿,104-105／ml為可疑陽性，需再?gòu)?fù)查。第44頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(三)臨床意義1.尿路感染主要經(jīng)尿道口上行感染所致，極少數(shù)為血行感染，即從體內(nèi)感染灶侵入血流到達(dá)腎引起腎盂腎炎。尿液細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)可反映腎、膀胱、尿道、前列腺等處的炎癥變化。臨床表現(xiàn)主要有尿頻、尿急、尿痛、排尿困難和腰痛等。第45頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三2．尿路感染常見腎盂腎炎(急性和慢性)、膀胱炎(急性為主)、尿道炎(細(xì)菌性尿道炎、淋菌性尿道炎、非淋菌性尿道炎)、前列腺炎(常見慢性)等。第46頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三3．尿路感染需要明確部位和急性與慢性，主要依病原菌檢測(cè)，還要緊密結(jié)合臨床綜合考慮作出診斷，藥物敏感試驗(yàn)對(duì)指導(dǎo)臨床合理使用有效抗生素有重要意義。第47頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三第八節(jié)性傳播疾病性傳播疾病(STD)是指以性行為為主要傳播途徑的一組傳染病。STD有二十幾種，1991年8月我國(guó)確認(rèn)8種STD為重要防治的病種，如梅毒、淋病、軟下疳、性病淋巴肉芽腫、非淋菌性尿道炎、艾滋病、尖銳濕疣、生殖器皰疹8種。第48頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三STD在概念與病種范圍上不同于傳統(tǒng)的性病，性病是指以性交為主要傳播途徑的傳染病。性病只包括梅毒、淋病、軟下疳、性病淋巴肉芽腫和腹股溝肉芽腫5種。第49頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三一、梅毒螺旋體感染的檢查(一)標(biāo)本采集取下疳分泌物或二期皮疹或病灶滲出物或局部淋巴結(jié)等穿刺物為標(biāo)本。(二)微生物檢驗(yàn)1．直接顯微鏡檢查①用暗視野顯微鏡直接鏡檢。有動(dòng)力的梅毒螺旋體。②鍍銀染色用光學(xué)顯微鏡直接檢查螺旋體。③用直接熒光檢測(cè)法(IFA)檢查見亮綠色熒光的梅毒螺旋體,有診斷價(jià)值，主要適用于一、二期梅毒。第50頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三2．梅毒血清學(xué)試驗(yàn)①非螺旋體抗原試驗(yàn)主要測(cè)定反應(yīng)素，如VDRI、USR、

RPR試驗(yàn)為篩查試驗(yàn)；②密螺旋體抗原試驗(yàn)：主要測(cè)定特異性抗體，如

TPHA、FTA—ABS、FTA-ABSDS、MHA-TP試驗(yàn)等，特異性高為證實(shí)試驗(yàn)。第51頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三3．PCR快速敏感特異，可檢測(cè)梅毒螺旋體DNA片段，對(duì)分析疑難病例有幫助。4．暗視野鏡檢和血清學(xué)試驗(yàn)為目前實(shí)驗(yàn)室檢查的金標(biāo)準(zhǔn)。第52頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(三)臨床意義1．梅毒分期：①一期梅毒為硬下疳，病灶中有大量螺旋體，適用涂片直接鏡檢；②二期梅毒是梅毒疹期，病期在2年以內(nèi)，梅毒疹及淋巴結(jié)有大量的螺旋體；③三期梅毒為晚期梅毒，病期2-5年或更長(zhǎng)，引起心血管和中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損。第53頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三2．梅毒血清學(xué)試驗(yàn)并非梅毒所特有，應(yīng)結(jié)合臨床仔細(xì)分析、除外假陽性反應(yīng)。近年來新方法有應(yīng)用前景，如①競(jìng)爭(zhēng)ELISA法檢測(cè)抗螺旋體抗體；②用梅毒重組蛋白作免疫印跡法檢測(cè)梅毒血清；③用梅毒螺旋體全細(xì)胞溶解物作抗原免疫印跡法；④特異性IgG酶免疫法。第54頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三二、淋病奈瑟菌感染的檢查

(一)微生物檢驗(yàn)1.用無菌棉拭子取尿道膿液或?qū)m頸膿液和分泌物。抵抗力極低易白溶，應(yīng)立即送檢或床旁自接接種2.取分泌物標(biāo)本涂片染色鏡檢，為革蘭陰性雙球菌，特別是見白細(xì)胞內(nèi)細(xì)菌，有助于診斷3.抗原檢測(cè)可用EIASA及免疫熒光技術(shù)檢測(cè)抗原，對(duì)診斷較有幫助。第55頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三4．核酸檢測(cè)PCR檢測(cè)DNA片段，快速敏感特異，但要注意假陽性，需結(jié)合臨床進(jìn)行診斷。5．分離培養(yǎng)與鑒定在選擇培養(yǎng)基上見典型菌落鏡檢，氧化酶、糖發(fā)酵等生化試驗(yàn)，熒光抗體試驗(yàn)鑒定確證。6．淋病奈瑟菌培養(yǎng)是目前實(shí)驗(yàn)室的金標(biāo)準(zhǔn)。第56頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(三)臨床意義1．淋病奈瑟菌所致淋病，常見于男性淋菌性尿道炎(急性和慢性)、附睪炎，前列腺炎等；女性淋菌性尿道炎、宮頸炎、陰道炎等；女孩陰道炎和尿道炎，主要由直接或間接傳染。亦可發(fā)生全身性淋病(淋菌性菌血癥、淋菌性眼炎和咽炎等)。2．淋病是目前世界上發(fā)病率最高的性病，女性易受感染，易發(fā)生在性活躍的中青年。第57頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三三、軟下疳性病的檢查

是由杜克嗜血桿菌感染引起生殖器疼痛性潰瘍及所屬淋巴結(jié)化膿性病變的性傳播疾病。(一)采集潰瘍膿液或分泌物為標(biāo)本。(二)微生物檢驗(yàn)1．標(biāo)本直接涂片染色，呈鏈狀或“龜群狀’’排列G-菌，可初步診斷。第58頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三2．PCR檢測(cè)病原菌核酸、快速敏感特異、有助于診斷。3．分離培養(yǎng)與鑒定可選用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)，可見典型菌落。再經(jīng)涂片染色鏡檢和生化反應(yīng)鑒定，可明確診斷。4．軟下疳實(shí)驗(yàn)室檢查的金標(biāo)準(zhǔn)為培養(yǎng)加PCR檢測(cè)。第59頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(三)臨床意義1．本病性交傳染，間接傳染少見。多見于女性，男女比1：2，但男性病人癥狀重。病變多在外生殖器，也可播散到其他部位的皮膚和粘膜。2．軟下疳發(fā)生1～2周后，有10％～30％患者出現(xiàn)一側(cè)腹股溝淋巴結(jié)炎和淋巴結(jié)周圍炎稱橫痃。第60頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三四、性病淋巴肉芽腫的檢查(一)微生物檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的金標(biāo)準(zhǔn)是分離培養(yǎng)加PCR。1.取淋巴結(jié)膿液或?qū)m頸和直腸拭子或活檢材料為標(biāo)本：2.標(biāo)本直接涂片作Giemsa染色檢查衣原體及其包涵體；熒光抗體(DFA)染色檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)衣原體包涵體第61頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三3．抗原檢測(cè)①用熒光抗體(DFA)染色檢測(cè)抗原；②酶免疫檢測(cè)(EIA)衣原體可溶性抗原第62頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三4．PCR檢測(cè)沙眼衣原體DNA敏感性、特異性達(dá)100％和93％，可用于早期診斷;第63頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三5．分離培養(yǎng)可用雞胚培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)和動(dòng)物接種方法,分離培養(yǎng)病原體，涂片染色鏡檢，免疫熒光檢測(cè)、生化反應(yīng)作鑒定;6．抗體檢測(cè)①檢測(cè)補(bǔ)體結(jié)合抗體，效價(jià)達(dá)l：64有診斷意義；②微量免疫熒光試驗(yàn)可測(cè)抗體，滴度1：512

有意義。第64頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三細(xì)菌性陰道病的檢查(一)微生物檢驗(yàn)1.由陰道加特納菌引起的生殖道性傳播疾病。2.采集陰道分泌物及感染部位的標(biāo)本3.直接涂片染色鏡檢，可觀察到線索細(xì)胞，有大量多形性G-桿菌,實(shí)驗(yàn)室檢查的金標(biāo)準(zhǔn)。第65頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三4．陰道分泌物pH和胺試驗(yàn)pH4．5；標(biāo)本中滴加10％KOH1滴即可發(fā)出魚腥味為陽性。5．分離培養(yǎng)與鑒定將陰道分泌物接種于人血平板作培養(yǎng)，48h后觀察菌落特征，同時(shí)作生化試驗(yàn)等進(jìn)行鑒定。第66頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(二)臨床意義1．主要是陰道內(nèi)乳酸桿菌受抑制，厭氧菌大量生長(zhǎng)繁殖，而發(fā)生混合性感染的細(xì)菌性陰道病。可分解氨基酸產(chǎn)胺而發(fā)生魚腥味，亦使pH上升。2．主要引起細(xì)菌性陰道病，也可引起產(chǎn)后感染，流產(chǎn)等婦科疾病。3．分離培養(yǎng)一般不用，因20-40％正常婦女陰道中也可檢出此菌，應(yīng)結(jié)合臨床。第67頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三六、性傳播衣原體感染的檢查(一)微生物檢驗(yàn)?zāi)壳皩?shí)驗(yàn)室檢查衣原體的金標(biāo)準(zhǔn)是培養(yǎng)加PCR。1.用無菌棉拭子采集宮頸、男性尿道分泌物或病變部位活檢標(biāo)本。2.直接顯微鏡檢查①涂片Giemsa染色鏡檢，見上皮細(xì)胞包涵體有診斷價(jià)值，原體呈紫紅色或紅色，始體為藍(lán)色或暗藍(lán)色。②免疫熒光檢查：用直接法熒光抗體(DFA)染色檢查細(xì)胞內(nèi)有典型的衣原體包涵體；3.抗原檢測(cè)ELISA檢測(cè)衣原體特異性抗原。具有快速敏感特異性高的特點(diǎn)。第68頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三4．核酸檢測(cè)PCR和LCR法：檢查分泌物和尿標(biāo)本中衣原體DNA片斷，快速敏感特異。5．分離培養(yǎng)與鑒定有細(xì)胞培養(yǎng)(Hela細(xì)胞)、雞胚卵黃囊和小白鼠(腹腔、腦內(nèi)、鼻腔內(nèi))接種三種方法，取培養(yǎng)細(xì)胞涂片、

Giemsa和碘染色鏡檢、熒光抗體染色、

ELISA、PCR等進(jìn)是測(cè)特異性抗體，也可對(duì)分離出的病原體進(jìn)行血清學(xué)分型。第69頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(三)臨床意義1．沙眼衣原體沙眼生物變種有18個(gè)血清型，D-K型引起NGU；A、D、B引起沙眼。2．由衣原體引起的性傳播疾病，發(fā)病率呈明顯上升趨勢(shì)，引起全世界重視，并將此列為獨(dú)立的性傳播疾病。常可引起女性不孕、男性不育癥。此病常臨床癥狀輕或隱性感染。第70頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三七、性傳播支原體感染的檢查(一)微生物檢驗(yàn)1.取宮頸分泌物、男性分泌物和無菌中段尿或感染部位標(biāo)本。2.將標(biāo)本涂片、革蘭染色或Giemsa染色鏡檢。因支原體無固定形態(tài),故意義不大。3.PCR檢測(cè)支原體DNA,敏感性特異性均高，且快速，但應(yīng)避免假陽性。4.支原體營(yíng)養(yǎng)要求高，選用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng),可見典型呈“油煎蛋狀”菌落，為陽性。目前實(shí)驗(yàn)室檢查的金標(biāo)準(zhǔn)為細(xì)菌培養(yǎng)。第71頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(二)臨床意義1．解脲脲原體為條件致病菌，故應(yīng)結(jié)合臨床考慮診斷和治療。2．NGU并非都由沙眼衣原體和支原體所引起，還有其他微生物可引起，因此應(yīng)結(jié)合臨床考慮診斷及治療。3.支原體所致的STD呈上升趨勢(shì)，應(yīng)引起重視。也引起女性不孕、習(xí)慣性流產(chǎn)不育等危害。第72頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三八、性傳播病毒性感染的檢查(一)微生物檢驗(yàn)1．CA的檢查金標(biāo)準(zhǔn)是PCR(1)醋酸白試驗(yàn)：病變局部出現(xiàn)白色丘疹或白斑為陽性，因是非特異性檢查，亦有假陽性。第73頁，講稿共81頁，2023年5月2日，星期三(2)細(xì)胞學(xué)檢查：陰道壁或?qū)m頸細(xì)胞涂片作巴氏染色檢查，見空泡化細(xì)胞及角化