淋巴細(xì)胞活化的分子機制

第十二章淋巴細(xì)胞活化的分子機制以及應(yīng)答過程淋巴細(xì)胞活化是指淋巴細(xì)胞在抗原或致分裂原刺激下所發(fā)生的一系列細(xì)胞生物化學(xué)變化過程，包括細(xì)胞活化信號的傳遞、多種相關(guān)酶的活化。細(xì)胞最終分裂成子代淋巴細(xì)胞并分化成熟為各種亞群的淋巴細(xì)胞，發(fā)揮各自的免疫功能。本文檔共158頁；當(dāng)前第1頁；編輯于星期二\17點7分第一節(jié)細(xì)胞信號傳遞系統(tǒng)的分子基礎(chǔ)細(xì)胞的信號傳遞系統(tǒng)可以概括為受體-信號放大器-效應(yīng)器三大組成部分。受體負(fù)責(zé)識別和接收外界信號或刺激，繼而激活胞內(nèi)信號放大系統(tǒng)，再由胞內(nèi)信息分子將轉(zhuǎn)導(dǎo)后的信號傳遞至靶分子，引起包括酶活性、基因表達(dá)、膜通透性改變等一系列生理或病理效應(yīng)。在上述復(fù)雜的信號傳遞系統(tǒng)中，蛋白質(zhì)（即信號分子）的可逆性磷酸化作用就如同“分子開關(guān)”一樣，調(diào)節(jié)信號傳遞途徑的暢通無阻。本文檔共158頁；當(dāng)前第2頁；編輯于星期二\17點7分信使分子按其功能大致可分為三類：第一信使：指細(xì)胞外的信息分子，如激素、CKs等。第二信使：胞內(nèi)的信息分子稱為第二信使，包括cAMP、cGMP、Ca2+、DAG、NO、神經(jīng)酰胺等。第三信使：指一類專在胞漿和細(xì)胞核之間進行信息傳遞的信使分子。它們多半是DNA結(jié)合蛋白或轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，參與基因的表達(dá)調(diào)控。這類核蛋白又稱之為“核內(nèi)第三信使”。本文檔共158頁；當(dāng)前第3頁；編輯于星期二\17點7分第二節(jié)

細(xì)胞信號傳遞過程中所涉及的酶

和接頭蛋白本文檔共158頁；當(dāng)前第4頁；編輯于星期二\17點7分一、蛋白酪氨酸激酶蛋白酪氨酸激酶(proteintyrosinekinase,PTK)是一類催化ATP上γ-磷酸轉(zhuǎn)移到蛋白酪氨酸殘基上的激酶，能催化多種底物蛋白質(zhì)酪氨酸殘基磷酸化，在細(xì)胞生長、增殖、分化中具有重要作用。迄今發(fā)現(xiàn)的蛋白酪氨激酶中多數(shù)是屬于致癌RNA病毒的癌基因產(chǎn)物，也可由脊椎動物的原癌基因產(chǎn)生。根據(jù)PTK是否存在于細(xì)胞膜受體可將其分成非受體型和受體型。本文檔共158頁；當(dāng)前第5頁；編輯于星期二\17點7分（一）非受體型PTKSrc家族：包括p60src、p56lck、p59fyn、p59yes、(p62yes)、p56lyn、p59hck、p55fgr和p55blk等。Syk家族：包括Syk和ZAP-70Tec家族：包括Btk、Tec、Itk、DSrc29、Etk和Rlk。這些PTKs缺乏胞外及跨膜序列，因此通過其N末端與細(xì)胞膜表面蛋白的胞漿內(nèi)結(jié)構(gòu)域相連接，從而發(fā)揮信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。本文檔共158頁；當(dāng)前第6頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第7頁；編輯于星期二\17點7分1．Lckp56lck是分子量為56kDa的單鏈分子，由509個氨基酸殘基組成。Lck分子結(jié)構(gòu)可以分為四個功能區(qū):①膜接觸區(qū)，位于N-端，N-端第2位Gly能結(jié)合豆蔻酸，通過豆蔻酸(myristicacid)與細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)面相連；②底物作用區(qū)，包括SH2和SH3結(jié)構(gòu)域；③激酶活性區(qū)，即SH1結(jié)構(gòu)域，這一區(qū)域在氨基酸組成上與其它src家族成員高度同源。其中273位的賴氨酸（Lys）是ATP結(jié)合點，394位的酪氨酸（Tyr）為自身磷酸化位點；④調(diào)節(jié)區(qū)，位于羧基端，與Lck激酶活性的調(diào)節(jié)有關(guān)。Tyr505是調(diào)節(jié)性磷酸化位點。本文檔共158頁；當(dāng)前第8頁；編輯于星期二\17點7分

調(diào)節(jié)區(qū)在靜止細(xì)胞中，Lck

在Tyr505上發(fā)生磷酸化，但當(dāng)細(xì)胞活化時這個殘基則發(fā)生去磷酸化，隨之發(fā)生激酶的活化以及Tyr394的自身磷酸化。目前研究認(rèn)為，CD45通過使Tyr505去磷酸化對Lck起正調(diào)控作用；而p50csk是使Tyr505發(fā)生磷酸化對Lck則起負(fù)調(diào)控作用。CD45和p50csk對其它src家族PTKs也發(fā)揮著同樣的調(diào)節(jié)作用。本文檔共158頁；當(dāng)前第9頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第10頁；編輯于星期二\17點7分信號分子的特殊結(jié)構(gòu)域——SH結(jié)構(gòu)域：src同源區(qū)2(srchomology2,SH-2)是一個保守的蛋白序列，約有100個氨基酸殘基組成，能夠識別蛋白中磷酸化的酪氨酸殘基。src同源區(qū)3(SH-3)，為一個保守的氨基酸序列，約含50個氨基酸，可見于多種胞漿信號蛋白以及肌動蛋白結(jié)合蛋白中。目前研究發(fā)現(xiàn)SH-3識別的部位是一些富含脯氨酸的區(qū)域。本文檔共158頁；當(dāng)前第11頁；編輯于星期二\17點7分

2．Fynp59fyn見于多種細(xì)胞中。Fyn基本結(jié)構(gòu)類似于Lck。它通過氨基末端豆蔻酸的基團共價結(jié)合于胞漿膜內(nèi)面，F(xiàn)yn有一個自身磷酸化位點Tyr417，羧基末端有一個負(fù)調(diào)控功能域，包括含有一個酪氨酸磷酸化位點Tyr528。Fyn與TCR/CD3鏈結(jié)合，F(xiàn)yn的活化可引起CD3鏈的磷酸化。本文檔共158頁；當(dāng)前第12頁；編輯于星期二\17點7分

3．Lyn

Lyn也是一種主要分布于造血細(xì)胞的非受體型PTK。在B細(xì)胞中，Lyn參與BCR，CD19和CD40等的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。本文檔共158頁；當(dāng)前第13頁；編輯于星期二\17點7分4．Syk家族

Syk家族有Syk和ZAP－70兩個成員，二者結(jié)構(gòu)相似，在N端有兩個SH2結(jié)構(gòu)域，C端有一個SH1激酶結(jié)構(gòu)域。兩個SH2結(jié)構(gòu)域可與多種刺激性免疫受體胞漿區(qū)的活化ITAM基序結(jié)合，介導(dǎo)多種受體引起的細(xì)胞活化信號。Syk家族分子的激活一般晚于Src家族。

（1）SykSyk（spleentyrosinekinase）表達(dá)于大部分造血細(xì)胞，B細(xì)胞表達(dá)水平最高。

（2）ZAP-70

最早發(fā)現(xiàn)與TCR復(fù)合體中的CD3鏈相關(guān)，所以稱為相關(guān)蛋白（－associatedprotein,ZAP-70）。ZAP-70分子量為70kDa，主要表達(dá)在T細(xì)胞和NK細(xì)胞。本文檔共158頁；當(dāng)前第14頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第15頁；編輯于星期二\17點7分（二）受體型PTK受體型PTK屬于I型跨膜分子，胞膜外區(qū)一般結(jié)構(gòu)復(fù)雜且高度糖基化，可以結(jié)合相應(yīng)的配體。激酶結(jié)構(gòu)位于胞漿區(qū)，激酶結(jié)構(gòu)中有一個ATP結(jié)合基序。另外，一般在胞漿區(qū)含有一定數(shù)量的自身磷酸化位點。根據(jù)它們的結(jié)構(gòu)不同，受體型酪氨酸激酶可以分為9種類型,其中較常見的有4種。受體型酪氨酸蛋白激酶活化后可激活胞漿中多種分子，如STAT、PLC、PI-3K、GAP、Raf等。本文檔共158頁；當(dāng)前第16頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第17頁；編輯于星期二\17點7分二、蛋白酪氨酸磷酸酯酶T細(xì)胞活化中所發(fā)生的多種蛋白分子酪氨酸磷酸化提示必需有蛋白酪氨酸磷酸酯酶(proteintyrosinephosphatase,PTP/PTPase)來拮抗這種作用，通過負(fù)反饋來維持機體生理功能的平衡。本文檔共158頁；當(dāng)前第18頁；編輯于星期二\17點7分（一）受體型PTP——CD451．CD45的基本結(jié)構(gòu)與分布

CD45是位于白細(xì)胞表面的白細(xì)胞共同抗原(leukocytecommonantigen,LCA)。CD45可以高水平表達(dá)在淋巴細(xì)胞以及除了紅細(xì)胞和血小板之外的其它所有的造血細(xì)胞上。CD45為單鏈跨膜蛋白。2．CD45的異構(gòu)型

CD45分子一個明顯的特點是存在結(jié)構(gòu)和分子量不同的異型(isoform)。CD45異型產(chǎn)生的分子基礎(chǔ)是由于CD45mRNA水平的不同拼接所致，另外由于翻譯后糖基化修飾不同，更增加了CD45分子的多樣性。最著名的CD45異構(gòu)型是CD45R。本文檔共158頁；當(dāng)前第19頁；編輯于星期二\17點7分

3．CD45分子的配體

CD22?4．CD45分子的功能

CD45直接參與TCR和BCR介導(dǎo)的活化信號，在淋巴細(xì)胞的活化過程中起重要作用。CD45的底物主要是Src家族成員，如Lck、Fyn、Lyn等。靜止T細(xì)胞中Lck是無活性的，其分子的505位點氨基酸被磷酸化。Lck激酶活性的升高是與Tyr505去磷酸化相一致。

CD45也可使有活性激酶中主要自身磷酸化Tyr394發(fā)生去磷酸化，從而引起激酶活性的抑制。

本文檔共158頁；當(dāng)前第20頁；編輯于星期二\17點7分5．Ca2+濃度與CD45活化的關(guān)系

活化T細(xì)胞內(nèi)酪氨酸磷酸化水平升高與細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度升高相關(guān)，推測高濃度鈣離子可能對CD45具有負(fù)調(diào)控作用?？乖琓CR結(jié)合，隨后CD4和CD45發(fā)生共凝集，從而導(dǎo)致CD45介導(dǎo)的p56lck去磷酸化而活化，細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平的突然升高又可滅活CD45，從而使二級底物發(fā)生短暫的酪氨酸磷酸化以及活化信號的傳遞；隨后細(xì)胞內(nèi)鈣離子水平又回到最初的水平，CD45也從無活性狀態(tài)中恢復(fù)過來，使p56lck在Tyr394位點發(fā)生去磷酸化而滅活，以及其它能終止信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑起始步驟中起關(guān)鍵作用的酶發(fā)生去磷酸化。本文檔共158頁；當(dāng)前第21頁；編輯于星期二\17點7分（二）非受體型PTP

1．SH2-containingtyrosinephosphatase1（SHP-1）分布局限，僅表達(dá)于造血細(xì)胞（紅細(xì)胞和血小板除外）。SHP-1是造血細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的一種重要的負(fù)調(diào)控因素。SHP-1的作用機制是：一方面通過SH2結(jié)構(gòu)域與磷酸化的ITIM基序結(jié)合；另一方面通過PTP酶活性使底物去磷酸化而被滅活。2.SHP-2

與SHP-1不同，SHP-2表達(dá)十分廣泛，在不同的條件下，SHP-2可發(fā)揮正的或負(fù)的調(diào)節(jié)作用本文檔共158頁；當(dāng)前第22頁；編輯于星期二\17點7分三、蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶是機體中分布十分廣泛的蛋白激酶，種類繁多，調(diào)節(jié)機制也十分復(fù)雜。此處僅介紹PKC和MAPK。本文檔共158頁；當(dāng)前第23頁；編輯于星期二\17點7分

（一）蛋白激酶C（PKC）PKC(proteinkinaseC)是一類Ca2+、磷脂依賴性的蛋白激酶，在跨膜信號傳遞過程中起著重要作用。PKC通過催化多種蛋白質(zhì)上Ser/Thr磷酸化，調(diào)節(jié)多種細(xì)胞的代謝、生長、增殖和分化。本文檔共158頁；當(dāng)前第24頁；編輯于星期二\17點7分

1．PKC的結(jié)構(gòu)和分類PKC的所有亞類都由一條單肽鏈組成，分子量大約為6783kDa，其結(jié)構(gòu)可分為四個保守區(qū)C1C4(nPKC和aPKC缺少C2區(qū))和五個可變區(qū)V1V5。其中C1區(qū)可能是膜結(jié)合區(qū)。此區(qū)中的序列與佛波酯和二酰甘油(DAG)的結(jié)合有關(guān)。C2區(qū)與PKC對Ca2+的敏感性有關(guān)。C1和C2在結(jié)構(gòu)上不同于其它蛋白激酶，能結(jié)合Ca2+、磷脂、DAG和TPA，因此C1和C2區(qū)又稱為調(diào)節(jié)區(qū)。C3區(qū)包括一個ATP結(jié)合序列，該區(qū)域與其它蛋白激酶的ATP結(jié)合位點具有很高的同源性，又稱催化區(qū)。C4區(qū)包含一個底物結(jié)合區(qū)，是識別磷酸化底物所必需的。本文檔共158頁；當(dāng)前第25頁；編輯于星期二\17點7分

2．PKC的轉(zhuǎn)位與激活PKC廣泛分布于多種組織、器官和細(xì)胞，靜止細(xì)胞中PKC主要存在于胞漿中，當(dāng)細(xì)胞受到刺激后，PKC以Ca2+依賴的形式從胞漿中移位到細(xì)胞膜上，此過程稱之為轉(zhuǎn)位(translocation)。一般將PKC的轉(zhuǎn)位作為PKC激活的標(biāo)志。靜止細(xì)胞中PKC一般以非活化形式存在。PKC的活性依賴于鈣離子和磷脂的存在，但只有在DAG存在下，生理濃度的鈣離子才起作用，這是由于DAG能增加PKC對底物親和力的緣故。PIP2在PLC作用下水解生成DAG和IP3。IP3促進細(xì)胞內(nèi)鈣離子的釋放，在激活PKC過程中與DAG起協(xié)同作用。

本文檔共158頁；當(dāng)前第26頁；編輯于星期二\17點7分

乙酸豆寇佛波酯(TPA;或PMA)是一種促腫瘤劑，由于其結(jié)構(gòu)與DAG相似，可在很低濃度下模擬DAG，活化PKC。由于TPA與PKC的結(jié)合牢固，使PKC處于持續(xù)的激活狀態(tài)，易導(dǎo)致代謝紊亂。3．PKC的抑制劑多種化學(xué)物質(zhì)或抗生素對PKC活性具有抑制作用，根據(jù)抑制劑作用PKC靶部位的不同可以將抑制劑分為二組:一組是作用于催化區(qū)的抑制劑，它們可與蛋白激酶的保守殘基結(jié)合，因此對PKC無明顯的選擇性；另一組是作用于調(diào)節(jié)區(qū)的抑制劑，它們可與Ca2+、磷脂和二?；视?佛波酯相結(jié)合，因而有較高的選擇性。本文檔共158頁；當(dāng)前第27頁；編輯于星期二\17點7分

（二）MAP激酶絲裂原活化的蛋白激酶（mitogenactivatedproteinkinase,MAPK）是一組可以被多種細(xì)胞外信號激活的蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶。MAPK主要參與生長因子、激素、細(xì)胞因子、應(yīng)激等各種刺激下的細(xì)胞反應(yīng)，以及細(xì)胞的生長、分化等。MAPK屬于一種Ser/Thr蛋白激酶，可在多種不同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中充當(dāng)一種共同的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)成份，且在細(xì)胞周期調(diào)控中發(fā)揮重要的作用。在T細(xì)胞中有三種主要的MAP激酶，ERK、JNK和p38。本文檔共158頁；當(dāng)前第28頁；編輯于星期二\17點7分

1．ERK（extracellularreceptor-activatedkinase）當(dāng)細(xì)胞膜受體與配體結(jié)合后，通過受體型PTK的作用，使Sos（一種GEF）轉(zhuǎn)位到膜內(nèi)側(cè)，催化Ras-GTP途徑激活，后者作用于Raf，引起絲氨酸/蘇氨酸激酶活性激活。Raf引起MEK1和MEK2的絲氨酸磷酸化并使之激活。MEK1和MEK2是雙特異性蛋白激酶，可以使ERK1和ERK2的202204位的TET序列中的酪氨酸和絲氨酸殘基發(fā)生磷酸化并激活。最終活化的ERK使ELK磷酸化，ELK使c-fos基因轉(zhuǎn)錄，F(xiàn)os蛋白是AP-1的組成成分之一。本文檔共158頁；當(dāng)前第29頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第30頁；編輯于星期二\17點7分2．JNK（c-junN-terminalkinase）

JNK是由與Ras平行的Rac-GTP途徑激活的。Grb2連接Vav，Vav使Rac-GDP釋放GDP，然后Rac連接GTP成為Rac-GTP，通過MAP激酶的級聯(lián)反應(yīng)最終活化JNK，JNK使Jun蛋白磷酸化，Jun是AP-1的另外一個組成成分。3．p38

激活p38的因素與JNK相似?；罨膒38轉(zhuǎn)位到細(xì)胞核內(nèi)，作用于核內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子，引起基因的轉(zhuǎn)錄。本文檔共158頁；當(dāng)前第31頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第32頁；編輯于星期二\17點7分四、G蛋白和小G蛋白本文檔共158頁；當(dāng)前第33頁；編輯于星期二\17點7分

（一）G蛋白G蛋白既參與由TCR/CD3、PLC介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)，又在B細(xì)胞BCR介導(dǎo)的信號傳導(dǎo)中發(fā)揮作用。G蛋白屬于作用于受體和效應(yīng)器之間的偶聯(lián)蛋白。由于它們能結(jié)合并水解GTP，故稱之為G蛋白，又稱鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白（guaninenucleotideregulatoryprotein）。G蛋白偶聯(lián)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)是由G蛋白、G蛋白偶聯(lián)體和效應(yīng)系統(tǒng)共同組成的信號傳導(dǎo)單位。本文檔共158頁；當(dāng)前第34頁；編輯于星期二\17點7分

1．受體

G蛋白受體分子量為4045kD，由一條單鏈形成的7個螺旋的跨膜結(jié)構(gòu)，反復(fù)7次穿越細(xì)胞膜，其中C末端和第5、6跨膜區(qū)螺旋為G蛋白結(jié)合部位。

幾乎所有與G蛋白偶聯(lián)的受體都有相似的氨基酸順序。本文檔共158頁；當(dāng)前第35頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第36頁；編輯于星期二\17點7分2．G蛋白的分子結(jié)構(gòu)與分類

G蛋白屬于一個龐大的三聚體同源蛋白家族，種類已多達(dá)40余種，大多數(shù)存在于細(xì)胞膜上，由α、β、γ三個不同的亞單位構(gòu)成，總分子量為100kDa左右。其中β亞單位在多數(shù)G蛋白中都非常類似，分子量36kDa左右。γ亞單位分子量在811kDa之間，除Gt外，大多數(shù)G蛋白的γ亞單位都是相同的。βγ兩個亞單位結(jié)合緊密，只有當(dāng)?shù)鞍鬃冃詴r才使之分開。各種G蛋白的差別主要在α亞單位，根據(jù)α亞單位的不同可以將G蛋白分為Gs、Gi、Go、Gq、G?及Gt等六類。這些不同類型的G蛋白在信號傳遞過程各自發(fā)揮不同的作用。本文檔共158頁；當(dāng)前第37頁；編輯于星期二\17點7分

除此之外，在細(xì)胞內(nèi)還存在另一類G蛋白，這類G蛋白具有鳥核苷酸的結(jié)合位點，有GTP酶活性，其功能也受鳥核苷酸調(diào)節(jié)，但與跨膜信息傳遞似乎無直接相關(guān)。在結(jié)構(gòu)上不同于前述的G蛋白，分子量較小，在2030kDa之間，不是以α、β、γ三聚體方式存在，而是單體分子，因此被稱為小G蛋白(smallGproteins)。如ras表達(dá)產(chǎn)物為一種小G蛋白。本文檔共158頁；當(dāng)前第38頁；編輯于星期二\17點7分

3．G蛋白循環(huán)受體(R)在與配體(L)結(jié)合之前是與G蛋白分離的，G蛋白的3個亞基呈聚合態(tài)，并與GDP結(jié)合成G-GDP形式，此時的受體呈低親和力，以RL表示。受體與配體結(jié)合被激活后，形成L-RH-G復(fù)合物，其中RH表示受體己從低親和力轉(zhuǎn)為高親和力狀態(tài)，同時GDP從亞基上釋放出來。

在Mg2+存在時，GTP將取代GDP與G亞基結(jié)合，并進一步使整個復(fù)合體解聚為三部分：RL(又恢復(fù)為低親和力受體)、G復(fù)合體和激活后的Gs-GTP。后者可進一步激活效應(yīng)器，即腺苷酸環(huán)化酶。Gs亞基本身具有GTP水解酶活性，將所結(jié)合的GTP水解為Gs-GDP后，再與G亞基結(jié)合，重新形成Gs原先的三聚體形式。本文檔共158頁；當(dāng)前第39頁；編輯于星期二\17點7分

本文檔共158頁；當(dāng)前第40頁；編輯于星期二\17點7分4．G蛋白偶聯(lián)的信號系統(tǒng)

（1）與腺苷酸環(huán)化酶相關(guān)的信號傳遞系統(tǒng)

Gs和Gi蛋白通過不同的機制激活或抑制細(xì)胞上的腺苷酸環(huán)化酶(AC)體系。腺苷酸環(huán)化酶可使ATP水解并環(huán)化生成cAMP。細(xì)胞內(nèi)cAMP水平的改變及激活依賴于cAMP的蛋白激酶(PKA)。

（2）與cAMP磷酸二脂酶相關(guān)的信號傳遞系統(tǒng)該系統(tǒng)是與視覺信號傳遞有關(guān)的效應(yīng)系統(tǒng)。

（3）與磷脂酶C相關(guān)的信號傳遞系統(tǒng)磷脂酶C(PLC)是存在于細(xì)胞膜漿膜面上的一種關(guān)鍵酶類，有9種異構(gòu)體，可分為α、β、γ和δ四組。在T細(xì)胞活化過程中，參與信號傳遞的主要為PLC-亞型。本文檔共158頁；當(dāng)前第41頁；編輯于星期二\17點7分

（二）小G蛋白小G蛋白是一組分子量約2025kDa的單體鳥苷酸結(jié)合蛋白。雖然沒有G蛋白的三聚體形式，但具備了G蛋白的功能特點。有著廣泛的調(diào)節(jié)功能。本文檔共158頁；當(dāng)前第42頁；編輯于星期二\17點7分

1．Ras途徑參與信號傳遞過程的Ras蛋白是c-ras基因的產(chǎn)物，屬于一類低分子量(2lkDa)的G蛋白，具有GTP結(jié)合活性和水解活性(即GTPase活性)，又稱為p21ras蛋白。Ras蛋白具有兩種可以互變的構(gòu)象(Ras-GDP、Ras-GTP),只有呈Ras-GTP構(gòu)象時才能激活Ras蛋白下游的信號傳遞過程，故Ras蛋白在信號傳遞途徑中起“開關(guān)”樣作用。Ras蛋白本身不含有疏水區(qū)，但是可通過翻譯后的化學(xué)修飾過程，使其C-末端的半胱氨酸殘基被脂肪?；揎?，藉此與細(xì)胞膜結(jié)合。因此，Ras蛋白與細(xì)胞膜的結(jié)合過程為其功能所必需。本文檔共158頁；當(dāng)前第43頁；編輯于星期二\17點7分

Ras蛋白的激活有賴Sos蛋白。Sos蛋白(thesonofsevenless蛋白)，是一種鳥嘌呤核苷酸交換因子（guanineexchangefactor,GEF）。Sos蛋白原來在胞漿中是以無活性的分算狀態(tài)存在的。當(dāng)受體與配體結(jié)合.Grb2中的SH-2區(qū)域則與受體PTK所催化的自身磷酸化的某些位點結(jié)合，Grb2含有SH3結(jié)構(gòu)域可以和富含脯氨酸的Sos蛋白結(jié)合并聚集。形成受體-Grb2-Sos復(fù)合物，從而使細(xì)胞漿中分散的Grb2-Sos富集于膜內(nèi)側(cè)。聚集起來的Sos具有GEF活性，可使Ras-GDP釋放出GDP，然后Ras蛋白迅速與GTP結(jié)合，變?yōu)镽as-GTP活化形式。此外，還有一種GTP水解酶的激活蛋白(GAP)，可與Ras-GTP結(jié)合，并激活其GTPase活性。本文檔共158頁；當(dāng)前第44頁；編輯于星期二\17點7分

在信號傳遞系統(tǒng)中，Ras蛋白的“下游”通路與蛋白質(zhì)絲氨酸和蘇氨酸的磷酸化反應(yīng)有關(guān)?，F(xiàn)已證明，從酵母至哺乳類細(xì)胞中，均存在著非常相似的蛋白質(zhì)磷酸化級聯(lián)反應(yīng)系統(tǒng)，涉及Raf-1、MAPK激酶系統(tǒng)。Raf-1是PKC的天然底物，又是一個潛在的Ser／Thr蛋白激酶，其分子中有3個以上的磷酸化位點。Raf-1可由兩條途徑被激活，即活化的Ras蛋白介導(dǎo)的途徑和PKC介導(dǎo)的途徑，二者可以交匯。Raf作用于ERK激酶途徑，最終使c-fos基因啟動，產(chǎn)生Fos蛋白，而Fos蛋白是組成轉(zhuǎn)錄因子AP-1的主要組成成分。本文檔共158頁；當(dāng)前第45頁；編輯于星期二\17點7分2．Rac途徑Vav蛋白參與的Rac作用途徑。Vav蛋白是c-vav基因的產(chǎn)物，分子中含1個SH-2結(jié)構(gòu)和2個SH-3結(jié)構(gòu)，還有1個亮氨酸拉鏈區(qū)、1個核定位信號序列。TCR發(fā)生交聯(lián)后的T細(xì)胞以及經(jīng)EGF-R、PDGF-R、IgE-R以及IgM-R刺激途徑的其它細(xì)胞類型如成纖維細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞均有Vav蛋白的募集，并具有了GEF活性，Vav蛋白使Rac-GDP釋放GDP而變成游離的Rac，然后Rac結(jié)合GTP而成為有活性的Rac－GTP。Rac-GTP使JNK磷酸化而活化，后者使Jun蛋白磷酸化。而磷酸化的Jun和新合成的Fos蛋白組成轉(zhuǎn)錄因子AP-1。本文檔共158頁；當(dāng)前第46頁；編輯于星期二\17點7分五、參與磷脂代謝的酶本文檔共158頁；當(dāng)前第47頁；編輯于星期二\17點7分

（一）磷脂酶C磷脂酶C（phospholipaseC,PLC）是存在于胞漿膜上一個關(guān)鍵酶，有9種異構(gòu)體，分為、、和四組。PLC作用于PIP2產(chǎn)生三磷酸肌醇(IP3)和二?；视?DAG)，IP3和DAG是淋巴細(xì)胞活化的重要信號。除PLC

組外，其余PLC組均不具有跨膜序列，所以PLC在水解PIP2時必須與細(xì)胞膜結(jié)合。在淋巴細(xì)胞活化過程中，參與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的主要為PLC。PLC

為單鏈分子，分子量約140kDa。PLC

分子結(jié)構(gòu)中包括2個SH2結(jié)構(gòu)域和一個SH3結(jié)構(gòu)域。本文檔共158頁；當(dāng)前第48頁；編輯于星期二\17點7分

當(dāng)受體受到活化刺激后，引起胞漿中與之相鄰的Src家族的PTK活化，并進而引起Syk/ZAP-70家族活化。這些活化的蛋白激酶，以及本身具有PTK活性的膜受體等活化后，可以直接通過磷酸化作用活化PLC，也可通過PI-3K誘導(dǎo)PIP3的產(chǎn)生而激活PLC。PIP3一方面直接誘導(dǎo)PLC

活化，另一方面還可以誘導(dǎo)胞漿中Tec家族PTK活性，通過Tec家族PTK的磷酸化作用促進PLC的活化。

本文檔共158頁；當(dāng)前第49頁；編輯于星期二\17點7分活化的PLC

水解磷脂酰4，5-二磷酸肌醇（PIP2），形成1，4，5-三磷酸肌醇（IP3）和1,2-酰基甘油(diacylglycerol,DAG）第二信使。IP3的作用是與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的受體結(jié)合，使Ca2+從胞內(nèi)貯備中釋放出來，并打開細(xì)胞膜上離子通道讓胞外Ca2+進入細(xì)胞內(nèi)，最終導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高。DAG則可特異地激活蛋白激酶C（PKC），提高PKC對底物的親和力，從而啟動下游蛋白磷酸化級聯(lián)反應(yīng)，引起細(xì)胞活化、基因轉(zhuǎn)錄。本文檔共158頁；當(dāng)前第50頁；編輯于星期二\17點7分

（二）PI-3激酶PI-3Kinase（PI-3K）由p110和p85兩個亞單位組成。p85亞單位含有SH2和SH3結(jié)構(gòu)域，能與上游分子磷酸化的酪氨酸殘基相連。P110亞單位是酶活性區(qū)，不但具有脂激酶活性，而且還具有蛋白激酶活性?；罨腜I-3K能使PI變成PIP2，有利于磷脂酰肌醇信號傳遞途徑。PI-3K還能活化PKC。本文檔共158頁；當(dāng)前第51頁；編輯于星期二\17點7分六、接頭蛋白接頭蛋白（adapterprotein）具有可攜帶許多信號分子進入到特定細(xì)胞器的功能，以此來促進信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。接頭蛋白含有可與其它蛋白分子結(jié)合的區(qū)域，起承上啟下的作用。接頭蛋白有跨膜和胞漿兩種形式，在淋巴細(xì)胞識別抗原后發(fā)揮迅速募集信號分子和促進級聯(lián)反應(yīng)建立的作用。

本文檔共158頁；當(dāng)前第52頁；編輯于星期二\17點7分

（一）LATLAT（linkerforactivationofTcells）主要表達(dá)于T細(xì)胞等。LAT是一種I型膜蛋白，包括較短的N端胞膜外區(qū)，跨膜區(qū)和較長的胞漿區(qū)。LAT含有多個酪氨酸磷酸化位點。LAT在ZAP-70的作用下發(fā)生酪氨酸磷酸化并進而結(jié)合Grb2,PLC,PI-3K等多種下游分子。LAT跨膜區(qū)附近的二個半胱氨酸是棕櫚?；奈稽c，使LAT成為脂筏結(jié)構(gòu)中的一個重要分子。本文檔共158頁；當(dāng)前第53頁；編輯于星期二\17點7分

（二）SLP-76SLP-76（SH2domain-containingleukocytePhosphoproteinof76kDa）是一個533個氨基酸的造血細(xì)胞特異性接頭蛋白，N端有三個酪氨酸磷酸化位點，可以結(jié)合Vav蛋白；分子中部有一段富含脯氨酸的序列，可結(jié)合Grb2的SH3結(jié)構(gòu)域；C端有一個SH2結(jié)構(gòu)域，可結(jié)合多種蛋白質(zhì)的磷酸化酪氨酸序列。SLP-76在T細(xì)胞抗原受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中起著中樞性的調(diào)控作用。本文檔共158頁；當(dāng)前第54頁；編輯于星期二\17點7分

（三）Grb2Grb2(growthfactorreceptor–bindingprotein2)是最典型的接頭蛋白，N端和C端分別有一個SH3結(jié)構(gòu)域，中間夾著一個SH2結(jié)構(gòu)域。Grb2分布廣泛，在生長因子受體和淋巴細(xì)胞抗原受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要作用。本文檔共158頁；當(dāng)前第55頁；編輯于星期二\17點7分

（四）Cbl-b1995年,KeaneMM等克隆了一種新的基因cbl-b,它與原癌基因c-cbl(cell-casitasBlineagelymphoma,c-cbl)有驚人的核苷酸和氨基酸同源性。其編碼的蛋白稱為Cbl-b

(CasitasB-celllineagelymphoma-b,cbl-b),分子量約108kDa。Cbl-b蛋白的結(jié)構(gòu)類似c-Cbl蛋白,同樣含有一個富脯氨酸結(jié)構(gòu)域、一個核定位信號、一個C3HC4鋅指和一個假定的亮氨酸拉鏈。Cbl-b蛋白與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白相互作用,調(diào)節(jié)它們的作用或受它們的調(diào)節(jié)?？乖碳ず?，T細(xì)胞和B細(xì)胞中的Cbl-b發(fā)生酪氨酸磷酸化，結(jié)合PI-3Kp85亞單位和Vav蛋白。Cbl-b是多個PTK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中進化保守的負(fù)調(diào)節(jié)分子。本文檔共158頁；當(dāng)前第56頁；編輯于星期二\17點7分第三節(jié)T細(xì)胞的活化與應(yīng)答過程T淋巴細(xì)胞介導(dǎo)的免疫應(yīng)答也稱細(xì)胞免疫應(yīng)答，可分為三個階段：①T細(xì)胞特異性識別抗原階段；②T細(xì)胞活化、增殖和分化階段；③效應(yīng)性T細(xì)胞的產(chǎn)生及效應(yīng)階段。

本文檔共158頁；當(dāng)前第57頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第58頁；編輯于星期二\17點7分一、T細(xì)胞對抗原的識別T細(xì)胞通過TCR識別并結(jié)合APC表面MHC分子遞呈的抗原多肽。CD4+T細(xì)胞的TCR是與MHCII類分子所遞呈的抗原肽結(jié)合，而CD8+T細(xì)胞的TCR則與MHCI類分子所遞呈的抗原肽結(jié)合。T細(xì)胞識別抗原，依賴于抗原肽-MHC-TCR三元件，因而抗原肽激活T細(xì)胞表現(xiàn)出抗原特異性及MHC限制性。超抗原只是選擇性地結(jié)合到TCRV區(qū)和MHCII類分子的外側(cè)，不受MHC的限制。本文檔共158頁；當(dāng)前第59頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第60頁；編輯于星期二\17點7分二、T細(xì)胞與APC的特異性結(jié)合若TCR能識別相應(yīng)的抗原肽-MHC分子復(fù)合物，則T細(xì)胞與APC發(fā)生特異性結(jié)合，并由CD3分子向胞內(nèi)傳遞特異性識別信號，導(dǎo)致抗原特異性T細(xì)胞的激活和增殖。T細(xì)胞的CD4和CD8分子是TCR識別抗原的輔助受體，可分別與MHCⅡ類分子和MHCⅠ類分子結(jié)合，增強TCR與抗原肽-MHC分子結(jié)合的親和力。APC和T細(xì)胞表面還表達(dá)參與細(xì)胞間相互作用的多種免疫分子對，其中一些又稱為共刺激分子。協(xié)同刺激信號（co-stimulatorysignal）。本文檔共158頁；當(dāng)前第61頁；編輯于星期二\17點7分

本文檔共158頁；當(dāng)前第62頁；編輯于星期二\17點7分

T細(xì)胞與APC之間的物理接觸是抗原識別的基礎(chǔ)。TCR與MHC-抗原肽復(fù)合物之間的親和力較低，不足以單獨介導(dǎo)T細(xì)胞與APC之間的穩(wěn)定粘附。由TCR復(fù)合物介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)需要較長時間或反復(fù)的TCR與MHC-抗原肽之間的接合（engagement）。因此，T細(xì)胞與APC表面黏附分子之間的相互作用使上述接合成為可能。T細(xì)胞表面表達(dá)多種黏附分子，與APC表面的黏附分子以受體-配體相互作用使二者得以緊密接觸，在細(xì)胞與細(xì)胞接觸的部位形成了一個瞬時性的特殊結(jié)構(gòu)，稱為免疫突觸（immunologicalsynapse）。本文檔共158頁；當(dāng)前第63頁；編輯于星期二\17點7分

免疫突觸是指T細(xì)胞在和APC識別結(jié)合過程中，多種跨膜分子聚集在富含神經(jīng)鞘磷脂和膽固醇的“脂筏”（raft）狀結(jié)構(gòu)上，并相互靠攏成簇，形成細(xì)胞間相互結(jié)合的部位，在免疫突觸形成的后期，其中心區(qū)為TCR和抗原肽-MHC分子復(fù)合物，以及T細(xì)胞膜輔助分子和其相應(yīng)配體，周圍環(huán)行分布著大量的其他細(xì)胞黏附分子。免疫突觸的形成是TCR、黏附分子與細(xì)胞骨架共同作用的結(jié)果。此結(jié)構(gòu)有助于增強TCR與抗原肽-MHC復(fù)合物相互作用的親和力和促進T細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子的相互作用、信號通路的激活及細(xì)胞內(nèi)亞微結(jié)構(gòu)極化，涉及到細(xì)胞骨架系統(tǒng)和細(xì)胞器的結(jié)構(gòu)及功能變化，從而參與T細(xì)胞的激活和細(xì)胞效應(yīng)的有效發(fā)揮。本文檔共158頁；當(dāng)前第64頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第65頁；編輯于星期二\17點7分三、T細(xì)胞活化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程當(dāng)T細(xì)胞受到抗原信號刺激后，活化信號由胞外傳導(dǎo)至胞內(nèi)，需經(jīng)歷一個由蛋白激酶和蛋白磷酸酶催化的蛋白質(zhì)磷酸化與脫磷酸化反應(yīng)的環(huán)節(jié)。這是一個可以互相轉(zhuǎn)換的過程。磷酸化的底物主要是絲氨酸/蘇氨酸和酪氨酸。催化這一反應(yīng)的酶稱為蛋白激酶，如PKC和PTK等。此外，還有參與脫磷酸化的PTP等。信號轉(zhuǎn)導(dǎo)(signaltransduction)。本文檔共158頁；當(dāng)前第66頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第67頁；編輯于星期二\17點7分(一)脂筏與免疫受體的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞膜是由磷脂雙分子層組成的液態(tài)結(jié)構(gòu)，蛋白質(zhì)分子鑲嵌其中，作為膜受體或膜相關(guān)分子，溝通細(xì)胞內(nèi)外的信息。但在細(xì)胞膜中，脂類分子的分布并不是均一的，在某些局部集中分布著鞘脂和膽固醇等脂類。由于鞘脂具有較長的緊密折疊的烴鏈因而具有較高的熔點，在膽固醇的結(jié)合下，形成液態(tài)磷脂平面中的固態(tài)結(jié)構(gòu)，猶如漂浮在大海中的小舟，因此被稱為脂筏（lipidraft）。本文檔共158頁；當(dāng)前第68頁；編輯于星期二\17點7分

脂筏的直徑一般為70nm左右。脂筏中的成分不僅有脂類分子，更重要的是與脂筏相關(guān)的蛋白分子。蛋白分子通過兩種方式與脂筏結(jié)合：一般是通過糖基磷脂酰肌醇（GPI）錨在鞘脂分子上；另一種是通過蛋白質(zhì)的烷基化修飾，與鞘脂的烴鏈結(jié)合。Lck可在Gly2發(fā)生豆蔻酸化，在Cys3和Cys5發(fā)生棕櫚酸化，因而Lck與脂筏組成性結(jié)合。

本文檔共158頁；當(dāng)前第69頁；編輯于星期二\17點7分在靜止T細(xì)胞膜表面，有多種與TCR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)的分子組成性地存在于脂筏中。除Lck外，接頭蛋白LAT通過棕櫚酸化結(jié)合在脂筏中，TCR輔助受體CD4、CD8以及協(xié)同分子CD28和CD2等也都組成性分布在脂筏中。Csk結(jié)合蛋白是一個烴基化蛋白，定位于脂筏中，并結(jié)合Csk，使后者對相鄰的Lck發(fā)揮磷酸化的抑制作用，維持Lck的非活化狀態(tài)。CD45分子處于脂筏之外，但由于脂筏較小，每個脂筏上只能隨機分布幾個蛋白分子，所以CD45仍有機會作用于Lck活性中心的酪氨酸，調(diào)節(jié)Lck的活性。本文檔共158頁；當(dāng)前第70頁；編輯于星期二\17點7分當(dāng)抗原與TCR結(jié)合，TCR及其相關(guān)的信號分子在與APC細(xì)胞相結(jié)合的部位形成特殊的免疫突觸。免疫突觸的中央主要是小脂筏融合而成的大的脂筏斑，其中包含有與脂筏組成性結(jié)合的CD4/CD8、CD28、Lck、LAT等，也有被活化信號募集而來的ZAP-70、SLP-76、Vav等。當(dāng)活化的TCR/CD3在受到活化刺激后，ITAM發(fā)生磷酸化，與脂筏的親和力提高，所以交聯(lián)的TCR/CD3也處于免疫突觸的中央。CD2位于脂筏斑的外圍。較大的黏附分子LFA-1與APC上的ICAM-1結(jié)合，圍繞在外周，穩(wěn)定突觸的結(jié)構(gòu)但不結(jié)合脂筏。CD45則在免疫突觸之外。在免疫突觸形成的過程中，脂筏可能起到了運輸和聚集信號分子的作用。本文檔共158頁；當(dāng)前第71頁；編輯于星期二\17點7分

（二）PTK的活化T細(xì)胞活化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的早期，因受體交聯(lián)而活化的胞內(nèi)酶類有蛋白酪氨酸激酶(PTK)。參與T細(xì)胞活化早期的PTK主要有Lck和Fyn及ZAP-70等。Lck主要與CD4或CD8的胞漿尾部相連。Fyn與CD3的鏈相連，ZAP-70在胞質(zhì)中，當(dāng)受體交聯(lián)時，與TCR有關(guān)的膜蛋白如CD3、CD4或CD8的胞漿尾部同時聚在一起，促使帶有酪氨酸的蛋白發(fā)生磷酸化而活化，產(chǎn)生激酶活化的級聯(lián)反應(yīng)，將活化信號傳遞給其他分子。本文檔共158頁；當(dāng)前第72頁；編輯于星期二\17點7分在T細(xì)胞應(yīng)答的初始階段，TCR特異性識別APC表面的抗原肽-MHC分子復(fù)合物。同時T細(xì)胞的CD4或CD8分子分別與APC表面MHCⅡ類或Ⅰ類分子的單態(tài)區(qū)結(jié)合，在APC和抗原特異性T細(xì)胞之間形成穩(wěn)定的分子間聚合體，它包括MHC分子、抗原肽、TCR、CD4或CD8以及CD45。因此，與CD4或CD8相連的lck得以在空間上靠近TCR的胞漿內(nèi)區(qū)域。CD45是具有PTP活性的分子，可使Lck和Fyn分子的調(diào)控區(qū)去磷酸化，而激活Lck和Fyn?？拷麮D3的Fyn活化了CD3各鏈的ITAMs后，并由于CD4或CD8與MHC分子結(jié)合，Lck的作用使ITAMs的磷酸化更完全。酪氨酸磷酸化后，胞內(nèi)帶有SH-2功能區(qū)的ZAP-70分子則與之結(jié)合。

本文檔共158頁；當(dāng)前第73頁；編輯于星期二\17點7分CD3

亞基含有3個ITAM，共有6個保守的酪氨酸殘基，均能被磷酸化。ZAP-70蛋白原先游離在胞漿中，當(dāng)其與結(jié)合后，便征集到TCR復(fù)合物的膜周圍，同時其本身的PTK激酶活性又被膜周圍定位的lck激活，成為一個偶聯(lián)中介物，繼而作用于其下游的效應(yīng)分子。

經(jīng)歷上述啟動過程，Src家族中的PTK成員及ZAP-70PTK均被聚攏到膜周圍，與活化的TCR及其共受體定位在一起。

本文檔共158頁；當(dāng)前第74頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第75頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第76頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第77頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第78頁；編輯于星期二\17點7分

（三）TCR介導(dǎo)的信號傳遞的下游過程1．PLC-

活化活化的ZAP-70使接頭蛋白(LAT，SLP-76)磷酸化，它們可將胞漿中的PLC-

募集到細(xì)胞膜內(nèi)面。此處的活化型ZAP-70和其它激酶（如Tec家族的Itk）可使PLC-

分子中的酪氨酸殘基發(fā)生磷酸化而活化。活化的PLC-

可裂解細(xì)胞膜上的磷酯酰肌醇二磷酸(phosphatidylinosito1bisphosphate，PIP2)，產(chǎn)生兩個重要的信息分子：三磷酸肌醇(inositol1,4,5-triphosphate,IP3)和甘油二酯(diacylglycerol,DAG)。本文檔共158頁；當(dāng)前第79頁；編輯于星期二\17點7分IP3經(jīng)胞漿擴散至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，與其受體結(jié)合并刺激內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜Ca2+通道開放，釋放胞內(nèi)鈣儲備，使細(xì)胞漿內(nèi)游離Ca2+濃度快速升高。同時，TCR介導(dǎo)的信號也可開放細(xì)胞膜Ca2+通道，使Ca2+流入胞內(nèi)。上述反應(yīng)結(jié)果使細(xì)胞漿內(nèi)膜Ca2+濃度比靜息狀態(tài)高68倍。高水平的游離胞漿Ca2+與胞漿內(nèi)的鈣調(diào)素（calmodulin）結(jié)合形成鈣-calmodulin復(fù)合物。該復(fù)合物活化胞漿內(nèi)的鈣調(diào)磷酸酶(calcineurin)，活化的鈣調(diào)磷酸酶使轉(zhuǎn)錄因子NF-AT去磷酸根而活化，并從胞漿轉(zhuǎn)位到核內(nèi)。DAG是疏水性的，形成后留存在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)面。游離鈣和DAG的組合作用使與細(xì)胞膜相連的PKC活化。由PKC活化轉(zhuǎn)錄因子NF-B。本文檔共158頁；當(dāng)前第80頁；編輯于星期二\17點7分

本文檔共158頁；當(dāng)前第81頁；編輯于星期二\17點7分2．MAP激酶活化

ZAP-70活化后可經(jīng)Ras和Rac活化MAPK級聯(lián)反應(yīng)。活化型ZAP-70可使接頭蛋白LAT磷酸化，并與Grb2的SH2結(jié)構(gòu)域結(jié)合。Grb2與LAT結(jié)合后，因其分子結(jié)構(gòu)中含有SH3結(jié)構(gòu)域，所以可募集富含脯氨酸的Sos蛋白，Sos具有GEF作用，可使Ras分子上的GDP釋放，然后Ras結(jié)合GTP，Ras水解GTP而活化下游的MAP。MAP激酶途徑：Ras-GTP活化Raf-1，Raf-1使MEK-1磷酸化，MEK-1又使ERK1,2磷酸化，活化的ERK使Elk磷酸化，磷酸化的Elk刺激c-fos轉(zhuǎn)錄。Fos蛋白為轉(zhuǎn)錄因子AP-1的一個成分。本文檔共158頁；當(dāng)前第82頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第83頁；編輯于星期二\17點7分與Ras相平行發(fā)生的是，由TCR-相關(guān)激酶磷酸化的接頭蛋白也募集和活化一個稱為Vav的GEF。Vav蛋白對另一個小G蛋白Rac產(chǎn)生作用?；罨腞ac（Rac-GTP）可誘導(dǎo)細(xì)胞骨架的變化，參與TCR簇化和免疫突觸的形成?；罨蚏ac導(dǎo)致JNK（c-junN-terminalkinase）的MAP激酶活化。由于在許多細(xì)胞中JNK可被紫外線/滲透性應(yīng)激或炎性細(xì)胞因子（TNF-

和IL-1）等有害刺激所激活，故又將其稱為應(yīng)激活化蛋白激酶（stress-activatedproteinkinase,SAPK）?；罨蚃NK可使jun蛋白磷酸化，后者是AP-1的另一個成分。Fos/Jun是AP-1。本文檔共158頁；當(dāng)前第84頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第85頁；編輯于星期二\17點7分

（四）CD28協(xié)同信號活化途徑CD28與B7的相互作用為T細(xì)胞活化提供了第二活化信號。這種信號是T細(xì)胞活化所必需的。CD28分子的胞漿部分有數(shù)個潛在的磷酸化位點。當(dāng)CD28被交聯(lián)后，可由Lck和Fyn引發(fā)這些位點（如Y173和Y191）發(fā)生酪氨酸磷酸化。它們與PI-3K的p85亞單位結(jié)合后，使PI-3K激活，有助于Ras上的GTP/GDP交換，導(dǎo)致MAP激酶途徑的活化。CD28能活化Vav相關(guān)的Rac途徑。導(dǎo)致JNK活化，使Jun蛋白磷酸化而有活性。本文檔共158頁；當(dāng)前第86頁；編輯于星期二\17點7分CD28也可以阻斷T細(xì)胞中的抑制信號。例如，當(dāng)LAT被活化的時候，另一種接頭蛋白叫做Cbl-b附著在復(fù)合體上，Cbl-b磷酸化抑制T細(xì)胞活化，部分是由于阻斷了依賴PI-3K的TCR介導(dǎo)的信號傳遞。CD28信號通過活化Vav和Rac途徑，可以阻斷Cbl-b的抑制作用，從而增強TCR信號。本文檔共158頁；當(dāng)前第87頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第88頁；編輯于星期二\17點7分四、轉(zhuǎn)錄因子的活化和表達(dá)所有信號傳導(dǎo)最終將作用于不同的轉(zhuǎn)錄因子，并通過轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控細(xì)胞基因及增殖分化。涉及T細(xì)胞活化的基因有近百種。根據(jù)其活化順序可將這些基因劃分為3種，即時基因（已報導(dǎo)9個）；早期基因（54個）；晚期基因（21個）。按這些基因的功能又分成3類：細(xì)胞原癌基因、細(xì)胞因子基因和細(xì)胞因子受體基因。本文檔共158頁；當(dāng)前第89頁；編輯于星期二\17點7分

（一）轉(zhuǎn)錄因子活化T細(xì)胞活化信號經(jīng)磷酯酰肌醇代謝活化PKC和鈣離子信號途徑及Ras-MAP激酶途徑，產(chǎn)生激酶磷酸化的級聯(lián)反應(yīng)。放大了開始時的活化信號，使T細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子活化，結(jié)合到有關(guān)基因的調(diào)控區(qū)，增強了啟動子的活性，促使轉(zhuǎn)錄開始。如IL-2基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)，是由轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合到IL-2基因的調(diào)控區(qū)(增強子和啟動子)。該處的幾個轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合點，包括AP-1、NF-B、NFAT，它們是經(jīng)不同轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑來的信號活化DNA結(jié)合蛋白(轉(zhuǎn)錄因子)。本文檔共158頁；當(dāng)前第90頁；編輯于星期二\17點7分

1．NF-AT

未經(jīng)活化的細(xì)胞，其NFAT是停留在胞漿中，而活化時，由于胞漿鈣離子濃度增加，經(jīng)鈣離子活化信號作用，活化Calcineurin，鈣調(diào)磷酸酶使NF-AT去磷酸化而激活，激活的NF-AT從胞漿進入細(xì)胞核，NFAT作為一種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白，與AP-l轉(zhuǎn)錄因子一起，作用到IL-2基因的增強子。這一點對于IL-2基因轉(zhuǎn)錄非常重要。本文檔共158頁；當(dāng)前第91頁；編輯于星期二\17點7分

目前臨床上常用的免疫抑制藥，如環(huán)孢菌素(cyclosporinA，CsA)和FK506均是以阻止NF-AT轉(zhuǎn)位到IL-2基因上，由于阻止IL-2基因轉(zhuǎn)錄而發(fā)揮免疫抑制作用。環(huán)孢菌素A(cyclosporinA,CsA)是由11個氨基酸組成的環(huán)狀分子，F(xiàn)K506為大環(huán)內(nèi)酯抗生素，分子量228。CsA和FK506免疫抑制作用十分相似，其機理主要是抑制T細(xì)胞活化過程中IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ等基因的轉(zhuǎn)錄，抑制細(xì)胞因子合成，降低IL-2R和轉(zhuǎn)鐵蛋白的表達(dá)，抑制B細(xì)胞針對胸腺依賴抗原的抗體形成。本文檔共158頁；當(dāng)前第92頁；編輯于星期二\17點7分

CsA的作用機制：CsA進入細(xì)胞內(nèi)，與胞內(nèi)蛋白環(huán)孢親和素（cyclophilin）結(jié)合，形成復(fù)合物。后者與胞內(nèi)的鈣調(diào)磷酸酶結(jié)合并抑制其酶活性。鈣調(diào)磷酸酶的上游激活物為鈣離子和鈣調(diào)蛋白（calmodulin），下游靶蛋白為胞漿轉(zhuǎn)錄因子NF-AT，因而CsA抑制了鈣調(diào)磷酸酶，使胞漿NF-AT不能向細(xì)胞核內(nèi)移動，而發(fā)揮阻斷IL-2轉(zhuǎn)錄的作用。FK506與靶細(xì)胞內(nèi)FK506結(jié)合蛋白(FK506bindingprotein,FKBP)結(jié)合形成復(fù)合體，使Calcineurin磷酯酶活性受到抑制，阻止NF-AT的去磷酸化，從而阻止了NFATC向細(xì)胞核內(nèi)轉(zhuǎn)移，影響IL-2等基因的轉(zhuǎn)錄。本文檔共158頁；當(dāng)前第93頁；編輯于星期二\17點7分

本文檔共158頁；當(dāng)前第94頁；編輯于星期二\17點7分2．核因子NF-B

NF-B(nuclearfactorB，NF-B)是由TCR活化信號激活的另一種轉(zhuǎn)錄因子。

在靜止細(xì)胞中，NF-B與IB（inhibitorofB）結(jié)合，后者抑制NF-B活化。T細(xì)胞活化后，PKC/MAP激酶途徑和鈣均可使IB磷酸化,IB磷酸化后可使泛素分子與其結(jié)合，促使IB遷移至蛋白酶體，在蛋白降解中起作用。同時，NF-B與IB解離，并由胞漿轉(zhuǎn)移至細(xì)胞核。本文檔共158頁；當(dāng)前第95頁；編輯于星期二\17點7分

3.AP-1AP-1（activatingprotein-1）是存在于多種類型細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄因子，但在T細(xì)胞活化中特異性被活化。AP-1實際是一個DNA結(jié)合蛋白家族的名稱。目前特征最明了的AP-1是由c-fos和c-Jun所組成。AP-1活化包括c-fos蛋白的合成和預(yù)先存在的c-Jun蛋白的磷酸化。ERK途徑增強c-fos的轉(zhuǎn)錄和合成，PKC途徑對此也起到了促進作用。JNK磷酸化c-Jun。含有磷酸化Jun的AP-1復(fù)合物的轉(zhuǎn)錄活性大為增強。本文檔共158頁；當(dāng)前第96頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第97頁；編輯于星期二\17點7分

（二）T細(xì)胞基因表達(dá)在T細(xì)胞活化過程中至少有4個原癌基因參與。細(xì)胞原癌基因是一種正常細(xì)胞基因，其產(chǎn)物可存在于細(xì)胞內(nèi)不同部位，參與細(xì)胞的生長與分化，如c-fyn和c-lck基因編碼酪氨酸激酶。

c-fos和c-myc基因則屬于即時基因，它們的產(chǎn)物參與啟動細(xì)胞內(nèi)DNA合成。Ras基因的產(chǎn)物p21ras是T細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的一個重要成分。Ras蛋白的上游信號大多是PTK介導(dǎo)的?；罨腞as再作用于下游分子Raf-1、MAPK，進而啟動c-fos。Rac基因產(chǎn)物是另外一個小G蛋白p21rac

。本文檔共158頁；當(dāng)前第98頁；編輯于星期二\17點7分在T細(xì)胞活化初期半小時內(nèi)核轉(zhuǎn)錄因子(如fos/jun、NFAT)和原癌基因c-myc表達(dá)，數(shù)小時后，可見到多種細(xì)胞因子及其受體合成。

再后，出現(xiàn)與細(xì)胞分裂有關(guān)的轉(zhuǎn)鐵蛋白受體分子及遲現(xiàn)抗原如粘附分子VLA-l的表達(dá)。由于細(xì)胞因子及其受體基因活化轉(zhuǎn)錄，再經(jīng)自分泌或旁分泌作用使細(xì)胞進入生長的G1期，核DNA含量迅速增加，胞體增大，胞漿增多，隨后經(jīng)有絲分裂期(S期)，表現(xiàn)為細(xì)胞增殖，數(shù)量增多，即克隆擴增。在有不同細(xì)胞因子作用下，活化T細(xì)胞經(jīng)分化成為有不同功能的效應(yīng)細(xì)胞，部分細(xì)分化成記憶細(xì)胞。本文檔共158頁；當(dāng)前第99頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第100頁；編輯于星期二\17點7分T細(xì)胞活化后誘生細(xì)胞因子和表面分子表達(dá)而表現(xiàn)多種效應(yīng)功能和調(diào)節(jié)功能?；罨T生的兩個重要膜蛋白即CD40L和FasL。CD40L是活化的CD4+T細(xì)胞表面膜蛋白。CD40L與B細(xì)胞表面CD40結(jié)合，為B細(xì)胞活化提供第二信號，促使B活化、增殖，并進行Ig類別轉(zhuǎn)換，促進體液免疫，經(jīng)CD40L與CD40的結(jié)合，可使APC的B7-1和B7-2的表達(dá)增加，進一步活化T細(xì)胞，而放大T細(xì)胞對抗原的應(yīng)答。成熟的CD8+T細(xì)胞和CD4+T細(xì)胞活化后表達(dá)FasL增加，F(xiàn)asL與表達(dá)Fas分子的細(xì)胞結(jié)合導(dǎo)致細(xì)胞凋亡，除殺傷靶細(xì)胞外，也在免疫耐受及免疫調(diào)節(jié)中起作用。本文檔共158頁；當(dāng)前第101頁；編輯于星期二\17點7分五、T細(xì)胞增殖與分化

在有病原生物或其他免疫原刺激時，能識別這些抗原肽-MHC分子復(fù)合物的特異T細(xì)胞數(shù)量非常少，但是由于T細(xì)胞活化后的快速克隆擴增，可使數(shù)量迅速增加。T細(xì)胞活化的細(xì)胞內(nèi)信導(dǎo)轉(zhuǎn)導(dǎo)觸發(fā)了某些T細(xì)胞膜蛋白(如細(xì)胞因子受體)和細(xì)胞因子(如IL-2)的基因轉(zhuǎn)錄和蛋白合成。這一結(jié)果引發(fā)了活化后細(xì)胞行為的兩大變化：細(xì)胞分裂和細(xì)胞分化。本文檔共158頁；當(dāng)前第102頁；編輯于星期二\17點7分

T細(xì)胞分裂的群體表現(xiàn)形式為細(xì)胞增殖，IL-2與IL-2高親和力受體的相互作用是始動和促進該過程的關(guān)鍵因素。初始T細(xì)胞大量增殖實質(zhì)是抗原特異性T細(xì)胞克降擴增。使抗原特異性T細(xì)胞達(dá)到整體功能所需的數(shù)量水平。T細(xì)胞分化并行于增殖過程?？乖男再|(zhì)和所分泌細(xì)胞因子的類型決定分化的結(jié)果。隨著抗原的清除，大多數(shù)活化T細(xì)胞死于細(xì)胞凋亡，以維系自身穩(wěn)定的基礎(chǔ)靜息狀態(tài)。少數(shù)抗原特異性T細(xì)胞分化成為長壽命的記憶T細(xì)胞，在再次抗原刺激時發(fā)揮快速的免疫應(yīng)答作用。本文檔共158頁；當(dāng)前第103頁；編輯于星期二\17點7分（一）細(xì)胞因子分泌是T細(xì)胞活化主要的表現(xiàn)形式在T細(xì)胞活化中，抗原和協(xié)同刺激分子傳遞的信號觸發(fā)一些細(xì)胞因子的基因轉(zhuǎn)錄和蛋白合成。初始T細(xì)胞產(chǎn)生的最重要的細(xì)胞因子是IL-2。IL-2發(fā)揮T細(xì)胞生長因子的作用。在不同性質(zhì)的抗原刺激下，初始T細(xì)胞還可分泌不同種類的細(xì)胞因子，產(chǎn)生不同的效應(yīng)，尤其可導(dǎo)致初始T細(xì)胞的功能分化和作用發(fā)揮。同時，活化T細(xì)胞還可增強許多細(xì)胞因子受體的表達(dá)水平。本文檔共158頁；當(dāng)前第104頁；編輯于星期二\17點7分（二）IL-2及受體基因表達(dá)是T細(xì)胞克隆性增殖的關(guān)鍵因素IL-2受體表達(dá)是T細(xì)胞活化的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。IL-2受體以和鏈二聚體或、和鏈三聚體形式表達(dá)，其二聚體中的鏈與IL-2呈低親和力的結(jié)合。當(dāng)T細(xì)胞活化后，T細(xì)胞表達(dá)IL-2受體的鏈(CD25)，與IL-2受體的、鏈結(jié)合，形成高親和力受體，導(dǎo)致即便對于低水平的IL-2也有很高的反應(yīng)性。在T細(xì)胞活化過程中，大多數(shù)CD4+T細(xì)胞和某些CD8+T細(xì)胞可有l(wèi)2天的IL-2的表達(dá)。此間，IL-2與IL-2高親和力受體的作用可導(dǎo)致T細(xì)胞的分裂、增殖。本文檔共158頁；當(dāng)前第105頁；編輯于星期二\17點7分

本文檔共158頁；當(dāng)前第106頁；編輯于星期二\17點7分

（三）細(xì)胞增殖——抗原特異性T細(xì)胞克隆擴增初始T細(xì)胞增殖的結(jié)果是抗原特異性T細(xì)胞克隆擴增，即由少量抗原特異性初始T細(xì)胞分裂，增殖到清除抗原所需的大數(shù)量水平。末接觸抗原前，對特定抗原特異性的初始T細(xì)胞克隆頻率為1/105

106

淋巴細(xì)胞?？乖旅艉?，抗原特異性T細(xì)胞的數(shù)量大幅度增高，可達(dá)l/10個CD8+T細(xì)胞和1/1001000個CD4+T細(xì)胞。隨著抗原的清除，抗原特異性T細(xì)胞數(shù)量快速減少。平時存活的記憶T細(xì)胞頻率為1/104。本文檔共158頁；當(dāng)前第107頁；編輯于星期二\17點7分（四）效應(yīng)T細(xì)胞的分化：初始T細(xì)胞CD4+T細(xì)胞分化成為T輔助細(xì)胞

伴隨T細(xì)胞增殖，CD4+T細(xì)胞分化成效應(yīng)細(xì)胞亞群，產(chǎn)生不同類別的細(xì)胞因子，發(fā)揮作用各異的效應(yīng)。Th細(xì)胞有Thl和Th2細(xì)胞兩個功能亞群。IFN-

是Th1細(xì)胞分泌的重要細(xì)胞因子，Th2細(xì)胞優(yōu)勢分泌IL-4和IL-5。CD4+T細(xì)胞分化成Thl或Th2細(xì)胞取決于免疫應(yīng)答早期存在的刺激因素，其中抗原性質(zhì)和細(xì)胞因子類型是關(guān)鍵因素。本文檔共158頁；當(dāng)前第108頁；編輯于星期二\17點7分

Thl分化途徑是機體對感染或活化巨噬細(xì)胞和活化NK細(xì)胞的微生物的應(yīng)答。許多細(xì)胞內(nèi)感染微生物導(dǎo)致抗原活化的CD4+T細(xì)胞(ThO)分化成Thl效應(yīng)細(xì)胞。活化的NK細(xì)胞可分泌IFN-，繼而活化巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL-12。IL-12結(jié)合于CD4+T細(xì)胞(ThO)表面的IL-12受體，活化轉(zhuǎn)錄因子STAT4。STAT4促進ThO分化成Thl效應(yīng)細(xì)胞。Th2分化出現(xiàn)在對寄生蟲和變應(yīng)原(a11ergen)的應(yīng)答之中，通常不伴隨固有免疫應(yīng)答和巨噬細(xì)胞活化。ThO分化成Th2亞群依賴于IL-4。除細(xì)胞因子外，抗原的性質(zhì)、濃度以及共刺激因子也影響Th細(xì)胞的發(fā)育。細(xì)胞內(nèi)感染微生物誘導(dǎo)Thl細(xì)胞的分化，而細(xì)胞外感染微生物如大多數(shù)細(xì)菌則誘導(dǎo)Th2的發(fā)育。本文檔共158頁；當(dāng)前第109頁；編輯于星期二\17點7分（五）效應(yīng)T細(xì)胞的分化：初始T細(xì)胞CD8+T細(xì)胞分化成細(xì)胞毒T細(xì)胞前細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞(pre-CTL)分化成為功能性CTL主要涉及細(xì)胞毒功能的獲得。CTL分化的最重要的特征是膜結(jié)合型細(xì)胞漿顆粒的發(fā)育。這些顆粒包含穿孔素和顆粒酶。根據(jù)CTL不同的細(xì)胞因子產(chǎn)生譜將CTL分類為：Tcl和Tc2。在CTL所識別靶細(xì)胞低/不表達(dá)共刺激因子時，CTL分化需要Thl和APC的輔助。在病毒感染DC時，可直接促使CTL的分化。本文檔共158頁；當(dāng)前第110頁；編輯于星期二\17點7分

（六）細(xì)胞分化產(chǎn)生長壽命、功能靜息的Tm細(xì)胞

某些抗原刺激的T淋巴細(xì)胞前體分化成為記憶T細(xì)胞(Tmemorycell，Tm)。記憶T細(xì)胞介導(dǎo)快速和增強的再次免疫應(yīng)答。記憶T細(xì)胞可被低濃度抗原和細(xì)胞因子以及低水平的共刺激分子所激活。在抗原被清除后，記憶T細(xì)胞可以功能沉寂和緩慢細(xì)胞周期的形式在宿主體內(nèi)存活多年。記憶T細(xì)胞隨年齡增長而積聚，這與接觸微生物和抗原有關(guān)。本文檔共158頁；當(dāng)前第111頁；編輯于星期二\17點7分記憶T細(xì)胞表面表達(dá)一些有異于初始性或近期活化T細(xì)胞表面所表達(dá)的分子，如表達(dá)高水平的整合素和CD44。在人類，記憶T細(xì)胞表型標(biāo)志為CD45RO+，而初始T細(xì)胞為CD45RA+。記憶T細(xì)胞不表達(dá)CD25。記憶性T細(xì)胞也有功能異質(zhì)性。人類記憶性T細(xì)胞中存在表達(dá)趨化因子受體CCR7差異的亞群。CCR7與初始T細(xì)胞和DC遷移至淋巴器官T細(xì)胞區(qū)有關(guān)。高表達(dá)CCR7的Tm可遷移到淋巴結(jié)，在遭遇抗原時可快速增殖．為再次免疫應(yīng)答提供大量T細(xì)胞。低表達(dá)CCR7的Tm產(chǎn)生效應(yīng)細(xì)胞因子，遷移至感染和炎癥的部位，發(fā)揮清除抗原的作用。本文檔共158頁；當(dāng)前第112頁；編輯于星期二\17點7分六、T細(xì)胞介導(dǎo)的效應(yīng)抗原活化T細(xì)胞后，經(jīng)克隆擴增及功能分化，成為效應(yīng)T細(xì)胞，它們能引起遲發(fā)型超敏性炎癥，或殺傷靶細(xì)胞而清除抗原。細(xì)胞免疫的重要效應(yīng)細(xì)胞有兩類，其一是Thl型CD4+Th細(xì)胞，經(jīng)活化M

而誘生炎癥，在宿主抗胞內(nèi)病原感染中起重要作用。其二是CD8+CTL，它藉分泌細(xì)胞毒素殺傷表達(dá)抗原的靶細(xì)胞。本文檔共158頁；當(dāng)前第113頁；編輯于星期二\17點7分

（一）Thl型CD4+T細(xì)胞的作用1．Thl效應(yīng)細(xì)胞活化巨噬細(xì)胞引起炎癥

胞內(nèi)寄生病原生物如結(jié)核桿菌，麻風(fēng)桿菌可在M內(nèi)的吞噬小體中生長繁殖，可躲避抗體和CTL的攻擊，使M

成為這些致病菌的“避難所”。只有活化的Thl細(xì)胞使M活化后，這些胞內(nèi)寄生的病原菌才能被殺死。M能吞噬多種胞外細(xì)菌，進而在胞內(nèi)分解破壞這些細(xì)菌而提呈其抗原肽給CD4Thl和Th2，最終產(chǎn)生效應(yīng)CD4+T細(xì)胞，這些對該細(xì)菌抗原有特異性的細(xì)胞活化后，反過來又可活化M，而增強它們殺傷胞內(nèi)吞噬微生物的能力。本文檔共158頁；當(dāng)前第114頁；編輯于星期二\17點7分

2．Th1細(xì)胞分泌的主要細(xì)胞因子

效應(yīng)Th1細(xì)胞分泌多種細(xì)胞因子產(chǎn)生免疫效應(yīng)：①IL-2：活化的T細(xì)胞可借其IL-2的自分泌和旁分泌作用促進T細(xì)胞增殖；②IL-3及GM-CSF，它可刺激骨髓產(chǎn)生新的巨噬細(xì)胞。③TNF-：可作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞使之表達(dá)粘附分子和分泌趨化性細(xì)胞因子如IL-8等，可吸引血流中的白細(xì)胞如單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞和淋巴細(xì)胞等與血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附并遷移和外滲至組織內(nèi)引起炎癥反應(yīng)。④IFN-：強的巨噬細(xì)胞活化因子，活化的M具有強大的吞噬殺傷作用。本文檔共158頁；當(dāng)前第115頁；編輯于星期二\17點7分本文檔共158頁；當(dāng)前第116頁；編輯于星期二\17點7分

3．效應(yīng)Thl細(xì)胞活化M

必須經(jīng)嚴(yán)格控制

Thl細(xì)胞結(jié)合其抗原后，新合成的細(xì)胞因子在T細(xì)胞與M

接觸的部位分泌出來，直接、快速地活化M?；罨腗產(chǎn)生強有力的殺菌活性?；罨腗

表面MHCII分子和TNF-受體數(shù)量增加，使活化的M

更有效地向新的T細(xì)胞提呈抗原，而活化動員更多的效應(yīng)T細(xì)胞，因而增強且放大了免疫應(yīng)答。活化的M

分泌IL-12，它可促使未受刺激的CD4+T細(xì)胞分化成Thl細(xì)胞。與上述作用相反，M

和Th2細(xì)胞可分泌IL-10，它可抑制IFN-

產(chǎn)生，從而抑制M

活化。本文檔共158頁；當(dāng)前第117頁；編輯于星期二\17點7分

4．Thl細(xì)胞與活化的M

協(xié)同作用對抗胞內(nèi)寄生病原的感染雖然Thl細(xì)胞分泌的IFN-

和表達(dá)的CD40L是抗這類感染最重要的效應(yīng)分子，但Thl細(xì)胞所分泌的其他細(xì)胞因子在應(yīng)答中也起重要作用。Thl細(xì)胞可表達(dá)FasL，能殺死表達(dá)Fas分子的靶細(xì)胞，包括M。被殺死的M

釋放出胞內(nèi)的細(xì)菌，這些細(xì)菌又可被新召集來的M

所吞噬。本文檔共158頁；當(dāng)前第118頁；編輯于星期二\17點7分

（二）CD8+細(xì)胞毒性T細(xì)胞1．殺傷T細(xì)胞的產(chǎn)生

CTL細(xì)胞的前體(CTLprecursor，CTLp)識別細(xì)胞表面與MHCI類分子結(jié)合的抗原肽，此時它需要Th細(xì)胞的輔助。Th和CTLp結(jié)合到同一個APC上，即該APC處理病毒抗原，進而既表達(dá)抗原肽-MHCI類分子復(fù)合物，也表達(dá)抗原肽－MHCII類分子復(fù)合物。由激活的Th釋放的細(xì)胞因子作用于與其密切相鄰的CTLp。CTLp在IL-2、IL-6等細(xì)胞因子提供下，在抗原肽：MHCI類分子發(fā)出的特異活化信號作用下，CTLp增殖分化為效應(yīng)CTL(Tc)。本文檔共158頁；當(dāng)前第119頁；編輯于星期二\17點7分

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2．Tc殺死靶細(xì)胞的過程

Tc細(xì)胞多為CD8+T細(xì)胞，經(jīng)其TCR與靶細(xì)胞上的抗原肽-MHCI類分子結(jié)合，使Tc細(xì)胞與靶細(xì)胞的結(jié)合更加緊密，在有其他輔助分子協(xié)同作用下，向胞內(nèi)轉(zhuǎn)導(dǎo)的活化信號，使胞質(zhì)內(nèi)的骨架結(jié)構(gòu)重新排列，即特殊的溶酶體結(jié)構(gòu)等胞內(nèi)顆粒在胞質(zhì)內(nèi)沿微管系統(tǒng)快速移動，使胞內(nèi)的分泌裝置集中朝向與靶細(xì)胞結(jié)合部位，以保證激活的效應(yīng)Tc細(xì)胞釋放的效應(yīng)分子集中作用于帶抗原的靶細(xì)胞上。這樣就保證了沒有特異性的細(xì)胞毒分子能選擇性地作用于帶抗原的靶細(xì)胞，也保護了鄰近的正常細(xì)胞不受損害，這也就保證了Tc細(xì)胞作用的強度集中而準(zhǔn)確無誤。本文檔共158頁；當(dāng)前第121頁；編輯于星期二\17點7分

效應(yīng)