侵襲性深部真菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷

關(guān)于侵襲性深部真菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷第1頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三侵襲性真菌病的致病菌—條件致病菌—致病性雙相真菌念珠菌組織胞漿菌曲霉球孢子菌隱球菌芽生菌接合菌馬內(nèi)菲青霉鐮刀菌孢子絲菌暗色真菌酵母菌毛孢子菌枝頂孢霉第2頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三侵襲性真菌病(IFD)主要包括：念珠菌病隱球菌病侵襲性曲霉病第3頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三高危人群+高危因素=IFD第4頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三IFD的高危人群和高危因素廣譜抗生素應(yīng)用入住ICU血液系統(tǒng)腫瘤病人（粒缺、骨髓移植）器官移植HIV感染應(yīng)用皮質(zhì)激素糖尿病靜脈插管第5頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三第6頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三尸體解剖中侵襲性真菌感染的發(fā)生率78798081828384858687888990919202468Aspergillusspp.Candida

spp.AllotherPrevalenceatAutopsy[%]PrevalenceofinvasiveaspergillosisatnecropsyatJWGeotheUniversityHospital,Frankfurt,Germany(Lancet,2000;335:2076)第7頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三54.84%12.9%3.23%9.68%19.35%國(guó)內(nèi)西南醫(yī)院尸解資料，(1971-2000)，郝飛教授提供AspergillusCryptococcusMucorCandidaAllothers第8頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三侵襲性真菌病的流行病學(xué)特點(diǎn)危險(xiǎn)因素不斷增多，發(fā)生率逐年增高趨勢(shì)，確切資料有待收集整理白念珠菌仍然是最常見(jiàn)臨床分離致病菌非白念珠菌增加（帶來(lái)的問(wèn)題）曲霉已成為重要的致死真菌第9頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三真菌感染的實(shí)驗(yàn)診斷方法及問(wèn)題形態(tài)學(xué)檢查：經(jīng)驗(yàn)？陽(yáng)性率？培養(yǎng)+鑒定：時(shí)間長(zhǎng)，敏感性？血清學(xué)檢查：敏感性？特異性？分子生物學(xué)檢查：標(biāo)準(zhǔn)化？第10頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三真菌抗原、細(xì)胞壁成分檢測(cè)GM試驗(yàn)：血漿、血清、BAL、胸水、CSF，用于曲霉檢測(cè)；G試驗(yàn):用于曲霉、念珠菌檢測(cè)，對(duì)隱球菌、接合菌無(wú)意義；乳膠凝集試驗(yàn):檢測(cè)隱球菌；第11頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三新生隱球菌乳膠凝集試驗(yàn)第12頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三血清GM作為診斷的早期標(biāo)志物MarrandLeisenringClinInfectDis2005;41:S381第13頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三在BAL中檢測(cè)GM作為早期診斷標(biāo)志Musheretal.JClinMicrobiol2004:42(12):5517-22敏感性(%)特異性(%)陽(yáng)性預(yù)測(cè)(%)陰性預(yù)測(cè)(%)血清47937382BAL8510010088Beckeretal.BrJHaematol2003;121:448第14頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三關(guān)于GM試驗(yàn)與G試驗(yàn)可作為推定診斷的標(biāo)準(zhǔn);GM:檢測(cè)半乳甘露聚糖，對(duì)曲霉感染診斷特異性強(qiáng)，假陽(yáng)性反應(yīng)可以在青霉菌屬中出現(xiàn)；部分含青霉烷砜衍生物的抗菌藥物可以誘發(fā)陽(yáng)性反應(yīng)；G試驗(yàn):檢測(cè)(1,3)-?-D-葡聚糖，在很多真菌中都可以出現(xiàn)陽(yáng)性反應(yīng)，但在隱球菌、接合菌、毛霉、根霉呈陰性反應(yīng)；第15頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三Prospectiveutilityof(1-3)-B-D-Glucan(BG),galactomannan(GM)andanti-Candidaalbicansgermtubeantibodies(CAGT)forthediagnosisofinvasivefungaldisease(IFD)inhaemato-oncologyadultpatientsA.Alhambra1,M.S.Cuétara2,J.M.Moreno1,A.DelPalcioPerez-Medel1,I.Moragues3,J.Pontón3,A.DelPalacio11HospitalUniversitarioDocedeOctubre,MADRID,Spain2HospitalUniversitarioSeveroOchoa,LEGANES,Spain3UniversidaddelPaisVasco,BILBAO,Spain第16頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三InvasiveCandidiasisSSPPPVNPVCAGT(%)57934496BG(%)77863997InvasiveAspergillosisSSPPPVNPVGM(%)92947398BG(%)57844291第17頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三CONCLUSIONSTheincidenceofIFDcorrelateddirectlyandsignificantly(x2p=0.0005)withriskstratificationgroup:highestproportioninthehigh-riskgroup.Sinceallthebiomarkershaveinherentlimitations,abetterdiagnosisyieldisachievedcombiningthebiomarkers.AllthreebiomarkerssharehighnegativepredictivevalueandcanexcludereasonablyIFDinhaematologyadultpatientstreatedwithwidespectrumantifungals.第18頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三EvaluationoftwoserologictestfordiagnosisinvasiveAspergillosisC.Castro,A.Romero,A.Aller,T.Gonzalez,A.González,E.Martín-MazuelosH.U.Valme,SEVILLA,Spain第19頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三Atotalof236serafrom51patientsinriskofIAweretestedforGMusingPlateliaAspergilluskit(BioRad,France)which36sera(10patients)weretestedforBGalsousingFungitellkit(AssociatesofCapeCod.,USA).PatientswereattendedattheUniversityHospitalofValmefromSevillefromJanuaryof2008toDecember2008.PatientswithGMindex≥0.5intwoconsecutivesampleshavebeenmarkedasGMpositiveandsampleswithresults≥80pg/mlweremarkedasBGpositive.AllGMpositivepatientswereclassifiedaccordingtoEORTC/MSGcriteria(2008)forprobabilityofIA.第20頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三GMtestFrom51patientstudied,16ofthemshowedatleastonepositivespecimen(33sera).Only6patientsshowedtwoconsecutivepositiveresults(≥0.5GMtest)andtheyshowclinicalsignsormicrobiologicalcriteriaforAIproven(3patients)andprobable(3patients).第21頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三BGassayTheBGassaywereusedinparallelwithGMin36serawhich26showedpositiveresultfrom9patients,(3withAIprovenand6AIprobable).3patientsshowedpositiveresultsbeforeforBGtest(3,5days)and6patientspresentedsimultaneouslybothantigens.NevertheGMtestwasthefirstserologicaltesttoshowapositiveresult.G試驗(yàn)陽(yáng)性的9名患者中，G試驗(yàn)單獨(dú)陽(yáng)性的有3個(gè)病人，兩種抗原同時(shí)陽(yáng)性有6個(gè)病人，未出現(xiàn)單獨(dú)GM試驗(yàn)陽(yáng)性的情況。第22頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三ConclusionCalculatingsignificantsensitivityforbothdetectionmethodswasnotfeasibleduetoalownumberofproven/probableAI.BGdetectionshowedpositiveresultsbeforeGMtestandpresentthegreatadvantagetobea“panfungal”antigen.BGdetectionshouldbeusedwithothertechniquesfordetectionofinvasiveAspergillosisinfections.第23頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三真菌細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)示意圖第24頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三深部真菌感染患者血漿

1-3-β-D葡聚糖檢測(cè)

病例選擇深部真菌感染患者35例，年齡12－88歲，來(lái)自我院2004年1月到5月住院患者，均經(jīng)培養(yǎng)證實(shí)存在深部真菌感染，感染部位包括呼吸道、泌尿道、血液及靜脈插管引起的系統(tǒng)性感染。正常健康對(duì)照組30人，來(lái)自我院健康查體者。第四軍醫(yī)大學(xué)

第25頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三檢測(cè)結(jié)果正常對(duì)照組血漿1-3-β-D葡聚糖含量最高為7.29pg/ml，最低為0.45pg/ml，平均值為2.83±2.57pg/ml；深部真菌感染組血漿1-3-β-D葡聚糖含量最高為168.9pg/ml，最低為14.93pg/ml，平均值為54.06±36.13pg/ml。經(jīng)SPSS統(tǒng)計(jì)軟件T-檢驗(yàn)分析，對(duì)照組與深部真菌感染組1-3-β-D葡聚糖平均值差異非常顯著（t=7.741,P＜0.001）。第26頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三討論入選的深部真菌感染患者均經(jīng)細(xì)菌培養(yǎng)證實(shí)為念珠菌感染，包括白色念珠菌23株、熱帶念珠菌8株、季也蒙念珠菌1株、克柔念珠菌1株和光滑球擬假絲酵母菌2株，無(wú)隱球菌感染。如以10pg/ml為cutoff值，則陽(yáng)性率為100%;以20pg/ml為cutoff值，則陽(yáng)性率為91.4％。葡聚糖檢測(cè)可在擬診早期為臨床醫(yī)生提供機(jī)體是否感染真菌的可靠信息，因此葡聚糖含量檢測(cè)不失為一種實(shí)用的真菌感染早期診斷方法。第27頁(yè)，講稿共31頁(yè)，2023年5月2日，星期三注意