肺炎支原體檢測培養(yǎng)基培訓資料瑞凱演示文稿

肺炎支原體檢測培養(yǎng)基培訓資料瑞凱演示文稿本文檔共23頁；當前第1頁；編輯于星期三\16點38分優(yōu)選肺炎支原體檢測培養(yǎng)基培訓資料瑞凱本文檔共23頁；當前第2頁；編輯于星期三\16點38分支原體的分類：1.自然界目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的150多種；2.與人有關(guān)的（人類能感染的）：人型支原體（MH）、解脲支原體（UU）、肺炎支原體（MP）、生殖支原體（MG）本文檔共23頁；當前第3頁；編輯于星期三\16點38分顯微鏡下觀察肺炎支原體本文檔共23頁；當前第4頁；編輯于星期三\16點38分肺炎支原體傳播途徑及發(fā)病率1.通過呼吸道飛沫傳染；2.可散發(fā)流行；3.全年均可發(fā)??；4.易感染的人群兒童，青少年；5.發(fā)病率：由支原體引起的感冒占整個感冒20%-40%，支原體肺炎的發(fā)病率可占所有肺炎病例的30%-40%。本文檔共23頁；當前第5頁；編輯于星期三\16點38分引起感冒的幾種原因

及檢測與治療細菌感染，可通過檢查血常規(guī)，測定白細胞，中性粒細胞高低來判斷。１小時出結(jié)果。頭孢類，青霉素類抗生素。病毒感染，通過血常規(guī)，測定淋巴細胞高低來判斷。１小時出結(jié)果。無特效藥，用解熱鎮(zhèn)痛來緩解，靠免疫力。肺炎支原體感染。大環(huán)內(nèi)酯類抗生素（破壞細胞中蛋白質(zhì)合成）1血清學檢測，也稱抗體檢測，檢測患者血液中是否存在支原體抗體。２－３小時出結(jié)果。目前普遍采用。2ｐｃｒ檢測，依靠大型設(shè)備，手段繁瑣，無臨床價值，目前只做科研使用。３傳統(tǒng)培養(yǎng)法直接查病原體，所需時間長，但準確率高。本文檔共23頁；當前第6頁；編輯于星期三\16點38分肺炎支原體幾種檢測方法對比1：血清學檢測（抗體檢測），3小時出結(jié)果是指抗體產(chǎn)生后經(jīng)3小時檢驗，但從人感染支原體到體內(nèi)產(chǎn)生抗體需要5－７天，且治愈后抗體在體內(nèi)衰退仍需１－３月。所以說無論什么時間做抗體檢測結(jié)果都不準確。２：傳統(tǒng)培養(yǎng)法，直接查患者體內(nèi)病原體，準確率高，但所需時間長（４８－７２小時）。３：瑞凱培養(yǎng)法，準確率高，直接提取患者咽部分泌物查病原體，發(fā)病前2-3天就能查到，培養(yǎng)時間短２４小時報結(jié)果。本文檔共23頁；當前第7頁；編輯于星期三\16點38分目前醫(yī)院檢查肺炎支原體常用手段及治療常用抗體檢測，患者由于時間問題未產(chǎn)生抗體時，靠經(jīng)驗用藥，３天后，如無緩解再測抗體，產(chǎn)生后換藥治療。聯(lián)合用藥，增加患者負擔，造成濫用抗生素。抽血檢測患者痛苦，易造成交叉感染。操作時采樣，血清離心繁雜費時費力。本文檔共23頁；當前第8頁；編輯于星期三\16點38分瑞凱培養(yǎng)法檢測的臨床意義直接查病原體，發(fā)病前２－３天就可在呼吸道分泌物中發(fā)現(xiàn)肺炎支原體，實現(xiàn)早期發(fā)現(xiàn)，快速正確診斷，及時治療。根據(jù)患者病情各異，指導(dǎo)正確用藥。避免濫用抗生素，減少患者負擔。無需采血，減少患者痛苦及恐怖心里。本文檔共23頁；當前第9頁；編輯于星期三\16點38分肺炎型支原體藥敏檢測培養(yǎng)基的作用機理本文檔共23頁；當前第10頁；編輯于星期三\16點38分pH為堿性紅色（營養(yǎng)物質(zhì)+葡萄糖+酚紅+抑菌劑）肺炎支原體pH為酸性黃色37℃培養(yǎng)葡萄糖分解H+產(chǎn)品由培養(yǎng)基與藥敏板組成本文檔共23頁；當前第11頁；編輯于星期三\16點38分藥敏板制備藥敏板內(nèi)分別包備11種不同濃度的抗生素，Ａ１－１１為低濃度，Ｂ１－１１為高濃度。１２ＡＢ兩孔未包備。本文檔共23頁；當前第12頁；編輯于星期三\16點38分肺炎支原體藥敏檢測培養(yǎng)基的使用步驟常溫下使培養(yǎng)基解凍，滴加50ul到藥敏板12號A孔，再加50ul石蠟油封蓋以防揮發(fā)。用無菌棉拭子（或咽拭子）在口腔咽部捻轉(zhuǎn)數(shù)次取出棉拭子置于培養(yǎng)瓶內(nèi)，攪動數(shù)次，對著瓶壁盡量擠壓出其中液體，然后取出棉拭子棄之。移液器將接種后的培養(yǎng)基分別滴加到藥敏實驗板除陰性對照孔外的23個小孔內(nèi)，每孔50ul，然后每孔再加50ul的液體石蠟。將藥敏板連同培養(yǎng)瓶內(nèi)剩余培養(yǎng)基放置37°C恒溫箱培養(yǎng)24小時。本文檔共23頁；當前第13頁；編輯于星期三\16點38分結(jié)果判斷陽性判斷：A:培養(yǎng)瓶和藥敏板的12號A孔培養(yǎng)基應(yīng)保持原來的紅色，如果變黃操作過程可能出現(xiàn)問題，建議放棄本次試驗。B:培養(yǎng)瓶和藥敏板的12號B孔保持原來的紅色為陰性，變黃判定為陽性。藥敏判斷：標本判定陽性后再分別觀察1~11號孔，如果A、B兩孔均呈黃色說明肺炎支原體對該抗生素耐藥。A孔呈黃色，B孔保持紅色，則是中度敏感；如果A、B兩孔均保持原來的紅色則肺炎支原體對該抗生素敏感。本文檔共23頁；當前第14頁；編輯于星期三\16點38分肺炎支原體37℃培養(yǎng)50ul/孔50ul/孔敏感中敏耐藥本文檔共23頁；當前第15頁；編輯于星期三\16點38分

注意事項1：培養(yǎng)液-4°C至-15°C冷凍保存，不能反復(fù)解凍。2：取樣位置準確，取樣量足。3：取樣后在10分鐘

內(nèi)接種到培養(yǎng)基。4：37°C恒溫。本文檔共23頁；當前第16頁；編輯于星期三\16點38分解答大家關(guān)心比較多的問題：1.采樣部位：咽喉部位（舌腭弓、懸雍垂、扁桃體）本文檔共23頁；當前第17頁；編輯于星期三\16點38分2.采樣方法：A.棉拭子浸潤生理鹽水后并擠壓出棉拭子液體采樣更佳；B.捻轉(zhuǎn)數(shù)次，粘取盡量多（沒有具體量值）的分泌液；C.棉拭子壓住舌根部，令患者咬住30秒左右取出。本文檔共23頁；當前第18頁；編輯于星期三\16點38分3.采樣后，咽拭子能放置多久？

我們建議采樣后立即將咽拭子放入培養(yǎng)基內(nèi)，據(jù)國外文獻報道，MP離開宿主后會很快死亡（15分鐘以內(nèi)）。另外這樣也避免了感染其他雜菌的可能。（門診的使用）4.培養(yǎng)基能否快速解凍？可以?？剖铱梢愿鶕?jù)當天的大概用量，早上在恒溫箱里快速解凍。5.當天解凍了，沒有用完的培養(yǎng)基，能再凍起來嗎？

不能反復(fù)凍融。但是您可以把它冷藏起來，明天繼續(xù)用。培養(yǎng)基在冷藏環(huán)境下至少可以保存一周以上。本文檔共23頁；當前第19頁；編輯于星期三\16點38分6.如果培養(yǎng)結(jié)果偶爾出現(xiàn)渾濁、沉淀或者半紅半黃的情況，應(yīng)該如何判斷？

出現(xiàn)這樣的情況全部判斷為陰性。培養(yǎng)基內(nèi)發(fā)生的這種變化不是由于存在MP引起的，而是因為患者口腔內(nèi)的食物殘留或者其他口腔雜菌引起的。培養(yǎng)基特異性極強，只有MP能在其中快速生長繁殖，而其他微生物的代謝和酸性物質(zhì)不敏感，才會出現(xiàn)以上情況。？本文檔共23頁；當前第20頁；編輯于星期三\16點38分7.試劑的準確率如何？經(jīng)臨床對比驗證，我們的培養(yǎng)基檢驗結(jié)果的準確率達到了98﹪以上。菌株試驗100%準確。8、標本量是否對結(jié)果有影響？從之前各醫(yī)院的使用結(jié)果上看，標本量對培養(yǎng)時間有一定的影響，如果沒有達到足夠的標本量（即采取的咽部分泌物量），就可能無法在24小時內(nèi)檢出陽性，但24小時后仍可能出現(xiàn)陽性。所以采集時盡可能取足標本。本文檔共23頁；當前第21頁；編輯于星期三\16點38分9.口內(nèi)微量的支原體是否會導(dǎo)致結(jié)果陽性？

不會！當咽部提取的分泌物內(nèi)支原體量沒有達到104—106時（也就是沒有達到肺炎支原體的發(fā)病基數(shù)），24小時內(nèi)結(jié)果不會呈現(xiàn)陽性，但是由于本試劑的敏感性達到10-8，延長培養(yǎng)時間也可能出現(xiàn)陽性。本文檔共23頁；當前第22頁；編輯于星期三\16點38分9.關(guān)于臨床效果對比？①培養(yǎng)法本身就是微生物檢驗的金標準，如果與其它檢查抗體的檢驗方法對比，是沒有什么可比性的，因為這是兩種完全不同的檢查方法，臨床目的和意義也是完全不一樣，MP培養(yǎng)更適合用于早期篩查和指導(dǎo)臨床用藥；②如果比較應(yīng)該在培養(yǎng)方法之間比較，也只有快速出結(jié)果的培養(yǎng)才能真正實