.高效液相色譜

第十六章高效液相色譜法

一、高效液相色譜法的特點(diǎn)

二、流程及主要部件

三、影響分離的因素

四、高效液相色譜法的主要分離類型2023/6/28概述

高效液相色譜法（HPLC）是20世紀(jì)60年代末70年代初發(fā)展起來(lái)的一種新型分離分析技術(shù)，隨著不斷改進(jìn)與發(fā)展，目前已成為應(yīng)用極為廣泛的化學(xué)分離分析的重要手段。2023/6/28一、液相色譜分離原理及分類

和氣相色譜一樣，液相色譜分離系統(tǒng)也由兩相——固定相和流動(dòng)相組成。液相色譜的固定相可以是吸附劑、化學(xué)鍵合固定相（或在惰性載體表面涂上一層液膜）、離子交換樹脂或多孔性凝膠；流動(dòng)相是各種溶劑。2023/6/28

被分離混合物由流動(dòng)相液體推動(dòng)進(jìn)入色譜柱。根據(jù)各組分在固定相及流動(dòng)相中的吸附能力、分配系數(shù)、離子交換作用或分子尺寸大小的差異進(jìn)行分離。

色譜分離的實(shí)質(zhì)是樣品分子（以下稱溶質(zhì)）與溶劑（即流動(dòng)相或洗脫液）以及固定相分子間的作用，作用力的大小，決定色譜過(guò)程的保留行為。2023/6/28

根據(jù)分離機(jī)制不同，液相色譜可分為：液固吸附色譜、液液分配色譜、化合鍵合色譜、離子交換色譜以及分子排阻色譜等類型。2023/6/28它是在經(jīng)典液相色譜基礎(chǔ)上，引入了氣相色譜的理論，在技術(shù)上采用了高壓泵、高效固定相和高靈敏度檢測(cè)器，因而具備速度快、效率高、靈敏度高、操作自動(dòng)化的特點(diǎn)。為了更好地了解高效液相色譜法優(yōu)越性，現(xiàn)從兩方面進(jìn)行比較：

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高效液相色譜法比起經(jīng)典液相色譜法的最大優(yōu)點(diǎn)在于高速、高效、高靈敏度、高自動(dòng)化。高速是指在分析速度上比經(jīng)典液相色譜法快數(shù)百倍。由于經(jīng)典色譜是重力加料，流出速度極慢；而高效液相色譜配備了高壓輸液設(shè)備，流速最高可達(dá)103cm·min-1。高效液相色譜法與經(jīng)典液相色譜法2023/6/28

例如分離苯的羥基化合物，7個(gè)組分只需1min就可完成。對(duì)氨基酸分離，用經(jīng)典色譜法，柱長(zhǎng)約170cm，柱徑0.9cm，流動(dòng)相速度為30cm3·h-1，需用20多小時(shí)才能分離出20種氨基酸；而用高效液相色譜法，只需lh之內(nèi)即可完成。又如用25cm×0.46cm的Lichrosorb－ODS(5μ)的柱，采用梯度洗脫，可在不到0.5h內(nèi)分離出尿中104個(gè)組分。2023/6/28

（l）氣相色譜法分析對(duì)象只限于分析氣體和沸點(diǎn)較低的化合物，它們僅占有機(jī)物總數(shù)的20％。對(duì)于占有機(jī)物總數(shù)近80％的那些高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、摩爾質(zhì)量大的物質(zhì)，目前主要采用高效液相色譜法進(jìn)行分離和分析。

高效液相色譜法與氣相色譜法2023/6/28（2）潑液相味色譜妙能完歪成難制度較擴(kuò)高的四分離喬工作槽，因者為：①氣俱相色跡譜的毒流動(dòng)駝相載察氣是戰(zhàn)色譜指惰性完的，忙不參查與分繪配平覆衡過(guò)橫程，佛與樣豆品分敞子無(wú)喉親和娘作用圈，樣片品分莖子只益與固號(hào)定相廳相互推作用曉。而在潑液相情色譜廁中，售流動(dòng)司相液轉(zhuǎn)體也柜與固騾定相偷爭(zhēng)奪即樣品火分子劫，為您提高光選擇臉性增牛加了響一個(gè)傘因素。也錘可選傲用不加同比陡例的笛兩種比或兩蓬種以范上的耽液體攻作流問(wèn)動(dòng)相類，增飄大分米離的裳選擇胃性。20厘23抽/6僚/2仰5②液擾相色花譜固筐定相吧類型表多，溪如離猴子交醒換色其譜和葉排阻猜色譜烘。等敞，作夸為分從析時(shí)情選擇檔余地孩大；雅而氣欣相色旨譜并股不可鏡能的洲。③床液相堡色譜紋通常難在室識(shí)溫下銹操作違，較誤低的員溫度篇，一河般有帆利于伍色譜課分離彎條件也的選淹擇。20脂23踏/6歉/2明5（3雕）由談?dòng)谝簼怏w的療擴(kuò)散間性比耐氣體飽的小筐105倍，鑼因此輝，溶而質(zhì)在繪液相印中的場(chǎng)傳質(zhì)菊速率踢慢，角柱外姻效應(yīng)濕就顯導(dǎo)得特危別重籮要；毫而在介氣相峽色譜枕中，蔬柱外溉區(qū)域禮擴(kuò)張慮可以捕忽略魄不計(jì)鞏。（4藍(lán)）液哈相色鍬譜中堆制備須樣品撈簡(jiǎn)單俘，回壺收樣指品也妻比較夸容易敗，而且應(yīng)回收詞是定佩量的界，適團(tuán)合于扇大量金制備。但自液相程色譜嗚尚缺描乏通痰用的稅檢測(cè)但器，纏儀器純比較啊復(fù)雜漫，價(jià)面格昂籮貴。房誠(chéng)在實(shí)椅際應(yīng)行用中欠，這隱兩種毀色譜謀技術(shù)嗎是互距相補(bǔ)遼充的器。20系23珠/6兩/2研5目前碰高效備液相衰色譜筑法已勒被廣他泛應(yīng)暮用于夠分析醫(yī)對(duì)生紹物學(xué)凝和醫(yī)柿藥上局有重光大意得義的大分警子物儲(chǔ)質(zhì)，例凍如蛋灰白質(zhì)勸、核必酸、處氨基比酸、聞多糖受類、受植物日色素夫、高弦聚物玻、染牌料及藥物速等物質(zhì)私的分伏離和體分析旱。高效篩液相眾色譜和法的肺儀器協(xié)設(shè)備走費(fèi)用賠昂貴讓，操眉作嚴(yán)污格，隔這是凍它的突主要缺點(diǎn)。20欲23兩/6榴/2脈5高效劍液相擾色譜檢儀的痕結(jié)構(gòu)誼示意嗽見圖摸20歲-1略，一暑般可卡分為悲4個(gè)脂主要剩部分猜：高壓角輸液漠系統(tǒng)默，進(jìn)戶樣系紐奉統(tǒng)，打分離詠系統(tǒng)荒和檢痛測(cè)系顯統(tǒng)。此納外還泊配有輔助柱裝置：如糟梯度舅淋洗覽，自艱動(dòng)進(jìn)類樣及隸數(shù)據(jù)捆處理幣等。高效讀液相夕色譜定儀20濕23傾/6算/2繼520崖23緣瑞/6螺/2鋸520桃23通/6看/2創(chuàng)5其工作本過(guò)程如下預(yù)：首先高壓撤泵將催貯液堤器中摧流動(dòng)結(jié)相溶終劑經(jīng)不過(guò)進(jìn)傷樣器叉送入屈色譜辮柱，然后從控觀制器別的出鳳口流耍出。尾當(dāng)注壯入欲似分離廟的樣略品時(shí)側(cè)，流柿經(jīng)進(jìn)亂樣器侄貯液煮器的冠流動(dòng)丟相將聽樣品排同時(shí)脖帶入正色譜艦柱進(jìn)材行分握離，綱然后獸依先風(fēng)后順段序進(jìn)脫入檢融測(cè)器構(gòu)，記梁錄儀謊將檢她測(cè)器徑送出推的信爽號(hào)記圖錄下塔來(lái)，雞由此芬得到忘液相病色譜里圖。20謙23折/6輸/2壞5高效僑液相霸色譜懶儀120依23倍/6行/2玻5高效初液相籍色譜帆儀220要23享/6唉/2瓣5高效勞液相賴色譜鍋儀320腐23休/6位/2稅5高效冰液相最色譜澤儀420攝23請(qǐng)/6梳/2罵5一、光高效掉液相驢色譜調(diào)法的鉆特點(diǎn)20豆23欄/6輸/2研51.流程二、盆流程謀及主糞要部央件20辯23意/6端/2蘇52.嗎主讓要部棟件：（1征）高探壓輸劃液泵：主要糾部件慈之一候，壓鄉(xiāng)豐力：馬15占0～檢35嗎0×奸105Pa應(yīng)具頓有壓你力平冬穩(wěn)、驗(yàn)脈沖唯小、仙流量只穩(wěn)定救可調(diào)泥、兩耐腐場(chǎng)蝕等戒特性茶。20肢23紫/6美/2母5由于銹高效六液相各色譜碑所用推固定遞相顆算粒極攀細(xì)，縫因此叼對(duì)流貢動(dòng)相觸阻力占很大鼓，為州使流綠動(dòng)相鮮較快疏流動(dòng)煙，必增須配踢備有陶高壓競(jìng)輸液為系統(tǒng)騰。它艦是高鴉效液拼相色弄譜儀屋最重剃要的農(nóng)部件挖，一家般由儲(chǔ)液南罐、劫高壓海輸液贈(zèng)泵、或過(guò)濾量器、灰壓力裁脈動(dòng)青阻力暑器等袋組成，其紙中高壓保輸液慎泵是謙核心任部件。20燃23邁/6脊/2配5對(duì)于怕一個(gè)抹好的瘦高壓輸輸液泉泵應(yīng)假符合炮密封光性好怠，輸掙出流奸量恒符定，茶壓力閉平穩(wěn)問(wèn)，可爆調(diào)范鼻圍寬屑，便半于迅跳速更心換溶顆劑及晚耐腐聞蝕等咬要求續(xù)。常用晉的輸以液泵隔分為恒流交泵和恒壓家泵兩種米。20衣23截/6飾/2邁5恒流棍泵特點(diǎn)這是在弦一定速操作婦條件度下，需輸出漁流量蹈保持疊恒定鞋而與設(shè)色譜蛾柱引漠起阻施力變政化無(wú)咽關(guān)；恒壓靜泵是指口能保決持輸羅出壓駕力恒謎定，親但其漫流量?jī)磩t隨測(cè)色譜皂系統(tǒng)絕阻力趙而變阻化，財(cái)故保嗓留時(shí)船間的容重視宰性差暗，它潑們各尸有優(yōu)伙缺點(diǎn)辭。目前裕恒流識(shí)泵正編逐漸挖取代蒼恒壓緊泵。辱恒流挺泵又短稱機(jī)芒械泵其，它戀又分機(jī)械偶注射棟泵和歌機(jī)械壘往復(fù)炎泵兩種榮，應(yīng)掌用最既多的逝是機(jī)械托往復(fù)腿泵。20銜23新/6憤/2庫(kù)5高效瓜液相位色譜榨柱比凱氣相慢色譜疼柱短雄得多爪（約袋5～袍30cm頸），所以柱外許展寬棒（又兵稱柱倉(cāng)外效豆應(yīng)）仆較突螞出。柱外翼展寬錄是指污色譜侍柱外鉆的因就素所押引起厚的峰甘展寬奴，主要崖包括框進(jìn)樣婆系統(tǒng)暈、連婚接管狡道及巡壽檢測(cè)滾器中但存在幼死體保積。柱外鹽展寬蓄可分柱前和柱后展寬上。進(jìn)丸樣系忠統(tǒng)是災(zāi)引起腐柱前偶展寬誰(shuí)的主蜂要因悠素，穴因此鳥高效碌液相危色譜浮法中繁對(duì)進(jìn)展樣技抹術(shù)要慕求較旗嚴(yán)。（2榆）進(jìn)侍樣系遵統(tǒng)20利23裙/6辦/2柴5流路劉中為假高壓哭力工觸作狀拳態(tài)，樹通常捧使用儀耐高樂(lè)壓的胖六通雹閥進(jìn)柄樣裝永置，其結(jié)謙構(gòu)如水圖所寨示：進(jìn)樣庭裝置20咳23棵/6藥/2鋸5色譜傭柱是朋液相曲色譜球的心乞臟部掠件，成它包獅括柱管與固定先相兩部畏分。務(wù)柱管坦材料憑有玻著璃、僑不銹椒鋼、餡鋁、歪銅及右內(nèi)襯杏光滑鐘聚合飛材料防的其犧他金車屬。返玻璃閑管耐胖壓有店限，失故金賀屬管顫用得旱較多還。一般酷色譜寧柱長(zhǎng)旦5～成30cm末，內(nèi)徑芹為4素～5mm循，凝膠撇色譜池柱內(nèi)顏徑3起～1診2mm健，制備掀柱內(nèi)舟徑較軍大，務(wù)可達(dá)赤25mm以上咳。（3獻(xiàn)）分燃離系泡統(tǒng)—侵色譜喝柱20勻23紀(jì)/6闊/2芹5一般偷在分秀離前把備有火一個(gè)前置狹柱，前謊置柱肥內(nèi)填金充物咐和分張離柱鍬完全右一樣蒙，這糧樣可岡使淋塌洗溶矛劑由跑于經(jīng)眉過(guò)前初置柱廊為其侄中的毫固定糾相飽偶和，坑使它艷在流香過(guò)分洪離柱演時(shí)不寇再洗寧脫其闖中固潛定相帶，保矩證分佳離技奸的性飄能不虜受影莖響。20紫23族/6廣/2此5柱子視裝填財(cái)?shù)煤冒輭膶?duì)秧柱效籠影響姜很大蜂。對(duì)雨于細(xì)飽粒度數(shù)的填計(jì)料（賴＜2拘0μm冠）一般舊采用勻漿惡填充罩法裝魂柱，先臉將填浴料調(diào)險(xiǎn)成勻熄漿，罷然后冊(cè)在高鴿壓泵截作用嫂下，狠快速葵將其期壓入坐裝有戒洗脫劣液的單色譜娛柱內(nèi)洗，經(jīng)裁沖洗嫁后，角即可繳備用榆。20淋23殖/6布/2仆5柱體蠟為直章型不濕銹鋼襯管，發(fā)展扔趨勢(shì)是減務(wù)小填龍料粒鞏度和采柱徑抖以提菌高柱瞧效。高效亞分離包柱20透23榮/6陣/2晃5作用——判用巧來(lái)連衛(wèi)續(xù)監(jiān)晉測(cè)經(jīng)上色譜遠(yuǎn)柱分鄉(xiāng)豐離后陰的流噴出物宗的組孩成和陰含量挎變化惹的裝科置。在液侵相色棍譜中懲，有辰兩種泉基本炒類型寨的檢析測(cè)器甚。一復(fù)類是溶質(zhì)鐵性檢幟測(cè)器，它商僅對(duì)姻被分蠶離組倦分的聚物理萍或化里學(xué)特碼性有露響應(yīng)斥，屬狗于這匠類檢企測(cè)器忍的有紫外粗、熒丘光、擴(kuò)電化愛學(xué)檢前測(cè)器等。（4奴）檢弄測(cè)系無(wú)統(tǒng)20已23靈/6皺/2共5另一辭類是總體離檢測(cè)張器，它對(duì)漿試樣廚和洗留脫液胃總的捕物理誼或化釘學(xué)性定質(zhì)有查響應(yīng)杜，屬巖于這斤類檢兇測(cè)器杯的有示差嶼折光嗚，電鴨導(dǎo)檢錦測(cè)器等。現(xiàn)將刮常用指的檢方測(cè)器勒介紹機(jī)如下姜:20居23薪/6反/2稠5目前延最常受用的掛檢測(cè)刊器主瘦要有宜：紫外-可見檢測(cè)器熒光檢測(cè)器電化學(xué)檢測(cè)器蒸發(fā)光散射檢測(cè)器質(zhì)譜檢測(cè)器20海23鑼/6聰/2跪51.籠紫外駛-可介見檢防測(cè)器檢測(cè)室光源光柵二極管陣列檢測(cè)器20辣23堆/6循/2齒5紫外已光度杯檢測(cè)半器（UV察）：最小踩檢測(cè)艘量1暫0-9g·裳mL-1，對(duì)流增量和棒溫度監(jiān)的波究動(dòng)不賠敏感爐，可祝用于床梯度云洗脫卸。20豎23濤/6膽/2窄52.榮熒光冷檢測(cè)冤器許多糧有機(jī)練化合緞物，責(zé)特別唱是芳勝香族姥化合滋物、付被一香定強(qiáng)捕度和較波長(zhǎng)袍的紫晴外光熔照射紙后，影發(fā)射聞出較徐激發(fā)畫光波墻長(zhǎng)要止長(zhǎng)的失熒光圣。特點(diǎn)：洲有非渠常高黃的靈望敏度營(yíng)和良眠好的蔑選擇漏性，僅靈敏辣度要久比紫硬外檢撓測(cè)法豎高23個(gè)源數(shù)量過(guò)級(jí)，稿特別船適合耀于藥刪物和其生物賊化學(xué)爬樣品找的分性析。20筆23找/6紙/2沾5熒光蚊檢測(cè)對(duì)器結(jié)資構(gòu)示信意圖光源檢測(cè)器濾光片檢測(cè)室20耕23助/6網(wǎng)/2煩53.們蒸發(fā)星光散障射檢氣測(cè)器蒸發(fā)捐光散哥射檢娃測(cè)器迷適合賭于無(wú)廚紫外以吸收景、無(wú)鴿電活忌性和盤不發(fā)航熒光炭的樣況品的密檢測(cè)斧。20友23軟/6蠻/2揉54.喝電化央學(xué)檢昨測(cè)器濾（以電悄導(dǎo)檢頸測(cè)器碰為例）電導(dǎo)儀電極電極20功23云/6經(jīng)/2怖5問(wèn)題電導(dǎo)府檢測(cè)簽器怎飾樣消服除流物動(dòng)相舞電導(dǎo)卵的干捉擾？例如軌，采業(yè)用陽(yáng)幼離子良交換銀色譜紛分離種堿金塊屬離駛子時(shí)紗，通扮常用HC敏l作為杠流動(dòng)緩相。20就23材/6手/2誕55.踏示差弟折光拳率檢插測(cè)器幾乎睛所有端物質(zhì)齒都有符各自狡不同敵的折代射率馳，因利此差醒示折乖光檢凝測(cè)器熄是一大種通用致型檢測(cè)凈器。嗽靈敏拜度可霜達(dá)1啊0-7g·艙cm-3。主要缺點(diǎn)是對(duì)篩溫度齒變化欺敏感嚼，并壤且不序能用訴于梯偵度淋摧洗。20鞭23漢/6細(xì)/2阿520須23怕/6敢/2及5(5受)附演屬系爭(zhēng)統(tǒng)它包續(xù)括脫帆氣、顧梯度蕩淋洗騎、恒娘溫、格自動(dòng)核進(jìn)樣慶、餾旅分收置集以癥及數(shù)掛據(jù)處刃理等苦裝置淋。其貧中梯度存淋洗遇裝置是高楚壓液飄相色燒譜儀拔中尤天為重但要的室附屬霜裝置禾。20辟23葬/6瓣/2翻5梯度濤洗脫津裝置梯度頂洗脫就是輩在分悠離過(guò)歲程中穩(wěn)使兩權(quán)種或政兩種查以上新不同有極性則的溶頓劑按踏一定燥程序擁連續(xù)架改變記它們?nèi)局g行的比仙例，條從而室使流陵動(dòng)相銜的強(qiáng)恨度、別極性費(fèi)、pH值或?qū)m離子孝強(qiáng)度估相應(yīng)恥地變翁化，踏達(dá)到社提高侵分離潑效果承，縮磁短分崇析時(shí)報(bào)間的激目的賤。20振23槳/6僵/2捏5梯度昨洗脫肥裝置指分為兩類：一類勻是外梯傅度裝鳥置（又掌稱低罷壓梯考度）販，流查動(dòng)相姑在常雁溫常堤壓下討混合關(guān)，用躍高壓搶泵壓輕至柱陡系統(tǒng)絡(luò)，僅孕需一肯臺(tái)泵鋪即可漆。另一說(shuō)類是內(nèi)梯常度裝飼置（又殲稱高拼壓梯雪度）新，將殺兩種窄溶劑財(cái)分別稿用泵候增壓漁后，規(guī)按電序器部除件設(shè)覆置的顫程序移，注雁入梯撕度混玩合室障混合瓜，再放輸至扎柱系挑統(tǒng)。20體23真/6鹽/2全5梯度郊洗脫咐的實(shí)既質(zhì)是通接過(guò)不幅斷地騎變化找流動(dòng)莖相的送強(qiáng)度失，來(lái)儲(chǔ)調(diào)整秩混合償樣品虜中各珠組分描的k值，語(yǔ)使所殲有譜鑰帶都閥以最燦佳平振均k值通理過(guò)色仍譜柱優(yōu)。它在派液相跟色譜面中所用起的浙作用糠相當(dāng)澆于氣妙相色動(dòng)譜中堤的程族序升屈溫。所以不同澡的是嗚，在飽梯度糊洗脫弱中溶沙質(zhì)k值的存變化什是通認(rèn)過(guò)溶忘質(zhì)的謹(jǐn)極性烘、pH值和顫離子俱強(qiáng)度該來(lái)實(shí)債現(xiàn)的猴，而不是大借改僑變溫援度（頸溫度朱程序扁）來(lái)沙達(dá)到。20瓜23序/6席/2插5在線焦脫氣巨裝置在線決脫氣尖裝置叨用于蕉脫去糾流動(dòng)胖相中急的溶異解氣距體，尼流動(dòng)牌相先傅經(jīng)過(guò)笨脫氣屈裝置煌再輸飯送到頓色譜回柱。除在肅線脫屑?xì)庋b難置外性，目床前也學(xué)采用姓超聲菠脫氣鋼、真晝空脫絞氣等駁方式墨。脫氣調(diào)不好畝時(shí)有劫氣泡曲，導(dǎo)它致流釋動(dòng)相令流速掀不穩(wěn)乏定，鑄造成?；€偽飄移蒜，噪鈔音增餅加。20壩23炎/6撒/2死5在高莖效液飄相色昌譜中佩,越速率檢方程逃中的謙分子炮擴(kuò)散冠項(xiàng)B/內(nèi)U較小朝，可疫以忽晶略不偏計(jì)，掠而只框有兩按項(xiàng)，晚即：H窄=都A花+桑C校u故液語(yǔ)相色瞧譜H-貓u曲線符與氣嗽相色駱譜的猶形狀傲不同罵，如孤圖所餅示：影響筒分離港的主塘要因雅素有流茫動(dòng)相擊的流絞量、款性質(zhì)忍和極望性。三、土影響益分離盞的因得素20麻23鬼/6迫/2極520波23急/6斷/2蒼5流速許：流速葡大于翠0.閉5cm艇/s時(shí),H～u曲線絨是一鳳段斜篇率不待大的去直線毫。降源低流擺速，舊柱效霉提高年不是硬很大粘。但蹤蝶在實(shí)抹際操械作中虧，流弄量仍技是一腸個(gè)調(diào)睛整分譯離度憤和出荒峰時(shí)揮間的慣重要洽可選澡擇參賤數(shù)。影響再分離眾的因鮮素20辱23窩/6蘭/2繡5固定乏相及幅分離腸柱：氣洗相色修譜中伴的固止定液筋原則離上都隆可以敏用于隨液相勝色譜注，其全選用姻原則廁與氣跑相色其譜一等樣。摔但在遷高效臣液相歲色譜奶中，凍分離龜柱的介制備反是一肝項(xiàng)技許術(shù)要拆求非腳常高同的工幟作，綠一般撕很少樸自行遮制備。高效銅液相飛色譜昌的固斑定相轎和流匠動(dòng)相20馬23繞/6悟/2明5（－轎）固證定相高效撿液相哲色譜需固定謝相以州承受徒高壓放能力正來(lái)分許類，血可分僵為剛性分固體描和硬轉(zhuǎn)膠兩大諸類。房誠(chéng)剛性搜固體乓以二氧鑼化硅述為基巖質(zhì)，可膚承受7.O×效108～1忍.O凝×1導(dǎo)09Pa的高貫壓，?？芍朴殉芍标憦健⒓拘螤钍?、孔歉隙度絲式不同在的顆傾粒。胡如果噴在二鈔氧化尸硅表回面鍵悄合各懇種官懼能團(tuán)才，就握是鍵謊合固耳定相坑，可診擴(kuò)大沈應(yīng)用菊范圍炭，它歲是目籠前最胖廣泛州使用吉的一欺種固竄定相鑒。20輕23派/6驅(qū)/2賠5硬膠主要餅用于貝離子榮交換尼和尺行寸排萌阻色理譜中升，它儉由聚苯灰乙烯與二乙條烯苯腎基交聯(lián)陵而成描。可撕承受艇壓力元上限襖為3斑.5真×1拖08Pa姑。固定質(zhì)相按偏孔隙抵深度筐分類貧，可賤分為表面匠多孔啟型和全多嫂孔型鉛固定搬相兩類臉。20科23番/6棟/2害51.運(yùn)表面交多孔況型固清定相它的基體是實(shí)役心玻璃灶珠，在跟玻璃旗球外增面覆乓蓋一隙層多豎孔活億性材儉料，港如硅衣膠、令氧化團(tuán)鋁、引離子爹交換抵劑、彎分子傳篩、塔聚酸巴胺等晶。表面蘿活性析材料為氧化市鋁的固谷定相伙，這芒類固固定相瞧的多健孔層討厚度襖小、怨孔淺蔥，相茫對(duì)死供體積罪小，搏出峰臭迅速意、柱宴效亦壇高；滋顆粒合較大膏，滲爆透性爸好，蠻裝柱殲容易秀，梯陷度淋韻洗時(shí)嶼能迅妨速達(dá)奶平衡蓋，較倒適合編做常孤規(guī)分各析。折由于粉多孔句層厚疼度薄站，最竄大允元許量唉受限有制。20建23走/6甜/2揀52．蚊全多隔孔型坑固定開相它由直徑搜為1析0nm的硅貓膠微仇粒凝薄聚而成招。也確可由氧化氏鋁微烘粒凝肅聚成全品多孔氏型固襪定相去，這類伶固定辰相由喉于顆些粒很糟細(xì)（活5～壟10μm地），孔仍崖然較奮淺，征傳質(zhì)匙速率型快，枯易實(shí)裳現(xiàn)高矮效、壺高速扮。特劣別適躲合復(fù)怎雜混彎合物者分離擦及痕播量分奶析。20凡23軍/6維/2喉520妥23魯/6萄/2拖5流動(dòng)鎖相及詠流動(dòng)鞋相的箭極性（1）楚可顯餓著改辭變組兆分分薪離狀防況的泰流動(dòng)斗相選申擇在首液相雅色譜盡中顯疤得特餓別重較要。液相著色譜催的流稠動(dòng)相鄙又稱抗為：?jiǎn)柫芟垂乱海呦疵摌?biāo)劑。（2租）親薯水性鼓固定棕液常茂采用禮疏水戶性流飽動(dòng)相欣，即丹流動(dòng)鏈相的門極性夜小于央固定囑相的孟極性棕，稱渾為正相度液液墻色譜筐法，極酸性柱痛也稱正相塔柱。20查23大/6歇/2說(shuō)5（3爽）若掉流動(dòng)膏相的腸極性尼大于非固定封液的疊極性師，則根稱為反相巴液液要色譜，非沒(méi)極性扛柱也柏稱為反相柄柱。組聞分在峽兩種鹽類型僅分離幅柱上信的出對(duì)峰順六序相躲反。20爽23其/6嘩/2尖5流動(dòng)仿相組皂成流動(dòng)奪相按撕組成毛不同送可分龍為單組肝分和畏多組渾分；按極盒性可券分為極性冠、弱器極性泉、非液極性恨；按使病用方縮慧式有固定案組成誰(shuí)淋洗辛和梯欄度淋奏洗。常用餐溶劑:捎烷、引四氯銅化碳篩、甲債苯、覺(jué)乙酸宵乙酯庫(kù)、乙噸醇、犯乙腈酸、水神。采用互二元革或多方元組泰合溶少劑作砌為流襯動(dòng)相歸可以愁靈活嘴調(diào)節(jié)具流動(dòng)踩相的坑極性富或增犧加選浪擇性戲，以烘改進(jìn)偉分離鎮(zhèn)或調(diào)沈整出僚峰時(shí)謝間。20匯23唉/6止/2醫(yī)5（二物）流丸動(dòng)相由于供高效顫液相李色譜撇中流咽動(dòng)相列是液勤體，敗它對(duì)某組分寬有親吐和力絕，并液參與換固定您相對(duì)螺組分這的競(jìng)教爭(zhēng)。粘因此戴，正庭確選綿擇流貿(mào)動(dòng)相檢直接枝影響嫩組分粒的分驚離度買。對(duì)貓流動(dòng)鍛相溶攜劑的疾要求繡是：（1始）溶劑磁對(duì)于周待測(cè)活樣品健，必泰須具義有合攤適的榴極性撤和良色好的桶選擇譽(yù)性。（2違）溶劑乳要與曬檢測(cè)恥器匹對(duì)配。20客23鑒/6聲/2錄5（3卵）高純恐度?；钟捎谄咝С合嗵嘴`敏豈度高望，對(duì)芳流動(dòng)猜相溶資劑的默純度丙也要掘求高錦。不則純的白溶劑沈會(huì)引污起基督線不胸穩(wěn)，照或產(chǎn)堵生“透?jìng)畏迕瘛?。遷痕量贈(zèng)雜質(zhì)今的存倒在，難將使夫截止扁波長(zhǎng)走值增鉗加5蟻0～潤(rùn)1OO樓nm疫。（4譜）化學(xué)摩穩(wěn)定威性好榮。不張能選閑與樣濾品發(fā)必生反筋應(yīng)或邀聚合裂的溶章劑。（5神）低粘森度。躲若使費(fèi)用高污粘度瘡溶劑滋，勢(shì)楚必增吵高壓販力，蠶不利條于分采離。的常用長(zhǎng)的低砌粘度財(cái)溶劑碗有丙礦酮、濃乙醇態(tài)、乙刷晴等波。但寇粘度慨過(guò)于輪低的摔溶劑春也不農(nóng)宜采腔用，匙例戊多烷、坐乙醚紋等，雁它們電易在棚色譜瀉柱或歌檢測(cè)禮器內(nèi)四形成足氣泡腦，影勝響分框離。20疏23講/6辮/2子5對(duì)于質(zhì)紫外沙吸收統(tǒng)檢測(cè)矩器，撇應(yīng)注意送選用框檢測(cè)心器波糕長(zhǎng)比搞溶劑足的紫朽外截隨止波常長(zhǎng)要錘長(zhǎng)。爸所謂活溶劑銳的紫司外截征止波謹(jǐn)長(zhǎng)指成當(dāng)小余于截?zé)共ǘL(zhǎng)的托輻射憐通過(guò)擦溶劑川時(shí)，苗溶劑吧對(duì)此首輻射墓產(chǎn)生鉆強(qiáng)烈爺吸收狠，此艙時(shí)溶哀劑被戚看作么是光態(tài)學(xué)不紛透明敗的，鉗它嚴(yán)季重干彎擾組楚分的考吸收圍測(cè)量趴。表崇20擔(dān)-2燒列出招了一籃些常賄用溶娘劑的林紫外碗截止眨波長(zhǎng)脾。對(duì)于蝴折光啟率檢盈測(cè)器蜜，要翻求選債擇與嘩組分約折光魚率有殘較大佳差別錦的溶璃劑作肥流動(dòng)奶相，橋以達(dá)算最高葵靈敏抗度。20否23雖/6逢/2孝520襲23磁/6槽/2劃5高效槍液相凝色譜嘩法的獵主要艘分離君類型1.巡壽吸附叔色譜譯（液蔬-固爆吸附烈色譜冒）：以盞固體訪吸附嗚劑為扶固定槽相，盞如硅項(xiàng)膠、市氧化陽(yáng)鋁等邊，較切常使洋用的悶是5撐～1張0μm的硅柔膠吸秋附劑況。流著動(dòng)相邊可以乳是各慚種不雷同極球性的障一元臭或多銳元溶允劑。2.拒分配院色譜起（液設(shè)-液沸分配孝色譜愁）：早捏期通邀過(guò)在領(lǐng)擔(dān)體碎上涂伯漬一陸薄層犧固定軋液制銹備固鹽定相館,百現(xiàn)多劈燕為化請(qǐng)學(xué)鍵錫合固賞定相州，即幟用化慣學(xué)反小應(yīng)的搭方法算通過(guò)卷化學(xué)事鍵將足固定盈液結(jié)燭合在附擔(dān)體軋表面撇。20揮23駁/6儉/2勾53.符離子谷交換撒色譜：固鐵定相勵(lì)為離復(fù)子交早換樹充脂，流動(dòng)注相為丹無(wú)機(jī)泉酸或翅無(wú)機(jī)麻堿的蕉水溶揭液。案各種者離子秤根據(jù)悅它們栗與樹擾脂上珍的交挑換基航團(tuán)的崖交換罵能力談的不福同而姿得到退分離圍。4.幕凝膠鑄色譜山（空亡間排艘阻色削譜）：以厲凝膠撓為固確定相引。凝級(jí)膠是挪一種便經(jīng)過(guò)支交聯(lián)咱的、巷具有雀立體竟網(wǎng)狀豬結(jié)構(gòu)建和不住同孔階徑的成多聚暑體的寇通稱猜。如騰葡聚墊糖凝婚膠、茫瓊脂純糖等勇軟質(zhì)冊(cè)凝膠鴿；多毛孔硅經(jīng)膠、吼聚苯度乙烯錯(cuò)凝膠耀等硬詳質(zhì)凝掀膠；20篩23鏟/6您/2笛5高效千液相蓋色譜霸法的毒主御要類聯(lián)型及絞選擇（－含）液英一液膏分配蛙色譜奪法（LL榴PC圈）在液是-液排色譜館中,討流動(dòng)舅相和贊固定始相都陷是液龍?bào)w,蒙它能緣瑞適用池于各符種樣些品類砍型的匯分離劣和分木析，達(dá)無(wú)論測(cè)是極醒性的工和非敬極性謎的，咐水溶彎性和竹油溶國(guó)性的熱，離號(hào)子型狠的和胡非離丈子型鄰的化蔑合物最。20攤23仁/6罷/2犯51.境分離饞原理液液稈分配周色譜宗的分膜離原覺(jué)理基嗓本與多液液給萃取德相同日，都秋是根據(jù)糊物質(zhì)綁在兩爆種互忽不相絕溶的溫液體組中溶揀解度殊的不艘同，度具有尚不同押的分俘配系冊(cè)數(shù)。所不才同的潮是液部液色鮮譜的允分配揮是在底柱中賄進(jìn)行漢的，削使這刷種分怖配平費(fèi)衡可吳反復(fù)津多次廣進(jìn)行份，造科成各訓(xùn)組分沙的差耕速遷側(cè)移，老提高度了分嗚離效射率，斜從而貫?zāi)芊滞桦x各候種復(fù)漲雜組永分。20符23扒/6肯/2稻52.礎(chǔ)固定軌相由于厭液液允色譜直中流界動(dòng)相厚參與鄙選擇遷競(jìng)爭(zhēng)月，因養(yǎng)此，賣對(duì)固爹定相罷選擇堆較簡(jiǎn)限單?；恍杌I使用滿幾種奇極性演不同給的固營(yíng)定液亞即可僚解決配分離嬌問(wèn)題熊。例如屈，最積常用息的強(qiáng)極棉性固定宿液β，導(dǎo)β′一氧片二丙淹睛，中等熄極性的聚皇乙二趣醇，非極扯性的角爽鯊?fù)樘鹊取?0瘦23狡/6湖/2議53.竿流動(dòng)捆相在液兆液色翻譜中吵為了隸避免得固定們液的舍流失觀。對(duì)琴流動(dòng)記相的撇一個(gè)揭基本舒要求繪是流念動(dòng)相她盡可芽能不江與固極定相牲互溶催，而膠且流動(dòng)拐相與壤固定媽相的旋極性吃差別循越顯濃著越轉(zhuǎn)好。根合據(jù)所鋪使用紋的流押動(dòng)相羅和固地定相濾的極闖性程盯度，親將其臟分為正相球分配嘩色譜熄和反寺相分翁配色澇譜。20光23亂/6偉/2碰5如果貝采用流動(dòng)鏡相的瘡極性扒小于捐固定臂相的壟極性隸，稱義為正當(dāng)相分探配色勉譜，它支適用坊于極型性化司合物憤的分總離。裳其流出疏順序馳是極哲性小們的先浙流出征，極像性大伴的后禍流出。如果些采用流動(dòng)館相的撤極性返大于會(huì)固定趴相的寄極性堡，稱能為反雞相分述配色鍵譜。它捎適用此于非惜極性端化合縮慧物的容分離愿，其流滲出順紛序與嚴(yán)正相永色譜陜恰好就相反。20間23帆/6惹/2暗5為了顧更好竹解決短固定尚液在杰載體遺上流嶺失問(wèn)勤題。絲式產(chǎn)生詳了化學(xué)李鍵合評(píng)固定該相。它叔是將裙各種縮慧不同到有機(jī)寶基團(tuán)飛通過(guò)吩化學(xué)斧反應(yīng)亭鍵合蠶到載綿體表包面的拆一種燥方法悠。它刃代替弱了固延定液哥的機(jī)曉械涂紐奉漬，福因此隔它的穴產(chǎn)生盆對(duì)液翠相色煮譜法啄迅速奧發(fā)展屋起著兔重大億作用森，可以鹽認(rèn)為血它的錫出現(xiàn)填是液魂相色瘡譜法疊的一衰個(gè)重驢大突屢破。它滿是目建前應(yīng)繩用最梨廣泛蜂的一漠種固急定相臟。據(jù)腥統(tǒng)計(jì)貝，約寄有3叫/4搜以上靜的分賺離問(wèn)丘題是麥在化潔學(xué)鍵艙合固捕定相叛上進(jìn)勢(shì)行的云。20熱23廢/6隊(duì)/2寸5（二踏）化猴學(xué)鍵慢合相沙色譜冬法（CB脾PC嗽）采用餓化學(xué)爆鍵合貍相的坑液相鐘色譜宣稱為晃化學(xué)燦鍵合軋相色吩譜法聰，簡(jiǎn)稱攏鍵合穩(wěn)相色爬譜。柱由于狹鍵合腹固定乖相非農(nóng)常穩(wěn)籮定，增在使施用中反不易線流失期，適視用于之梯度諒淋洗緒，特形別適踏用于分離仙容量斜因子k值范鬧圍寬的樣菌品。睬由于適鍵合予到載坦體表遣面的拆官能居團(tuán)可廣以是測(cè)各種孔極性登的，貧因此軋它適肢用于訊種類金繁多慢樣品鮮的分倘離。20督23源/6削/2乖51.笑鍵合斬固定脫相類姿型用來(lái)城制備暫鍵合言固定支相的瘦載體斑，幾柜乎都肌用硅膠。利合用硅烏膠表秀面的搜硅醇原基(Si一OH母)與有襖機(jī)分鵲可成監(jiān)鍵,燦即可聚得到腦各種濫性能佩的固巖定相怒。一截般可敬分三類（1幫）疏水稠基團(tuán)如不文同鏈冤長(zhǎng)的激烷烴張（C8和C18）和苯剩基等詠；（2誓）極性那基團(tuán)如氨繪丙基料，氰托乙基委、醚你和醇踏等；（3望）離子笑交換浪基團(tuán)如作構(gòu)為陰招離子吸交換榮基團(tuán)潛的胺接基，憑季銨神鹽；禁作為規(guī)陽(yáng)離何子交晨換基仰團(tuán)的斗磺酸次等。20方23頭/6濫/2燒52.久鍵合酒固定券相的螞制備（l）硅酸撞酯（盟≡Si一OR袍）鍵合自固定問(wèn)相,它是斑最先諸用于開液相攻色譜肥的健搖合固噸定相王。用旁醇與謹(jǐn)硅醇泳基發(fā)疼生酯構(gòu)化反約應(yīng)：≡Si猴－0衡H＋回RO猴H→掙≡S取i－烘OR估＋H20由于答這類敵鍵合罷固定骨相的勵(lì)有機(jī)碑表面高是一此些單抓體，階具有甩良好般的傳攔質(zhì)特淡性,搭但這戀些酯韻化過(guò)笑的硅閱膠填噸料易媽水解百且受右熱不果穩(wěn)定席，因含此僅適別用于登不含潮水或萌醇的強(qiáng)流動(dòng)鳳相。20器23榮/6澆/2荒5（2麻）≡Si銷－C或Si一N共價(jià)應(yīng)鍵合黎固定桐相制備戴反應(yīng)柳如下糖：20稍23坊/6替/2拜5共價(jià)知鍵健姥合固挨定相柱不易縱水解捧，并米且熱敗穩(wěn)定海較硅保酸酯眠好。洞缺點(diǎn)用是格愛氏反歉應(yīng)不午方便蛋；當(dāng)鬧使用順?biāo)芤б簳r(shí)船，必須園限制pH在4讓～8搏范圍主內(nèi)。20遭23蒸/6基/2城5（3）硅烷呢化（創(chuàng)≡Si捕—O南－S陸i－揭C）鍵合脖固定國(guó)相制備龜反應(yīng)里如下手：這類董鍵會(huì)泡固定挺相具柄有熱垃穩(wěn)定側(cè)好，論不易也吸水義，耐螞有機(jī)續(xù)溶劑跡的優(yōu)粥點(diǎn)。珍能在追70掩℃以末下，pH服=2觀～8范圍偏內(nèi)正唯常工漏作，視應(yīng)用杯較廣堂泛。20真23填/6凍/2脖53．憶反相謀鍵合臺(tái)相色抵譜法此法慈的固不定相振是采筑用極莖性較嚼小的礙鍵合兵固定點(diǎn)相，巖如硅膠雨一C18H37、硅膠究一苯拿基等；流動(dòng)陵相是美采用畢極性蓄較強(qiáng)踩的溶疾劑，殘如甲勉醇、骨乙睛進(jìn)一水川、水結(jié)和無(wú)副機(jī)鹽吼的緩寬沖溶升液等。調(diào)它多叉用于相分離談多環(huán)棒芳烴塵等低棵極性凈化合京物；20塘23鎖/6儀/2典5若采吸用含一會(huì)定比銷例的恐甲醇中或乙臣睛的根水溶到液為羊流動(dòng)早相，也盞可用腦于分租離極挎性化黎合物君；若采悄用水和倍無(wú)機(jī)脫鹽的察緩沖俘液為元流動(dòng)有相，則戴可分獨(dú)離一很些易伸離解匆的樣趙品，堵如有端機(jī)酸估、有扯機(jī)堿嫁、酚會(huì)類等穗。反相烈鍵合童相色戒譜法送具有沒(méi)柱效位高，耗能獲替得無(wú)酷拖尾半色譜辰峰的優(yōu)點(diǎn)。20旦23往/6黨/2湖5關(guān)于鍵反相恒鍵合絡(luò)相色敵譜的跪分離章機(jī)理坐，可棵用所狐謂疏溶嬌劑作辛用理叨論來(lái)揪解釋。這捧種理中論把戲非極資性的茄烷基欠鍵合座相看汗作一卻層鍵乘合在婆硅膠峰表面蒜上的慚十八冬烷基艦的“分子瘋毛”，杰這種殺“分弊子毛第”有牙較強(qiáng)炸的疏忘水特躁性。恰當(dāng)用適極性盟溶劑陶為流雀動(dòng)相注來(lái)分能離含謠有極猛性官僑能團(tuán)鉛的有杯機(jī)化腦合物泉時(shí)：20壞23蒙/6黑/2域5一方和面，分熟子中加的非理極性徐部分倘與固奇定相儲(chǔ)表面夜上的哭疏水豪烷基放產(chǎn)生執(zhí)締合灘作用偷，使悠它保匪留在瞞固定嫂相中艘；而另一身方面，被哲分離她物的拴極性達(dá)部分欣受到組極性宜流動(dòng)俱相的身作用上，促剪使它嗚離開惱固定彎相，駛并減見小其常保留血作用鈔（見嫩圖2楚0-乓4）院。顯彩然，兩種利作用晃力之勒差，梳決定辯了分輪子在姨色譜綠中的雨保留明行為。20妻23絡(luò)/6勝/2貢520酷23務(wù)/6把/2紹54.枯正相纖鍵合靈相色塑譜法此法府是以極沾性的隆有機(jī)番基團(tuán)痛，CN笑、N脅H2。雙羥豈基等蹤蝶鍵合沫在硅規(guī)膠表蔽面，秩作為盼固定澤相；而乞以非儲(chǔ)極性伶或極交性小忌的溶沫劑（奶如烴懼類）原中加雨入適路量的裂極性寸溶劑墓（如擴(kuò)氯仿酸、醇欺、乙男腈等從）為薯流動(dòng)約相，寺分離馳極性離化合底物。20湖23判/6糞/2蠅5此時(shí)鞏，組分美的分昆配比k值隨段其極饅性的梨增加搶而增益大，挖但隨儉流動(dòng)運(yùn)相極孟性的春增加賊而降頃低。這種浪色譜鍋方法五主要規(guī)用于膀分離壟異構(gòu)頂體、并極性獵不同樸的化攝合物攀，特郊別適果用于位分離肯不同罪類型壞的化葉合物鋪。20拉23譽(yù)/6房誠(chéng)/2樂(lè)55.離子泉性鍵幅合相賄色譜誓法當(dāng)以亞薄殼蹦型或隆全多酸孔微兔粒型盞硅膠貫為基念質(zhì)，板化學(xué)踏鍵合掩各種叼離子潑交換稻基團(tuán)繞，如差一SO3H一CH2NH2、－犯C0遠(yuǎn)0H猴、一CH2N（暮CH3）等時(shí)蘆，就呼形成震了離奏子性捐鍵合鄉(xiāng)豐相色勒譜的命固定止相；流動(dòng)脈相一遷般采界用緩惹沖溶萍液。其分廁離原斤理與蜓離子眠交換最色譜調(diào)類同塞。20堤23盒/6謝/2儉5以上切討論居了各枯種類榨型化攝學(xué)鍵饞合相儉色譜男法，蛛歸納賠鍵合糞相色欠譜的最大霞優(yōu)點(diǎn)是：通過(guò)針改變鈔流動(dòng)域相的啟組成銅和種望類，餃可有鹽效地覺(jué)分離濟(jì)各種愿類型拌化合阻物（列非極番性、理極性豬和離勺子型孩）。20釣23摧/6列/2六5此外立，由俱于鍵靈合到稅載體辮上的漲基團(tuán)秒不易夢(mèng)流失敗，特挨別適道用于恩梯度碌淋洗轟。據(jù)威統(tǒng)計(jì)者，在稻高效偷液相眨色譜索法中宴，約鳳有8O％的分緒離問(wèn)勻題是狹用鍵矩合相潤(rùn)色譜街法解洲決。此法鹿的最也大缺點(diǎn)是不譜能用油于酸賀、堿偷度過(guò)鄭大或理存在檢氧化邊劑的搖緩沖拉溶液患作流佩動(dòng)相載的體棄系。如何貸根據(jù)竊樣品艦極性倉(cāng)種類躬來(lái)選擇濕化學(xué)俊鍵合旋的固省定相，請(qǐng)湯參看救表2剖1-松3。20陜23胳/6苗/2眾520魯23指/6錄/2滴5（三弱）液陜一固馬吸附覺(jué)色譜順?lè)?LS盾AC隙)液一雅固吸歲附色聽譜是請(qǐng)以固挽體吸例附劑貸作為霧固定敏相，耽吸附翠劑通裹常是口些多涂孔的失固體愛顆粒隙物質(zhì)頸，在驕它們平的表步面存司在吸紡附中銳心。液固纖色譜譽(yù)實(shí)質(zhì)排是根溉據(jù)物城質(zhì)在布固定鴿相上闊的吸崗附作熱用不己同來(lái)層進(jìn)行厲分離煤的。1．蒸分離筑原理20慶23僑/6咱/2豎5當(dāng)流北動(dòng)相扛通過(guò)米固定蓋相（駁吸附變劑）怎時(shí)，蒼吸附偉劑表病面的呢活性啄中心誼就要姜吸附監(jiān)流動(dòng)險(xiǎn)相分佛子。教同時(shí)撓，當(dāng)瞧試樣派分子盟（X）被流竿動(dòng)相媽帶入免柱內(nèi)金，只太要它譯們?cè)诒夤潭ò叵嘤行右欢暢潭纫龅谋ＹY留就晨要取沸代數(shù)跳目相咳當(dāng)?shù)母G已被來(lái)吸附傅的流欄動(dòng)相壤溶劑究分用歸）于哈是，蒼在固蹤蝶定相奔表面屋發(fā)生絞競(jìng)爭(zhēng)餃吸附優(yōu):X厚+棄nSad=駱Xad+促nS20刑23蒸/6仿/2霧5達(dá)平朵衡時(shí)放,有其中Kad為吸腐附平而衡常趟數(shù)，面值大宿表示鬧組分毫在吸印附劑濟(jì)上保督留強(qiáng)濤，難鏈于洗凱脫。Kad值小卻,則猾保留趟值弱逮，易壁于洗愚脫。禾試樣氧中各執(zhí)組分烘據(jù)此攔得以位分離火。Kad值可疾通過(guò)喪吸附練等溫念線數(shù)岡據(jù)求江出。20太23戰(zhàn)/6模/2跑52.疏固定診相吸附秤色譜輸所用饒固定株相多紙是一尿些吸啞附活腰性強(qiáng)動(dòng)弱不腦等的攜吸附因劑，言如硅膠習(xí)、氧腔化鋁讓、聚麗酸膠限等。由往于硅妙膠的盲優(yōu)點(diǎn)斥較多智，如叛線性劉容量卷較高促，機(jī)書械性吩能好里，不跳溶脹盯，與卻大多往數(shù)試牌樣不譜發(fā)生允化學(xué)滋反應(yīng)擁等，創(chuàng)因此刪，以碑硅膠然用得銹最多可。20灣23挨/6之/2壤5在高夾效液哪相色族譜法殺中，符表面販多孔礎(chǔ)型和稱全多聯(lián)孔型扇都可妨作吸析附色胞譜中級(jí)的固殼定相淺，它男們具喇有填滋料均尖勻、蹤蝶粒度領(lǐng)小。益孔穴遮淺的割優(yōu)點(diǎn)患，能怨極大偉地提達(dá)高柱傍效。開但表仔面多唇孔型堅(jiān)由于雕試樣正容量笨較小蝕，目吉前最走廣泛刷使用受的還托是全多撇孔型興微粒皮填料。20叨23宰/6寒/2廁53流動(dòng)減相一般博把吸盜附色爹譜中流動(dòng)護(hù)相稱陸作洗錫脫劑。在樹吸附巡壽色譜晉中對(duì)苦極性尿大的材試樣色往往截采用觸極性椅強(qiáng)的炸洗脫婦劑；晴對(duì)極送性弱寫的試景樣宜籍用極壤性弱月的洗爛脫劑雪。洗騎脫劑傷的極勞性強(qiáng)付弱可匪用溶葬劑強(qiáng)終度參敗數(shù)（ε0）來(lái)衡渾量，ε0越大駕，表假示洗叉脫劑戴的極紡性越汽強(qiáng)。20槐23野/6標(biāo)/2但520夕23就/6盈/2雜5下表泰列出子一些艷常用彩溶劑支在氧怕化鋁陪吸附秘劑中繪的ε0值。驅(qū)在硅制膠吸菜附劑調(diào)中ε0值的劃順序袖相同疼，數(shù)祖值可泡換算薯（ε0硅膠=0歌.7涂7×ε0氧化惑鋁）陪。20驚23芒/6再/2權(quán)5液固隸色譜村最適途宜分堪離那冠些溶耽解在怪非極妻性溶誓劑中網(wǎng)、具昆有中邪等相密對(duì)分固子質(zhì)踐量且希為非狂離子嗚型的軍試樣飲。特別投適用搬于分艷離異鼠構(gòu)體些。20福23壘/6盯/2歉5(四回）離舊子交峰換色漲譜法冒（IE傭C）此法梳是利挖用離子圈交換置原理膝和液霞相色寨譜技制術(shù)的結(jié)中合來(lái)滲測(cè)定獵溶液文中陽(yáng)數(shù)離子第和陰怪離子海的一小種分淡離分奇析方擔(dān)法。凡在溶液暗中能夠莖電離竭的物倒質(zhì)，通常煉都可棵用離寶子交猜?lián)Q色勢(shì)譜法辮進(jìn)行既分離。它真不僅猜適用辣無(wú)機(jī)單離子約混合刮物的鋤分離坦，亦仍可用吹于有察機(jī)物張的分年離，塘例如虎氨基繩酸、殼核酸迎、蛋吊白質(zhì)槳等生王物大醒分子戚。因堡此，曠應(yīng)用翻范圍傳較廣保。20鑄23創(chuàng)/6慌/2末51．脖離子叮交換辦原理離子秘交換戲色譜蠅法是懲利用悶不同待測(cè)虛離子對(duì)固隱定相親和秩力的示差別來(lái)實(shí)閣現(xiàn)分舍離的維。其固白定相夢(mèng)采用離子云交換需樹脂，樹嫌脂上犬分布面有固定覽的帶宋電荷堤基團(tuán)右和可講游離鄭的平停衡離晴子。20襲23食/6若/2田5陽(yáng)離猛子交依換：當(dāng)待太分析慨物質(zhì)讀電離忘后產(chǎn)物生的獵離子叛可與和樹脂慘上可女游離航的平脹衡離布子進(jìn)捆行可意逆交伶換，其交蒜換反錢應(yīng)通適式如臣下：20禿23托/6閘/2徒5一般老形式秀：R一A＋嚼B銀＝界R學(xué)－B望＋A達(dá)平衡時(shí)，慣以濃錯(cuò)度表重示的閱平衡富常數(shù)村（離線子交鎮(zhèn)換反泥應(yīng)的市選擇孤系數(shù)音）：20籮23夏/6符/2劫5式中移[A]室r，塔[B椒]r分別笛代表搬樹脂逃相中繁洗脫份劑離稱子（A）和試猶樣離掀子（B）的濃沿度，領(lǐng)[A]柔、[厭B]則代型表它淹們?cè)谔胰芤貉械闹禎舛仁?。離子己交換倍反應(yīng)湖的選菊擇性等系數(shù)壟表示清試樣潑離子B對(duì)于A型樹懼脂親臣和力幅的大畫?。篕B/特A越大棒，說(shuō)棉明B離子搬交換才能力垃越大堤，越羨易保誤留而脂難于粥洗脫窩。一般糠說(shuō)來(lái)緩，B離子凝電荷訂越大洋，水腔合離瘦子半譜徑越頑小，KB/需A值就畏越大穿。20銹23餓/6竊/2攔5對(duì)于木典型放的磺酸暢型陽(yáng)沉離子閉交換牽樹脂，一價(jià)改離子手的KB/座A值按株以下姜順序繳：Cs+＞R洋b+＞K+＞N胸H4+＞N陶a+＞H+＞L炸i+二價(jià)昌離子睬的順鼓序?yàn)榉Γ築a2+＞P消b2+＞S顫r2+＞C州a2+＞C獲d2+＞C行u2+，Z持n2+＞M棉g2+20磨23蛛/6謹(jǐn)/2哀5對(duì)于辱季銨慶型強(qiáng)劉堿陰檢離子漢交換蒸樹指朝，各萬(wàn)陰離干子的播選擇席性順佩序?yàn)閭€(gè)：Cl遣O4-＞I-＞H價(jià)S04-＞S筒CN-＞N嫂O2-＞B定r-＞C鞏N-＞C飽l-＞B鼠rO3-＞O何H-＞H反CO3-＞H2P04-＞I清O3-＞C暈H3CO漠O－＞F－20稿23子/6牢/2浩52.固定驢相賣作衡為固烤定相紐奉的離螺子交擺換劑饞，其尾基質(zhì)曉大致充有三噸大類佛：合成蛛樹脂喚（聚削苯乙蝦烯）譯、纖咱維素青和硅常膠。而污離子纖交換固劑又皮有陽(yáng)飛離子腥和陰烈離子影之分懂。再租根據(jù)協(xié)官能匹基的洲離解所度大站小還輝有強(qiáng)察弱之肢分（米見下雁表）殲。20墨23嶺/6這/2典520甜23膨/6饞/2甘5常用漫的離廈子交顆換劑遼固定愿相大串致可吼分以傳下幾種惱：（l）多孔捕型離塌子交帥換樹遇脂--醬-它垮主要大是聚苯匙乙烯市和二侍乙烯距苯基怎的交截聯(lián)聚盤合物，直歪徑約中為5腰～2愉0μm配，有微直孔型悄和大打孔型租之分麥；（2）薄膜脹型離胞子交器換樹鵲脂--拍-它嘗是在椒直徑孫約為棄30μm的固嗎體惰侍性核環(huán)上，寸凝聚霉1～洽2μm厚的閣樹脂鄰層；20增23伏/6辜/2呈5（3）表面彩多孔嫂型離誦子交賤換樹短脂--咐-它吃是在中固體本惰性感核上耐，覆謎蓋一密層微憐球硅介膠，粱再在論上面隆涂一克層很餡薄的賓離子歉交換蘭樹脂皮；（4給）離閃子交階換鍵若合固奇定相--伴-它是型用化常學(xué)反適應(yīng)將吉離子濁交換叨基團(tuán)譯鍵合巧到惰擋性載災(zāi)體表慶面。傾它也南分為兩種萬(wàn)類型：20響23毅/6在/2由5一種關(guān)是鍵合論薄殼弊型，其運(yùn)載體荷是薄少殼玻貪珠。列另一建種是鍵合拘微粒緒載體絨型，它鐮的載耀體是鴨多孔卷微粒悟硅膠肆。后階者是干一種驅(qū)優(yōu)良嶺的離返子交綿換固晃定相當(dāng)，它孟的優(yōu)點(diǎn)是機(jī)幻玉械性誓能穩(wěn)論定，對(duì)可使丑用小嚷粒度蝴固定摔相和口高柱午壓來(lái)謊實(shí)現(xiàn)管快速軟分離煎。20秒23鉤/6樓/2允53．流旁動(dòng)相離子蓮交換潔色譜粉法所占用流微動(dòng)相大都踏是一惡定pH和鹽孕濃度兼（或教離子優(yōu)強(qiáng)度垂）的蘿緩沖動(dòng)溶液嚼。通過(guò)肢改變輔流動(dòng)汗相中鹽離鍋?zhàn)拥目糠N類佛、濃鄭度和pH值可瞞控制k值，修改變晶選擇凱性。如曲果增相加鹽腰離子遙的濃只度，女則可乳降低撕樣品凝離子牌的競(jìng)感爭(zhēng)吸墊附能淋力，住從而許降低狐其在范固定元相上誤的保維留值庸。20虧23例/6串/2險(xiǎn)5一般笑，對(duì)牽于陰皇離子振交換牢樹脂巨來(lái)說(shuō)陰離觀子的車滯留梳次序臭為：檸檬迎酸離略子＞SO42－＞C2O42-＞I-＞N只O3-＞C糖rO42-＞B巴r-＞S歷CN-＞C纏l-＞H拉CO暑O-＞C鉛H3C0倆0-＞O費(fèi)H-＞F-所以煤用檸施檬酸崖離子袋洗脫富要比某用氟剛離子云快。陽(yáng)離脫子的半滯留熟次序液大為農(nóng)：Ba2+＞P鉤b2+＞C蠟a2+＞N嘆i2+＞C拖d2+＞C日u2+＞C拼o2+＞Z唉n2+＞M打g＞妨Ag+＞C甚s+＞R兆b+色＞K+＞N殺H4+＞N畢a+＞H+＞L觸i十20旬23謹(jǐn)/6認(rèn)/2曲5但差雨別不纏如陰猶離子品明顯鴿。關(guān)貿(mào)于pH值的難影響滅，要蛋視不杯同情德況而存定。例如聚，分少離有冰機(jī)酸典和有多機(jī)堿興時(shí)，挖這些造酸堿蠅的離請(qǐng)解程弊度可準(zhǔn)通過(guò)懂改變求流動(dòng)陰相的pH值來(lái)乒控制略。增大pH值會(huì)使擁酸的石電離邪度增蓬加，眨使堿伍的電邁離度怪減少逮；降低pH值，其洞結(jié)果他相反偽。但剖無(wú)論儀屬于詢哪種午情況冶，只要他電離勉度增盟大，箏就會(huì)雁使樣餃品的求保留虧增大蒜。20同23誕/6見/2赴5（五銜）離爭(zhēng)子色咸譜法貌（IC喘）離子攜色譜須法是叔由離辦子交毅換色幫譜法圈派生手出來(lái)減的一史種分?jǐn)囯x方懸法。由于脂離子誤交換隱色譜故法在姜無(wú)機(jī)享離子梨的分此析和諸應(yīng)用帶受到帥限制既。例扒如，越對(duì)于橋那些誦不能蛙采用同紫外全檢測(cè)嘩器的寨被測(cè)陡離子巡壽，如蜻采用鞋電導(dǎo)浸檢測(cè)除器，機(jī)由于靜被測(cè)勸離子齊的電越導(dǎo)信效號(hào)被愁強(qiáng)電烤解質(zhì)秒流動(dòng)結(jié)相的止高背敏景電襖導(dǎo)信仇號(hào)掩剩沒(méi)而聚無(wú)法戲檢測(cè)很。20導(dǎo)23寨/6休/2炮5為了羊解決都這一償問(wèn)題律，1萌97蠅5年Sm卻al優(yōu)l等人喜提出但一種機(jī)能同稅時(shí)測(cè)雞定多亞種無(wú)遲機(jī)和綠有機(jī)刪離子乞的新破技術(shù)孤。他們泡在離米子交里換分笛離柱曉后加舌一根蔽抑制屈柱。抑制槐柱中禽裝填到與分距離柱慎電荷榆相反世的離賀子交綁換樹仍脂。通刑過(guò)分乘離柱搞后的治樣品恭再經(jīng)褲過(guò)抑極制柱釣，使霉具有緞高背敏景電肢導(dǎo)的譜流動(dòng)箏相轉(zhuǎn)畝變成奶低背慨景電逆導(dǎo)的軟流動(dòng)吩相，20匆23其/6暑/2拼5從而融用電頑導(dǎo)檢屯測(cè)器藝可直源接檢梳測(cè)各誦種離剛子的弦含量律。這前種色巖譜技威術(shù)稱膠為離子針色譜。若樣批品為獨(dú)陽(yáng)離氏子，投用無(wú)機(jī)丟酸作流危動(dòng)相敗，抑劣制柱定為高容器量的棉強(qiáng)堿勤性陰文離子鳴交換掌劑。當(dāng)笑試樣坑經(jīng)陽(yáng)廚離子誘交換導(dǎo)劑的隙分離稈柱后逢，隨吃流動(dòng)擊相進(jìn)筑入抑惑制柱疫，在級(jí)抑制墻柱中朋發(fā)生協(xié)兩個(gè)極重要物反應(yīng)陽(yáng)：20請(qǐng)23全/6銹/2揉5R+－O迫H＋雖H+Cl--→胡R+－C小l十H2OR+一OH-＋M+Cl--→堆M+OH－＋R+－C諒l-由反旱應(yīng)可什見：在經(jīng)抑款制柱雀后，慈一方文面將亮大量王酸轉(zhuǎn)拍變?yōu)榫妼?dǎo)版很小葵的水粘，消嚇除了揀流動(dòng)棚相本譜底電某導(dǎo)的媽影響紗。同時(shí)順，又幣將樣些品陽(yáng)不離子M+轉(zhuǎn)變生成相伯應(yīng)的更堿，喊由于OH-離子何的淌麻度為Cl-離子瞞的2.挎6倍，提脊高了默所測(cè)打陽(yáng)離魔子電筍導(dǎo)的鞠檢測(cè)驕靈敏如度。當(dāng)對(duì)于辟陰離脂子樣鴉品也隸有相慨似的枝作用臭機(jī)理匯。20爪23封/6浮/2易5在分版離柱慚后加螺一個(gè)蠅抑制公柱的橡離子彎色譜有亦稱見為抑制擋型離首子色紋譜或鎖稱雙逢柱離持子色速譜。由奇于抑斤制柱架要定昌期再期生，奧而且撞譜帶爆在通挺過(guò)抑蠟制柱寸后會(huì)賓加寬紋，降燦低了倉(cāng)分離祝度。后來(lái)挺，F(xiàn)r紗it支s等人