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免疫組化應(yīng)用免疫組化應(yīng)用免疫組化應(yīng)用免疫組化的原理根據(jù)抗原和抗體特異性反應(yīng)的免疫學(xué)原理,應(yīng)用標(biāo)記抗體檢測組織中未知抗原的方法??乖?抗體(標(biāo)記)→抗原抗體復(fù)合物通過抗原和抗體的特異性結(jié)合檢測組織中的化學(xué)成分(蛋白—抗原)顯示系統(tǒng):抗原抗體復(fù)合物+檢測系統(tǒng)將二抗和酶通過一個多聚葡聚糖骨架聯(lián)接成一個多聚體(即)免疫組化的原理根據(jù)抗原和抗體特異性反應(yīng)的免疫學(xué)原理,應(yīng)用標(biāo)記抗體檢測組織中未知抗原的方法??乖?抗體(標(biāo)記)→抗原抗體復(fù)合物通過抗原和抗體的特異性結(jié)合檢測組織中的化學(xué)成分(蛋白—抗原)顯示系統(tǒng):抗原抗體復(fù)合物+檢測系統(tǒng)將二抗和酶通過一個多聚葡聚糖骨架聯(lián)接成一個多聚體(即)PrimaryAntibodyPolymercomplexSubstrate-chromogensolution染色方法(1)、將切片撈至膠片上,放入60℃溫箱中烘烤1小時。(2)、經(jīng)二甲苯脫蠟,梯度酒精脫水后流水沖洗。(3)、過3%H2O2中20后流水沖洗。(4)、修復(fù)高火3后,低火15后,自然冷卻至室溫。(5)、取出玻片放至濕盒,沖洗,33。擦干玻片,每張玻片加1滴或50μl的第一抗體40。(6)、沖洗,33。擦干玻片,每張玻片加1滴或50μl的聚合物增強(qiáng)劑(試劑A),室溫孵育20。(7)、沖洗,33。擦干玻片,每張玻片加1滴或50μl的酶標(biāo)鼠/兔聚合物(試劑B),室溫下孵育30。(8)、沖洗,33。擦干玻片,每張玻片加2滴或100μl的液,顯微鏡下觀察,10顯色。(9)、流水沖洗,蘇木素復(fù)染1-2,0.1%鹽酸分化,自來水沖洗后返藍(lán)。(10)、梯度酒精脫水干燥,二甲苯透明,中性樹膠封片。免疫組化的使用范圍組織學(xué)標(biāo)本中的應(yīng)用細(xì)胞塊中的應(yīng)用各系統(tǒng)腫瘤的抗體表達(dá)對腫瘤進(jìn)行來源分類上皮性腫瘤的標(biāo)記物間葉腫瘤的標(biāo)記物淋巴造血系統(tǒng)腫瘤的標(biāo)記物神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的標(biāo)記物、、56各系統(tǒng)腫瘤的抗體表達(dá)上皮性腫瘤中的腺癌CK7+CK20-Villin+Villin-可見于:胃腺癌(41.67%)、乳頭狀腎細(xì)胞癌(17.39%)、乳腺浸潤性導(dǎo)管癌(5.36%)、卵巢漿液性腺癌(3.7%)少見于:肺鱗癌、肺腺癌、肺小細(xì)胞癌、腎透明細(xì)胞癌、嫌色細(xì)胞癌、前列腺癌、直腸腺癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢粘液性癌??梢娪冢喝橄俳櫺托∪~癌(100%)、肺腺癌(95.83%)、乳腺浸潤型導(dǎo)管癌(78.57%)、卵巢漿液性腺癌(70.37%)、嫌色細(xì)胞癌(66.67%)、卵巢粘液性腺癌(37.5%)、肺鱗癌(11.43%)、前列腺癌(9.09%)、直腸腺癌(2.78%)、胃腺癌(2.78%)、腎透明細(xì)胞癌(2.33%)。少見于:肺小細(xì)胞癌、乳頭狀腎細(xì)胞癌。CK7+CK20+Villin+Villin-可見于:胃腺癌(13.89%)、卵巢粘液性腺癌(12.5%)、直腸腺癌(5.56%),乳頭狀腎細(xì)胞癌(4.35%)少見于:肺鱗癌、肺腺癌、肺小細(xì)胞癌、腎透明細(xì)胞癌、腎嫌色細(xì)胞癌、乳腺癌、卵巢漿液性癌??梢娪冢郝殉舱骋盒韵侔?12.5%)乳腺浸潤性導(dǎo)管癌(3.57%)、胃腺癌(2.78%)、直腸腺癌(2.78%)。少見于:肺鱗癌、肺腺癌、肺小細(xì)胞癌、腎透明細(xì)胞癌、乳頭狀腎細(xì)胞癌、嫌色細(xì)胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢漿液性癌。CK7-CK20-Villin+Villin-可見于:乳頭狀腎細(xì)胞癌(43.47%)、胃腺癌(18.06%)、直腸腺癌(16.67%)、卵巢粘液腺癌(12.5%)、嫌色細(xì)胞癌(11.11%)、前列腺癌(4.54%)。少見于:肺鱗癌、肺腺癌、肺小細(xì)胞癌、腎透明細(xì)胞癌、乳腺浸潤型導(dǎo)管癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢漿液性癌??梢娪冢悍涡〖?xì)胞癌(100%)、腎透明細(xì)胞癌(42/43,97.67%)肺鱗癌(88.57%)、前列腺癌(86.36%)、乳頭狀腎細(xì)胞癌(34.78%)、嫌色細(xì)胞癌(22.22%)、卵巢漿液腺癌(18.52%)、乳腺浸潤型導(dǎo)管癌(16.07%)、胃腺癌(13.89%)、直腸腺癌(5.56%)、肺腺癌(4.17%)。少見于:乳腺浸潤性小葉腺癌、卵巢粘液腺癌。CK7-CK20+Villin+Villin-可見于:直腸腺癌(52.78%)、卵巢粘液性腺癌(25%)、胃腺癌(6.94%)、卵巢漿液性癌(3.7%)。少見于:肺鱗癌、肺腺癌、肺小細(xì)胞癌、腎透明細(xì)胞癌、乳頭狀腎細(xì)胞癌、嫌色細(xì)胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤性導(dǎo)管癌、乳腺浸潤性小葉癌??梢娪冢褐蹦c腺癌(13.89%)、卵巢漿液性腺癌(3.7%)。少見于:肺鱗癌、肺腺癌、肺小細(xì)胞癌、腎透明細(xì)胞癌、乳頭狀腎細(xì)胞癌、嫌色細(xì)胞癌、前列腺癌、乳腺浸潤性導(dǎo)管癌、乳腺浸潤性小葉癌、卵巢粘液性癌、胃腺癌1、軟組織小圓細(xì)胞腫瘤

100小細(xì)胞未分化癌+-+-----神經(jīng)內(nèi)分泌癌+-+-++--神經(jīng)母細(xì)胞瘤-+--++-尤文肉瘤-+--++-胚胎性橫紋肌肉瘤-+----+-惡性淋巴瘤---+----惡性黑色素瘤-+----+(45+)、、、、、45胞漿胞膜/胞漿胞膜100胞核/漿間皮:、陽性橫紋?。?+)、1(弱+)血管:31、34陽性顆粒細(xì)胞瘤:100、342100神經(jīng)纖維瘤+++孤立性纖維性腫瘤++-滑膜肉瘤-+-孤立性纖維性腫瘤99+滑膜肉瘤、雙陽2、乳腺P635/634βE12導(dǎo)管原位癌+-+-浸潤性導(dǎo)管癌--+-浸潤性小葉癌---+P63胞核5/6胞漿胞漿、胞膜34βE12胞漿

乳腺病理、顯示腫瘤的內(nèi)分泌表達(dá),與腫瘤的內(nèi)分泌治療反應(yīng)率相關(guān)2腫瘤相關(guān)因子,靶向治療67顯示細(xì)胞增殖指數(shù)、胞核2胞膜67胞核中間型上皮成熟型5/68/18+5/68/18+干細(xì)胞5/68/18-63-中間型肌上皮成熟型5/663+5/663+5/6,8/18,胞漿P63胞核2的染色意義陽性強(qiáng)度的判斷:強(qiáng)的著色是指4x或10x物鏡下易于觀察到,弱的強(qiáng)的著色是指需要用40x物鏡觀察。2與治療及預(yù)后的關(guān)系不僅與浸潤型乳腺癌的不良預(yù)后有關(guān),并能預(yù)測多種化療藥機(jī)內(nèi)分泌治療的敏感性。靶向藥物赫賽汀2的染色意義0+浸潤性腫瘤細(xì)胞無著色1+任何比例的浸潤性腫瘤細(xì)胞呈弱而不完整的包膜著色或<10%的腫瘤細(xì)胞呈弱且完整著色2+≥10%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)弱或不一致的、完整的包膜著色;或≤30%的腫瘤細(xì)胞呈現(xiàn)強(qiáng)且完整的包膜著色3+>30%的浸潤性腫瘤細(xì)胞呈強(qiáng)且完整包膜著色指導(dǎo)治療267:60-70%的內(nèi)分泌治療反應(yīng)率:10%的內(nèi)分泌治療反應(yīng)率:40%的內(nèi)分泌治療反應(yīng)率:46%的內(nèi)分泌治療反應(yīng)率陽性分級(或陽性細(xì)胞數(shù)比例)與治療反應(yīng)的相關(guān)性尚缺乏統(tǒng)一認(rèn)識3、消化720+胃腸間質(zhì)瘤117,34肝1漿陽、、2主要表達(dá)于結(jié)腸,胃癌和卵巢粘液性腺癌也有表達(dá)117胞膜/胞漿,34胞膜2胞核7,20,,胞漿4、泌尿腎10117透明細(xì)胞-++-+(膜)+-(乳頭狀癌)嫌色細(xì)胞癌++-+(漿)鐵++(嗜酸細(xì)胞腺瘤)集合管癌+++-±、–L、胞漿10胞膜、117、胞膜/胞漿

移行上皮:正常7陽性,20陽性提示腫瘤5、生殖卵巢上皮性腫瘤720-,125卵巢上皮(+)無性細(xì)胞瘤(女性)=精原細(xì)胞瘤(男性),,117胚胎性癌,30,子宮

合體滋養(yǎng)葉弱+細(xì)胞滋養(yǎng)葉--中間滋養(yǎng)葉弱+,胞漿

子宮內(nèi)膜樣癌++-宮頸癌--+胞漿胞核胞膜/胞漿前列腺基底細(xì)胞陽性標(biāo)記:高分子量(34βE125/6)P504s腫瘤性腺泡(+),良性腺泡(-)前列腺上皮(+)34βE12,5/6,,P504s胞漿6、神經(jīng)內(nèi)分泌甲狀腺156乳頭狀癌++--濾泡癌++-+髓樣癌-+++甲狀腺乳頭狀癌3,19、胞漿1胞核56胞膜腎上腺皮質(zhì)1、、、陽性髓質(zhì)、、15陽性1、、、胞漿胞核/胞漿15胞膜/胞漿7、肺鱗狀細(xì)胞癌14、5/6、34βE12和p63;腺癌7和;神經(jīng)內(nèi)分泌癌56、、、13、18、。

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