兒童PID免疫學(xué)改變

兒童PID免疫學(xué)改變

原發(fā)性免疫缺陷病是一組少見而重要的免疫系統(tǒng)癥候群，其病因復(fù)雜，無論是免疫活性細(xì)胞還是免疫應(yīng)答分子缺陷均可造成免疫功能失衡，使機(jī)體抗感染免疫功能低下，甚至并發(fā)自身免疫性疾病和腫瘤，故在臨床上對(duì)嚴(yán)重感染患兒的免疫功能檢測(cè)尤為重要。本研究對(duì)76例PID患兒的免疫指標(biāo)進(jìn)行檢測(cè)分析，旨在加強(qiáng)臨床兒科醫(yī)師對(duì)該類疾病的認(rèn)識(shí)，提高臨床診治水平。

1對(duì)象與方法

1．1對(duì)象

收集上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院門診和病房收治的PID患兒76例，其中普通變異性免疫缺陷病20例，細(xì)胞免疫缺陷病10例，聯(lián)合免疫缺陷病11例，低丙種免疫球蛋白血癥25例，中性粒細(xì)胞減少癥3例，選擇性IgA缺乏癥3例，DiGeorge綜合征2例，共濟(jì)失調(diào)毛細(xì)血管擴(kuò)張癥2例。診斷和分類標(biāo)準(zhǔn)參照2009年免疫學(xué)會(huì)國際聯(lián)合會(huì)PID分類委員會(huì)公布的方案[1]。

1．2方法

回顧性分析PID患兒相關(guān)免疫功能的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果。檢測(cè)指標(biāo)包括血清免疫球蛋白、T細(xì)胞亞群、CD19＋細(xì)胞，部分CVID患兒檢測(cè)IgG亞類、NK細(xì)胞百分比及T細(xì)胞功能亞群及活化指標(biāo)。

1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS14．0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。兩組間比較用秩和檢驗(yàn)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2．1PID患兒體液免疫功能變化

本組患兒中，CVID及聯(lián)合免疫缺陷病患兒的IgG均較正常值明顯降低，尤以CVID降低更為明顯，且伴IgA及CD19＋細(xì)胞明顯降低，而聯(lián)合免疫缺陷病患兒的CD19＋細(xì)胞均值則增高達(dá)45．80％。IgA降低除見于CVID外，主要見于IgAD及AT，尤其是IgAD的IgA水平顯著低于正常，僅為0．05g／L；中性粒細(xì)胞減少癥患兒的免疫球蛋白不低反而均升高。低丙種球蛋白血癥患兒的IgG、IgA及CD19＋細(xì)胞均降低。見表1。本組7例CVID患兒的IgG亞類的檢測(cè)結(jié)果顯示，IgG1、IgG3均較同年齡正常值降低，有5例IgG2降低，IgG4均正常。見表2。

2．2PID患兒T淋巴細(xì)胞亞群變化

本組患兒中，細(xì)胞免疫缺陷病、聯(lián)合免疫缺陷病及DGS患兒的CD3＋、CD4＋及CD8＋T細(xì)胞降低；中性粒細(xì)胞減少癥患兒的CD4＋T細(xì)胞及CD4＋／CD8＋比例有所降低；AT患兒的CD4＋／CD8＋比例也降低。見表3。

2．3CVID患兒NK細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞功能亞群及活化的變化

對(duì)8例CVID患兒進(jìn)行NK細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞功能亞群及活化的檢測(cè)，其中5例患兒CD4＋／CD8＋比例倒置。與對(duì)照組相比，CVID患兒CD4＋HLA-DR＋和CD8＋CD45RO＋T細(xì)胞比例明顯升高，CD4＋CD45RA＋T細(xì)胞比例明顯降低，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CD4＋CD45RO＋、CD8＋CD45RA＋和CD16＋CD56＋與對(duì)照組之間的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見表4。

3討論

PID患兒大多存在B細(xì)胞功能障礙。本組患兒中，體液免疫功能主要檢測(cè)了免疫球蛋白水平和CD19＋B細(xì)胞，兩項(xiàng)檢查均反映了B細(xì)胞的功能狀態(tài)。CD19是一種相對(duì)分子質(zhì)量為95000的糖蛋白，表達(dá)于所有B細(xì)胞表面。作為B細(xì)胞表面輔助因子之一，CD19與其相應(yīng)配體分子結(jié)合后，提供協(xié)同刺激信號(hào)以使B細(xì)胞活化，并調(diào)節(jié)其功能。

PID患兒抗體缺陷可能是B細(xì)胞本身發(fā)育障礙，如抗體缺乏性免疫缺陷病往往出現(xiàn)抗體和CD19＋B細(xì)胞減少甚至缺如；也可能與正常B細(xì)胞不能接受有缺陷的T輔助細(xì)胞的協(xié)同信號(hào)刺激有關(guān)。PID中CVID發(fā)病率較高，本院以往統(tǒng)計(jì)的近30年的PID發(fā)病數(shù)為93例，其中CVID22例，占23．7％[2]。本組中CVID及聯(lián)合免疫缺陷病患兒IgG均較正常值降低，尤以CVID降低更為明顯，且伴有IgA及CD19＋B細(xì)胞明顯下降。低丙種球蛋白血癥患兒IgG、IgA均降低，而B細(xì)胞極少甚至缺如，其CD19＋B細(xì)胞明顯降低。中性粒細(xì)胞減少癥患兒的Ig不低反而升高。提示CVID、聯(lián)合免疫缺陷病、低丙種球蛋白血癥不同程度的存在B細(xì)胞發(fā)育和活化障礙，這導(dǎo)致B細(xì)胞功能缺陷，從而使抗體產(chǎn)生障礙。3例IgAD及2例AT患兒IgA降低，尤其是IgAD患兒的IgA明顯低于正常，僅為0．05g／L，與文獻(xiàn)報(bào)道一致[3，4]。IgG根據(jù)其重鏈結(jié)構(gòu)不同分為IgG1、IgG2、IgG3和IgG44種亞型，其中IgG1占總IgG的70％。在CVID患兒，由于B細(xì)胞功能受損，其重鏈形成產(chǎn)生差異。本組20例CVID患兒中7例進(jìn)行了IgG亞型檢測(cè)，結(jié)果7例IgG1和IgG3均較正常降低，5例IgG2降低。以往研究表明，IgG1和IgG3不僅有抗蛋白抗體的作用，還有抗人類多種脂多糖抗原的作用，兩者在誘導(dǎo)補(bǔ)體介導(dǎo)的殺傷或?qū)ν淌杉?xì)胞介導(dǎo)的清除莢膜菌的作用較強(qiáng)。本組7例IgG1低下的患兒，臨床上均有反復(fù)感染癥狀，與上述推論相符。IgG2和IgG4主要是抗細(xì)菌脂多糖的抗體，兩者缺乏的患者對(duì)有莢膜的細(xì)菌易感，血清IgG2濃度在臨床上常作為對(duì)感染易感性的標(biāo)志。因此CVID患者血清IgG亞類缺陷與感染有關(guān)，其易感性與IgG亞類的綜合變化有關(guān)，臨床上對(duì)IgG亞類的檢測(cè)有助于判斷其臨床易感性[5]。T細(xì)胞亞群中CD3代表總T細(xì)胞，為成熟T細(xì)胞膜上T細(xì)胞抗原識(shí)別受體復(fù)合物的一個(gè)重要組成部分。CD3陽性細(xì)胞又可分為CD4＋和CD8＋細(xì)胞。CD4＋細(xì)胞為輔助／誘導(dǎo)性T細(xì)胞，CD8＋細(xì)胞主要為細(xì)胞毒性T細(xì)胞。一般而言，CD3＋、CD4＋細(xì)胞及CD4＋／CD8＋比例降低提示細(xì)胞免疫功能受損。本組病例中，細(xì)胞免疫缺陷病、聯(lián)合免疫缺陷病及DGS患兒的CD3＋、CD4＋細(xì)胞均降低。DGS是由于胸腺發(fā)育不全導(dǎo)致的T細(xì)胞系列缺乏所致，根據(jù)其細(xì)胞免疫缺陷的嚴(yán)重程度不同，可分為不完全性和完全性2種。本組2例DGS的CD3＋、CD4＋和CD8＋T細(xì)胞均值均有所降低，提示其可能屬于不完全性DGS。CVID雖被歸于體液免疫缺陷范疇，但近年來發(fā)現(xiàn)部分患兒同時(shí)存在T細(xì)胞調(diào)節(jié)功能失常。本組CVID患兒的CD4＋T細(xì)胞有所降低，而CD8＋T細(xì)胞有所增加，導(dǎo)致CD4＋／CD8＋比例降低，提示其發(fā)病機(jī)制可能與T細(xì)胞對(duì)B細(xì)胞的輔助功能不足而抑制功能加強(qiáng)有關(guān)。聯(lián)合免疫缺陷病是PID種最嚴(yán)重的一種，其在細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)和抗體產(chǎn)生方面均有嚴(yán)重的缺陷，導(dǎo)致患兒易產(chǎn)生各種嚴(yán)重的及條件致病微生物的感染。本組CID患兒CD3＋、CD4＋和CD8＋T細(xì)胞均降低，尤以CD3＋、CD4＋更為明顯。

CD45RA和CD45RO是CD45的兩種異型，均屬I型跨膜蛋白，廣泛存在于白細(xì)胞表面，其胞漿均具有酪氨酸磷酸酶活性，在淋巴細(xì)胞的發(fā)育成熟、功能調(diào)節(jié)及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中具有重要意義。CD45RA＋T細(xì)胞被稱為初始T淋巴細(xì)胞，即未致敏T細(xì)胞；而CD45RO＋T細(xì)胞被稱為記憶T細(xì)胞，具有輔助誘導(dǎo)作用[6，7]。本組8例CVID患兒中，CD8＋CD45RO＋T細(xì)胞比例明顯升高，CD4＋CD45RA＋T細(xì)胞比例明顯降低。文獻(xiàn)報(bào)道，CVID患者可出現(xiàn)CD45R異型分布的異常，Richards等[8]分析了8例CVID患者CD4＋和CD8＋T細(xì)胞中CD45RA和CD45RO的變化，發(fā)現(xiàn)7例患兒存在CD45RA和CD45RO表達(dá)的異常，其中4例患者CD45RO的表達(dá)是增加的，與本研究結(jié)果基本一致。我們推測(cè)，CD8＋CD45RO＋T細(xì)胞比例升高，在接受外界抗原刺激時(shí)，可迅速啟動(dòng)CTL細(xì)胞的殺傷功能，體內(nèi)的免疫格局向細(xì)胞免疫偏移；同時(shí)CD4＋CD45RA＋T細(xì)胞比例的降低，使得輔助B細(xì)胞產(chǎn)生抗體的Th2細(xì)胞減少，導(dǎo)致體液免疫受損。HLA-DR是MHC-II類分子，是活化T淋巴細(xì)胞的表面標(biāo)志。本研究發(fā)現(xiàn)，CVID患兒CD3＋T淋巴細(xì)胞表面HLA-DR的表達(dá)高于正常對(duì)照組，這與國外很多報(bào)