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文檔簡介
預防艾滋病、梅毒、乙肝母嬰阻斷實驗室檢測目錄1.乙肝五項實驗室快速檢測。2.HIV實驗室快速檢測。3.梅毒螺旋體抗體非特異性反應檢測(TRUST)。4.梅毒螺旋體抗體檢測(ELISA法)。5.乙肝人免疫球蛋白。乙肝五項實驗室快速檢測
試劑名稱:乙型肝炎病毒表面抗原、表面抗體、e抗原、e抗體、核心抗體檢測試劑盒(膠體金法)
檢測原理:HBsAg,HBeAg檢測試紙條采用雙抗體夾心法,試紙條含有被事先固定于膜上測試區(qū)(T)的多克隆抗體和控制區(qū)(C)的相應抗體。HBsAb檢測試紙條采用雙抗原夾心法,試紙條含有被事先固定于膜上測試區(qū)(T)的乙肝表面抗原和控制區(qū)(C)的相應抗體。測試時,血清/血漿標本滴入試劑板加樣處,隨之標本在毛細效應下向上層析。如標本中含有相應的待測物質(zhì),在測試區(qū)內(nèi)(T)出現(xiàn)一條紅色條帶,則是陽性結(jié)果。如標本中不含有相應的待測物質(zhì),則測試區(qū)內(nèi)(T)將沒有紅色條帶,則是陰性結(jié)果。無論相應的待測物質(zhì)是否存在于標本中,一條紅色條帶都會出現(xiàn)在質(zhì)控區(qū)內(nèi)(C)。質(zhì)控區(qū)內(nèi)(C)所顯現(xiàn)的紅色條帶是判定是否有足夠標本,層析過程是否正常的標準,同時也作為試劑的內(nèi)控標準。HBeAb,HBcAb檢測試紙條采用競爭抑制法,試紙條含有被事先固定于膜上測試區(qū)(T)的單克隆抗體和控制區(qū)(C)的相應抗體。測試時,血清/血漿標本滴入試劑板加樣處,隨之標本在毛細效應下向上層析。如標本中含有相應的抗體,則同膜上測試區(qū)(T)的單克隆抗體競爭與預包被在乳膠顆粒上的相應抗原反應。如標本中沒有相應的抗體,預包被在乳膠顆粒上的相應抗原則同膜上測試區(qū)(T)的單克隆抗體全部結(jié)合。強陽性標本,測試區(qū)內(nèi)(T)將沒有紅色條帶,弱陽性標本,測試區(qū)內(nèi)(T)將有一條非常弱的紅色條帶,陰性標本,測試區(qū)內(nèi)(T)將會出現(xiàn)明顯的紅色條帶。無論相應的抗體是否存在于標本中,一條紅色條帶都會出現(xiàn)在質(zhì)控區(qū)內(nèi)(C)。質(zhì)控區(qū)內(nèi)(C)所顯現(xiàn)的紅色條帶是判定是否有足夠標本,層析過程是否正常的標準,同時也作為試劑的內(nèi)控標準。標本收集:標本收集后應盡快分離出血清或血漿以避免溶血。檢測時應盡量使用新鮮的標本。標本若不能及時送檢,可在2℃-8℃冷藏3天。長期保存需冷凍于-20℃,忌反復凍融。操作步驟:在進行測試前必須先完整閱讀使用說明書,使用前將試劑板和血樣標本恢復至室溫(20℃-30℃)。1.從原包裝鋁箔袋中取出試劑板,在小時內(nèi)應盡快地使用。2.用吸管吸取血清/血漿標本,逐滴(每孔2-3滴)加入試劑板的五個加樣孔中。3.等待紅色條帶的出現(xiàn),測試結(jié)果應在15分鐘時讀取。20分鐘后判定無效。檢驗結(jié)果判定:陽性(+):兩條紅色條帶出現(xiàn),一條位于測試區(qū)(T)內(nèi),另一條位于質(zhì)控區(qū)(C)。陽性結(jié)果表明:標本中含有待測物質(zhì)。陰性(-):僅質(zhì)控區(qū)(C)出現(xiàn)一條紅色條帶,在測試區(qū)(T)內(nèi)無紅色條帶出現(xiàn)。陰性結(jié)果表明:標本中檢測不出待測物質(zhì)。無效:質(zhì)控區(qū)(C)未出現(xiàn)紅色條帶,表明不正確的操作過程或試紙條已變質(zhì)損壞。在任何情況下,應重新測試。如果問題仍然存在,應立即停止使用此批號產(chǎn)品,并與當?shù)毓搪?lián)系。注意:測試區(qū)(T)內(nèi)的紅色條帶可顯現(xiàn)出顏色深淺的現(xiàn)象。但是,在規(guī)定的觀察時間內(nèi),不論該色帶顏色深淺,即使只有非常弱的色帶也應判為陽性結(jié)果。
強陽性(+):僅質(zhì)控區(qū)(C)出現(xiàn)一條紅色條帶,在測試區(qū)(T)內(nèi)無紅色條帶出現(xiàn)。陽性結(jié)果表明:標本中含有待測抗體。弱陽性(+):質(zhì)控區(qū)(C)出現(xiàn)一條紅色條帶,在測試區(qū)(T)內(nèi)有非常弱的紅色條帶出現(xiàn)。弱陽性結(jié)果表明:標本中含有少量待測抗體。陰性(-):兩條紅色條帶出現(xiàn),一條位于測試區(qū)(T)內(nèi),另一條位于質(zhì)控區(qū)(C)。陰性結(jié)果表明:標本中檢測不出待測抗體。無效:質(zhì)控區(qū)(C)未出現(xiàn)紅色條帶,表明不正確的操作過程或試紙條已變質(zhì)損壞。在任何情況下,應重新測試。如果問題仍然存在,應立即停止使用此批號產(chǎn)品,并與當?shù)毓搪?lián)系。注意事項:1.乙肝兩對半血清/血漿檢測試劑板適用于測試血清/血漿標本。2.由于在技術(shù)上和操作上可能出現(xiàn)的失誤,同時也由于標本中存在干擾物,試劑結(jié)果有可能錯誤。對可疑結(jié)果應作相應的進一步檢測。3.乙肝兩對半血清/血漿檢測試劑板只是定性的篩選乙肝病毒血清標志物的存在,但不能確定其在標本中的含量。4.測試結(jié)果應在15分鐘時讀取,20分鐘后判定無效。HIV實驗室快速檢測試劑名稱:艾滋病毒1/2型抗體快速檢測(膠體金法)檢測原理:HIV1/2試劑盒采用高度特異性的抗體抗原反應及免疫層析分析技術(shù)來定性檢測血液中是否含有HIV1/2抗體,試劑盒中含有被事先固定于膜上測試區(qū)(T)的重組HIV抗原和質(zhì)控區(qū)(C)的相應抗體。測試時,血標本滴入試劑盒加樣孔(S)內(nèi),血標本中的HIV1/2抗體與預包被在膜上的重組抗原-乳膠結(jié)合物反應。然后,混合物隨之在毛細效應下向上層析,在測試區(qū)(T)與固定在膜上的重組HIV抗原反應。如果血液中含有抗HIV-1或HIV-2抗體,在測試區(qū)內(nèi)(T)會出現(xiàn)一條紅色條帶,表明是陽性結(jié)果。如果在測試區(qū)內(nèi)(T)沒有出現(xiàn)紅色條帶,則血液中不含有抗HIV1/2抗體,表明是陰性結(jié)果。無論抗-HIV1/2抗體是否存在于血液中,混合物都會繼續(xù)向上層析至質(zhì)控區(qū)(C),質(zhì)控區(qū)的相應抗體與乳膠結(jié)合物反應出現(xiàn)一條紅色條帶。質(zhì)控區(qū)內(nèi)(C)所顯現(xiàn)的紅色條帶是判定層析過程是否正常的標準,同時也作為試劑的內(nèi)控標準。結(jié)果判定:陽性(+):兩條紅色條帶出現(xiàn)。一條位于測試區(qū)內(nèi)(T),另一條位于質(zhì)控區(qū)內(nèi)(C)。陰性(-):僅質(zhì)控區(qū)(C)出現(xiàn)一條紅色條帶,在測試區(qū)內(nèi)(T)無紅色條帶出現(xiàn)。無效:質(zhì)控區(qū)(C)未出現(xiàn)紅色條帶,表明不正確的操作過程或試劑盒已變質(zhì)損壞。在任何情況下,應重新測試。如果問題仍然存在,應立即停止使用此批號產(chǎn)品,并與當?shù)毓搪?lián)系。注意:由于樣本中抗-HIV抗體滴度的不同,測試區(qū)(T)內(nèi)的紅色條帶會顯現(xiàn)出不同深淺的顏色。但是,本試劑盒的測試結(jié)果不能做為判定樣本中抗體滴度高低的依據(jù)。
標本收集:血標本的采集:指尖、耳垂末梢或靜脈標本采集后應盡可能立即使用,抗凝血應在24小時內(nèi)使用以避免融血。血清/血漿標本的收集:血清/血漿標本由靜脈采血后離心獲得,標本在2-8℃可保存一周。如長期保存需冷凍。避免反復凍融。操作步驟:在進行任何測試前必須先完整閱讀使用說明,使用前將檢測試劑盒和全血/血清/血漿標本恢復至室溫(20-30℃),取出反應緩沖液并放置20分鐘使其恢復至室溫。1.從原包裝鋁箔袋中取出試劑盒(注意:在打開鋁箔袋前應先恢復至室溫)。在1小時內(nèi)應盡快地使用,特別是在室溫高于30℃或是在高度潮濕的環(huán)境中應盡快地使用。在一小時內(nèi)測試將會得到最佳效果。2.將試劑盒置于干凈平坦的臺面上,用吸管吸取指尖血或靜脈血后滴入1滴全血/血清/血漿(約25ul)于加樣孔S中,隨后加入1滴緩沖液于加樣孔S中。切勿將指尖血直接滴入加樣孔內(nèi)。3.等待紅色條帶的出現(xiàn),在15分鐘左右讀取測試結(jié)果。關鍵要注意,在紅色條帶出現(xiàn)以前,背景要清晰,特別當樣本中含有低滴度的抗-HIV1/2抗體,會導致出現(xiàn)的T線顏色很淡,此時更需注意背景要清晰。在20分鐘后讀取的結(jié)果無效。注意擋事項蘇:HI擔V1籮/2乳膠術(shù)層析按法檢予測試等劑盒肅僅用相于體裹外診型斷,繁并適晉用于廣檢測頃全血/血清/血漿級樣本共中的表抗-H勵IV錦1/腹2抗體河。這斗項測敵試僅院表示抽樣本引中抗-H嫌IV透1/排2抗體解的存脾在,浙而不機能作蒸為機蚊體感償染HI瓦V-沃1或HI恒V-旁2的標訂準??錇榱酥甏_保盈結(jié)果榴的準揉確性磁,可值對樣奪本用EL俘IS龜A或We生st皆er才nB品lo榴t作進惱一步快的分居析。奸同所蕩有的叫診斷泛試劑著一樣委,檢藍測結(jié)礎果必扇須結(jié)語合內(nèi)才科醫(yī)稅生得討出的清其它宣臨床這癥狀放進行丸診斷艇。如果掛測試弟結(jié)果笛呈陰薦性并租有臨韻床癥牛狀存窗在,栽可建謎議使傲用其遠他臨越床方瓦法進購行測鏡試。驗陰性魚結(jié)果觸并不榜能排懂除感緊染HI序V-勸1或HI栗V-廣2的可沃能性漆。梅毒翠螺旋嚴體抗焰體非趟特異典性反謝應檢植測(TR積US去T)檢測釀方法思:甲苯得胺紅紅不加裹熱血儲清學楊試驗津(TR喜US費T)實驗腫原理:采用宣性病蔽研究摸所實紹驗室情玻片住試驗漿(VD怖RL)抗陸原重頭懸于叉含有叔特制撤的甲閱苯胺虹紅溶友液中宰制成數(shù)。將??扇芄残钥故吭葍S吸附桃于適次當大狡小的狗顆粒的性載營體的修表面治,然心后與營相應賤抗體咸作用吹,在愉適當節(jié)的電粗解質(zhì)懼存在亦的條切件下顧,出墨現(xiàn)凝濁集現(xiàn)法象,奴既可分定性舉檢測毀,又良能半耗定量吳測定山。該筐方法而簡便爆,敏蠻感度利較高憂,在擱臨床遲檢驗啄中被悟廣泛遙應用公。標本頃收集匪:用無償抗凝妄管抽槽取靜蚊脈血2-針3m拾l(fā),離鋸心(15唐00揪-3奔00惡0轉(zhuǎn)/分)豪分離掀出血貝清。輝不能譯立即干測定軟的標持本應匹保存誤于2-陷8℃的冰員箱,田于3內(nèi)檢撈測,近超過3天應享分離央出血差清于2-鄉(xiāng)豐8℃的冰并箱,逐一周讓內(nèi)檢廁測完劉畢。操作劫步驟秀:1分別勾吸取50席ul梅毒便陽性蹦對照遞和陰搬性對泛照均宣勻鋪鳥加在慚紙片印的兩斤個圓續(xù)圈中惰。2取待局檢血昆清50運ul(不籮需滅刪活)聲置于呆紙片槍的另扭一圓柄圈中領。3用專旁用滴冒管和拍吸頭雷垂直末分別似滴加TR客US稠T試劑1滴于弱上述饞血清樣中。4按每野分鐘10窮0轉(zhuǎn)搖備動8分鐘孕,肉賊眼觀宏察結(jié)天果。結(jié)果琴判定歉:1陽性織反應工(++粒+~++患++):啞可見斬中等約或較薦大的命紅色夢凝集坦物。2弱陽頸性反丑應(+~++):裹可見暗較小踐的紅糞色凝秋集物峰。3陰性坑反應壤(—):伙可見羊均勻桐的紅灘色抗姑原顆伍粒而墨無凝埋集物角。注意因事項匆:1.操作從前請襪仔細者閱讀繭操作浪規(guī)程向。2.試劑頁盒存愿放于2-俘8攝氏搞度環(huán)究境中鼠;使材用前爪將試葛劑盒耍置于飼室溫修下平危衡,總試驗齡應在逃室溫23沙-2島9℃條件相下進擱行。3.批號挪不同蘇的試昌劑盒堂不能逃混用金。4.待測泰標本種必須法符合產(chǎn)要求丸,溶鑄血標陡本不亞能進脆行檢缸測。5.如做筋半定剖量試溉驗,詢可將棕待檢吹血清婚用生雖理鹽垮水作基倍比桑稀釋惱,然翠后按當上述筐定性予方法甜進行滲試驗燦,以彈呈現(xiàn)荷明顯甲凝集芒反應戲的最往高稀類釋度得作為武該血譯清的厭凝集尖效價懂。6.本試陶驗系臺非特戴異性棋反應像需結(jié)炸合臨轉(zhuǎn)床進冠行綜報合分武析,救必要炭時作條特異孟性密斯螺旋丘體試坐驗進唐行確基認。7.使用井后所識有物揀品,塌應按竟傳染菠源處替理。8.朽TR板US鎖T抗原余在使沿用前慣必須永充分守搖勻桂。檢測擦方法疫:酶聯(lián)梢免疫砌吸附漂試驗土(EL系IS省A)實驗盡原理挽:雙抗優(yōu)原夾饅心法用精犧制的純基因概工程罰表達傻的酶續(xù)毒螺淺旋體哭特異慣性抗棕原色稀被酶覽粒板言及標噸記辣橡根過晃氧化槳酶,寸同時拔加入辭待測記血清朵或血續(xù)漿與封酶標羞記抗富原以TM始B顯色即。本懂方法榆適用伙于獻序血員林篩選省,婚港檢和賞臨床抹診斷理梅毒封螺旋斑體感筍染。標本悶收集名:用肝娘素鋰貌抗凝天管抽懂取靜浙脈血2-3m發(fā)l,離遞心(15戚00-30紙00轉(zhuǎn)/凡分)15分鐘嘆分離蜂出血擴漿,鐘不能敢立即眠測定漁的標臨本應恥保存途于2-8℃于3日內(nèi)拘檢測盯,超圍過3天應英分離革出血禿漿于2-8℃的冰嚴箱內(nèi)倘保存掃,一那周內(nèi)植檢測程完畢行。梅毒斷螺旋膠體抗顧體檢抽測(E搶LI芳SA法)操作安步驟秋:1取出恨酶標赴板條且固定壩于板輛架上烤,按笛順序妖編號棚,室償溫平奴衡18乞-2延5℃?zhèn)溆觅v。2加樣神:分新別在擇相應尸孔中障加入10牢0u然l陰、斤陽性賤對照諸血清尖和待宴測樣爭本。3溫育侵:覆影上封遞板模桑,置37慰℃溫育60分鐘隊。4洗滌術(shù):小肯心將汪封板綿膜揭讓掉,詢使用歸冼板泛機吸泊干孔注內(nèi)液樂體,駛用洗智滌液艘充分喬洗滌6遍,臘最后挑一次孫盡量近扣干它。5加酶帥:分褲別在驢每孔予中加坡入酶潛標記政抗原10易0u平l。6溫育恢:覆聞上封山板模妖,置37?!鏈赜?0分鐘拾。7顯色她:每迫孔加屆顯色哨劑A、B各50你ul,輕酸拍混冶勻37供℃避光證顯色30分鐘臨。8測定愛:每憲孔加許終止硬液50捉ml,混旱勻,語于45補0n貿(mào)m處,渠用空熟白孔養(yǎng)調(diào)零貍的測拍定各啄孔OD值。結(jié)果巨判定花:樣本OD值S/傻C.蹈o.隱≥1者為補梅毒錘螺旋穴體抗渾體反稍應陽性。樣本OD值S/舉C.競o.<1者為照梅毒犯螺旋掙體抗混體反掠應陰性。陰性勢對照OD均值智>0.溜1或陽譯性對麻照OD均值降≤0.忠5時,施實驗摩無效斷,應秤重新賽試驗侄。注意雅事項鑼:1死加樣仆應拖將所幣加物兆加在漂板孔氧底部屋,避丸免加斑在孔嗎壁上柱部,勢并注扔意不曠可濺乒出,笨不可獵產(chǎn)生另氣泡理.2奧保溫春抗屑原抗橋體反起應的磚完成瘦需要浩一定掠溫度匯和時縫間。籮一般填采用主37呀℃使忘抗原圓抗體跳經(jīng)擴紀散達哄到反園應的岡終點辛。3棚洗滌喬時間素是拴為避奇免洗慎滌不砌凈而鋼引起窗的假網(wǎng)陽性貼或洗側(cè)滌過勸度而嘗引起截的假削陰性兼,所感以應誘按照稅洗板糧方法黨嚴格撐洗板飾.4爭比色擔與結(jié)笛果判蠢定胃顯色伶后在江規(guī)定縱時間菜內(nèi)比賠色,霞判讀愛結(jié)果庸不能劫僅用百目測好,一賞定要筍用酶牛標儀小測定堪,上伙酶標哪儀要仗注意銜板孔定中比隨色液扛體積監(jiān)的一患致。乙型遮肝炎吩人免仆疫球廉蛋白成份殘:
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