甲狀腺自身抗體

關(guān)于甲狀腺自身抗體第1頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三自身免疫性甲狀腺疾病(autoimmunethyroiddiseases，AITD)存在多種甲狀腺自身抗體，這些抗體在AITD的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。最主要的是抗甲狀腺球蛋白抗體(anti-thyroglobulinantibody，TGAb)和抗甲狀腺過氧化物酶抗體(anti-thyroperoxdase，TPOAb)，促甲狀腺素受體抗體(TRAb)，抗鈉／碘同向轉(zhuǎn)運(yùn)體抗體(anti-NIS)。近來又發(fā)現(xiàn)一些新的甲狀腺自身抗體如抗GP330抗體、抗Gal抗體等。第2頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三Contents目錄01020304生物學(xué)性狀致病機(jī)制檢測適應(yīng)征臨床意義第3頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三

抗甲狀腺球蛋白抗體(TGAb)

抗甲狀腺球蛋白抗體（TGAb）分IgG1、IgG2、lgG3、IgG44個亞類，以IgG1和IgG4占優(yōu)勢，但以IgG2功能活性最高。TGAb的靶抗原是甲狀腺球蛋白，甲狀腺球蛋白是甲狀腺組織的主要蛋白成分，占總蛋白7O%～8O%。部分健康人血清中的抗甲狀腺球蛋白抗體為針對甲狀腺球蛋白自然表位的多克隆抗體，而AITD患者體內(nèi)的抗體為針對甲狀腺球蛋白某一個特殊表位的特異性抗體。第4頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三

抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPOAb)抗甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）屬IgG類免疫球蛋白，以IgG1及IgG4亞類為主。TPOAb的靶抗原是人甲狀腺過氧化物酶(hTPO)。TPO是甲狀腺激素合成過程中重要的酶，它可以催化碘的氧化，甲狀腺球蛋白上酪氨酸的偶聯(lián)直至最終生成甲狀腺激素T3和T4。除了具有重要的生理學(xué)功能外，hTPO還有著重要的免疫學(xué)特性。TPO有一定的種屬和器官非特異性，人的抗TPO可與豬的TPO反應(yīng)。第5頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三

促甲狀腺素受體抗體（TRAbs）促甲狀腺素受體抗體（TRAbs）亦稱TSH結(jié)合抑制免疫球蛋白(TBII)。在臨床實(shí)踐中，GD患者血清中檢出的TRAbs一律視為甲狀腺刺激抗體(TSAb)，其合理性尚值得商榷。TRAbs陽性提示存在針對促甲狀腺素受體（TSHR）的自身抗體。但無法說明該抗體具有的功能。事實(shí)上，TRAbs有TSAb和甲狀腺刺激阻斷抗體(TSBAb)2種亞型。TSAb具有刺激TSHR、促進(jìn)甲狀腺濾泡分泌、致甲狀腺毒癥的功能，是GD的致病性抗體。越來越多的證據(jù)表明．TSAb通過活化TSHR而介導(dǎo)GD患者甲狀腺激素的過量分泌。TSBAb對TSHR具有一定的親和力?？烧紦?jù)TSHR，并阻斷TSH與TSHR結(jié)合．從而導(dǎo)致甲減．也是部分自身免疫性甲狀腺炎患者發(fā)生甲減的致病因素。第6頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三

TGAb致病機(jī)制體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)TGAb也在ADCC中起一定作用。TGAb與甲狀腺球蛋白(TG)結(jié)合后，可以通過Fc受體與結(jié)合抗體的相互作用激活自然殺傷(NK)細(xì)胞而攻擊靶細(xì)胞，導(dǎo)致甲狀腺細(xì)胞破壞。血中TG的減少可以降低機(jī)體免疫系統(tǒng)對TG的暴露，因而對TG的自體免疫反應(yīng)減弱。另一方面，由于甲狀腺激素合成依賴TPO對天然TG的識別，因此TG減少必然導(dǎo)致T3、T4合成減少。值得注意的是，分泌TGAb的B淋巴細(xì)胞主要存在于甲狀腺內(nèi)，當(dāng)甲狀腺內(nèi)TGAb積累至一定濃度時，不僅TG分解增加，也可導(dǎo)致其他與TG無關(guān)的蛋白發(fā)生水解，從而可能造成全身性的蛋白分解作用增強(qiáng)及組織損害。第7頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三

TPOAb的致病機(jī)制

TPOAb的致病作用有抗體依賴細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用(ADCC)。由于TPO被隔絕于甲狀腺細(xì)胞濾泡腔的邊緣即甲狀腺細(xì)胞頂部，因此，在TPOAb(也包括TGAb)參與ADCC之前，抗體為了接近甲狀腺抗原并與之結(jié)合可能需要依賴某些類型的甲狀腺細(xì)胞損傷，如T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞損傷。甲狀腺細(xì)胞發(fā)生破裂、極性倒置或B淋巴細(xì)胞可以進(jìn)入甲狀腺濾泡及血清蛋白到達(dá)甲狀腺濾泡里的膠質(zhì)，所以抗體介導(dǎo)的ADCC對甲狀腺細(xì)胞損傷作用發(fā)生的前提是甲狀腺細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞。第8頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三TPOAb可以結(jié)合補(bǔ)體，在AITD的甲狀腺里存在豐富的激活補(bǔ)體，補(bǔ)體激活產(chǎn)物如膜攻擊復(fù)合物(MAC)可以引起甲狀腺細(xì)胞損傷。同時，甲狀腺細(xì)胞可以通過表達(dá)CD59及MAC抑制蛋白而對抗補(bǔ)體介導(dǎo)的細(xì)胞溶解，這些表面蛋白可以防止終末補(bǔ)體產(chǎn)物插人甲狀腺細(xì)胞膜，而該功能又可被細(xì)胞因子上調(diào)，所以補(bǔ)體引起的甲狀腺細(xì)胞殺傷是MAC形成的必然的最終結(jié)果。第9頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三

TGAb的檢測

TGAb的檢測最初用瓊脂擴(kuò)散法，后用對流免疫電泳法，此法簡便易行，但敏感性不高。后來建立了間接血凝技術(shù)、間接熒光抗體技術(shù)，這些技術(shù)只能進(jìn)行定性或半定量檢查。所以，20世紀(jì)70年代逐漸建立了放射免疫分析(RIA)、E1ISA、化學(xué)發(fā)光、電化學(xué)發(fā)光等技術(shù)，這些技術(shù)成為常用的檢測方法。其檢測的原理及方法與TPOAb類似。第10頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三

TPOAb的檢測

TPOAb的檢測主要是雙抗液相放免法和TPO單抗固相放免法。另外EIISA法是以TPO為抗原包被酶標(biāo)板，與人血清抗hTPO抗體特異結(jié)合，在加入堿性磷酸酶標(biāo)記的羊抗人IgG抗體，進(jìn)行二次抗原抗體反應(yīng)，再加入顯色底物pNPP充分顯色后，在酶標(biāo)儀上用波長405nm濾光片測定OD值。還有化學(xué)發(fā)光免疫分析方法，如酶促化學(xué)發(fā)光、吖啶酯標(biāo)記物直接發(fā)光，電化學(xué)發(fā)光。其中微粒子酶免疫分析(MEIA)方法集抗原抗體反應(yīng)的特異性和熒光反應(yīng)的敏感性于一體，減少了非特異性干擾，化學(xué)反應(yīng)簡單、快速、靈敏度高，且具有很好的重復(fù)性。第11頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三1974年，ReesSmith通過用125I標(biāo)記TSH競爭性抑制TSHR與TRAbs的結(jié)合。開創(chuàng)了TRAbs的放射免疫測定法，這也是目前在臨床實(shí)踐中被廣為采用的檢測方法。此后，3種主要的TRAbs測定方法相繼問世。①競爭測定法：通過被標(biāo)記的牛TSH或單克隆TSAb對結(jié)合位點(diǎn)的競爭測定TRAbs，即TBII；②生物測定法：通過計(jì)數(shù)自身抗體與TSHR結(jié)合后產(chǎn)生的環(huán)磷酸腺苷(cAMP)量來鑒別TRAbs的亞型(TSAb)，目前僅用于科研；第12頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三③直接結(jié)合測定法：即測定TRAb和TSHR抗原．抗體復(fù)合物的總量。但由于TSHR結(jié)構(gòu)復(fù)雜以及結(jié)合位點(diǎn)的異質(zhì)性，該方法相對繁瑣。競爭測定法以其敏感性高、試劑價格低廉以及報(bào)告迅速(4~5h)等優(yōu)勢，正逐步取代生物測定法。第13頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三

臨床意義1、

Graves病(GD)人體內(nèi)也可出現(xiàn)少量的TGAb、TPOAb，隨著年齡的增長，抗體的滴度也逐漸升高。但這部分抗體是多克隆的，而自身免疫性甲狀腺疾病患者體內(nèi)的抗體足大量的某一種單克隆抗體。GD又稱毒性彌漫性甲狀腺腫，和突眼性甲狀腺腫是甲狀腺功能亢進(jìn)(甲亢)的最常見類型，約占全部甲亢的90%左右，這類患者體內(nèi)的TGAb的陽性率可達(dá)63%，TPOAb的陽性率為42.2%。有研究發(fā)現(xiàn)，TPOAb與甲亢患者的臨床轉(zhuǎn)歸之間存在密切關(guān)系，甲狀腺功能明顯改善組，抗體滴度不高，而甲狀腺功能無明顯改善組，抗體顯著增高。第14頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三2、橋本甲狀腺炎該病90%為女性，好發(fā)年齡為30～50歲，患者血中多可測出高滴度的抗甲狀腺抗體，其親屬中的檢出率也可達(dá)50%左右。該病患者血清內(nèi)主要為TPOAb、TGAb等破壞性抗體。TGAb的檢出率為80～9%，TPOAb為77.7%。第15頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三

鑒別診斷由缺碘等原因所致的代償性甲狀腺腫大的患者進(jìn)行檢測顯示，其TGAb、TPOAb等抗體含量都在正常范圍內(nèi)，可見TGAb和TPOAb在鑒別診斷AITD和非AITD中具有重要的臨床價值。除甲狀腺疾病外，在其他一些自身免疫性疾病，如1型糖尿病、慢性腎上腺皮質(zhì)功能減退、干燥綜合征、惡性貧血及系統(tǒng)性紅斑狼瘡等疾病患者的體內(nèi)也可出現(xiàn)TGAb、TPOAb等抗體。第16頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三

結(jié)語甲狀腺自身抗體對臨床疾病診斷的作用越來越得到大家的認(rèn)可。雖說如今的檢測方法敏感度和特異性都有了很大的提高，但還沒有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，還不能檢測到亞型。所以說甲狀腺自身抗體的研究有待進(jìn)一步深入。第17頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）甲狀腺球蛋白抗體（TGAb）檢測適應(yīng)癥：-未知病因的TSH升高、甲狀腺腫大、甲亢-可疑多腺體自身免疫性疾病-自身免疫性甲狀腺疾病的家族性評價-對干擾甲狀腺合成或免疫的因素評估-產(chǎn)后甲狀腺炎（孕期或產(chǎn)后）危險(xiǎn)評估第18頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三

在自身免疫性甲狀腺疾病中TGAb價值小于TPOAb陽性率及滴度：

橋本氏甲狀腺炎、產(chǎn)后甲狀腺炎〉Graves病第19頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三

促甲狀腺激素受體抗體（TRAb

）多克隆抗體(包括)-促甲狀腺素受體刺激抗體(TSAb)-促甲狀腺素受體阻斷抗體(TSBAb)-甲狀腺生長刺激免疫球蛋白

(TGI)-促甲狀腺素結(jié)合-抑制免疫球蛋白（TBII）第20頁，講稿共23頁，2023年5月2日，星期三TSAb+TSH受體甲狀腺細(xì)胞增生

TSBAb＋TSH受體甲狀腺激素合成及分泌增加

TGI＋TSH受體甲狀腺激素合成及分